Анализы на гепатит с ифа расшифровка анализа

Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.

Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.

Что такое ИФА?

Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.

Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.

Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.

ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.

В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.

Показания к ИФА на гепатит С

Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:

острых и хронических заболеваниях печени;

желтухе неясного генеза;

обследовании перед хирургическими вмешательствами;

стандартном обследовании доноров крови;

постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;

прохождении гемодиализа;

профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;

незащищенном сомнительном половом контакте;

рождении детей от инфицированных матерей.

В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.

Как проводится анализ?

За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.

Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).

Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:

На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.

Виды ИФА

Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:

По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
a) конкурентный;
b) неконкурентный;

По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
a) гомогенные;
b) гетерогенные;

3) По принципу определения исследуемого вещества:
a) прямой;
b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.

Прямой метод ИФА

При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.

В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.

Непрямой метод

При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.

В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.

Расшифровка результатов

Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.

При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Положительный

При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.

Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.

Отрицательный

Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.

Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.

Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.

Ложноположительный

ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:

выполненной накануне вакцинации;

при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;

опухолевом процессе;

инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).

Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.

ИФА положительный, а ПЦР отрицательный: что это значит?

Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».

Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.

Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.

Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.

Источник

Вирусный гепатит в настоящее время излечим, однако сложности могут возникнуть при диагностике заболевания. В особенности это касается ВГС — «ласкового убийцы», который часто протекает бессимптомно. Нередко выявить наличие вирусной инфекции можно только при комплексной диагностике.

Но как проводится расшифровка анализов на гепатит? Какие методы диагностики проводятся, в зависимости от типа заражения? Какова расшифровка анализа на гепатит С или В? Ответы на эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Виды анализов на гепатит

Прежде чем говорить о расшифровке анализа на гепатит В или С, следует выяснить, какие методы аналитической диагностики этого заболевания существуют в современной медицинской практике. Способ определения болезни зависит от путей заражения. Так как гепатиты В и С преимущественно передаются через кровь, для определения вирусной нагрузки и подтверждения диагноза проводится анализ этой биологической жидкости. Образец крови берется из вены пациента для дальнейшего изучения в лабораторных условиях.

Также диагноз подтверждается аппаратным способом при помощи ультразвукового обследования и эластометрии печени. Данные методы позволяют определить степень заражения и площадь пораженных вирусом тканей жизненно важного органа. Также для расшифровки анализов на гепатит большое значение имеет определение примерного срока инфицирования.

Исследования образцов биологических жидкостей, проводимые при диагностике гепатовируса, делятся на:

Исследование проведено при поддержке научно-исследовательского института индийского фармацевтического производителя Zydus Heptiza. Официальный сайт в России Zydus.ru

Качественные — нацелены на определение наличия патогена;
Количественные — определяют вирусную нагрузку и степень инфицирования.

В зависимости от типа вируса, для определения его наличия проводятся разные анализы. Рассмотрим их подробнее.

Гепатит В

Вирусный гепатит В является не только опасным, но и чрезвычайно заразным вирусным заболеванием. Кроме того, эта болезнь опасна большим количеством осложнений, среди которых: цирроз, фиброз и онкологические новообразования в печени. Поэтому правильная расшифровка анализа на гепатит В очень важна. Своевременная диагностика может спасти пациенту жизнь.

С целью определения гепатовируса типа В проводятся следующие анализы:

На австралийский антиген (HBs) — может быть качественным или количественным тестом. Положительный результат тестирования свидетельствует о хроническом или остром течении болезни. Однако отрицательный результат не является гарантией отсутствия вирусного заболевания;
На HBеAg — качественный анализ. Если данный антиген не обнаруживается, то говорить об отсутствии болезни можно только при отсутствии других иммуноглобулинов;
На Anti-HBс-total — качественный анализ, позволяющий установить факт заражения, но не помогающий в установлении фазы болезни (хронической или острой);
На Anti-HBс IgМ — тест с вариантами результатов «положительно», «отрицательно» и «сомнительно». Если результат сомнителен, следует сдать тест еще раз через 2 недели;
На Anti-HBе — количественный анализ, позволяющий выявить уровень вирусной нагрузки;
Выявление ДНК возбудителя заболевания — позволяет определить вероятность инфицирования.

Гепатит С

Вирусный гепатит С также передается через кровь, однако является менее заразным. Тем не менее, это заболевание довольно распространено как в России, так и за ее пределами. Сдача анализов на обнаружение ВГС необходимо для определения самого заболевания, его стадии и подходящей для терапии схемы лечения оригинальными индийскими препаратами. При диагностике гепатита С проводятся следующие анализы:

На анализ на антигены ВГС (аnti-HCV-total ) — качественный тест. Обнаруженные иммуноглобулины являются одними из основных маркеров заболевания;
На антитела IgG (recomBlot HCV IgG) — качественное тестирование. Положительный результат говорит о наличии заболевания, отрицательный — о его отсутствии. Исключением является проведение диагностики у пациентов, родившихся с антителами матери либо во время инкубационного периода заболевания;
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — тест на выявление флававируса. Может быть как качественным, так и количественным.

