Гепатит в количественный 10 2
Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.
При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.
Виды ПЦР на вирусный гепатит В
Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.
Качественный ПЦР и его трактовка
Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:
- отрицательный результат — вируса нет;
- положительный результат — вирус обнаружен.
Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.
В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.
Количественный ПЦР
Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:
- Перед назначением лечения.
- Для оценки эффективности терапии.
- Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
- Для определения стадии, на которой находится заболевание.
Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:
1 МЕ/мл = 5 копий/мл
Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.
Трактовка количественного ПЦР
При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:
- < 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
- от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
- 10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
- 10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.
Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:
- Хронический гепатит В диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
- Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
- Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
- Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
- Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.
Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:
- ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
- ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
- ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.
Подготовка к обследованию
Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:
- Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
- Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
- Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.
Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.
Подводя итоги
На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.
Источник
Гепатит В – распространённая вирусная инфекция, передающаяся от человека к человеку. Гепатит разрушает клетки печени, что может стать причиной формирования цирроза. Присутствие в крови гепатита делает носителя потенциально опасным. Данное заболевание передаётся от матери к ребёнку, распространяется половым путём.
Лабораторные исследования крови больного вирусом гепатита имеют следующие цели: подтверждение диагноза, выявление прогресса в лечении, контроль состояния пациента, определение формы болезни.
Количественный анализ на гепатит Б проводится для определения уровня антигенов и подбора правильного курса лечения. Он позволяет диагностировать заболевание во время инкубационного периода и выявить носителя вируса.
Что такое количественный анализ на гепатит Б?
Проникая в тело человека, антигены начинают размножение на поверхности печени и попадают в кровь. Количественный анализ – современная разработка в области генной инженерии для точной диагностики инфекции в печени. С его помощью устанавливается количество ДНК гепатита Б в крови пациента. Присутствие невысокого содержания вируса допустимо, но требует контроля. Превышение этого показателя свидетельствует о необходимости врачебного вмешательства.
У ряда заражённых вирус гепатита Б не сопровождается симптомами, поэтому количественные анализы назначаются:
- женщинам во время беременности;
- работникам медицинской сферы;
- ВИЧ-инфицированным;
- при патологиях печени;
- перед переливанием крови.
Если в крови обнаружен вирус, состояние пациента необходимо отслеживать. Через установленный временной промежуток потребуется вторичная сдача количественного анализа. Контроль необходим при всех формах заболевания, включая бессимптомный латентный гепатит.
Существуют различные вариации количественного анализа: полимеразная цепная реакция, биохимия, ИФА.
Следить за уровнем инфекции в организме необходимо людям с заболеваниями печени – цирроз, рак. Причиной развития этих патологий может быть долгое время прогрессировавший вирус гепатита В.
Показания к исследованию
Количественный анализ назначается для того, чтобы определить наличие вируса гепатита. У пациентов с диагностированным гепатитом данное исследование выявляет степень поражения организма инфекцией. При хронической форме количественный анализ определяет стадию заболевания.
Проведение количественного анализа назначают людям, находящимся в группе риска, при положительных показателях предыдущих исследований. Поскольку инфекция передаётся от женщины к плоду, во время беременности назначается проведение этой процедуры. Заражение возможно при проведении операций, если использовавшиеся инструменты были нестерильны.
Подготовка и проведение количественного анализа
Подготовка пациента к сдаче количественного анализа влияет на результаты исследования. Необходимо воздержаться от употребления спиртных напитков за день до сдачи крови. Проводить забор разрешается не ранее, чем через четыре часа после еды. Следует отказаться от курения.
Перед забором биоматериала врач обязан уточнить у пациента, является ли он донором крови, узнать о перенесённых операциях, выяснить наличие контактов с заражёнными людьми.
Данную процедуру рекомендуется проводить после проведения первичного исследования. Забор крови происходит из вены. Собранный материал хранится в пробирке. Произвести изучение биоматериала требуется за 24 часа после забора.
