Антиген к коровому антигену гепатита с

Антитела к NS и core гепатита С – специфические иммуноглобулины, которые вырабатываются к структурным и неструктурным белкам вируса. Антигены вируса и антитела к нему обнаруживаются в рамках серологического исследования, которое называется иммуноферментным анализом (ИФА). Его выполняют при подозрении на гепатит С, во время противовирусной терапии и после нее. Снижение уровня антител (anti-HCV) отдельных классов указывает на полное уничтожение возбудителя инфекции.

Структурные и неструктурные белки гепатовируса

HCV – вирус рода Hepacivirus из семейства Flaviviridae, провоцирующий инфекционное воспаление печени. Когда антиген (чужеродное вещество) проникает в организм, возникает иммунный ответ, который характеризуется выработкой антител. При заражении гепатитом С специфические иммуноглобулины синтезируются к разным частям вируса:

Ядро – содержит структурный белок core. При инфицировании он встраивается в геном клеток печени. В результате они превращаются в фабрику по производству дочерних вирионов. В 1 зараженной клетке ежедневно синтезируется от 30 до 50 вирусов.
Оболочка – нуклеотидные протеины типа Е1 и Е2. Участвуют во взаимодействии возбудителя с иммунными клетками крови. Они помогают вирусу гепатита С (ВГС) защищаться от Т-лимфоцитов, гранулоцитов, фагоцитов и других клеток, борющихся с антигенами.
Фрагменты генома – неструктурные белки типа NS2, NS3, NS4, NS5. Выполняют регуляторные функции, участвуют в репликации, то есть образовании копий вируса.

Структурные и неструктурные белки ВГС – антигены, к которым иммунная система вырабатывает антитела. Поэтому анализ на anti-HCV назначается всем людям с подозрением на гепатит С.

В рамках иммуноферментного анализа определяют только три неструктурных белка – NS3, NS4 и NS5. В действительности их больше и каждый выполняет определенные функции. Одни участвуют в расщеплении ферментов и белков, а другие – в сборке скопированного генетического материала. Учеными обнаружено 11 неструктурных белков, но функции некоторых из них до сих пор неизвестны.

Как проводят анализ на антигены и антитела к вирусу гепатита

Анализ на антитела к ВГС (anti HCV) – молекулярно-биологическое исследование, направленное на выявление иммуноглобулинов к гепатиту С. В его основе лежит реакция антиген-антитело, при которой формируются устойчивые комплексы из белков возбудителя и плазмы крови.

Чтобы обнаружить anti-HCV, во время анализа используют специальные ферменты. Они выполняют функцию меток, позволяющих регистрировать соответствующие сигналы. Главное преимущество серологического анализа – высокая специфичность. Полученные результаты дают информацию о:

типе возбудителя;
стадии заболевания;
форме гепатита (острый или хронический).

Для анализа берут венозную кровь из локтевой вены. Подготовка к исследованию не занимает много времени. Пациентам рекомендуют выполнять процедуру натощак в утренние часы, не курить за полчаса до сдачи крови.

Для чего назначается анализ на anti-HCV:

первичная диагностика HCV-инфекции;

дифференциальная диагностика гепатитов;

выявление ранее перенесенного заболевания.

В случае раннего заражения (период до 4 недель) возрастает риск ложноотрицательного результата анализа. Поэтому даже при отсутствии в крови иммуноглобулинов дополнительно выполняется ПЦР на гепатит С. Если РНК возбудителя обнаруживается, диагноз подтверждают.

Анализ на anti-HCV выполняется при:

обследовании лиц из группы риска (хирургов, прооперированных пациентов, реципиентов крови);
признаках инфекционного поражения печени;
повышенном содержании печеночных ферментов;
планировании беременности;
мониторинге эффективности антивирусной терапии.

Сразу после забора крови лаборант подписывает образец и отправляет его в лабораторию для анализа. На исследование уходит не более 2-3 рабочих дней.

Расшифровка результатов

Если в крови обнаруживают иммуноглобулины к ВГС, это еще не свидетельствует о заражении. По статистике, до 30% пациентов излечиваются самостоятельно. Все они даже не догадываются, что переболели опасным заболеванием, исходом которого нередко становится фиброз, цирроз и гепатоцеллюлярная карцинома.

