Анализ на генотип количества гепатит в
Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.
При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.
Виды ПЦР на вирусный гепатит В
Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.
Качественный ПЦР и его трактовка
Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:
- отрицательный результат — вируса нет;
- положительный результат — вирус обнаружен.
Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.
В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.
Количественный ПЦР
Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:
- Перед назначением лечения.
- Для оценки эффективности терапии.
- Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
- Для определения стадии, на которой находится заболевание.
Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:
1 МЕ/мл = 5 копий/мл
Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.
Трактовка количественного ПЦР
При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:
- < 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
- от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
- 10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
- 10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.
Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:
- Хронический гепатит В диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
- Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
- Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
- Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
- Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.
Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:
- ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
- ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
- ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.
Подготовка к обследованию
Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:
- Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
- Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
- Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.
Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.
Подводя итоги
На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.
Источник
Прежде чем назначить схему лечения вирусной инфекции, врач обязан выяснить, с каким генотипом гепатита В ему придется столкнуться. Если специалист назначает инъекции и таблетки, основываясь только на заключении «ВГВ обнаружен» и не рекомендует дополнительные исследования, это повод усомниться в компетентности доктора.
Гепатологи проекта «Generic Names» проводят онлайн-консультации и рекомендуют диагностические процедуры в соответствии с индивидуальными особенностями пациента. Если компетенция вашего лечащего врача вызывает сомнения, обращайтесь, поможем начать грамотное лечение с гарантированным эффектом ликвидации вируса.
Возможные генотипы гепатита В
Генетическая вариабельность вируса во многом зависит от географического расположения страны. Данные медицинских исследований представлены в таблице.
Генотип вируса | География | Специфика |
A | Центральная Африка, Северная Америка, Северо-Западная Европа | Высокий показатель перехода из острой формы в хроническую. Отличный терапевтический эффект при итерферонотерапии. |
B1 | Страны Индонезийского архипелага, Китай | Высокий риск передачи бытовым путем. |
B2 | Вьетнам | |
C | Восточная Азия, Корея, Китай, Япония, Тайвань, Вьетнам, Полинезия, Австралия, США | Большая склонность к генетическим мутациям. |
D | Россия, Средиземноморье, Средний Восток, Индия, США | Высокая частотность хронизации. Рекомендуется комплексное лечение: блокировка вируса + устранение последствий. |
E | Западная Африка | |
F | США (изредка), Центральная и Южная Америка, Полинезия | |
G | Европа, США (редко) | Возможность генной вариативности, когда один генотип под воздействием медикаментов переходит в другой. |
H | Центральная и Южная Америка | |
I | Вьетнам, Лаос | |
J | Япония |
Среди жителей стран СНГ наиболее распространены А, D и C. По статистике Роспотребнадзора (отделение эпидемиологии), около 5% граждан Европейской части РФ и 10% сибиряков являются носителями А-генотипа ВСВ, эта же форма присутствует у 50% якутов. Генотип С распространен в Чукотском крае, а вариация вируса D не имеет географической привязки и распространена по всей территории России.
Какие виды анализов проводятся для определения генотипов
Сегодня для определения конкретного генотипа гепатита проводят следующие лабораторные исследования:
ПЦР (полимеразная цепная реакция) – метод исследования ДНК на предмет наличия в биоматериале патологически измененных нуклеиновых цепочек.
- Прямое секвенирование – определение аминокислотной или нуклеотидной последовательности ДНК и РНК, что позволяет выявить патологические изменения в генных цепочках.
- Обратная гибридизация с зондами на мембране – выявление хромосомных участков, поврежденных вирусом, и исследование их специфики.
Зачем проводятся исследования на генотипирование
Особенность вируса – способность изменяться, подстраиваясь под индивидуальные параметры человеческого организма. Если начать общее лечение, не имея результатов исследование на генотипирование, можно в лучшем случае не добиться положительного эффекта, в худшем – перевести ВГВ в другой генотип, который окажет стойкое сопротивление активным действующим веществам назначаемых препаратов.
Имея на руках достоверный результат анализа на вид генотипов, опытный специалист не только назначит наиболее эффективную схему терапии, но и сможет спрогнозировать результат лечения. Препараты, позволяющие полностью излечить гепатит В, уже существуют. Клинические испытания доказали их высокую результативность. Проведение подобных исследований позволяет сэкономить время, силы и деньги пациента, поскольку ресурсы направлены конкретно на излечение специфической генной модификации ВГБ.
Дата публикации 29.06.2018
Больше информации на наших каналах в соц. сетях
Источник
Hepatitis C Virus (HCV) опасен не только скрытыми симптомами. Патология может годами разрушать печень человека и при этом не вызывать значимых клинических проявлений. На основании отличий в порядке расположения аминокислотных остатков, специалисты выделяют несколько разновидностей вирусного патогена.
