Антинуклеарные антитела при гепатите с

Главная
» Гепатология
» Антитела при аутоиммунном гепатите, аутоантитела, значение в диагностике аутоиммунного гепатита

Аутоантитела представляют собой циркулирующие в сыворотке крови пептиды, которые направлены против определенных клеточных структур печени. Антитела считаются типичными для аутоиммунного гепатита, однако они не отличаются органной специфичностью или специфичностью в отношении определенного заболевания. Только при повторных обнаружениях в высоких концентрациях ( > 1 : 80 — у взрослых, > 1 : 20 — у детей) с одновременным повышением уровня трансаминаз можно говорить об аутоиммунном гепатите.

Система антигенов, соответствующая наиболее известным аутоантителам, остается недостаточно изученной и ей пока нельзя дать полной характеристики. Аутоантитела должны рассматриваться как маркеры; их участие в патогенезе заболевания в настоящее время не выяснено. Однако в последних исследованиях была показана возможность участия антител к микросомальному антигену печени и почек-1 (LKM-1) в патогенезе аутоиммунного гепатита 2 типа и антимитохондриальных антител (АМА) в патогенезе билиарного цирроза печени. Достаточным для клиницистов можно считать то обстоятельство, что антитела позволяют сделать вывод о тяжести течения заболевания, поскольку лишь тяжело протекающие формы аутоиммунного гепатита требуют лечения.

Антинуклеарные антитела

Антинуклеарные антитела выявляются при АНГ наиболее часто — у 40-80% больных. Антинуклеарные антитела определяются у взрослых и детей с аутоиммунным гепатитом 1 типа, реже — у больных с аутоиммунным гепатитом 2 типа. Соответствующие им антигены представляют собой гетерогенную группу структур (например ядерная ДНК, нуклеарные структурные и функциональные протеины или центромеры). Антинуклеарные антитела обнаруживаются и при других аутоиммунных заболеваниях, но обычно в более низких концентрациях. Они, как правило, обнаруживаются и при перекрестном синдроме, о котором будет сказано ниже, поэтому их предсказывающая ценность для диагноза аутоиммунного гепатита (2%) — очень низкая.

Аутоантитела к гладкой мускулатуре

Антитела к гладкой мускулатуре (smooth muscle antibodies) выявляются при аутоиммунном гепатите в большинстве случаев в комбинации с антинуклеарными антителами, причем в высокой концентрации. Они встречаются реже, чем антинуклеарные антитела, но отличаются большей специфичностью (особенно в титрах 1 : 100 и выше). У детей с аутоиммунным гепатитом антитела к гладкой мускулатуре определяются почти в 80% случаев. Несмотря на это, предсказывающая ценность антител к гладкой мускулатуре для диагноза аутоиммунного гепатита составляет лишь 30%, поскольку в некоторых исследованиях антитела к гладкой мускулатуре обнаруживались сравнительно редко. Антитела к гладкой мускулатуре направлены против актина микрофиламентов миоцитов; они реагируют также с актинсодержащими микрофиламентами гепатоцитов. Большей специфичностью в отношении аутоиммунного гепатита 1 типа обладают антиактиновые антитела (ААА), которые определяются лишь в немногих специализированных лабораториях. ААА ассоциированы с фенотипами антигенов лейкоцитов человека B8 и DR3 и указывают на неблагоприятный прогноз. ААА позволяют лучше разграничить между собой аутоиммунный гепатит и хронический гепатит C, чем антитела к гладкой мускулатуре.

Аутоантитела к микросомальному антигену печени и почек (LKM-1)

LKM-1 (liver-kidney microsomal antibodies) обнаруживаются особенно часто у больных с аутоиммунным гепатитом 2 типа, у которых нередко отсутствуют антинуклеарные антитела и антитела к гладкой мускулатуре.