Виды антител, которые выявляются при иммуноферментном анализе:

Anti-HCV core IgM – иммуноглобулины, которые синтезируются к ядру возбудителя. Они начинают циркулировать в крови раньше других антител. При хронической форме гепатита их концентрация сильно уменьшается.
Anti-HCV NS – антитела, синтезированные к неструктурным белкам ВГС. Если при анализе выявляются anti-NS3, это свидетельствует об острой форме гепатита. Белковые комплексы anti-NS4 и anti-NS5 обнаруживаются преимущественно при переходе гепатита в вялотекущую форму.
Anti-HCV total – суммарные антитела, которые возникают к возбудителю. Если они выявляются во время анализа, это значит, что человек либо заражен гепатитом, либо перенес инфекцию.

Во время диагностики вирусной болезни учитываются результаты качественной ПЦР. При выявлении HCV RNA, то есть РНК возбудителя, диагноз подтверждается.

Пример иммуноферментного анализа с расшифровкой данных

Данные анализа	Интерпретация данных
HCV IgG core 16.40 (положительно)	В плазме присутствуют высокие титры IgG (NS) и IgG (RNA). РНК предстоит выявить, так как велика вероятность заражения гепатитом
anti-HCV IgG NS3 14.20 (положительно)
anti-HCV IgG NS4 16.40 (положительно)
anti-HCV IgG NS5 0.34 (отрицательно)
anti-HCV IgG NS3 0.08 (отрицательно)	Если core положительно, а NS –отрицательно, результат считается сомнительным. Для подтверждения диагноза прибегают к дополнительному анализу – реал-тайм ПЦР
anti-HCV IgG NS4 8.30 (положительно)
anti-HCV IgG NS5 0.07 (отрицательно)
anti-HCV IgG core 0.15 (отрицательно)

Во время иммуноферментного анализа обязательно определяют позитивность пробы на структурный белок ВГС – КП (core-Ag). Коэффициент позитивности применяется для оценки уровня иммуноглобулинов в крови. В мировой практике он измеряется в МЕ/мл. Результаты анализа считаются положительными, если этот коэффициент превышает 1. Иными словами, чем выше КП, тем больше содержание иммуноглобулинов в образце.

Если данные иммуноферментного анализа указывают на инфицирование, выполняют ПЦ.

После подтверждения диагноза проводят дополнительные инструментально-лабораторные исследования, посредством которых определяются:

структурные изменения – фиброз, цирроз печени, печеночно-клеточный рак;
вирусная нагрузка – концентрация РНК возбудителя в 1 мл крови;
активность воспаления – стадия гепатита С;
генотип ВГС – тип и подтип возбудителя.

С учетом результатов анализов составляют схему противовирусной терапии. При курсовом приеме ингибиторов неструктурных белков ВГС – Софосбувира, Нарлапревира, Ледипасвира Омбитасвира, Даклатасвира – выздоровления достигают 96-100% пациентов. Поэтому если вы подозреваете гепатит, запишитесь на прием к врачу.

Источник

Главная

Гепатология

Острый вирусный гепатит, причины развития заболевания

Острый вирусный гепатит — диффузное воспалительное поражение клеток печени, вызываемое специфическими гепатотропными вирусами.

Острый вирусный гепатит — это группа широкораспространенных болезней, вызываемых разными вирусами, но имеющих сходные клинические биохимические и морфологические признаки.

Этиология и характеристики вирусов

Причиной острого вирусного гепатита могут быть, по крайней мере, пять различных агентов. Инфекционные поражения печени, вызываемые вирусом Эпштейна-Барр, цитомегаловирусом и вирусом желтой лихорадки, считаются отдельными болезнями и обычно не подразумеваются при употреблении термина «острый вирусный гепатит».