Генотипы гепатита С разнятся по симптоматике, скорости прогрессирования некротических поражений печени и вероятности развития осложнений. Именно генотип является основополагающим фактором подбора эффективной терапии.
Периодически в медицинской литературе появляется информация об открытии новой разновидности вирусной инфекции. В итоге данные, сколько генотипов у гепатита С, разнятся. Некоторые специалисты называют цифру 11 (без учета квази-типов). Но практикующие гепатологи руководствуются рекомендациями Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), в соответствии с которыми выделяют 6 генотипов вируса HCV.
Молекулярные методы диагностики позволяют с высокой точностью изучить структуру патогена, обнаруженного в плазме крови или биоптате тканей печени пациента. Таким образом специалисты могут с высокой точностью установить тип патогена, и на основании полученных результатов доктор назначает соответствующую терапию.
Что такое генотип и как его определить?
Чтобы объяснить принцип разделения HCV на генотипы и как одна разновидность патогена отличается от другой, доктора сравнивают структуру вируса с цепочкой. Набор звеньев цепи одинаков вне зависимости от типа возбудителя инфекции, но порядок их расположения отличается. Схожие группы объединены в типы, причем внутри каждого выделяют несколько субтипов, которые лишь незначительно разнятся друг от друга.
Вопрос, как узнать, какой генотип вируса у больного, целесообразно решать только после подтверждения диагноза. Подобное исследование проводится с использованием молекулярных методик путем постановки полимеразной цепной реакции. Нередко определение разновидности HCV проводят в комплексе с количественной оценкой вирусемии. Для проведения анализа пациенту следует сдать кровь из вены, срок выполнения – до 5 дней.
Многих пациентов интересует вопрос, меняется ли генотип в процессе терапии. Ответ однозначен: структура вируса неизменна, поэтому при гепатите С достаточно однократно определить разновидность заболевания до начала терапии. Резистентность к проводимому лечению объясняют не мутацией патогена уже после инфицирования, а индивидуальными особенностями пациента.
После сдачи крови на определение генотипа и получения результатов доктор может сориентировать пациента относительно следующих вопросов:
- риск развития осложнений;
- прогнозируемая эффективность терапии (на основании клинических испытаний);
- длительность лечения;
- вероятность возникновения внепеченочных проявлений заболевания.
Терапия различных генотипов отличается. Для разновидностей HCV, сложно поддающихся лечению, разработаны многокомпонентные лекарственные препараты. Но если на фоне приема противовирусных лекарств улучшения не наступает, исследование на определение разновидности HCV и прочие диагностические тесты проводят повторно для уточнения диагноза и исключения других факторов, негативно влияющих на эффективность лечения.
Сколько генотипов у HCV
Генотипы вирусного гепатита С разнятся по территориальной распространенности. Статистика диагностируемых разновидностей патологии приведена в таблице.
Наименование стран и/или континентов | Наиболее часто диагностируемые типы HCV (в порядке убывания по распространенности) |
Российская Федерация и страны бывшего СССР, ближнее зарубежье (Польша, Чехия, Болгария) |
|
Страны Европейского Союза |
|
Азия |
|
Канада и США |
|
Страны Южной Америки |
|
Индия, Ирак, Иран, Пакистан и рядом расположенные территории |
|
Африканский континент | Встречаются с 1 по 6 генотипы HCV, их распространенность зависит от конкретной части континента. Например, в Алжире, Египте, Ливии и Марокко чаще диагностируют 4, 3 и 1 разновидности. В странах западного побережья – 1, 4 и 2 генотипы. В центральной части – преимущественно 4, реже – 1. На востоке и юге континента встречаются все типы HCV. |
Австралия |
|
Но статистика распространенности определенного генотипа меняется из-за военных действий, постоянных миграционных перемещений населения, активного развития экзотического туризма. С этими же факторами связывают и постоянно растущее количество инфицированных. Если в Европе, США, Канаде, России удалось достичь контроля над заболеваемостью (своевременная диагностика, соответствующая информационная политика), население стран с неразвитой медициной (например, на территории Африки) является носителем и источников распространения болезни.
В большинстве отечественных медицинских публикаций, посвященных проблеме HCV, практически не встречается информация, чем отличаются 5 и 6 генотипы патогена. Эти разновидности инфекции диагностируются крайне редко и только в странах Африки и Азии.
Генотипы 1b и 1а
Для первой разновидности гепатита Ц характерно наличие трех подтипов, но обычно диагностируют один из двух – 1а или генотип 1b (б).
