Гепатит с количественный пцр отрицательный

Печень человека ежедневно испытывает огромные нагрузки. Орган непрерывно фильтрует кровь, очищая ее от токсичных соединений. Поэтому состояние печени требуется постоянно держать под контролем. Сделать это помогут диагностические процедуры.

Сдавали ли Вы когда-нибудь кровь на гепатит С?

ДаНет

Выявить развитие такого опасного заболевания, как гепатит С, позволяет полимеразная цепная реакция. Однако многие пациенты сталкиваются с ситуацией, когда антитела гепатита С есть, а ПЦР при этом отрицательный. Рассмотрим, что это значит.

Пути передачи вируса гепатита С

Гепатит С − опасная болезнь печени, имеющая вирусную природу. Вирусы передаются от больного человека к здоровому через биологические жидкости: кровь, слюну, сперму, влагалищные выделения.

Способы заражения гепатитом С

Медицинские работники выделяют условия, которые способствуют передаче вирусного заболевания:

Переливание крови.
В девяностые годы донорская кровь не подвергалась лабораторным исследованиям, поэтому случаи заражения реципиентов встречались достаточно часто. Сейчас доноры сдают анализ на гепатит.
Многократное использование иглы для инъекций.
Группу риска составляют наркозависимые и малообеспеченные люди.
Незащищенный половой акт.
Причины, приводящие к заражению вирусом: беспорядочные связи, частая смена партеров, неразборчивость. Надежно защитит от гепатита С использование презерватива.
Прохождение родовых путей ребенком.
Во время беременности плод защищен плацентой. В процессе родов защита отсутствует.
Грудное вскармливание.
Молоко зараженной женщины не содержит вирусных частиц. Опасность заключается в том, что младенцы прокусывают соски при кормлении. В подобных условиях инфицированная кровь попадет внутрь неокрепшего организма.
Плохая стерилизация инструментов.
Для выполнения косметических процедур, как маникюр, педикюр, татуаж, пирсинг.

Рискуют заразиться вирусом также медработники, постоянно контактирующие с хирургическими инструментами, использованными шприцами. Поэтому медицинский персонал, попадающий в группу риска, периодически проходит диагностику гепатита С.

Вопреки распространенному мнению, вероятность заражения вирусом гепатита С бытовым способом практически исключена.

Когда появляются антитела к гепатиту С?

Проникновение вируса внутрь организма человека вызывает синтез специальных антител, противостоящих распространению инфекции. Выработка антител отмечается в двух случаях:

вакцинация против гепатита;
распространение вируса в результате заболевания.

Присутствие антител в сыворотке крови можно обнаружить с помощью диагностических процедур только спустя две-три недели. Часто выявление болезни происходит поздно. Подобная проблема объясняется бессимптомным протеканием патологии. Больной ощущает повышенную утомляемость, ухудшение настроения, головные боли. Однако подобным болезненным признакам редко уделяют внимание.

Определяют присутствие антител с помощью иммуноферментного анализа. Если антитела к гепатиту С обнаружены, дополнительно проводят ПЦР диагностику.

Антитела к гепатиту C есть, а ПЦР отрицательный: причины

Иммуноферментное исследование способно выявить не сам вирус, а лишь наличие антител к нему. Иммунная система человека устроена таким образом, что после выздоровления она оставляет внутри организма защитные резервы, которые не позволят возникновения рецидива. Именно поэтому после контакта иммунитета с вирусом гепатита С остается некоторое количество антител.

Если ПЦР на гепатит С отрицательный, а антитела есть, это означает, что пациент перенес заболевание в прошлом. В редких случаях подобный результат свидетельствует о переходе патологии в неопасную скрытую форму или в хроническую стадию. В подобных случаях при соблюдении пациентом рекомендаций иммунолога, опасность активизации вирусных частиц сводится к нулю.

При постановке диагноза медицинские работники ориентируются преимущественно на результаты ПЦР. ИФА используется исключительно как первичная диагностика.

При диагностике гепатита С сначала делают ИФА, для подтверждения – ПЦР

Что такое ПЦР?

