Гепатит с методом ифа отрицательно
Иммуноферментный анализ – это метод диагностики вирусных заболеваний. ИФА на гепатит С показывает реакцию иммунной системы на действие патогенных микроорганизмов. Для процедуры используют венозную кровь и ищут в ней антитела к вирусу гепатита. Иммуноферментный анализ недорогой, выполняется быстро, но требует подтверждения повторным ИФА или более дорогим ПЦР.
Сущность и достоверность метода
Метод основан на способности антител (клеток иммунной системы) образовывать комплексы с частицами вируса гепатита (антигенами). Для определения этих комплексов пользуются специальными маркерными ферментами. Анализ дает возможность выявить количество антител к вирусу в первые 6-12 недель болезни.
Подготовка к ИФА включает:
- исключение физических нагрузок за сутки до исследования;
- запрет на употребление алкогольных напитков, табачных изделий и жирной пищи;
- временное прекращение приема лекарственных препаратов и оральных контрацептивов.
Кровь для иммуноферментного анализа на гепатит берут утром натощак. Достоверность данного метода повышается при повторном проведении ИФА спустя 2 недели после процедуры.
Результат анализа показывает:
- уровень эффективности работы иммунной системы при борьбе с вирусом;
- стадию заболевания;
- течение – острый или хронический гепатит.
Женщинам в период беременности необходимо сдать кровь на ИФА минимум два раза:
- на ранних сроках (4-5 недель);
- перед родами;
Преимущества ИФА заключаются в:
- доступной стоимости анализа для всего населения;
- полной автоматизации процесса, исключающей ошибку человека;
- быстром получении результата анализа;
- возможности выявить инфекционное заболевание на ранних этапах;
- высокой точности.
Показания к ИФА на гепатит С
Гепатит С – опасное вирусное заболевание, которое передается через кровь и разрушает клетки печени.
Показания к анализу крови на ВГС:
- наличие ВИЧ-инфекции;
- симптомы острого гепатита: рвота, вялость, чувство горечи во рту, отсутствие аппетита, желтушный цвет кожных покровов и др.;
- хронический гепатит;
- наличие в биохимическом анализе крови повышенного билирубина и изменение коэффициента де Ритиса (указывают на нарушения работы печени);
- принадлежность к группе риска (врачи, медсестры, наркозависимые);
- наркотическая и алкогольная зависимость.
Проверку на гепатит С обязаны проходить военные, сотрудники правоохранительных органов, работники общепита и социальных служб.
Какие антитела обнаруживает тест
Анализ на гепатит С, проведенный методом ИФА, способен обнаружить антитела двух типов:
- IgM;
- IgG.
IgM – иммуноглобулин, имеющий самую крупную молекулярную массу и неспособный проникать через плацентарный барьер. Антитела класса IgM вырабатываются в организме первыми – спустя 6 недель после заражения. Через полгода уровень иммуноглобулинов типа М снижается и остается таким до следующего рецидива болезни (при хроническом гепатите). Иммуноглобулины M являются основой первичного иммунного ответа зараженного организма.
IgG – основной иммуноглобулин сыворотки крови, является вторичным иммунным ответом. Обеспечивает иммунитет ребенка, рожденного от инфицированной матери. Иммуноглобулины G вырабатываются спустя 3 месяца после возникновения заболевания, достигают максимальной концентрации на пятом месяце и остаются в этом количестве на протяжении многих лет.
В периоде острого вирусного гепатита есть две стадии. На первой происходит активация и выделение IgM, на второй – IgG. В острой фазе болезни IgM и IgG образуются к нуклеокапсидному белку вируса Core. При латентном (скрытом) течении вырабатываются IgG к белку core и неструктурному белку NS.
Способы проведения
Диагностика гепатита включает два способа проведения ИФА – прямой и непрямой.
Прямой
Прямой метод ИФА на антитела к гепатиту С основан на образовании комплексов антиген-антитело.
Стадии проведения:
- В специальную таблицу с лунками заносят биологический материал пациента (кровь) и оставляют на 30 минут. Важные элементы приклеиваются ко дну лунок.
- Добавляют специальные меченые антитела. Они прикрепляются к антителам исследуемой крови (если такие есть). Здесь выжидают несколько часов.
- Содержимое лунок сливают и промывают от лишних веществ.
- В каждую лунку добавляют ферменты, которые распознают добавленные ранее антитела. Ферменты связаны со специальным маркером.
- При положительной реакции маркерное вещество становится окрашенным.
Эта методика включает несколько простых шагов и обеспечивает достоверный результат.
Непрямой
Непрямой метод ИФА отличается тем, что в системе участвуют не два, а три компонента.
