Ядерный антиген вируса гепатита в

Гепатит В (Б) был и остается одной из важнейших проблем мирового здравоохранения. По примерным оценкам заболеванием страдает около 350 миллионов человек.

Оно выражается в массовой гибели гепатоцитов (клеток печени) на фоне воспалительного процесса и последующим развитием печеночной недостаточности.

Заражение происходит вследствие контакта с биологическими жидкостями инфицированного человека — кровью, слюной, мочой, желчью и т.д. При проникновении вируса организм синтезирует специальные белковые соединения — антитела к гепатиту В (Б, B).

Исследование антител (маркеров) гепатита В (Б, B) позволяет не только установить диагноз, но и понять степень сложности заболевания, оценить эффективность его лечения.

Что такое маркеры гепатита В

Для борьбы с вирусами в ответ на антигены иммунная система продуцирует антитела, индивидуальные для каждого заболевания. Они представляют собой особые белки, действие которых направлено на защиту организма от возбудителя заболевания.

Если в крови обнаружены антитела гепатита В (Б), то в зависимости от их типа это может свидетельствовать:

1. о болезни пациента на начальных стадиях (до проявления первых внешних признаков);
2. о болезни на стадии затухания;
3. о хроническом течении гепатита В;
4. о поражении печени вследствие заболевания;
5. о сформировавшемся после выздоровления иммунитете;
6. о здоровом носительстве (пациент сам не болен, но заразен).

Антитела в крови не всегда говорят о наличии гепатита В или о заболевании, вылеченном ранее. Их продуцирование также является следствием сделанной прививки.

Кроме того, выявление маркеров гепатита В может быть связано с:

1. нарушениями работы иммунной системы (в том числе прогрессированием аутоиммунных заболеваний);
2. злокачественными опухолями в организме;
3. другими инфекционными заболеваниями.

Такие результаты называются ложноположительными, так как присутствие антител не сопровождается развитием гепатита В.

Антитела вырабатываются к вирусу и его элементам (антигенам). Исходя из этого выделяют:

• поверхностные антитела anti-HBs (антитела к антигенам HBs, формирующим вирусную оболочку гепатита В);
• ядерные антитела anti-HBc (антитела к антигену HBc, находящемуся в ядерном белке вируса гепатита В).

Дополнительную информацию об анализах на гепатит В можно узнать из этой статьи .

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg, anti-HBs)

Поверхностный антиген HBsAg входит в состав вируса гепатита В (Б, B) в качестве компонента капсида (оболочки). Отличается поразительной стойкостью.

Сохраняет свои свойства даже в кислой и щелочной средах, переносит обработку фенолом и формалином, заморозку и кипячение. Именно он обеспечивает проникновение HBV в клетки печени и его дальнейшее продуцирование.

Антиген поступает в кровоток еще до первых проявлений заболевания и обнаруживается посредством анализа спустя 2-5 недель после заражения. Антитела к поверхностному антигену HBsAg вируса гепатита В носят название anti-HBs.

Они играют ведущую роль в формировании иммунитета HBV. Количественное исследование крови на антитела проводится с целью контроля формирования иммунитета после вакцинации. Антиген при этом в крови не регистрируется.

Ядерный антиген вируса гепатита В (HBcAg, anti-HBc)

Антиген HBcAg является составляющей ядерных белков. Обнаруживается при биопсии печеночной ткани, в крови в свободном виде не присутствует. Так как сама процедура исследования на этот антиген вируса гепатита В достаточно трудоемкая, то проводят ее редко.

Обнаруживаются следующие антитела anti-HBc:

• IgM;
• IgG.

В норме IgM в крови отсутствуют. Появляются при острой фазе заболевания. Циркулируют в крови от 2 до 5 месяцев. В дальнейшем IgM заменяют IgG, способные находится в крови в течение многих лет.

