Днк гепатит в аналитическая чувствительность
Вирус гепатита В, ДНК HBV, ультрачувствительный — ультрачувствительное количественное определение ДНК вируса гепатита В в крови, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Аналитическая чувствительность: РНК вируса гепатита B — 5 МЕ/мл или 22,5 копий/мл.
Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.
Аналитическая чувствительность: РНК вируса гепатита B — 5 МЕ/мл или 22,5 копий/мл.
Ультрачувствительные тесты — это тесты с высокой аналитической чувствительностью. Тест позволяет проводить диагностику вируса гепатита B на ранних сроках с момента инфицирования. Исследование помогает выявить инфекцию, даже в тех случаях, когда стандартные методы ПЦР-диагностики бессильны. Исследование оптимально для тестирования донорской крови.
Исследование вируса гепатита B ультрачувствительным методом особенно актуально для пациентов, имеющих субклиническую форму гепатита, а также является достоверным способом оценки эффективности проводимой противовирусной терапии в процессе лечения.
Гепатит В (HBV или ВГВ) — потенциально опасная для жизни инфекция, одно из самых распространенных в мире инфекционных заболеваний печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV).
Пути передачи HBV — кровь и или другие жидкости организма инфицированного человека, через слизистые оболочки, повреждения кожного покрова, при незащищённом половом контакте, бытовой путь, использование нестерильных шприцев, переливание крови и пересадка донорских органов, парентеральный путь (от матери к ребёнку). Мать, также, может заразить новорождённого через трещины в сосках.
Длительность инкубационного периода от 4 недель до полугода. Гепатит В может протекать как в лёгкой форме, которая длится несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции.
Клинические проявления гепатита В
Основные клинические проявления гепатита В: появление слабости, тошнота, снижение аппетита, быстрая утомляемость, лихорадка, желтушность кожных покровов, в лабораторных анализах — нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Во многих случаях заболевание протекает бессимптомно во время острой стадии инфекции.
Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. После перенесённого ВГВ формируется стойкий иммунитет.
Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.
Показания:
- для выявления скрытых (латентных) форм вирусных гепатитов В;
- при наличии в крови антител к вирусам гепатита В, но неподтверждённом стандартными видами ПЦР-диагностики;
- для оценки эффективности проводимой противовирусной терапии в процессе лечения и через 24 недели после окончания лечения;
- для раннего выявления острых вирусных гепатитов В у лиц, контактировавших с заражённым человеком;
- мониторинг эффективности противовирусного лечения хронического гепатита В.
Подготовка
Кровь необходимо сдавать утром с 08.00–12.00 натощак или спустя 2–4 часа после последнего приёма пищи. Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: количество ДНК вируса гепатита В, выраженное в МЕ/мл.
Для пересчёта в копии/мл следует применять соотношение 1 МЕ=4,5 копии ДНК гепатита В.
Референсные значения: не обнаружено.
Аналитическая чувствительность 5 МЕ/мл или 22,5 копий/мл.
В диагностике вирусного гепатита В, выявление ДНК вируса в плазме — свидетельствует об инфицировании. В мониторинге эффективности терапии, отсутствие ДНК ВГВ — свидетельствует о достижении вирусологического ответа.
Источник
Метод исследования: ПЦР
Вирусный гепатит В — инфекционное заболевание с парентеральным механизмом передачи возбудителя — ДНК-содержащего вируса гепатита В, относящегося к семейству Hepadnaviridae. Источник инфекции — больной вирусным гепатитом В или носитель. Инкубационный период — 30-90 дней. Острый гепатит В характеризуется развитием гепатита с желтухой или без нее, заканчивающегося в большинстве случаев выздоровлением или переходящего в хронический гепатит В. Хронический гепатит В — поражение печени вирусом гепатита В, продолжающееся более 6 месяцев.
ДНК гепатита В — маркер репликации вируса гепатита В. Появляется в крови первым из маркеров гепатита В, в среднем через 1 месяц после инфицирования.
Ультрачувствительные тесты для выявления ДНК/РНК возбудителей инфекций — тесты с высокой аналитической чувствительностью, что позволяет использовать их для раннего выявления ВГВ. Высокоинформативен при исследовании крови доноров. Может использоваться для подтверждения спонтанной или индуцированной лечением элиминации вируса.
ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:
- Диагностика скрытых (латентных) форм вирусного гепатита В;
- Оценка эффективности проводимой противовирусной терапии;
- Для раннего выявления острого вирусного гепатита В у контактных лиц.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:
Референсные значения (вариант нормы):
| Параметр | Референсные значения | Единицы измерения |
|---|---|---|
| ДНК HBV (качественное ультрачувствительное исследование) | Не обнаружено |
Аналитическая чувствительность исследования для определения ДНК вируса гепатита B -5 МЕ/мл.
Выявление ДНК ВГВ свидетельствует об инфицировании вирусом гепатита В.
| Результаты лабораторных исследований при различных вариантах инфекции, вызванной ВГВ* | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Маркер | О Г В | Перене- сенный ГВ | Иммунитет после вакци- нации | Фаза иммунной толерант-ности | ХГВ, HBeAg-позитив-ный | ХГВ, HBeAg-негативный | Носи-тельство ВГВ | Латентная ВГВ-инфекция |
| HBsAg | + | — | — | + | + | + | + | — |
| anti-Bs | — | + | + | — | — | — | — | — |
| anti-Bc IgG | -/+ | + | — | + | + | + | + | +/- |
| anti-Bc IgM | + | — | — | — | — | — | — | — |
| HBeAg | +/- | — | — | + | + | — | — | — |
| anti-Be | -/+ | + | — | — | — | + | + | — |
| ДНК ВГВ | + | — | — | +++ | ++ | + | +/- | +/- |
* Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации и Российского общества по изучению печени по диагностике и лечению взрослых больных гепатитом В, 2014.
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник
Метод исследования: Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Гепатит В — инфекционное заболевание с парентеральным механизмом передачи. Вызывается ДНК-содержащим вирусом, который относится к семейству Hepadnaviridae. Источник инфекции — больной гепатитом В или носитель. Инкубационный период составляет 30-90 дней. Острый гепатит В характеризуется развитием гепатита с желтухой или без нее, и заканчивается в большинстве случаев выздоровлением или может перейти в хроническую стадию. Хронический гепатит В — поражение печени вирусом гепатита В, продолжающееся более 6 месяцев.
ДНК вируса гепатита В — маркер репликации. Появляется в крови первым из маркеров гепатита В, в среднем через 1 месяц после инфицирования. В некоторых случаях является единственным маркером особой формы — скрытой HBV-инфекции.
Новая услуга 030109 – это уникальное исследование с высокой аналитической чувствительностью (5 МЕ/мл) для определения ДНК вируса гепатита В в количественном формате. Исследование используется для мониторинга эффективности терапии. Высокая чувствительность метода достигается за счет максимально автоматизированного проведения исследования.
ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:
- Мониторинг эффективности противовирусной терапии.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:
Референсные значения (вариант нормы):
В результате проведенного исследования врач одновременно получает информацию о наличии или отсутствии ДНК HBV в качественном и количественном форматах. Результат исследования представлен в виде таблицы, состоящей из трех частей.
В первой части таблицы в графе «Результат» выдается результат «Готов». Во второй части таблицы в графе «Результат» содержится информация о наличии или отсутствии ДНК HBV в качественном формате и выдается результат «обнаружено» или «не обнаружено» (аналитическая чувствительность теста составляет 5 МЕ/мл). В третьей части таблицы в графе «Результат» содержится информация о наличии или отсутствии ДНК HBV в количественном формате (линейный диапазон измерения: 15-10^8 МЕ/мл). При концентрации вируса менее 15 МЕ/мл (от 5 до 15 МЕ/мл) количество вируса не указывается, в графе «Результат» отображается «Обнаружено, менее 15». При концентрации вируса 15 МЕ/мл и выше в графе «Результат» указывается точное количество вируса в МЕ/мл.