Часто они выявляются также у больных детского и юношеского возраста. Антигеном для LKM-1 служит цитохром Р 450 2D6 (CYP 2D6) рибосом цитоплазматической сети. CYP 2D6 участвует в метаболизме более 40 лекарственных препаратов. При аутоиммунном гепатите 2 типа, индуцированном лекарственными препаратами, LKM-1 определяются обычно в высоких концентрациях (1:160 и выше). LKM-1 выявляются также, и у 6-10% больных с хроническим гепатитом С. Поскольку они могут проявляться спонтанно после интерферо-нотерапии и повреждений, связанных с инъекциями, или же после повторного инфекцирования HCV больных, перенесших трансплантацию печени. Полагают, что в таких случаях имеет место нарушение иммунной толерантности по отношению к CYP 2D6 (т.е. развивается аутоиммунный процесс).

Одновременное выявление LKM-1 и антител к HCV может служить указанием на вирусный генез аутоиммунного гепатита. Так, у 10-88% больных, имеющих антитела к LKM-1, обнаруживаются маркеры инфекции HCV, при которой, как и при аутоиммунных заболеваниях печени, часто наблюдаются иммунные синдромы, свойственные поражению других органов. К ним относятся кри-оглобулинемия, мембранпролиферативный гломерулонефрит, полиартриты, болезнь Шегрена и др. По сравнению с больными, страдающими «классическим» аутоиммунным гепатитом, пациенты с HCV-положительным гепатитом, имеющие антитела LKM-1, характеризуются более старшим возрастом, отсутствием преобладания женщин над мужчинами, более низкой эффективностью иммуносупрессивной терапии. Поскольку одновременное обнаружение антител LKM-1 и антител к HCV может указывать на два заболевания печени (аутоиммунное и вирусное), правомерно говорить о перекрестном синдроме.

Противоцитозольные печеночные антитела 1 типа (анти-LCl) выявляются вместе с LKM-1. Они считаются высокоспецифичными для аутоиммунного гепатита 2 типа и, по-видимому, характерны для подгруппы больных с преимущественно доброкачественным течением заболевания. В группе больных с хроническим гепатитом С, имеющих LKM-1, одновременное обнаружение анти-LCl позволяет идентифицировать пациентов, у которых на фоне интерферонотерапии может возникнуть ухудшение течения аутоиммунной составляющей заболевания.

Антитела LKM-2 обнаруживаются при аутоиммунном гепатите 2 типа, индуцированном лекарственными препаратами. Антигеном в таких случаях является цитохром Р2С9 (CYP 2C9). Тикринафен, дигидралазин и галотан (вероятно и другие препараты) могут вести к образованию в мультиэнзимных комплексах системы Р450 метаболитов, способных действовать как антигены.

Антитела LKM-3 встречаются у 13% больных с инфекцией HDV и у 10% пациентов с аутоиммунным гепатитом 2 типа. В качестве антигена здесь действует уридиндифос-фат-5-глюкуронилтрансфераза (УГТ, прежняя аббревиатура — УДФГТ), которая принадлежит к семейству ферментов, располагающихся на внутренней мембране цитоплазматической сети и участвующих в метаболизме лекарственных препаратов.

Аутоантитела к растворимому антигену печени (SLA/LP)

У молодых женщин и больных, у которых отсутствуют антинуклеарные антитела, антитела к гладкой мускулатуре или LKM, часто обнаруживаются антитела к растворимому антигену печени (anti-soluble liver antigen), идентичные антителам LP (антитела к протеину печени и поджелудочной железы). Эти антитела помогают в дифференциальной диагностике между аутоиммунным гепатитом и хроническим вирусным гепатитом. Антитела SLA часто появляются одновременно с антителами LKM. Антигенами для антител SLAслужат, по-видимому, цитокератины (цитокератин 8 и 18). Антитела SLA обнаруживаются примерно у 10-50% больных с аутоиммунным гепатитом 1 типа и считаются в настоящее время единственным диагностическим маркером, специфичным для данного заболевания. Аутоантитела SLA/LP кодируются по меньшей мере тремя независимыми эпитопами доминантного региона антигена. Клиническое значение указанных антител обсуждается в главе 1.4.1.4.