Он включает два варианта:
- Конкурирующий: в исследуемую систему добавляют антигены, кровь пациента, в которой предполагается наличие иммуноглобулинов, и антитела, помеченные ферментом. Две группы антител вступают в борьбу за образование комплексов с антигеном. Положительной реакция считается при максимальном количестве антител первой группы и минимальном – второй группы.
- Сэндвич-ИФА: в лунки заносят антитела к исследуемому антигену, после чего добавляют кровь и новые антитела. Исследуемый антиген оказывается между двумя молекулами иммуноглобулинов. Этот «сэндвич» виден визуально или при подсвечивании специальным спектром.
Расшифровка анализа
Существует четыре варианта расшифровки анализа:
- Положительный результат. В исследуемом материале обнаружены IgM и IgG к вирусу гепатита – означает, что человек заражен давно (более 3 месяцев назад). Если обнаружены только IgM, то инфекция попала в кровь месяц назад, если только IgG – произошло выздоровление или хронизация гепатита.
- Отрицательный результат. Иммуноглобулинов в исследуемой крови не обнаружено. Человек полностью здоров.
- Ложноположительный результат. ИФА всегда нужно проверять полимеразной цепной реакцией (выявляет сам вирус в крови или печеночной ткани). Если ПЦР дает отрицательный результат, то ИФА следует провести заново.
- Сомнительный результат. Если прошло очень мало времени после рискованной ситуации, ИФА может не выявить наличия антител. Для подтверждения результата необходимо провести повторный анализ через две недели.
Ложноположительный и ложноотрицательный результаты ИФА могут возникнуть вследствие ошибки в лаборатории или неправильной подготовке к анализу. У беременных ложные результаты встречаются чаще, чем у остальных людей.
Почему ИФА положительный, а ПЦР отрицательная
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – дополнительный метод диагностики вирусных заболеваний. Выявляет РНК вируса, то есть его генетическую информацию, применяется для подтверждения диагноза. В некоторых случаях ПЦР дает отрицательный результат при положительном показателе ИФА.
Почему так происходит:
- Выздоровление: ПЦР реагирует только на РНК вируса гепатита, а ИФА может дать положительный результат и после выздоровления, ведь он выявляет клетки иммунной системы, которые сохраняются в крови на несколько лет.
- Разный исследуемый материал: при заборе из разной локализации может возникнуть несоответствие результатов. Так, для ПЦР берут не только кровь, но и кусочек ткани печени.
- Разные тестовые системы.
Что покажет ИФА после лечения гепатита
После пройденной терапии против гепатита С необходимо еще раз сдать кровь на ИФА.
Иммуноглобулины G сохраняются в организме несколько лет после выздоровления, поэтому повторный анализ на гепатит может быть положительным. В этом случае необходимо дополнительно сдать кровь на ПЦР. Отрицательный результат ПЦР на гепатит будет свидетельством того, что человек здоров, а положительный – подтвердит ИФА и укажет на некачественное лечение.
Отрицательный результат повторного ИФА является подтверждением выздоровления.
ИФА относится к лабораторным методам высокой точности и позволяет выявить заболевание на ранних сроках. При первых симптомах гепатита нужно срочно обратиться к врачу, который назначит необходимые анализы для подтверждения диагноза.
Если у вас так же обнаружен РНК гепатита С в крови (вирусная нагрузка), рекомендуем ознакомиться с материалом по расшифровке анализов при гепатите С.
Источник
Достоверность анализа
Чтобы оценить работоспособность защитных функций организма и выявить точные диагностические данные, проводят иммуноферментный анализ. В случаях инфицирования человека обнаруживаются кардинальные изменения в крови и получают результат ИФА на гепатит С положительный.
Метод изучения биологического материала ИФА относят к определению иммунохимических реакций, открывающих взаимосвязи антигенов и антител. В ходе проведения анализа к молекуле антитела химическим способом подсаживают антиген-экзим, служащий маркером, который указывает на компоненты процесса.
К компонентам иммуноферментного анализа относят:
- антитела:
- антитела промаркированные;
- antibodies-attacking-a-virus1-440×264 антиген;
- субстрат фермента;
- краситель-индикатор.
Процесс выработки антител и иммуноглобулинов запускается в момент проникания в организм пациента посторонних генов или болезнетворных бактерий.
Задачей иммуноглобулинов считают нейтрализацию антигенов, происходящую при их взаимодействии. В ходе взаимодействия иммуноглобулины формируют комплект антиген-антител, которые имеют количественные и качественные характеристики. Эти значения и изучаются в процессе исследования анализа.