В крови обнаружены антитела: что это значит

Anti-HBs в крови отражает положительную динамику. Они появляются:

• при выздоровлении и формировании иммунитета у пациента (HBsAg при этом отсутствуют);
• обнаруживаются у выздоровевших пациентов, которые остаются носителями вируса (антиген гепатита В HBsAg не обнаруживается);
• регистрируются у некоторых людей, перенесших переливание крови или ее компонентов от носителя антител.

Если поверхностный антиген гепатита В (Б, B) при пробе крови положительный, то можно сделать вывод о:

• остром течении заболевания (постепенное повышение уровня в крови, также обнаруживаются HbcAg, Anti-HBc);
• хроническом течении (антиген s вируса гепатита В имеет стабильный высокий уровень более 6 месяцев, также присутствует HBcAg,Anti-HBc);
• здоровом носительстве (сочетается с Anti-HBc);
• у маленьких детей возможно обнаружение в крови антигенов матери.

Единовременное исчезновение антигена HBsAg и проявление антител anti-HBs является хорошим признаком гипатита В (Б, B). Их одновременное нахождение говорит о неблагоприятном прогнозе болезни.

Положительные ядерные антитела IgM к гепатиту В (Б, B)  обнаруживаются при поражении печени в желтушной и преджелтушной стадии. Пациент при этом крайне заразен для окружающих.

Наличие anti-HBc IgM в сочетании с HBsAg говорит об остром течении заболевания.

Исчезновение IgM говорит о затухании болезни и выздоровлении пациента.

Проявляющиеся затем IgG сохраняются длительный период после выздоровления. IgG — показатель, возникающий при развитии стойкого иммунитета к болезни или ее переходе в хроническую форму.

Таблица: расшифровка анализов на маркеры гепатита В (Б, B)

Что делать, если поверхностный антиген вируса гепатита В положительный

Поверхностный антиген вируса гепатита В (Б, B), обнаруженный в крови, не является поводом для паники. Прежде всего, исследования всегда проводятся комплексно.

Рассмотрение пробы только на один маркер не дает внятных и точных результатов.

Если диагноз подтверждается совокупностью показателей в крови пациента, то назначается соответствующая терапия.

Современная медицина способна вылечить человека достаточно быстро.

В 95-98 процентах случаев у взрослых болезнь проходит бесследно. У детей гепатит лечится сложнее, зачастую переходит в хроническую форму. Для предупреждения заболевания рекомендуется вакцинация.

Производство вакцины основано на новейших технологиях генной инженерии. Рекомбинантным продуцентом антигена гепатита В являются трансформированные дрожжевые штаммы hansenula polymorpha. Их использование позволяет не применять компоненты крови при создании вакцины и обеспечивает высокую безопасность.

Заключение

Гепатит В — опасное заболевание. При заражении взрослого человека оно редко переходит в хроническую стадию. Для выявления на ранних стадиях применяют исследования на маркеры. Они способны дать наиболее полную информацию о стадии развития болезни и состоянии пациента.

Безопасный секс, стерилизация медицинских и стоматологических инструментов, тщательная гигиена маникюрных и парикмахерских принадлежностей станут отличной профилактикой заражения. При повышенных рисках инфицирования рекомендуется применять вакцину.

Комплексное исследование при подтвержденном вирусном гепатите В (HBV). Анализ маркеров инфекции позволяет установить клиническую стадию заболевания, иммунологический статус обследуемого, а также оценить эффективность лечения. Включает в себя определение белков вируса (антигенов), основных классов специфических антител, а также обнаружение ДНК вируса в крови.

Венозную кровь.

• Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования.
• Не курить за 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит B (HBV) – инфекционное заболевание, которое является причиной серьёзных поражений печени. Зачастую гепатит B переходит в хроническую форму, его течение становится затяжным и провоцирует возникновение цирроза и рака печени.

Вирус гепатита B (Hepadnaviridae) содержит двухцепочечную ДНК, окруженную нуклеокапсидом размером 27 нм, в состав которого входит антиген HBcAg, и внешней оболочкой, содержащей антиген HBsAg. Этот антиген обнаруживается в крови за 6 недель до появления симптомов заболевания и может выявляться длительное время как при их наличии, так и в при их отсутствии (при хроническом гепатите и носительстве). На ранних стадиях заболевания присутствует у 90-95 % больных.