Анализ ПЦР заслуженно считается самым действенным методом выявления гепатита С. Полимеразная цепная реакция способна определить присутствие генотипа вируса в плазме крови на ранних стадиях развития заболевания, спустя семь-десять дней. Для диагностики используются два вида ПЦР:

Качественный.
Назначается после положительного анализа на присутствие антител. Суть метода заключается в том, чтобы определить, присутствует вирус гепатита С в крови пациента либо отсутствует. Некоторые условия могут дать ложноотрицательный результат.Например, проведение лабораторного исследования в первые дни после попадания вирусных частиц в организм, ошибки медработников при заборе крови, лечение уколами Гепарина.
Количественная ПЦР диагностика.
Лабораторное исследование определяет концентрацию вирусных частиц в организме. Тяжесть и стадия заболевания прямо пропорциональна количеству вируса. Особенности и успешность терапевтического курса также зависят от результата количественного ПЦР. При небольшой концентрации вирусных частиц вероятность полного выздоровления достигает девяноста девяти процентов.Зашкаливающие показатели, наоборот, сводят успешность лечения к минимуму, а также способны вызывать ухудшение самочувствия пациента. При выявлении заболевания количественная ПЦР диагностика проводится неоднократно − спустя один, три и шесть месяцев. Подобные меры требуются, чтобы проследить динамику болезни и объективно оценить результаты лечения.

Многих пациентов интересует, если в результате анализа на гепатит С ПЦР отрицательный, что значит подобная формулировка. В данном случае человек признается полностью здоровым.

Нужно ли повторно сдавать анализы?

Положительный результат ИФА показывает присутствие антител в плазме крови и указывает на факт столкновения иммунной системы человека с вирусом гепатита С. Поэтому требуется дополнительная диагностика с использованием ПЦР. Положительный результат однозначно подтвердит развитие заболевания.

Если результат отрицательный, в девяноста процентах случаев пациент здоров. Однако сохраняется вероятность, что заболевание только зарождается, и вирусных частиц настолько мало, что ПЦР исследование пока не способно их выявить.

Поэтому, для полного исключения гепатита С, медицинские работники назначают повторное прохождение анализа спустя полгода. При отрицательном результате пациент может быть уверен в отсутствии болезни.

Что делать если обнаружены антитела, а ПЦР отрицательный?

Присутствие антител во внутренней среде человека может свидетельствовать о нахождении вируса гепатита С в скрытой форме, даже при отрицательном ПЦР. Поэтому в подобных случаях, чтобы обезопасить человека от активизации болезненного процесса, иммунологи назначают ежегодное прохождение лабораторных исследований.

Дополнительно пациент получает следующие рекомендации:

сократить употребление жирных, жареных блюд;
увеличить суточную норму потребления чистой воды до двух литров;
исключить спиртные напитки;
внимательно относиться к обработке инструментов во время косметических и медицинских процедур.

Стоит отметить, что присутствие антител, даже при отрицательном ПЦР − противопоказание для сдачи донорской крови.

Выявление антител в плазме крови − не повод для отчаяния. Их присутствие еще не говорит о протекании гепатита С. Чтобы получить правильный диагноз, потребуется пройти комплексное медицинское обследование.

( 1 оценка, среднее 5 из 5 )

Источник

ПЦР на гепатит С – обязательный анализ при обследовании пациента с симптомами поражения печени. Исследование назначают для подтверждения диагноза и получения максимально полной информации о возбудителе болезни, активности вирусной инфекции. Результаты служат основанием для назначения противовирусной терапии, определения ее продолжительности и оценки эффективности.

Анализ ПЦР на гепатит С

Диагностика с применением методики полимеразной цепной реакции получила распространение сравнительно недавно. Исследования на эту тему велись с середины 1970-х годов. Но первые публикации относительно возможности использования ПЦР в практической медицине появились только в середине 1980-х гг.

При объяснении, что такое ПЦР, врачи подчеркивают, что это самый надежный и достоверный анализ при гепатите С. Данный тест позволяет не только выявить частицы РНК вируса, но и установить его концентрацию (указывает на активность инфекционного процесса) и генотип. Полученные результаты играют ключевую роль для определения тактики и схемы дальнейшей терапии.

В чем состоит суть постановки реакции? При помощи определенных биологически активных веществ добиваются увеличения количество частиц РНК вируса в небольшом объеме крови. Впоследствии участки генома определяются разнообразными физико-химическими методами.

Постановка ПЦР осуществляется при помощи нескольких компонентов:

Праймер. Это искусственно синтезированное соединение, в котором последовательность нуклеотидов полностью идентична конкретному участку РНК вируса, не подвергающегося мутациям и изменением в зависимости от генотипа. Определение РНК вируса гепатита С выполняется с использованием строго специфичного праймера.
РНК-полимераза. Фермент, отличающийся устойчивостью и структурной стабильностью на фоне изменений температуры, необходимых для правильного протекания химической реакции. Обеспечивает построение цепочки РНК на одном из этапов ПЦР.
Смесь протеинов. Для построения дополнительных участков РНК необходим «строительный материал», для чего к биологическому образцу добавляют определенные соединения белковой структуры.
Буфер. Смесь, поддерживающая оптимальный уровень рН для обеспечения протекания полимеразной цепной реакции.
Образец биологического материала, предположительно содержащий образец РНК HCV (Hepatitis C Virus).

При некоторых способах постановки ПЦР дополнительно используются РНК-зонды и другие внутренние контроли, используемые в качестве контрольных образцов при выявлении результатов.

Сам процесс увеличения участков вирусной РНК при помощи матрицы именуют амплификацией. Реакция протекает в несколько этапов:

Денатурирование. Процесс «раскручивания» нитей РНК обеспечивается повышением температуры до определенного уровня.
Отжиг. После снижения температуры до необходимых показателей происходит присоединение праймеров к РНК. Данная стадия возможна только при наличии в образце крови искомых вирусных частиц.
Непосредственный синтез участков вирусной РНК с участием ферментов.

Перечисленные циклы постановки ПЦР повторяются несколько десятков раз, что обеспечивает многократное увеличение количества участков РНК возбудителя гепатита С уровня, определяемого лабораторными способами.

Перед проведением анализа образец забора крови соответствующим образом подготавливается. Содержащиеся РНК адсорбируются на буфере-носителе, затем смываются и используется для постановки полимеразной цепной реакции.

Детекция результатов проводится либо методом электрофореза (горизонтального или вертикального), либо способом гибридизации. Способ расшифровки результатов реакции выбирается исходя из целей проведения исследования (просто выявление РНК, либо определение ее ориентировочного количества).

Прием у инфекциониста

ПЦР – самый точный анализ крови на гепатит С

Перечень предлагаемых исследований на HCV включает несколько пунктов, отличающихся по стоимости, срокам готовности и способу выполнения.

Если обратиться к протоколам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), порядок диагностики инфекции включает несколько последовательных этапов.

Для начала сдают:

общий анализ крови и мочи;
биохимия крови;
исследование на содержание глюкозы (строго натощак);
анализ на ВИЧ;
флюорография;
иммунограмма (при подозрении на наличие аутоиммунных патологий).

При отклонении показателей биохимического анализа крови от физиологической нормы пациенту назначают тест, основанный на обнаружении специфических антител, вырабатываемых при контакте вируса с кровью (ИФА).

Но подобный анализ крови на гепатит С имеет существенный недостаток. Процесс синтеза антител зависит от функционирования и выработки иммунокомпетентных клеток. Индивидуальные особенности организма могут стать причиной как ложноотрицательного, так и ложноположительного ответа.

Перед назначением теста ИФА врач рассказывает пациенту о возможной ошибке, что вызывает ответный вопрос: «Какой анализ крови показывает гепатит С с минимальным риском получения неверных результатов?» Для подтверждения или опровержения диагноза самым точным лабораторным тестом является проведение ПЦР методом real time.

Дальнейшая тактика действий зависит от того, что покажет исследование. В случае подтверждения диагноза, пациенту сразу же назначают гепатопротекторы, предупреждают о важности правильного питания и здорового образа жизни. Но таргетная терапия невозможна без определения уровня вирусной нагрузки и генотипа гепатита С.

Некоторые лекарственные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В. Поэтому для исключения осложнений, дополнительно назначают анализы на HBsAg. HCV лечат только после получения отрицательного результата исследования.

Виды: качественный, количественный и генотипирование

При первичной диагностике гепатита С серологическим методом определяется титр вырабатываемых антител. Такой результат приблизительно показывает активность патологического процесса. Но максимально точную информацию доктор может получить только после изучения данных ПЦР.

Проведение ПЦР

В настоящее время практически во всех лабораториях анализ выполняют ультрачувствительным методом. Таким образом диагностика HCV возможно уже через 10–14 дней после заражения, реже – спустя 2,5–3 недели. В зависимости от целей, преследуемых в ходе исследования, доктор назначает конкретный тип теста.

Существуют следующие разновидности ПЦР:

Качественный. При назначении диагностических тестов, у пациентов возникает вопрос, что показывает подобный метод исследования. Качественный анализ способом ПЦР – высокочувствительный тест, определяющий наличие РНК вируса в крови в минимальной концентрации. Обычно подобная разновидность полимеразной цепной реакции ставится по технологии обратной транскрипции. Это один из немногих способов ПЦР, в ходе которого в качестве мишени можно использовать РНК.
Количественный. Количественный анализ на гепатит С позволяет определить точный уровень РНК HCV в крови. Проведение исследования возможно только одним способом – методом real-time. В ходе подготовки материала к постановке ПЦР в образец добавляют краситель. После каждого цикла амплификации проводится автоматизированное количественное исследование в режиме реального времени. Нередко методику проводят в сочетании с обратной транскрипцией. Таким образом возможно качественное определение малого количества копий РНК вируса. Устанавливать уровень РНК HCV количественно имеет смысл, если получен положительный результат качественной ПЦР.
Генотипирование. Анализ сдается проводится на конечной стадии диагностического процесса. Принцип исследования построен на разнице в последовательности нуклеотидов, что отличает один генотип вируса гепатита С от другого. Обычно анализ делают методом мультипраймерной (мультиплексной) ПЦР.

При подозрении на носительство вируса, необходимо выполнить качественную ПЦР. Если результат отрицательный, человек скорее всего здоров. Но для полного исключения заражения рекомендуют повторить исследование через 7–10 дней. Если же РНК вируса обнаружена, проводят дальнейшие тесты (количественный и генотипирование).

Показания к проведению лабораторного теста

Основным показанием к сдаче крови на гепатит С методом полимеразной цепной реакции является положительный результат иммуноферментного анализа (вне зависимости от разновидности: Total, дифференцированный тест на IgG и IgM).

Гепатолог

Кроме того, провериться нужно:

в период беременности (тест делают дважды – в первом триместре и за 7–10 недель до родов);
при работе, связанной с повышенным риском инфицирования (медсестры, лаборанты, работники донорских центров, косметологи и т.д.);
при беспорядочных половых связях и незащищенном контакте с малознакомым человеком;
на фоне ВИЧ, онкологических заболеваний, приема определенных медикаментозных средств и т.д.;
пациентам, зависимым от внутривенных наркотиков;
при постоянном проведении инвазивных диагностических или лечебных процедур;
при проведенном до 1992 года переливании крови (ранее не существовало достоверных способов проверки донорского биологического материала на наличие вируса).
при соприкосновении открытой раны с чужой кровью, нестерилизованным медицинским инструментарием.

Рост заболеваемости растет с каждым годом. Поэтому для раннего выявления инфекции лабораторные тесты на HCV рекомендуют сдавать один раз в год.

Где сдать анализ

При обращении в поликлинику, пациент имеет право на бесплатные анализы. Но сначала сдают тест ИФА. И только при положительном либо сомнительном результате показано исследование методом ПЦР. Поэтому провести срочную диагностику можно обратившись в платную лабораторию, где сдать кровь на ПЦР можно в удобное для пациента время. Одновременно рекомендуют сразу проверить показатели печеночных ферментов, стандартные клинические параметры крови.

Как правило, изучение крови методом ПЦР доступно практически в любой лаборатории. Если пункт забора крови не оснащен должным оборудованием, биологический материал транспортируют для проведения исследования с соблюдением температурного режима и других условий. Проведение ПЦР в поликлинике возможно только после других обследований, результаты которых косвенно укажут на наличие гепатита С.

Как правильно сдавать кровь

Перед тем, как сдавать кровь на обнаружения возможного вируса, следует соблюсти ряд правил подготовки к анализу.

Основные аспекты указаны в памятке:

За 5–7 дней отказаться от потребления жирной, жареной пищи, алкоголя. В целом, доктора рекомендуют придерживаться правил питания по диете №5.
За 12–14 часов до проведения исследования не есть. Пить можно только воду.
Сдать кровь лучше в первой половине дня.
До процедуры не курить.

ПЦР на гепатит С

Также следует предупредить доктора о принимаемых лекарственных препаратах, возможных проблемах со здоровьем, хронических заболеваниях.