Пример результата исследования
| Параметр | Результат | Референсные значения | Ед. Изм. |
|---|---|---|---|
| ДНК HBV (количественное ультрачувствительное исследование) | Готов | ||
| ДНК HBV (качественное ультрачувствительное исследование) | ОБНАРУЖЕНО | Не обнаружено | |
| ДНК HBV (количественное ультрачувствительное исследование) | Обнаружено, менее 15 | Не обнаружено | МЕ/мл |
| Комментарий к ДНК HВV (количественное ультрачувствительное исследование) Аналитическая чувствительность 5 МЕ/мл, линейный диапазон измерения: 15-10^8. Концентрация вируса в результате ответа указывается при значении 15 МЕ/мл и выше. | |||
Внимание! В соответствии с федеральным законом от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» ПЦР-исследование является одним из методов всестороннего обследования пациента, на основании которых лечащий врач устанавливает диагноз и выбирает мероприятия по лечению пациента.
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник
Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.
При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.
Виды ПЦР на вирусный гепатит В
Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.
Качественный ПЦР и его трактовка
Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:
- отрицательный результат — вируса нет;
- положительный результат — вирус обнаружен.
Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.
В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.
Количественный ПЦР
Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:
- Перед назначением лечения.
- Для оценки эффективности терапии.
- Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
- Для определения стадии, на которой находится заболевание.
Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:
1 МЕ/мл = 5 копий/мл
Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.
Трактовка количественного ПЦР
При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:
- < 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
- от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
- 10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
- 10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.
Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:
- Хронический гепатит В диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
- Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
- Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
- Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
- Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.
Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:
- ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
- ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
- ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.
Подготовка к обследованию
Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:
- Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
- Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
- Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.
Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.
Подводя итоги
На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.
Источник
Метод исследования: ПЦР
При одновременном заказе услуги 030102 с количественным и генотипирующим исследованием, в случае положительного результата, срок исполнения может быть увеличен до получения окончательного результата.
Вирусный гепатит В — инфекционное заболевание с парентеральным механизмом передачи возбудителя — ДНК-содержащего вируса гепатита В, относящегося к семейству Hepadnaviridae. Источник инфекции — больной вирусным гепатитом В или носитель. Инкубационный период — 30-90 дней. Острый гепатит В характеризуется развитием гепатита с желтухой или без нее, заканчивающегося в большинстве случаев выздоровлением или переходящего в хронический гепатит В. Хронический гепатит В — поражение печени вирусом гепатита В, продолжающееся более 6 месяцев.
ДНК гепатита В — маркер репликации вируса гепатита В. Появляется в крови первым из маркеров гепатита В, в среднем через 1 месяц после инфицирования. В некоторых случаях является единственным маркером особой формы — скрытой HBV-инфекции. Определение ДНК ВГВ позволяет диагностировать гепатит, вызванный мутантными штаммами вируса, при котором не определяются другие маркеры инфекции.
ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:
- Пациенты с признаками ОГ;
- Пациенты с диагнозом «Гепатит неясной этиологии»;
- Доноры крови, органов и тканей;
- Контактные лица в очаге ГВ.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:
Референсные значения (вариант нормы):
| Параметр | Референсные значения | Единицы измерения |
|---|---|---|
| ДНК Вируса гепатита В (качественное исследование) | Не обнаружено |
Аналитическая чувствительность теста: ДНК ВГВ — 50 МЕ/мл.
| Результаты лабораторных исследований при различных вариантах инфекции, вызванной ВГВ* | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Маркер | О Г В | Перене- сенный ГВ | Иммунитет после вакци- нации | Фаза иммунной толерант-ности | ХГВ, HBeAg-позитив-ный | ХГВ, HBeAg-негативный | Носи-тельство ВГВ | Латентная ВГВ-инфекция |
| HBsAg | + | — | — | + | + | + | + | — |
| anti-Bs | — | + | + | — | — | — | — | — |
| anti-Bc IgG | -/+ | + | — | + | + | + | + | +/- |
| anti-Bc IgM | + | — | — | — | — | — | — | — |
| HBeAg | +/- | — | — | + | + | — | — | — |
| anti-Be | -/+ | + | — | — | — | + | + | — |
| ДНК ВГВ | + | — | — | +++ | ++ | + | +/- | +/- |
* Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации и Российского общества по изучению печени по диагностике и лечению взрослых больных гепатитом В, 2014.
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник
