Ифа на гепатит а достоверный анализ
Гепатит А коварен тем, что заразившийся представляет угрозу для окружающих последние пять дней инкубационного периода, когда заболевание протекает в скрытой форме. Люди с хорошим иммунитетом переносят болезнь Боткина легко, без желтушности, при этом так же активно высевают вирус, по нескольку миллиардов в сутки, для заражения хватит 100 особей.
По симптомам заболевания печени схожи с проявлениями ОРВИ, поэтому присутствие в крови патогена заподозрить всё-таки можно, особенно если был контакт с выявленным больным, или человек находился в зоне возможного поражения. Вирус гепатита А живуч, длительное время живет на поверхностях, к которым прикасался больной, в воде он спокойно существует до 10 месяцев.
Показатели крови меняются, если печень поражена. Выявить присутствие патогена помогает анализ на гепатит А. По результатам несложно установить факт заражения. Специальные маркеры определяют в крови вирусы гепатита А, антигены к заболеванию, их концентрацию. Исследования проводятся в диагностических и профилактических целях, в первую очередь обследуют людей группы риска.
Какие анализы крови сдаются на гепатит А?
На нарушения работы печени указывают отклонения некоторых показателей от нормы общего анализа крови, когда кровь берут из пальца. При воспалительном процессе любой этиологии изменяется скорость осаждения эритроцитов.
Развернутую картину состояния здоровья позволяют получить биохимические исследования проб, взятых из вены. Например, билирубин: по его концентрации судят о присутствии патологических изменений в паренхиме. На заболевание указывают сразу несколько показателей. Но установить факт заражения по биохимическому анализу нельзя.
Вирус гепатита А выявляется по ферментам, которые организм начинает выделять, когда патоген попадает в гепатоциты. С большой точностью определяют гепатит А анализы:
- Anti-HAV-IgG на наличие анител класса IgG, они появляются в крови когда организм начинает противостоять вирусу гепатита А и после прививок, когда вырабатывается иммунитет;
- Anti-HAV-IgM выявляет антитела класса IgM, их количество возрастает в период заболевания, резко снижается при выздоровлении;
- тест на РНК-вирус, этот генетический анализ проводится методом ПЦР (полимеразная цепная реакция), исследуется сыворотка крови.
Кому необходимо сдавать анализы?
Существует утвержденный Минздравом список лиц, которые регулярно проходят обследования, это:
- сотрудники медицинских учреждений;
- кадровый состав и учащиеся образовательных учреждений (детских садов, школ, специализированных учебных заведений);
- специалисты, контактирующие с неорганизованными детьми в группах их дневного пребывания;
- работники интернатов;
- люди, занятые в сфере торговли, общепита, переработки продуктов питания;
- военнослужащие и гражданские лица, служащие в исправительных учреждениях.
Кровь на гепатит А сдают:
- беженцы;
- лица, находящиеся в очаге возможного заражения (когда выявляются случаи заболевания, обследуют родственников заразившегося, соседей, коллег по работе или учебе);
- люди, устраивающиеся на работу в детские учреждения, школы, другие предприятия, где требуется санитарная книжка;
- сотрудники, выезжающие в командировки в страны с высоким уровнем заболеваемости гепатитом;
- туристы, посещающие страны Ближнего востока, Африки;
- люди, проживающие в районах, где канализационные стоки попали в питьевой водоем, вышла из строя система хозпитьевого водоснабжения.
В группе риска находятся и другие категории граждан, которым рекомендуется анализ крови на гепатит:
- люди, пренебрегающие правилами личной гигиены;
- любители орального секса, гомосексуалисты;
- асоциальные элементы, проживающие в антисанитарных условиях;
- жильцы общежитий, сотрудники учреждений, контактирующие с большим числом посетителей.