Вирус гепатита A (HAV) — это одноцепочечный РНК-вирус подобный пикорнавирусам. Вирусный антиген (Ag) обнаруживается в плазме, каловых массах и печени только в острый период инфекции. IgM-антитела выявляются на ранних этапах болезни, но через несколько недель исчезают; им на смену приходят IgG, которые обычно сохраняются на протяжении всей жизни. Таким образом, IgM-антитела можно рассматривать как маркеры острой инфекции, тогда как IgG лишь указывают, что организм прежде подвергался воздействию вируса гепатита А и имеет иммунитет к повторному инфицированию. Вирус гепатита А неизменно исчезает после острой инфекции; в отличие от вирусов гепатитов В и С, неизвестны случаи его хронического носительства, он не играет никакой роли в развитии хронического активного гепатита или цирроза.

Вирус гепатита В (HBV) является наиболее изученным и сложным агентом. Инфекционная частица (частица Дейна) состоит из сердцевины (кора) и внешней оболочки (капсида). В состав вириона входит кольцевая двухцепочечная ДНК и ДНК-полимераза; репликация вирусных частиц происходит внутри ядер инфицированных гепатоцитов. Белки оболочки присутствуют в цитоплазме в значительных количествах; с помощью иммунологических методов их определяют в плазме как поверхностный антиген гепатита В (см. ниже).

По крайней мере четыре различные системы антиген-антитело тесно связаны с вирусом гепатита В:

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg, австралийский антиген) связан с белковой оболочкой вируса; обнаружение его в плазме крови позволяет диагностировать острый гепатит В и означает, что кровь больного стала потенциальным источником инфицирования. (Некоторые подтипы антигенов представляют эпидемиологический интерес, но их клиническое значение невелико.) Австралийский антиген выявляется во время инкубационного периода (обычно за 1-6 нед до развития клинических или биохимических признаков болезни) и исчезает при выздоровлении. Соответствующие антитела (анти-HBs) можно обнаружить значительно позже, лишь через недели или месяцы после клинического выздоровления; обычно они сохраняются в течение всей жизни и их присутствие в крови указывает на имевшее место инфицирование вирусом гепатита В в прошлом и наличие относительной защиты от него в будущем. У некоторых больных (до 10%) австралийский антиген продолжают обнаруживать после острой фазы инфекции, а соответствующие антитела не появляются; у таких больных обычно развивается хронический гепатит, или они становятся бессимптомными носителями вируса.
Коровый антиген (HBcAg) ассоциируется с сердцевиной (кором) вириона. Он может быть обнаружен в инфицированных клетках печени, а в плазме выявляется лишь в том случае, если с помощью специальных методик разрушают вирусные частицы. Соответствующие антитела (анти-НВс), как правило, обнаруживают в начале периода манифестации; впоследствии их титр постепенно снижается. Наличие антител к HBcAg наряду с антителами к HBsAg указывает на предшествующее инфицирование HBV. Антитела к HBcAg регулярно обнаруживаются у носителей HBsAg, не способных к формированию антител к HBsAg. В хронических случаях анти-НВс-антитела представляют собой главным образом иммуноглобулины класса IgG, тогда как при острой инфекции доминируют анти-НВс-антитела класса IgM. Иногда последние выполняют роль маркера недавней инфекции HBV, заполняя «провал» между исчезновением HBsAg и появлением анти-НВв-антител.
Антиген c (HBeAg), по-видимому, представляет собой пептид, входящий в состав вирусного кора. Он обнаруживается только в HBsAg-положительной плазме и связан каким-то образом с синтезом вирусной ДНК-полимеразы. Присутствие этого антигена свидетельствует об активной репликации вируса и, как правило, сочетается с более высокой инфицирующей способностью крови и повышенной вероятностью развития хронического поражения печени. Наоборот, присутствие соответствующих антител (анти-НВе) указывает на относительно более низкую инфицирующую способность и обычно предвещает благоприятный исход.
Вирус гепатита D (HDV, дельта-фактор) является уникальным. Его РНК дефектна, вследствие чего данный вирус способен реплицироваться только в присутствии HBV. Гепатит D встречается либо как сочетанная инфекция при остром гепатите В, либо как суперинфекция при достоверном хроническом гепатите В. Инфицированные гепатоциты содержат дельта-частицы, покрытые HBsAg. Распространенность фактора широко варьирует географически при наличии эндемичных районов в нескольких странах. Относительно высок риск для наркоманов, но среди гомосексуалистов этот вирус (в отличие от HBV) еще не распространен. Клинически инфекция HDV, как правило, проявляется необычно тяжелым острым гепатитом В (до 50% случаев молниеносного гепатита В связаны с сочетанной инфекцией вирусом гепатита D), «обострением» у хронических носителей HBV (суперинфекция) или относительно агрессивным течением хронического гепатита В.

Термин «гепатит ни А ни В» (NAN В) был предложен для обозначения инфекций, не связанных с вирусами А- или В-типа. Недавно идентифицирован специфический одноцепочечный РНК-вирус, подобный флавивирусам (вирус гепатита С, HCV), являющийся причиной большинства посттрансфузионных и спорадических случаев гепатита NAN В. В некоторых случаях такие инфекции, по-видимому, обусловлены другими агентами, пока еще не идентифицированными.

Антитела к HCV часто появляются в плазме крови через несколько месяцев после острой инфекции. Затем титры медленно уменьшаются, если только инфекция не становится хронической (что имеет место почти в половине случаев). Вирус HCV удалось идентифицировать в плазме с помощью весьма сложных методик; соответствующий антиген также выделен из цитоплазмы инфицированных гепатоцитов.

Гепатит ни А ни В может встречаться в виде спорадических случаев и в форме эпидемий. В последнем случае причиной, по-видимому, служит вирус, в порядке рабочей гипотезы называемый вирусом гепатита Е (HEV); его природа еще неясна.

Ред. Н. Алипов

«Острый вирусный гепатит, причины развития заболевания» — статья из раздела Гепатология

В каких случаях обычно назначают исследование

при обследовании пациентов, готовящихся к плановой госпитализации или операции;
при профосмотрах и диспансеризациях;
при подозрении на контакт с инфицированной кровью или нестерильными медицинскими инструментами;
при появлении симптомов поражения печени;
при обследовании беременных.

Что именно определяют в процессе анализа

Выявляют наличие специфических суммарных антител к вирусу гепатита С методом ИХЛА — модификации иммуноферментного анализа.

Что означают результаты теста

Результат «Не обнаружено» — значит, что в сыворотке крови пациента нет специфических антител к гепатиту С. Это может быть, если пациент здоров и никогда не встречался с вирусом гепатита С. Отсутствие антител возможно в течение короткого периода в начале заболевания, когда вирус попал в организм, а иммунная система еще не выработала антитела к вирусу гепатита С (так называемый период «серологического окна»).

Результат «Обнаружено» — значит, что антитела к вирусу в крови выявлены. Положительный результат выдают всегда с результатами подтверждающего теста. В подтверждающем тесте определяют антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С.

Результат исследования (пример):

Антитела к вирусу гепатита С, сумм	ОБНАРУЖЕНО
Антитела к гепатиту С, подтверждающий тест
Core (антитела к структурным белкам вируса гепатита С)	15.26
NS3 (антитела к неструктурному белку NS3 вируса гепатита С)	0.65
NS4 (антитела к неструктурному белку NS4 вируса гепатита С)	0.02
NS5 (антитела к неструктурному белку NS5 вируса гепатита С)	0/02

Антитела могут быть выявлены у пациентов в нескольких случаях:

пациент болен в настоящее время острым или хроническим гепатитом С;
пациент когда-то перенес гепатит С как острое заболевание и теперь здоров, антитела остались как иммунологическая память о контакте с вирусом;
у пациента редкий случай неспецифической реакции сыворотки крови с используемой тест-системой.

Выявление антител к вирусу гепатита С не означает наличия заболевания и требует дополнительного обследования пациента. В случае положительного ответа необходима консультация лечащего врача или врача-инфекциониста и назначение дополнительных тестов. Может быть назначено ПЦР-исследование на HCV (выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента), биохимические маркеры — АЛТ, АСТ, ГГТ, щелочная фосфатаза, билирубин, общий анализ крови с лейкоцитарной формулой, коагулограмма.

Сроки выполнения теста

Результат исследования «Не обнаружено» можно получить уже на следующий день после сдачи анализа. В случае необходимости выполнения подтверждающего теста результат может быть задержан на 1–2 дня.

Подготовка к анализу

Кровь можно сдавать не ранее чем через 3 часа после приема пищи в течение дня или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.