Для регистрации результата в ходе тестирования иммуноферментного анализа у человека забирают биологический материал. Обычно для этих целей используют венозную кровь, но в определенных ситуациях необходим анализ спинномозговой жидкости, стекловидного тела или околоплодных вод беременной женщины. Главной особенностью этого теста является его высокая достоверность, которая составляет порядка 80%.
К плюсам иммуноферментного анализа также относят:
- метод ИФА превосходит прочие тесты по точности определения важных показателей в десятки раз;
- для выполнения ИФА не требуется много времени, результаты, подтверждающие или опровергающие наличие вируса в организме, получают довольно быстро;
- стоимость проведения ИФА доступна большинству категорий населения, в отличие от прочих тестов;
- проведение ИФА дает возможность обнаружить проблему при начальных проявлениях, что значительно облегчает последующий процесс лечения человека;
- все стадии проведения этого анализа автоматизированы;
- высокая степень унификации теста.
К негативным проявлениям данного анализа относят возможность ложноположительных и отрицательных результатов. Сомнительные итоги могут регистрироваться при различных патологических состояниях, беременности и при употреблении медикаментозных средств, которые влияют на выработку организмом антител.
Ложноположительный результат
Вирус гепатита С
С помощью проведения иммуноферментного анализа подсчитывается количество антител к вирусу гепатита С. В ходе исследования определяется число этих образований по IgM типу, который соответствует острому течению недуга и IgG, обнаруживаемому при хронической форме.
Антитела IgM регистрируют в течение двух недель после инфицирования организма пациента вирусом гриппа С в острой форме, срок существования этих образований от 3 до 5 месяцев.
Антитела IgG вырабатываются спустя несколько месяцев после поражения организма, но их существование подтверждается в течение десяти лет, даже при условии полного выздоровления пациента.
Отрицательный результат тестирования дает возможность утверждать, что антитела обоих типов отсутствуют в организме и на данный момент гепатит С не обнаружен. Следует учитывать, что если человек заразился в течение последних двух недель, определение патологии невозможно.
Положительный результат теста показывает наличие того или иного типа антител в организме пациента. Данный показатель характеризует инфицирование гепатитом С в острой или хронической форме. Следует учитывать, что фиксация этих образований не дает возможность однозначно указывать на заражение человека, вполне допустимо, что он является только носителем. Бывают случаи, когда при расшифровке данных фиксируется ложноположительный результат.
Это происходит в результате фиксирования лабораторными приборами антител, которые производятся защитной системой человека в ответ на следующие патологии:
- аутоиммунное воспаление;
- проникновение в организм пациента прочих инфекций;
- при беременности.
Статистика проведения иммуноферментного исследования показывает, что ложноположительный вывод регистрируется в 15% всех результатов, подтверждающих наличие вируса. Для беременных женщин данный показатель еще выше.
Причины ложноположительных результатов
Недостоверный вывод тестирования на гепатит С выявляется при сбоях функционирования внутренних органов и технических сбоев, то есть халатного отношения медицинского персонала к своим обязанностям. Ошибки обнаруживаются не более чем в 15% случаев, но их можно избежать, выполняя следующие правила:
Перед сдачей анализа нельзя курить
- для сдачи анализа необходимо выбирать только проверенные, сертифицированные лаборатории с обученным медицинским персоналом;
- накануне проведения анализов следует прекратить употребление любых медикаментозных препаратов, если прием лекарства обусловлен состоянием пациента, он должен предупредить персонал лаборатории об этом факте;
- процедура обычно проводится утром натощак, но перед этим пациенту не следует проявлять излишнюю физическую активность и курить;
- непосредственно перед проведением анализа рекомендуется определить температуру тела, она не должна превышать норму.
При сомнении в правильности выводов тестирования, назначается повторный анализ. В идеале требуется проведение трех исследований биологического материала на гепатит С.
Если первый тест показал наличие антител в крови пациента, а последующие два не выявили эти образования, можно утверждать, что инфицирования организма вирусом гепатита С нет. Существует ряд заболеваний, которые влияют на результат тестирования крови на наличие вируса гепатита С.
https://youtu.be/WckrECLnx3I
Некоторые патологии сопровождаются выработкой антител, и в этом случае подтверждение наличия вируса гепатита С в организме пациента производится с помощью других методов исследования, так как многократно повторяющиеся ошибки при ИФА анализе не дают гарантии правильного диагноза.
Комплексное изучение с применением исследования биологического материала человека в лабораторных условиях и с использованием инструментальных методов позволит выявить истинную причину недомогания, и исключить гепатит С.