ИФА на гепатит А
От болезни Боткина нет лекарственных средств, больному снимают интоксикацию, поддерживают защитные функции организма. Иммунитет самостоятельно вырабатывает антитела или они вводятся в процессе вакцинации. Они бывают двух типов, сначала появляются антивирусы IgM, затем IgG. Определяются они иммуноферментным анализом Anti-HAV.
Как оцениваются результаты исследований:
- при отсутствии возбудителя в крови не обнаруживаются АНТИ-HAV IgM, АНТИ-HAV IgG;
- когда вырабатывается иммунитет, у человека отрицательный результат теста АНТИ-HAV IgM, положительный на присутствие IgG-антител;
- если в крови одновременно есть антигены IgM и IgG, организм заражен вирусом гепатита А.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Качественную и количественную оценку вируса гепатита А позволяет получить анализ методом ПЦР. Ген в специальной питательной среде с содержанием особых ферментов заставляют искусственно размножаться, чтобы затем определить генотип вируса: 1а, 1b или 1с. Существует два типа анализа ПЦР:
- качественный определяет наличие штамма в крови, положительный ПЦР говорит о заболевании,
- отрицательный ПЦР у здоровых людей;
- количественный анализ позволяет определить концентрацию вируса, этот показатель характеризует степень опасности инфицированного для окружающих.
Метод ПЦР выявляет заболевание на ранних стадия, когда нет внешних проявлений желтухи. Когда гепатит А протекает в латентной форме, вовремя выявить вирус гепатита А очень важно, распространение болезни происходит молниеносно, особенно в контактных группах. Изолировав больного, можно предотвратить эпидемию.
Общий (клинический) анализ крови
Результаты помогают в постановке предварительного анализа, у больного снижается уровень гемоглобина, меняется показатель свертываемости – уровень тромбоцитов падает, количество эритроцитов увеличивается, лейкоциты, наоборот, быстро разрушаются.
Каких-то характерных изменений при гепатите А в анализе не выявляется. Можно судить только об интоксикации, ухудшении состояния здоровья зараженного. Такая клиническая картина характерна для многих заболеваний.
Отклонения от норм являются поводом проводить дальнейшие исследования. Какие показатели общего анализа крови при гепатите А считаются нормальными, указано в таблице.
Результаты ОАК при гепатите А
Показатель (концентрация стандартная, указанная в бланках) | Возрастная группа: дети до 3 лет | Возрастная группа: дети от 3 до 12 лет | Возрастная группа: лица, старше 12 лет |
уровень лейкоцитов | 6–17 | 5–11 | 4–9,5 |
количество лимфоцитов | 2–9,5 | 2–9,5 | 1–5 |
концентрация эритроцитов | 1–12 | 1–12 | 1–15 |
уровень тромбоцитов | 100–450 | 100–450 | 180–400 |
СОЭ (скорость осаждения эритроцитов) | 4–8 | 4–12 | 2–20 |
Биохимический анализ крови
Венозная кровь исследуется после проведения общего анализа крови или одновременно с ним. При попадании вируса меняется белковый состав крови, концентрация микроэлементов. По биохимии можно судить о патологических процессах в печени, есть показатели, отклонение от нормы которых характерны только для пораженной паренхимы.
На что обращают внимание в анализе на гепатит А (расшифровка показателей):
- Концентрация билирубина (нормой считается 20,5 мкмоль/л), он утилизируется здоровыми клетками печени. Если орган работает не в полной мере, вещество накапливается в крови, в результате у человека желтеют склеры, глазные яблоки, кожа.
- Показатель АЛТ, (у здорового человека он в пределах 500 МЕ/л), при заболевании печени концентрация достигает 3000 МЕ/л, чем больше степень поражения паренхимы, тем выше концентрация белка АЛТ или АЛаТ.
- Уровень АСТ (норма 34-41 МЕ/л), когда этот белок хуже выводится из организма, концентрация его в крови возрастает. Одной из причин плохой утилизации является инфекционное поражение печени.