Аутоантитела к печеночному специфическому протеину (LSP и ASGPR)

Они направлены против протеина мембраны или против печеночного специфического протеина гепатоцитов (LSP). LSP обнаруживается и при хроническом гепатите В. Антигеном в указанных ситуациях является, по-видимому, сульфатированный гликосфинголипид, который дает реакцию с антителами у 90% больных с аутоиммунным гепатитом и билиарным циррозом печени. Чувствительность и специфичность LSP в диагностике аутоиммунного гепатита составляют более 80%.

Компонентом LSP служат антитела к асиалогликопротеиновому рецептору (ASGPR), которые отвечают за связывание гликозилированных протеинов. ASGPR — печеночный специфический антиген, экспрессирующийся в высокой концентрации на мембранах перипортальныхгепатоцитов. Антитела к данному рецептору обнаруживаются у 50-80% больных с аутоиммунным гепатитом; у 15% пациентов их титр коррелирует даже с активностью воспалительного процесса в печени. Поскольку антитела ASGPR встречаются и при других заболеваниях, они не считаются специфичными для аутоиммунного гепатита. Хорошо изученным компонентом LSP являются также антитела к алкогольдегидрогеназе/

Другие аутоантитела

Наряду с уже упоминавшимися аутоантителами, типичными для аутоиммунного гепатита, примерно у 20-30% больных обнаруживаются антимитохондриальные антитела (АМА). При выявлении антимитохондриальных антител у пациентов с аутоиммунным гепатитом следует думать о перекрестном синдроме с билиарном циррозом печени, особенно в тех случаях, когда с помощью иммунных методов определяются антитела к антигену М2. Если же эти антитела обнаруживаются в низком титре, то больше оснований предполагать фоновый эпифеномен (т.е. случайную находку), не имеющий диагностического значения. Атипичные антитела против цитоплазматических антигенов нейтрофильных лейкоцитов (р-AN CA) выявляются не только у 70-90% больных с аутоиммунным гепатитом, нону 60-90% пациентов с первичным склерозирующим холангитом, у 25% больных с билиарным циррозе печени, пациентов с хроническими воспалительными заболеваниями кишечника. Антигенами-мишенями при этом служат актин (у 63 % больных), катепсин G (у 29 % пациентов) и лактоферрин (у 20-50% больных). Клиническое значение p-ANCA продолжает оставаться не ясным: по-прежнему обсуждается их возможная связь с активностью течения заболевания, хотя достоверных доказательств этой гипотезы пока еще не получено. Возможно, что данные антитела представляют собой лишь эпифеномены, встречающиеся при аутоиммунных воспалительных заболеваниях.

Антитела к глиадину обнаруживаются у 10-40% больных с аутоиммунным гепатитом. Кроме того, они могут определяться и у пациентов с билиарным циррозом печени, первичным склерозирующим холангитом и токсическими алкогольными поражениями печени. У всех больных с антителами к глиадину встречаются и антитела к эндомизию и часто отмечается гистологическая картина, свойственная целиакии.

У 40% больных с аутоиммунным гепатитом в японской популяции обнаруживаются антитела к гистону. У них прослеживается тенденция к более высокому уровню IgG в сыворотке, к более высокой частоте выявления антигенов лейкоцитов человека -A2-DR4, свидетельствующего о более благоприятном течении аутоиммунного гепатита у детей и большей эффективности иммуносупрессивной терапии. Антитела к гистону следует рассматривать, по-видимому, как неспецифические маркеры воспаления; в рутинном клиническом обследовании какой-либо существенной роли они не играют.

У. Лейшнер

«Антитела при аутоиммунном гепатите, аутоантитела, значение в диагностике аутоиммунного гепатита» раздел Аутоиммунные заболевания печени

Дополнительная информация:

Изменения в печени при аутоиммунном гепатите
Типы аутоиммунного гепатита, классификация
Вся информация по этому вопросу

Источник

30 апреля 20198 911

Антитела к экстрагируемым ядерным антигенам (ЭНА, ENA) – гетерогенные группы специфических иммуноглобулинов, направленных против рибонуклеопротеинов в ядре и плазме. Исследование ЭНА применяется с целью диагностики и мониторинга ревматических болезней: системной красной волчанки, синдрома Шегрена, склеродермии, полимиозита, дерматомиозита, синдрома Шарпа. Анализ показан при наличии характерных симптомов, повышенных значениях концентрации антинуклеарных АТ. Биоматериалом является сыворотка венозной крови, метод исследования – ИФА, иммуноблоттинг. В норме итоговое значение – «отрицательно». Сроки выполнения составляют до 8 дней.

Экстрагируемые ядерные антигены – растворимые нуклеопротеины, которые при определенных условиях переходят из ядра клетки в цитоплазму. Производство антител к ним является патологической иммунной реакцией организма, приводит к развитию воспаления и поражению тканей. ENA характерны для системных заболеваний соединительной ткани. Тест включает в себя определение специфических иммуноглобулинов IgG, IgM к нуклеарным и плазматическим компонентам. Он дополняет анализ ANA, повышая специфичность обследования, снижая вероятность ложноотрицательного результата. Определение ЭНА не позволяет проводить дифференциальную диагностику, поэтому рекомендуется применять его в рамках комплексного обследования.

Показания

Тест на антитела к экстрагируемым ядерным антигенам используется для диагностики и контроля системных поражений соединительной ткани – СКВ, синдрома Шарпа, синдрома Шегрена, диффузной и локализованной склеродермии, полимиозита, дерматомиозита. Основания для назначения анализа:

Симптомы системного аутоиммунного процесса. Ревматические поражения проявляются персистирующей лихорадкой, слабостью, мышечной и суставной болью, кожными высыпаниями, нарушениями кровообращения в ступнях и кистях, судорогами, отеками, уменьшением объема мочи. Первично выполняется скрининговый вариант (ИФА), если он положителен, показан иммуноблот.
Выявленные антинуклеарные АТ . Определение ENA производится для подтверждения системного заболевания соединительной ткани, повышает специфичность диагностики.
Диагноз ревматической болезни. Тест назначается с определенной частотой для оценки эффективности лечения, выявления обострений.

Подготовка к анализу

Кровь берется из вены. Процедуру рекомендуется проводить с утра. Подготовка представлена общими правилами:

После приема пищи должно пройти 4-6 часов. Ограничений в употреблении чистой негазированной воды нет.
Накануне стоит ограничить физические нагрузки – отменить спортивные тренировки, отказаться от работы, требующей приложения силы.
За день до процедуры рекомендуется избегать умственных нагрузок, интенсивных эмоциональных переживаний.
Нужно обсудить с врачом необходимость отмены принимаемых лекарств. Некоторые препараты могут влиять на итоговое значение теста.
Сеансы физиотерапии, инструментальные обследования следует проводить после сдачи крови.
Последние полчаса нельзя курить. Прием алкогольных напитков необходимо исключить за сутки до процедуры.

Для забора крови выполняется венепункция. Биоматериал помещается в пробирки, в лаборатории из него получают сыворотку – отделяют форменные элементы, выводят факторы свертывания. Исследование проводится методом ИФА, когда необходима высокая чувствительность, и методом иммуноблота, когда важна специфичность. Данные подготавливаются за 8 дней.

Нормальные значения

Тест на определение ЭНА является качественным, результат выражается коэффициентом позитивности относительно пороговой концентрации. В норме показатель не более единицы – «отрицательно», «антитела не обнаружены». Важные замечания для интерпретации:

Нормальный результат не позволяет исключить патологию, необходимо сопоставление с данными теста на антинуклеарные АТ.
При контроле ревматических патологий отсутствие ENA – благоприятный прогностический признак.

