Гепатит с неопределенный результат что это

Специфические лабораторные методы применяются для диагностики гепатита С. К ним относятся иммунохимические, молекулярно-биологические анализы распознавания РНК-содержащего вируса (ВГС).

Интерпретация полученных данных зависит от:

1. Чувствительности применяемого метода. Это способ определения минимального компонента в величине разведения — антител, антигенов, нуклеиновых кислот. Выражается в количественных единицах — титрах.
2. Специфичности конкретного метода, способного выявить ВГС и антитела к нему

Цель работника лаборатории заключается в разграничении ложноположительных анализов на гепатит С и обнаружение вируса и антител к нему.

Анализы на гепатит С

Постановка диагноза HСV-инфекции происходит с помощью вирусологических (ПЦР) и серологических тестов (ИФА).Симптоматика острой фазы заболевания практически отсутствует, но уже в первые 7-14 дней после инфицирования диагностировать этот период гепатита С можно при обнаружении РНК методом ПЦР.

Применение ИФА в этой стадии не результативно, так как антитела вырабатываются через несколько недель. Изобретение тестовых систем 3 поколения способствует определению IgM в ранние сроки. Метод используют в лабораториях, но он не отвечает целям полной диагностики и оценки эффективности лечения.

ИФА

Метод иммуноферментного анализа разработан в трех вариантах: иммуноферментный, радиоиммунный, флюороиммунный. Востребован твердофазный ИФА. В постановке реакции он прост, высокочувствителен и относительно не дорог.

В зависимости от агента, который определяют – антиген или антитело, ИФА представляет разную ценность в диагностике. Верные результаты получаются при выявлении вирусных антигенов. Это также не является критерием постановки диагноза, так как часть антигенов расположена только в печеночной ткани и в крови обнаружить их не возможно. Поэтому нужно применять ИФА с определением сразу двух видов вирусных антигенов.

При обнаружении антител к ВГС нельзя говорить о присутствии вируса. Выявлены случаи когда анализ ИФА оказывается ложноположительным у обследуемого. Это указывает на иммунологическую память ранее присутствующего вируса в организме.

В проведенных исследованиях 957 проб с положительным ИФА потребовались другие арбитражные методы — ПЦР. В итоге у 36,6% РНК не обнаружилось, что свидетельствует о получении ложноположительного ответа.

Разработанные за последнее десятилетие новые тестовые системы способны одновременно определять антитела и антигены к вирусу гепатита С.

ПЦР

Этот метод детекции — полимеразная цепная реакция, создан для обнаружения вирусной РНК в образце сыворотки крови. Исследование заключается в многоцикловом процессе, который состоит из переходящих друг в друга этапов.

С помощью применения обратной транскриптазы (фермента) образуются молекулы ДНК вируса гепатита С. Итоговый результат — выделение вирусной рибонуклеиновой кислоты. Количественный вариант ПЦР используют для определения концентрации РНК. Исследуется количество копий в 1 мл. Выражается в логарифмических выражениях (log10).

Для прогнозирования эффективности лечения важным является выяснение принадлежности гепатита С к генотипу. В проведении генотипирования используют типоспецифические праймеры, в методах основанных на методике ПЦР.

Чувствительным методом определения нуклеиновых кислот считается «ПЦР в реальном времени». С помощью этого метода получают результат в ходе реакции даже при малом количестве нуклеиновых кислот. Полученные показатели с высокой точностью определяют уровень вирусной нагрузки.

Может ли анализ на гепатит С быть ошибочным?

На сегодня по-прежнему остается шанс получения ложноположительного результата на наличие анти-ВГС. При определенных обстоятельствах искаженные данные получаются при проведении ИФА и ПЦР.

Доля ошибочных ложноположительных результатов составляет 10-20%.

Для уточнения нахождения вируса в крови обследуемого человека применяют метод обнаружения РНК совместно с другими чувствительными методами. Однако получение отрицательного ответа не свидетельствует о ложноположительном ответе. В случаях полного выздоровления пациентов (10-15%) в крови возможно присутствие анти-ВГС.

Получение ложноположительного результата зависит от естественных причин:

• появление мутантных штаммов;
• репродукции антител и антигенов возбудителя.

Причины ложноположительного анализа

Ошибочный анализ регистрируется в виде ложнонегативных и ложнопозитивных результатов.

Ложноположительный ответ получается при:

• смешении исследуемого образца с предыдущим через лабораторное оборудование или аэрозоли;
• соединение между пробами при работе с реакционной смесью.

Ложноотрицательные ответы определения РНК получаются при:

• нарушениях правил перевозки клинических образцов;
• несоблюдении теплового режима образцов крови;
• распад РНК при подготовке к пробе;
• поэтапное прохождение ПЦР нарушает гепарин и высокий уровень криоглобулинов;
• присутствие в сыворотке белковых, химических субстанций.

Распространенные причины ошибок анализов связаны с:

• иммунодефицитными состояниями;
• онкологией;
• аутоиммунными заболеваниями (синдром Рейно, полинейропатия, узелковый периартериит и другие);
• поражениями системы крови (тромбоцитопения, гемолитическая анемия);
• глистными инвазиями;
• сифилисом.

Человеческий фактор

Ошибка в анализе возможна с учетом действия работников, участвующих в процессе, с процедурного кабинета и до клинической лаборатории.

Человеческий фактор возможен при:

• нарушении нумерации пробирок в момент забора крови;
• указании ошибочного ответа;
• неправильных действиях лаборанта в ходе подготовки образца;
• проведении пробы в условиях повышенной комнатной температуры;
• неопытности молодого специалиста;
• изготовлении некачественных диагностических препаратов.

Моментом, который способен искажать данные исследований является алкоголь. Это своеобразный антидепрессант, который воздействует на диагностику гепатита С. У пьющих людей с хронической формой выявляться HCV РНК при отсутствии антител и наоборот.

Ложноположительный результат у беременных

Установленный гепатит С ложноположительный у беременной женщины может быть связан с физиологическими изменениями происходящими в организме в период вынашивания плода:

• выработку характерных гестационному периоду белков;
• полную перестройку гормональной системы;
• повышение концентрации противовоспалительных цитокининов;
• изменение биохимических показателей;
• присоединение инфекций бактериального и вирусного генеза.

Инфекционные заболевания

Инфекционные заболевания протекают с выделением антител (защитные факторы крови) в ответ на антигены (болезнетворные возбудители). Работа иммунитета человека заключается в выработке иммуноглобулинов в ответ на проникновение чужеродных агентов.

Одновременное выделение иммуноглобулинов при инфекционном процессе в сочетании с гепатитом С искажает результаты анализов ИФА, что ведет к возрастанию количества ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

Инфекции, которые приводят к ошибке:

• токсоплазмоз;
• цитомегаловирус;
• передающиеся половым путем (уреаплазма, микоплазма, трихомоноз).

Лабораторная диагностика гепатита С при коинфекции с ВИЧ затруднена. Ложноотрицательный ИФА по выявлению анти-ВГС связан с формированием иммунодефицита у человека. Поэтому всегда проводится исследование РНК методом ПЦР.

Как избежать ложноположительного результата?

Ошибочный диагноз гепатита сводят к минимуму благодаря:

• качественному обучению лабораторных работников и прохождению курсов повышения квалификации;
• проведению этапов ПЦР в изолированных зонах;
• применению автоматических пипеток для каждого этапа реакции;
• проведение дополнительных анализов для уточнения.

Исключить ложноположительный результат возможно при проведении дополнительных (supplemental) тестов. Это препараты, созданные специально для определения антител к конкретным белкам, кодированных разными зонами вирусной РНК.

Внедрение новых методик лабораторного исследования вирусного гепатита С обеспечивает раннюю диагностику заболевания и сводит к минимуму появление ложных результатов. Это мера способствует своевременно начатому лечению, которое заканчивается выздоровлением.

( 1 оценка, среднее 5 из 5 )

Иногда у человека в анализе крови обнаруживается положительный результат на гепатит С. Это заболевание развивается бессимптомно, на первых стадиях никак не беспокоит пациента.

Такой анализ сдается при появлении тяжести в правом подреберье, желтушности кожи и склер, горечи во рту. Это исследование выполняют перед операциями, при беременности или желании сдать кровь в качестве донора.

Анализы на гепатит С

Для выявления гепатита С используют несколько лабораторных методов. К ним относятся:

1. Анти–HCV.
   Это скрининговое иммуноферментное исследование (ИФА), которое выявляет антитела к этому вирусу. Данный анализ доступен, проводится во всех медицинских лабораториях.
2. РИБА.
   Рекомбинантный иммуноблотинг. Применяется в случае положительного ИФА для подтверждения его специфичности. Это развернутое исследование, направленное на идентификацию обнаруженных антител.
3. ПЦР.
   Полимеразная цепная реакция относится к наиболее информативным методам диагностики. С помощью такого обследования определяют наличие вируса, количество возбудителя. По его результатам судят, насколько эффективным было лечение. Динамика вирусной нагрузки позволяет судить об активности процесса.
4. Генотипирование.
   Относится к разновидности полимеразной цепной реакции. Проводится при выявлении положительных результатов. После определения генотипа вируса назначается соответствующее лечение.