- Общий белок (у взрослых людей его должно быть не меньше 65 г/л, не больше 84 г/л), отклонение от нормы в любую сторону говорят о патологии, при воспалительных процессах в организме, в том числе и в печени, норма общего белка превышена.
- Альбумин (нормой считается концентрация в диапазоне 35–50 г/л), он ферментируется печенью, если паренхима поражена, уровень альбумина падает. Этот показатель очень характерен для гепатита А, так как вирус гепатита А заселяется в гепатоциты, уничтожает их. Некротические клетки в дальнейшем вызывают воспаление. По снижению альбумина можно заподозрить заболевание на ранних стадиях и при латентной форме течения.
Как сдавать анализы на гепатиты?
Точность исследований напрямую зависит от подготовки пациента к взятию проб. Речь идет не только сдаче анализа на голодный желудок. За сутки до забора крови людям с подозрениями на гепатит А не рекомендуется:
- употреблять жирную пищу;
- есть консервации и салаты с большим содержанием уксуса;
- исключить специи, особенно с желчегонными свойствами;
- отказаться от употребления спитросодержащих напитков любой крепости;
- снизить по минимума прием медикаментов, исключить БАДы, витаминные комплексы, на лекарства от диабета, гипертонии, сердечных заболеваний запрет не распространяется.
За 8 часов до анализов необходимо полностью отказаться от еды. При выполнении этих правил пациентом результаты исследований будут отражать реальную картину состояния его здоровья.
Сколько делается анализ на гепатит А?
Существуют специальные правила забора крови, ее транспортировки в лабораторию, в них же указывается, сколько времени делают анализ на гепатит А. Для проведения общего анализа крови требуется до 2 рабочих дня, превышение этого срока считается нарушением. Обычно результаты готовы уже к вечеру. Для проведения биохимического анализа отводится неделя.
Методы, требующие предварительной подготовки биологических жидкостей, оттягивают процесс получения результатов, сроки их получения могут затягиваться 10 дней.
Существуют методы экспресс-тестирования, когда забор крови производится для определения одного из показателей.
Источник
Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.
Что такое ИФА?
Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.
Вернуться к оглавлению
Плюсы исследования
ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.
Вернуться к оглавлению
Когда нужен анализ?
Для определения вида вируса необходимо сдать ИФА.
ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:
- Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
- Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
- Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
- Немотивированная слабость.
- Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
- Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.
Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.
Вернуться к оглавлению
Подготовка к проведению
Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.
Вернуться к оглавлению
Методология проведения
Метод ИФА.
Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.
Вернуться к оглавлению
Расшифровка показателей
Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.
Источник
Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.
Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.
Что такое ИФА?
Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.
Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.
Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.
ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.
В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.
Показания к ИФА на гепатит С
Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:
- острых и хронических заболеваниях печени;
- желтухе неясного генеза;
- обследовании перед хирургическими вмешательствами;
- стандартном обследовании доноров крови;
- постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;
- прохождении гемодиализа;
- профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;
- незащищенном сомнительном половом контакте;
- рождении детей от инфицированных матерей.
В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.
Как проводится анализ?
За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.
Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).
Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:
- На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
- На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
- Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.
Виды ИФА
Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:
- По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
a) конкурентный;
b) неконкурентный;
- По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
a) гомогенные;
b) гетерогенные;
- 3) По принципу определения исследуемого вещества:
a) прямой;
b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.
Прямой метод ИФА
При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.
- В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
- Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
- Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.
Непрямой метод
При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.
- В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
- В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
- В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
- Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.
Расшифровка результатов
Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.
При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).
Положительный
При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.
Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.
Отрицательный
Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.
Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.
Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.
Ложноположительный
ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:
- выполненной накануне вакцинации;
- при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;
- опухолевом процессе;
- инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).
Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.
ИФА положительный, а ПЦР отрицательный: что это значит?
Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».
Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.
Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.
Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.
Источник