Отличительными чертами вида служат:
- высокая распространенность, встречается по всему миру, в России диагностируется с частотой 58–61% от всех случаев инфицирования;
- преимущественно хроническое течение (вероятность такого исхода превышает 80%), при этом острая фаза обычно проходит быстро, без клинической симптоматики;
- высока вероятность рецидива.
Первый тип HCV отличает резистентность даже к современным противовирусным препаратам. По сравнению с другими генотипами патологии, реже регистрируется быстрый вирусологический ответ (лабораторно неопределяемые концентрации на 4 неделе лечения). При подобной форме гепатита С максимальную вероятность выздоровления врачи прогнозируют только на начальных стадиях инфекции до 3–4 лет с момента инфицирования.
Тип 2
HCV 2 типа подразделяется на три подгруппы – a, b и c. Второй генотип встречается относительно редко. На территории РФ и стран ближнего зарубежья практически не диагностируется.
Характерны такие особенности:
- вероятность самостоятельного разрешения инфекции (эрадикация патогена возможна под влиянием иммунитета без дополнительного приема медикаментов);
- низкая вероятность осложнений;
- реактивация инфекции регистрируется в единичных случаях;
- медленное прогрессирование.
Генотип 2 хорошо «отвечает» на современные методики терапии. Более того, инфекция достаточно легко лечится и по устаревшим схемам, которые подразумевают применение комбинации интерферонов и рибавирина. Но в медицинской литературе описаны случаи сочетания второй разновидности патологии с другими генотипами HCV и гепатитом В, что негативно влияет на прогноз терапии.
Гепатит с генотип 3
На территории России гепатит С генотип 3 является вторым по распространенности после первой разновидности. Выделяют два типа: a и b.
Третий генотип отличается:
- Высокой вероятностью развития осложнений. После анализа рандомизированных клинических исследований установлено, что тяжелые формы цирроза и гепатоцеллюлярный рак отмечаются на 5–8% чаще у пациентов с третьим генотипом.
- Более быстрыми сроками патогенных изменений в печени. В среднем, начальная стадия цирроза диагностируется на 3–5 лет раньше, чем при 1 генотипе.
- Преимущественно гематогенным путем передачи. Часто болезнь выявляют у лиц с пристрастием к инъекционным наркотикам.
- Возрастной группой. Это значит, что патологию обычно выявляют у людей активного трудоспособного возраста – 25–35 лет.
Срок, сколько живут пациенты с подобной разновидностью патологии, напрямую зависит от момента диагностирования. В целом, 3 генотип хорошо поддается лечению, при условии применения современных таргетных средств. Но если болезнь выявлена на поздних стадиях, когда изменения структуры печени приобрели необратимый характер, шансы на полное выздоровление невелики. Кроме того, такой тип HCV опасен злокачественным перерождением клеток органа. Рак печени считается одним из самых тяжелых форм онкологии. Количество пациентов, переступивших пятилетний порог выживаемости, не превышает 4–6%.
Разновидности 4, 5, 6
Генотип 4, как и 5, 6 разновидности HCV диагностируются реже всего. В большинстве отечественных лабораторий определение подобных типов вируса даже не предусмотрено. Исследование на эти группы гепатита С назначают только при негативном результате на определение 1–3 типа. В связи с низкой распространенностью такие разновидности патологии изучены в недостаточной степени.
Установлено, что для них характерно:
- преимущественно острое течение;
- высокая вероятность эффективного иммунного ответа и самостоятельного излечения;
- длительное латентное течение без изменения параметров виремии в большую сторону;
- низкий риск осложнений (случаи рака печени у пациентов с 4, 5 или 6 типами практически не зарегистрировано).
Четвертый генотип подразделяется на 10 квази-типов. Что касается пятого и шестого, на сегодняшний день известно только об одной подгруппе – а. Терапия данных типов HCV не представляет сложности. Достаточно стандартного курса пангенотипных противовирусных средств. Но вероятность осложнений течения инфекции повышается, если заражение произошло уже на фоне поражения ткани печени.
Смешанные типы
Смешанных генотипов HCV не существует. В некоторых случаях диагностируют комбинированный субтип. Это происходит, если по результатам генотипирования однозначно установлена разновидность патологии, но определить подтип затруднительно (тогда запись в карточке пациента выглядит, например, следующим образом – генотип 3аb). Крайне редко возможно заражение другой группой HCV на фоне уже присутствующей в организме инфекции. Как правило, таким пациентам назначаются длительные курсы пангенотипных противовирусных медикаментов.