Чаще всего причиной ложноположительного результата анализа являются следующие патологии:
- инфекционные заболевания острого или хронического типа;
- рак или доброкачественные новообразования во внутренних органах;
- заболевания аутоиммунного типа, при течении которых образуются антитела к собственным клеткам организма пациента;
- туберкулез;
- малярия;
- склеродермия;
- герпес;
- рассеянный склероз;
- артрит.
Все перечисленные заболевания являются причиной возникновения сбоев в иммунной системе человека, в результате чего иммуноглобулины начинают вырабатываться с превышением нормы, что и становится помехой для постановки точного диагноза и подтверждения наличия вируса гепатита С в организме пациента.
После соприкосновения с источником инфекции организм человека может успешно подавить воспаление, но антитела, при проведении ИФА, все еще обнаруживались в крови, что стало причиной ложноположительного результата теста.
Довольно часто такой результат тестирования регистрируется у беременных женщин, поэтому без повторного анализа, подтверждение заболевания у такого пациента, не проводится.
Причиной отклонений от нормы становится изменения в организме женщины, которая ждет ребенка. В этот период у нее происходит перестройка внутренних органов, что выражается в следующих процессах:
- изменяется гормональный фон;
- в крови формируются специфические белки, вследствие чего меняется ее состав;
- уровень цитокинов увеличивается.
Помимо перечисленных факторов, влияющих на итоги иммуноферментного анализа, нужно отметить ошибки медицинского персонала, приводящие к обнаружению ложноположительных выводов тестирования:
- недостаточная квалификация персонала, проводящего забор биологического материала;
- сбои в функционировании лабораторного оборудования;
- подмена проб по халатности;
- ненадлежащее хранение биологического материала (нарушение температурного режима).
При проведении иммуноферментного анализа следует учитывать, что пациент мог недавно получить прививку против гриппа, гепатита или столбняка. Этот факт нужно обязательно довести до сведения лечащего врача или медицинского персонала в лаборатории, чтобы была назначена другая дата исследования.
Что делать, если результат положительный
Регистрация антител в биологическом материале пациента, указывающая на присутствие вируса гепатита С в организме, не всегда является окончательным диагнозом заболевания. Ложноположительные результаты иммуноферментного анализа нередки, и повторные тесты часто опровергают первоначальные выводы.
При положительных анализах нужно обратиться к гепатологу
Нужно понимать, что ИФА тест дает возможность выявить количественные и качественные изменения в биологическом материале человека и определить характер течения заболевания. Делать окончательное заключение об инфицировании гепатитом С можно только после комплексного изучения состояния пациента с применением других лабораторных и инструментальных исследований.
Если положительный результат выявлен надлежащим образом, человеку следует отправиться к специалистам: инфекционисту и гепатологу. Только профильный врач сможет определить, какие тесты необходимо пройти дополнительно до назначения курса терапии
По данным медицинской статистики, в мире инфицировано гепатитом С почти 4% населения, но этот показатель явно занижен, так как многие носители недуга не подозревают о своей проблеме. Поэтому проведение ИФА теста в качестве профилактической меры поможет выявить заболевание на начальной стадии и быстро справиться с болезнью.
Источник
Гепатит С отрицательно – запись, которую ожидает увидеть каждый человек, сдающий анализ на наличие вируса. Но коварство вирусного гепатита в том, что у пациентов с сильным иммунитетом после заражения может пройти длительное время, прежде чем анализ покажет наличие инфекции и появятся симптомы. Поэтому после получения отрицательного результата нельзя быть уверенным в полном здоровье, особенно если человек находится в группе риска по заражению.
Какие бывают анализы на гепатит
Основные анализы крови – качественная и количественная ПЦР, выявляющие наличие частиц вирусов, их концентрацию и генотип. Данное исследование наиболее информативно для отслеживания стадии болезни и эффективности противовирусной терапии, что позволяет корректировать схему лечения.
Иммуноферментное исследование, или ИФА, показывает количество иммуноглобулинов IgM и IgG, вырабатывающихся в организме после инфицирования. Часто при отрицательной полимеразной цепной реакции на гепатит в крови обнаруживаются антитела, свидетельствующие о выздоровлении или переходе инфекции в хроническую (вялотекущую) форму.
Что значит отрицательный результат анализа на гепатит С
Иммуно-ферментный метод выявляет наличие иммуноглобулинов к вирусным частицам. По их виду и количеству можно определить давность заражения и стадию, на которой заболевание сейчас. Присутствие антител класса М свидетельствует о недавнем заражении и острой форме патологии. Через полгода после инфицирования и при переходе гепатита в хроническую форму обнаруживаются иммуноглобулины класса G.