Повышение показателя

Повышение уровня ЭНА характерно для аутоиммунного поражения соединительной ткани. К причинам отклонения данных теста от нормы относятся:

Ревматические болезни. Концентрация АТ увеличивается при синдроме Шарпа, СКВ, кожной волчанке, склеродермии, полимиозите, синдроме Шегрена, дерматомиозите, ревматоидном артрите. Наиболее высокие значения определяются при прогрессирующем течении патологии, развернутой клинической картине.
Инфекции, воспаления. Редко причиной повышения уровня ЭНА становятся вирусные инфекции (инфекционный мононуклеоз, гепатит) и хронические воспалительные заболевания.

Снижение показателя

При мониторинге патологии нормальный результат свидетельствует о низком риске обострений и осложнений. После курса лечения снижение итогового значения подтверждает успешность применения иммуносупрессоров.

Лечение отклонений от нормы

Исследование антител к экстрагируемым ядерным антигенам – высокочувствительный метод диагностики и контроля течения ревматических болезней. Результат отражает весь спектр специфических иммуноглобулинов – находящихся в ядре и экстрагированных в цитоплазму. Физиологические факторы (режим сна, особенности питания, конституция) не влияют на концентрацию АТ. Отклонение итогового показателя от нормы связано с аутоиммунной патологией и требует интерпретации врача – ревматолога, дерматовенеролога.

Источник

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Что такое антинуклеарные антитела

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Свечение антител в микроскопе

Антинуклеарные антитела — это патологические компоненты иммунной системы, ведущие к возникновению аутоиммунных заболеваний соединительной ткани, таких как системная красная волчанка, синдром и болезнь Шегрена, системная склеродермия.

Антинуклеарные антитела представляют из себя белки-иммуноглобулины, вырабатываемые защитными клетками человеческого тела (лимфоцитами). Из-за сбоя в работе иммунной системы ядра собственных клеток распознаются ею как чужеродные и вредные, что приводит к ошибочной выработке антител к разным компонентам клеточных ядер.

Всего выявлено более 190 компонентов ядра, к которым может вырабатываться патологический иммунный ответ, однако диагностическое значение имеют около 20 из них. К наиболее важным относят антитела к одно- и двуспиральной ДНК, гистонам, нуклеосомам и рибосомальному P-протеину.

Ядро содержится практически в любой клетке человеческого тела, за исключением некоторых кровяных. Оно находится внутри клетки и защищено собственной оболочкой, цитозолем и внешней клеточной мембраной. Антитела находятся во внеклеточной среде и чаще всего не могут напрямую контактировать с ядром, повреждая его. Однако при любом нарушении целостности клеточных оболочек антинуклеарные антитела, если они имеются в организме, способны связываться с компонентами ядра, образуя нерастворимые комплексы. Именно они и являются причиной возникновения разнообразных аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.

Механизм образования

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Антинуклеарные антитела и рецепторы

В норме собственные клетки организма даже в разрушенном состоянии иммунного ответа не вызывают. Однако сбои в работе иммунной системы наблюдаются постоянно даже у здоровых лиц, и при неблагоприятном стечении обстоятельств иммунитет может сформироваться на любой из компонентов клетки. В организме предусмотрена своеобразная система «отбраковки» патологических антител, в большинстве случаев она срабатывает, антитела уничтожаются, не вызывая болезнь.

Однако в некоторых случаях антинуклеарные антитела возникают в больших количествах и оказываются вовремя не распознаны организмом как патологические. Чаще всего это бывает при обширных солнечных ожогах, когда миллионы клеток кожи оказываются повреждены ультрафиолетом. Ядра погибших клеток оказываются непосредственно во внутренней межклеточной среде организма, где их встречают иммунные клетки — лимфоциты и макрофаги.

ДНК из ядер, гистоновые белки и другие белковые и нуклеиновые компоненты могут быть настолько повреждены ультрафиолетовым излучением, что в некоторых случаях изменяются до неузнаваемости. Именно это и провоцирует иммунные клетки вырабатывать против них антитела, как против чужеродных веществ.