Генотипирование – анализ на генотип гепатита С
Сдать анализ на генотип гепатита С можно практически в любой частной лаборатории. Исследование проводится методом полимеразной цепной реакции. Техника выполнения исследования состоит в следующем: обнаруженные в плазме крови образцы РНК патогена сравнивают с изолятами генотипов, а далее – подтипов.
Показаниями к проведению генотипирования служат:
- наличие иммуноглобулинов класса М или G;
- позитивный результат качественной ПЦР;
- определяемая методом количественной ПЦР виремия.
Сдавать кровь для генотипирования необходимо после подтверждения диагноза, но до начала терапии.
В некоторых случаях необходимо повторное исследование. Это:
- сохранение прежнего уровня виремии, увеличение вирусологической нагрузки на фоне применения противовирусных препаратов;
- положительные результаты ПЦР после окончания курса лечения вне зависимости.
Если в ходе стандартного исследования определить разновидность патологии не удается, проводят расширенное генотипирование вируса. Такой анализ подразумевает диагностику не только трех наиболее распространенных типов, но и выявление 4, 5 или 6 разновидностей. Данный тест показан и в том случае, если предполагается инфицирование в странах, где встречаются более редкие типы патологии.
Способ, как определить генотип по анализам, прост. Срок проведения исследования – от 3 до 5 дней. Пациенту выдается бланк с результатами тестирования, где указан точный тип и подтип патологии. С результатами анализа необходимо обратиться к врачу для назначения курса терапии.
Какой генотип самый опасный
Наряду с вопросом, какие бывают типы HCV, еще до получения результатов всех диагностических тестов пациенты интересуются, какой генотип гепатита С самый опасный. Если анализировать данные клинических исследований, неблагоприятный исход чаще отмечают при 1b разновидности патологии.
Именно эта группа инфекции обычно диагностируется на стадии необратимого некроза гепатоцитов и разрастания соединительной ткани в печеночной паренхиме. С учетом тенденции к рецидивам и резистентности доктора чаще назначают современные лекарственные средства, в состав которых входит 2 или 3 противовирусных ингредиента в фиксированной комбинации.
Но учитывая патогенез HCV, у некоторых пациентов даже сравнительно легкие разновидности инфекции могут вызвать серьезных осложнения. Вероятность успешной терапии существенно снижается при коинфекции ВИЧ и других тяжелых системных заболеваниях. Также результат лечения и риск осложнений во многом зависит от диеты, готовности больного отказаться от вредных привычек, употребления спиртного.
Какие типы имеют самый благоприятный прогноз
Легче лечится вторая разновидность вирусной инфекции, но она практически не диагностируется в России. Поэтому обычно на вопрос, какой генотип гепатита С лучше всего поддается лечению, отечественные инфекционисты называют третий тип. Хотя данная группа патологии чаще сопровождается различного рода осложнениями, высока вероятность полного излечения при условии своевременной диагностики.
Третий подвид болезни – не самый легкий, но при использовании современных противовирусных средств возможно выздоровление без значимого влияния на продолжительность жизни пациента. Чтобы снизить вероятность тяжелого течения патологии, необходимо следовать всем рекомендациям врача, четко соблюдать прописанный доктором режим питания.
После выздоровления следует продолжать прием медикаментов, обладающих гепатопротекторной активностью. Также сохраняются правила относительно диеты и отказа от спиртных напитков.
Инфицирование HCV не сопровождается формированием специфического иммунитета. Поэтому перенесенная болезнь не исключает необходимости соблюдения всех мер профилактики в дальнейшем.
Схема лечения в зависимости от типа HCV
Ранее терапия HCV вне зависимости от типа проводилось сочетанием интерферона и рибавирина. Подобное лечение часто вызывало побочные реакции. Причем степень их тяжести нередко становилась причиной отказа от терапевтической схемы. Впоследствии рекомендации относительно медикаментозной терапии изменились. Вместо интерферонов со стандартной продолжительностью действия доктора стали чаще прописывать пролонгированные формы, которые требовалось колоть только 1 раз в 7 дней.
Но в настоящее время перечень медикаментов, применяемых при различных генотипах, расширился противовирусными препаратами прямого действия.
Основные принципы лечения инфекции в зависимости от разновидности приведены в таблице:
Тип патологии | Рекомендуемое лечение |
1а и 1b |
|
2, 3а, 3b |
|
4 |
|
5 |
|
6 |
|
Определение генотипа является ключевым для выяснения дальнейшей тактики терапии гепатита С. Но вне зависимости от разновидности патологии конечный результат лечения во многом зависит от самого пациента. Недостаточно приема противовирусных средств. Обязательно соблюдение диеты №5, полный отказ от алкоголя и вредных привычек.
Источник