Забор крови выполняется из вены. После окончания процедуры место прокола медсестра заклеивает стерильным пластырем, предупреждает о необходимости согнуть руку и держать ее в таком положении 10–15 минут. В противном случае высока вероятность появления болезненной гематомы.

Сколько по времени делается исследование?

Сколько делается анализ, зависит от лаборатории. Средний срок выполнения колеблется в пределах 1–3 дней. Некоторые клиники предоставляют платную услугу быстрой постановки ПЦР, однако время проведения ограничивается возможностями медицинской аппаратуры.

В поликлинике результаты могут передаваться врачу в течение 7–10 дней. Это связывают с большим наплывом пациентов. При этом биологический материал хранится в соответствии со всеми требованиями.

Расшифровка результатов

Как правило, расшифровка качественной ПЦР не представляет сложности. Но во избежание ошибочной трактовки, с полученным из лаборатории бланком следует обратиться к врачу. Варианты, что означает та или иная разновидность ПЦР, приведены в таблице.

Вид исследования	Возможный результат и предполагаемая расшифровка
Качественная ПЦР	Отрицательный: человек здоров либо концентрация вирусной РНК в крови слишком мала для детекции. Положительный: человек инфицирован
Количественная	Проводится, если обнаружено РНК вируса качественным методом исследования. В зависимости от того, какие результаты анализов получены, определяется уровень вирусной нагрузки
Генотипирование	Проводится при гепатите С, подтвержденном другими методами исследования. Анализ позволяет установить точный генотип возбудителя патологии

Но нередко возникает ситуация, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Расшифровать такие результаты анализов может только врач.

Однако подобные данные возможны в следующих случаях:

беременность;
перенесенный в острой форме гепатит С;
пройденный курс лечения от HCV;
наличие инфекций, повышающих вероятность ложноположительного результата ИФА.

Только полимеразная цепная реакция показывает точное наличие вирусной инфекции в организме. На фоне отрицательной ПЦР положительный ИФА в большинстве случаев говорит о том, что человек не инфицирован. Но врачу следует точно установить причину ложноположительного результата.

Качественный анализ

Анализ ПЦР качественный на гепатит С подтверждает присутствие возбудителя заболевания в крови. Если РНК вируса не обнаружена, человек здоров. Но при подозрении на инфицирование рекомендуют повторно пройти исследование. Положительный результат свидетельствует об инфицировании. Но этот анализ не позволяет дифференцировать хронический гепатит С от острого, и не может показать, насколько активен патологический процесс.

Количественный тест

Количественный анализ методом ПЦР проводится после подтверждения диагноза и его расшифровка важна для определения тактики лечения. В зависимости от концентрации частиц возбудителя гепатита С выделяют несколько степеней вирусной нагрузки: средняя, высокая и низкая. Чем больше показатель, тем тяжелее протекает инфекция и сложнее терапия. В норме вирусная РНК отсутствует в крови.

Результаты ПЦР на гепатит С

Генотипирование

Многие лаборатории проводят генотипирование в комплексе с количественной ПЦР, что позволяет сэкономить. Подобное исследование делают только один раз, перед началом лечения. Обычно выполняют анализ на один из четырех наиболее распространенных генотипов (1, 2, 3 или 4). Одновременно определяют и подтип HCV. Генотипирование на 5 и 6 подвид гепатита С возможно не в каждой лаборатории.

Плюсы ПЦР диагностики

Диагностика методом ПЦР получила широкое распространение благодаря:

высокой точности (при условии использования тест-систем последнего поколения);
простоте забора биоматериала;
быстроте получения результатов (максимум 5 дней).

Но основное преимущество состоит в широких диагностических возможностях исследования. Анализ позволяет не только выявить вирус, но и точно определить его концентрацию в организме и установить генотип инфекции. Кроме того, количественное исследование необходимо для оценки эффективности противовирусной терапии. Основная цель лечения – достижение нормы анализов (т. е. неопределяемого уровня РНК HCV) на 4, 12 или 24 неделе противовирусного курса и сохранение этого результата.

Стоимость

Стоимость анализа ПЦР колеблется в зависимости от региона. Так, в Москве цены выше. Качественная ПЦР обойдется в 600–800 рублей, количественная – в 2200–3000 рублей, генотипирование – от 1000 рублей. Узнать точно, сколько стоит конкретное исследование, можно непосредственно в лаборатории, на сайте медицинской организации или по телефону.

Источник