Нормальные значения АНА

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Отсутствие антител — вариант нормы

Нормальным значением является полное отсутствие антинуклеарных антител. При скрининговом ИФА-исследовании отрицательный ответ чаще всего записывается с указанием титра (разведения), пример: «Отрицательно, < 1:160». При развернутом иммуноблот-исследовании на антитела к разным компонентам ядра клетки, ответ зачастую записывается для каждого вида антител по отдельности. Например: «АТ к двуспиральной ДНК — отрицательно; АТ к PCNA — отрицательно; АТ к Scl-70 – отрицательно».

Иногда у здоровых лиц обнаруживаются AHA в небольших количествах (слабоположительный результат), что может свидетельствовать о генетической предрасположенности к аутоиммунным заболеваниям. Результат анализа «Сомнительно» может быть вызван наличием антител в очень низкой концентрации, которая находится около пороговых значений чувствительности медицинской тест-системы для анализа. Чаще всего после получения результата «Сомнительно» анализ рекомендуется повторить через 4-5 недель.

Причины повышения ANA

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Повышение антител при системной склеродермии

Положительный результат анализа может свидетельствовать о наличии одного или нескольких следующих заболеваний:

системная красная волчанка,
лекарственная волчанка,
синдром или болезнь Шегрена,
системная склеродермия,
синдром Шарпа.

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Гепатит может стать причиной слабоположительного результата

Слабоположительный результат может быть вызван как наличием вышеперечисленных заболеваний, так и заболеваниями, не связанными с системой иммунитета. Перечислим основные болезни, которые могут его вызвать:

ревматоидный артрит, в том числе ювенильный (детский),
первичная легочная гипертензия,
идиопатический легочной фиброз,
синдром Рейно (дигитальный васкулит),
болезнь Крона,
узелковый периартериит,
гепатиты различной природы,
злокачественные новообразования (опухоли),
некоторые инфекционные болезни (туберкулез, шистосомоз, малярия).

Слабоположительный результат анализа иногда выявляется у здоровых лиц, чаще у женщин в возрасте старше 60 лет.

Показания к исследованию

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Показанием для проведения анализа могут быть боли в суставах

Исследование показано при симптомах, не исключающих аутоиммунную патологию соединительной ткани:

длительно сохраняющаяся повышенная температура тела;
беспричинное снижение массы тела;
уменьшение регионарных лимфатических узлов;
болезненность и скованность в суставах, когда не установлена иная причина патологии;
боли в мышцах;
кожная сыпь, особенно на лице в виде «красной бабочки» (нос и щеки рядом с крыльями носа);
перикардит и плеврит неясной причины;
изменения в общем и биохимическом анализе крови, когда исключены другие виды патологии.

Также анализ назначается при имеющемся аутоиммунном заболевании для контроля за эффективностью лекарственной терапии.

Подготовка к анализу и методика проведения исследования

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Определение антител может быть выполнено в нескольких вариантах

Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.

Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.

Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.

Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.

Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.

Факторы, влияющие на результат

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Лекарственные препараты способны искажать результат

Ложноположительный результат анализа может быть вызван приемом некоторых групп лекарственных препаратов:

антидепрессанты;
антиаритмики (бисопролол, биосотал);
противосудорожные препараты (карбамазепин, фенитоин);
препараты для лечения атеросклероза (ловастатин, аторвастатин);
средства для понижения артериального давления.

Прием лекарственных средств желательно ограничить за 1-2 дня до анализа в строгом соответствии с рекомендациями лечащего врача.

Лечение отклонений от нормы

Антинуклеарные антитела при гепатите с

Диагноз и лечение определяет врач

Для лечения аутоиммунных заболеваний соединительной ткани применяются следующие группы препаратов:

кортикостероиды (позволяют уменьшить иммунный ответ организма и снизить концентрацию патологических антител);
антифиброзные препараты (уменьшаю явления склерозирования соединительной ткани);
иммуносупрессивные средства;
ангиопротекторы (препараты, защищающие сосуды);
нестероидные противовоспалительные средства.

Стоит заметить, что диагностика данной группы заболеваний сложна и требует ряда дополнительных исследований, кроме выявления антинуклеарных антител и их вида. Диагноз чаще всего не может быть установлен после однократного исследования крови.

Источник