Если иммунитет человека когда-либо контактировал с вирусом, результат будет положительным. Отрицательный ИФА на гепатит С регистрируется при отсутствии болезни и если иммунная система никогда не сталкивался с вирусом. Ложноотрицательный результат ИФА получают на ранних стадиях гепатита, пока иммуноглобулины не успели выработаться. Это период называют диагностическим (серологическим) окном и он длится не более 6 месяцев.
Исследование HCV RNA, или РНК вируса гепатита С, является высокоточным диагностическим методом. Полимеразная цепная реакция выявляет количество вирионов в 1 мл крови, а также их генотип. Эти данные очень важны, так как позволяют подобрать наиболее подходящие противовирусные препараты.
В расшифровке анализов крови на гепатит при отрицательном итоге будут указаны следующие данные: «не найдено» или «не обнаружено». Даже незначительное присутствие вирусных частиц – подтверждение заражения.
Отрицательный качественный ПЦР на гепатит С не всегда свидетельствует об отсутствии патологии. Иногда исследование показывает ложноотрицательный результат, если:
- анализ проводился в первые дни после заражения;
- были совершены ошибки при заборе и хранении биоматериала;
- пациент проходил длительное лечение уколами Гепарина.
Чтобы исключить инфекцию, проводится количественный подсчет вирусов в крови (вирусная нагрузка, или виремия).
Если анализ ПЦР на гепатит С отрицательный, то с вероятностью в 99% можно утверждать, что заболевание отсутствует. Человеку, не входящему в группу риска заражения, не стоит беспокоиться. Но если существует вероятность инфицирования, необходимо пройти более тщательное обследование через несколько недель.
Что делать с полученными данными
Отрицательный анализ на РНК вируса гепатита и вирусную нагрузку у человека, не имеющего симптомов поражения печени, не увлекающегося наркотическими веществами, не ведущего беспорядочной половой жизни, является нормой. Нет необходимости проводить повторное исследование.
Но если существует вероятность заражения, человек близко контактировал с носителем инфекции, присутствуют признаки заболевания или обнаружены антитела, требуется повторное обследование через две недели, месяц и через полгода.
Расшифровка анализов должна проводиться квалифицированным специалистом – гепатологом или инфекционистом. При этом важно учитывать референсные значения лаборатории, в которой проводилось исследование. Все диагностические центры используют различные реагенты, оборудование и анализаторы, что может сказаться на интерпретации результатов. Врач, расшифровывающий полученные данные, должен в первую очередь руководствоваться референсными значениями лаборатории, и только потом сравнивать их с общепринятыми стандартами.
Почему ИФА положительный, а ПЦР отрицательный
Человек начинает паниковать, если ПЦР отрицательный, но есть антитела к гепатиту С. Но выявление иммуноглобулинов в плазме крови не повод отчаиваться. Наличие антител часто показатель того, что иммунитет человека когда-либо сталкивался с вирусом, но смог его побороть, болезнь не развилась или прошла в легкой форме. Даже если инфекция не распространилась, вырабатывается иммунная память. Она проявляется в виде постоянной циркуляции в крови антител, защищающих организм от заражения той же инфекцией. Иммуноглобулины могут сохраняться до 8-10 лет после болезни.
У переболевшего человека при отрицательном ПЦР на гепатит С обнаруживают антитела класса G, свидетельствующие о ранее перенесенной инфекции. Они могут годами присутствовать в организме. Если после трех последовательных ПЦР-исследований РНК не были обнаружены, врачи делают запись: «здоров, постинфекционный иммунитет». После выздоровления важно обследоваться дважды в год, чтобы своевременно отследить, если болезнь снова начнет развиваться.
Если обнаружены антитела класса М, но ПЦР отрицательный, это может свидетельствовать о раннем этапе развития болезни (первые 4-6 недель) и низкой вирусной нагрузке. Чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз, необходимо пройти повторное обследование. Если и вторая сдача анализа не выявила РНК вирусов, пациент считается здоровым.
Другие причины положительного ИФА при негативном ПЦР:
- Наличие аутоиммунных заболеваний.
- Присутствие других инфекций в организме.
- Недавно поставлена вакцина от гепатита Б, гриппа или столбняка.
- Наличие опухолевидных образований.
- Несоблюдение требований к взятию и транспортировке материала.
У беременных женщин часто регистрируются ложноположительные результаты из-за изменений гормонального фона, приводящими к модификации свойств крови и повышенному содержанию цитокинов.
Если у женщины во время беременности впервые обнаружены антитела, ей необходимо пройти всестороннее обследование. После рождения ребенка уровень иммуноглобулинов снижается или они полностью исчезают из крови женщины.
Источник