В каких случаях требуется диагностика гепатовируса?

В первую очередь диагностические меры применяются к пациентам, у которых наблюдаются следующие симптомы:

Тошнота и рвота;
Болевые ощущения в области печени;
Осветление (обесцвечивание) фекальных масс и потемнение мочи;
Желтушный оттенок склер и кожных покровов;
Общее недомогание, имеющее сходство с гриппозными проявлениями;
Апатичное или депрессивное состояние.

Однако, ввиду бессимптомного течения хронической формы вирусных гепатитов, сдавать анализы рекомендуется и в ряде профилактических мер.

Регулярно сдавать кровь на мониторинг патогена рекомендуется:

Лицам, ухаживающим за инфицированными;
Медперсоналу, регулярно контактирующему с зараженной кровью и другими биологическими жидкостями;
Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;
Инъекционным наркоманам;
Больным, страдающих от ВИЧ-инфекции;
Лицам, ведущим беспорядочную половую жизнь.

Важно вовремя определить наличие гепатовируса в крови больного. Чем раньше будет диагностирована болезнь, тем быстрее ее удастся победить при помощи инновационных противовирусных препаратов.

Как подготовиться к сдаче крови?

Результаты анализа крови на выявление ВГС могут быть неточными, ложноположительными или ошибочными. Чтобы этого не случилось, нужно учитывать все нормы подготовки и проведения диагностики:

В течение дня до сдачи крови на экспертизу нельзя употреблять продукты с большим содержанием сахара и трансжиров. За 8 часов до анализов нельзя есть вообще;
Накануне диагностики запрещается употребление алкоголя и курение сигарет. Это создает дополнительную нагрузку на печень, из-за чего анализы могут быть неточными;
За день до сдачи крови следует поберечь себя от стрессов и физических перенагрузок. Это также может негативно сказаться на результатах диагностики.

Являться в лабораторию для сдачи образца крови необходимо утром, примерно в 8 часов. Из вены кровь берется при помощи стерильного шприца. В рамках собственной безопасности пациенту важно следить за тем чтобы медицинский работник не применял ранее использованный шприц.

Расшифровка анализов

Расшифровка анализов проводится в лабораторных условиях компетентными медработниками. Результаты передаются лечащему врачу или напрямую пациенту в зависимости от особенностей отдельного медицинского учреждения или независимой лаборатории.

Фиксируются результаты диагностики на бумажном носителе. Период готовности расшифровки зависит от типа анализа. Чаще всего результаты готовы в период от нескольких часов до 1 суток после сдачи.

Расшифровка анализа на гепатит В

Расшифровка анализа на выявление вирусного гепатита В производится в условиях лаборатории. Ниже представлены ключевые данные, на которые опираются исследователи, изучая предоставленный пациентом образец крови:

При определении австралийского антигена, референсное значение составляет 0,5 МЕ/мл. При меньшей концентрации антигена результат теста можно считать отрицательным. Если же значение выше указанного, это может свидетельствовать о наличии инфекции в острой форме. Также наличие австралийского антигена может свидетельствовать о вирусоносительстве;
Референсное значение антител к HBs-антигену вируса гепатита B (Anti-HBs) — 10 МЕ/мл. Высокий показатель говорит об успешном иммунном ответе на вакцинацию от гепатита В. Низкий показатель свидетельствует о том, что вакцина не оказала ожидаемого действия;
Более 40 МЕ/л патогенной ДНК в сыворотке крови пациента говорит о заражении гепатовирусом типа В. Если концентрация вирусного ДНК в предоставленном образце крови ниже указанного серединного предела, человек наверняка здоров, либо его болезнь находится на стадии инкубационного периода.

Расшифровка анализа на гепатит С

Одним из основных методов диагностики ВГС является определение фрагментов РНК возбудителя в плазме крови пациента. При расшифровке этого анализа на гепатит С важно учитывать, является ли он качественным или количественным. Положительный показатель качественного теста позволяет говорить о наличии заражения.

В свою очередь, при количественном РНК-анализе:

Показатель ниже предела 15 МЕ/мл — патоген не обнаружен, или его концентрация находится ниже порога чувствительности теста;
От 15 до 100 000 000 МЕ/мл — вирусное РНК выявлено. Это говорит об инфицировании организма человека гепатовирусом типа С.

Результаты количественного теста на РНК в сыворотке крови расшифровываются следующим образом:

Ниже 60 МЕ/мл — возбудитель вирусного гепатита С не обнаружен;
От 60 до 108 МЕ/мл — положительный результат в пределах линейного диапазона;
От 108 и выше — повышенная концентрация РНК возбудителя.

Еще одним немаловажным анализом, расшифровка которого требуется при диагностике гепатита С, является ПЦР. Показатели, по которым можно отследить вирусную нагрузку, колеблются в пределах 10 до 500 МЕ/мл. Если результат ниже минимального уровня, гепатит С не обнаруживается. Завышенный показатель говорит о высокой вирусной нагрузке.

Оцените статью:

| Всего голосов: 1 Средняя оценка: 5

Источник