Количественный анализ на полимеразную цепную реакцию выявляет вирус на инкубационной стадии спустя две недели после инфицирования.
Расшифровка количественного анализа на гепатит Б
Расшифровкой показателей занимается врач. Мера измерения в заключении – копии вируса на миллилитр крови. В норме этот показатель показывает отметку <750. Лечение назначается, если биохимическое исследование выявило присутствие вируса. Если показатель <105, дальнейшие меры определяются в зависимости от результатов проведения биопсии.
Показатель >105 свидетельствует о необходимости проведения медикаментозного лечения. Отказ от приёма препаратов и проведения терапии может стать причиной развития хронического гепатита.
Если в организме обнаружено >1*108 , данное заключение свидетельствует о том, что существует высокая вероятность перехода заболевания в хроническую форму. Для предотвращения развития болезни требуется многоплановое продолжительное лечение.
На результат исследования влияет проведённая ранее вакцинация или перенесённая острая форма гепатита Б.
Курс препаратов для лечения подбирается врачом-инфекционистом. Исходя из данных количественного анализа, он составляет терапевтический план. При назначении лекарств учитываются показатели биопсии. При низких значениях и незначительных отклонениях от нормы препараты назначаются гепатологом.
В ряде случаев одновременно с гепатитом Б протекают другие типы болезней печени. Это осложняет терапию и увеличивает вероятность возможных последствий. Опасное течение заболевание принимает в редких случаях и при отсутствии многопланового лечения.
Возможны ли ошибки при количественном анализе?
Заключение количественного анализа, в котором показатели в норме, не гарантирует отсутствия в крови ДНК вируса. Человек может являться носителем при малом количестве вируса.
Ошибка исследований возможна при несоблюдении подготовительных мер перед забором биоматериала. Также результаты исследований могут быть ложными из-за неправильных условий хранения пробирок с собранным биоматериалом.
Латентный гепатит, не имеющий признаков и не сказывающийся на самочувствии носителя, способен привести к проблемам с печенью и стать причиной развития цирроза. Поэтому людям, входящим в группу риска и имевшим контакты с больными, необходимо отслеживать показатели крови для предотвращения заболеваний печени.
Латентная форма заболевания потребует наблюдения у врача. Для профилактики гепатита рекомендуется провести вакцинацию и соблюдать правила личной гигиены.
Источник
[09-009]
HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]
2890 руб.
Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.
ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.
Синонимы русские
Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.
Синонимы английские
Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Единицы измерения
МЕ/мл (международная единица на миллилитр).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.
Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рождённые от матерей с ВГВ.
Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.
Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.
Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.
Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке (5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови, присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).
Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.
Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.
Для чего используется исследование?
- Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
- Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
- Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
- Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
- Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.
Когда назначается исследование?
- При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
- При остром и хроническом вирусном гепатите В.
- При микст-гепатитах.
- До и во время противовирусной терапии.
Что означают результаты?
Референсные значения: не обнаружено
- «Не обнаружено» – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл);
- от 75 до 1,2*10^5 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, низкая виремия;
- от 1,2*10^5 до 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, средняя виремия;
- более 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, высокая виремия;
- > 1*10^8 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.
Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.
Важные замечания
- Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
- Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.
Также рекомендуется
- HBsAg
- anti-HBc, IgM
- anti-HBc, антитела
- anti-HBe, антитела
- anti-HBs, антитела
- HBеAg
- HBV, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- anti-HDV, антитела
- Anti-HCV, антитела, ИФА
- Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
- Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
- Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
- Фосфатаза щелочная общая
- Альбумин в сыворотке
- Билирубин общий
- Холестерол общий
- Тромбиновое время
- Фибриноген
Кто назначает исследование?
Инфекционист, гепатолог.
Литература
- Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 601-654.
- Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
- Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
- Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.
Источник