Рекомендуется сдавать кровь на маркеры гепатитов В и С каждые 6 месяцев медицинским работникам, военнослужащим и сотрудникам полиции.

Также обязательно такое исследование для пациентов, перенесших трансплантацию органов или находящихся на гемодиализе.

Результаты анализов

У человека может быть выявлен положительный, ложноположительный или отрицательный результат ИФА. Это свидетельствует о наличии или отсутствии в крови антител к вирусу гепатита С.

РИБА, генотипирование, ПЦР проводятся уже для верификации положительного диагноза.

Выявлен положительный гепатит С: что это значит?

Если во время первичного исследования ИФА выявляется положительный анализ на гепатит С, имеет значение вид обнаруженных антител (Ig). Эти вещества появляются при попадании вируса в организм человека. Их обнаружение определяет стадию и степень заболевания. Выделяют 2 вида иммуноглобулинов:

• Ig М.
  Обнаружение таких белков указывает на острую фазу болезни, недавнее заражение и сильное поражение гепатоцитов. При проведении ИФА в динамике наблюдается нарастание титра антител. У пациента проявляется характерная клиническая симптоматика: желтуха, тяжесть в правом подреберье, немотивированная усталость, изменение цвета мочи и фекалий.
• Ig G.
  Свидетельствуют о хроническом, вялотекущем или латентном течении гепатита. Никаких проявлений заболевания в этот период не наблюдается. Человек чувствует себя хорошо. Такой положительный результат выявляется при подготовке больных к хирургическим вмешательствам, скрининге беременных или при случайном обследовании.

Если антитела к гепатиту с положительные, это означает, что в организме есть специфические антигены. Следовательно, у больного уже присутствовал этот вирус.

Отрицательный

Получение такого ответа свидетельствует о том, что антитела или вирус гепатит С не обнаружен либо концентрация вируса ниже допустимого предела чувствительности, определяемого данным методом.

Отрицательный результат бывает получен при генотипировании. В этом случае на бланке анализа указывается «не типируется». Такое встречается редко и означает, что генотип вируса не может быть определен или не соответствует ни одному из имеющихся. Врачи рекомендуют такое исследование переделать.

Ложноположительный

Причиной ложноположительных результатов являются:

• Онкологические процессы в организме.
• Беременность или период лактации у женщин.
• Аутоиммунные заболевания соединительной ткани.
• Туберкулез.

Нельзя сдавать кровь во время острых респираторных вирусных инфекций, сразу после еды. Это тоже приводит к получению ложных положительных обследований.

Причины ошибочных анализов

Иногда бывает так, что при взятии крови на гепатит C обнаруживается положительный результат. При последующей пересдаче, исследовании другими способами выясняется, что первый анализ выполнен ошибочно.

Такое бывает в случае:

• Не соблюдении условий транспортировки или хранения образцов крови.
• В результате использования просроченных или несертифицированных реактивов.

• При случайной ошибке или халатности лаборанта.
• При воздействии горячей или холодной температуры.

Для опровержения или подтверждения полученных положительных результатов, необходимо пересдать их, желательно в другой лаборатории. Параллельно с этим рекомендуется выполнить биохимический анализ крови УЗИ или МРТ брюшной полости

Анти-HCV положительный, а ПЦР отрицательный

Этот результат обследования свидетельствует о том, что у пациента обнаружены антитела к вирусу, но при повторной сдаче крови с помощью полимеразной цепной реакции этот вирус не определяется.

Такое встречается в нескольких случаях:

• При неправильном заборе крови либо некачественном выполнения самого анализа.
• Если такое выявлено при беременности, то назначается повторное ПЦР. Если она положительна, то диагноз гепатита C подтверждается.
• Подобное наблюдается у больных, перенесших ранее это заболевания. Активная вирусная нагрузка отсутствует, но циркулируют уже имеющиеся антитела.

Что делать при положительном анализе?

Если у пациента выявлен положительный результат, то для многих это является шокирующим известием. В такой ситуации рекомендуется повторно пересдать ПЦР, ИФА. Затем необходимо сделать следующее:

• Обратиться к гепатологу, терапевту или инфекционисту.
• Сдать клинический анализ крови и мочи, биохимию ( трансаминазы, белок, билирубин прямой, непрямой, гамма – глутамилтрансфераза).
• Сделать УЗИ печени, МРТ брюшной полости.
• Выполнить фиброэластометрию печени для определения степени фиброза.
• Обязательно сделать прививку от гепатита В.

Диагноз гепатита C совсем не является приговором. Он успешно лечится. В зависимости от генотипа применяют 24-х или 48-и недельный курс терапии. После проведенного лечения ИФА всегда положительное, а при проведении ПЦР будет наблюдаться снижение или полное отсутствие вирусов в крови.