Особенностью вируса гепатита B является то, что он поступает непосредственно в кровь и циркулирует в ней на протяжении всего периода заболевания. У некоторых пациентов вирус в крови сохраняется всю жизнь. По этой причине источником заражения могут стать не только те, кто болен гепатитом в его острой форме, но также те, кто уже перенес данное заболевание, а также люди, у которых заболевание не проявляется, однако они являются носителями вируса.

Полное выздоровление регистрируется у 92-95 % больных острым гепатитом В, и лишь у 5-8 % из них отмечается переход заболевания в хроническую форму.

Гепатит B лечится исключительно в условиях стационара. Это заболевание в случае длительного течения является фактором риска развития первичной гепатоцеллюлярной карциномы (рак печени).

В жизнедеятельности вируса гепатита В различают две фазы: фазу репликации и фазу интеграции. В фазе репликации происходит воспроизведение (размножение) вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы синтезируется нуклеокапсид, содержащий ДНК вируса, антигены HBcAg, HBeAg, которые являются основной мишенью иммунной системы. Затем нуклеокапсид мигрирует из ядра в цитоплазму, где реплицируются белки внешней оболочки (HBsAg), и, таким образом, происходит сборка полного вириона. При этом избыток HBsAg, не использованный для сборки вируса, через межклеточное пространство попадает в кровь. Полная сборка (репликация) вируса заканчивается презентацией его растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на мембране гепатоцита, где происходит его «узнавание» иммуноцитами. Антиген HBcAg серологическими методами не определяется, потому что отсутствует в крови в свободном виде. Определяется наличие в крови антител (anti-HBc) к этому антигену, вырабатывающихся вследствие его высокой иммуногенности.

Маркерами фазы репликации вируса гепатита В являются:

• выявление в крови антигенов HBeAg и anti-HBc (Ig M).

У 7-12 % больных хроническим вирусным гепатитом В возможен спонтанный переход фазы репликации в нерепликативную фазу (при этом из крови исчезает HBeAg и появляются anti-HBe). Именно фаза репликации обусловливает тяжесть поражения печени и контагиозность больного.

В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве.

Вирусная ДНК может быть интегрирована не только в гепатоциты, но и в клетки поджелудочной железы, слюнных желез, лейкоциты, сперматозоиды, клетки почек.

Фаза интеграции сопровождается становлением клинико-морфологической ремиссии. В этой фазе в большинстве случаев формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к купированию активности процесса и носительству HBsAg. Интеграция делает вирус недосягаемым для иммунного контроля.

Серологические маркеры фазы интеграции:

• наличие в крови только HBsAg или в сочетании с anti-HBc (IgG);
• отсутствие в крови ДНК-вируса;
• сероконверсия HBeAg в anti-HBe (т.е. исчезновение из крови HBeAg и появление anti-HBe).

Пациенты, перенесшие инфекцию и имеющие антитела к вирусу, не могут повторно заразиться гепатитом B. В некоторых случаях полное выздоровление не наступает и человек становится хроническим вирусоносителем. Вирусоносительство может протекать бессимптомно, но в некоторых случаях развивается хронический активный гепатит B. Ключевым фактором риска активного вирусоносительства является возраст, когда человек был заражен: для грудных детей уровень риска превышает 50 %, в то время как для взрослых остается на уровне 5-10 %. Исследования показывают, что мужчины чаще становятся носителями, чем женщины.

HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg) является белком, который присутствует на поверхности вируса. Обнаруживается в крови при остром и хроническом гепатите В. Самый ранний маркер. Достигает максимума к 4-6-й неделе заболевания. Сохраняется до 6 месяцев при остром гепатите, свыше 6 месяцев – при переходе заболевания в хроническую форму.

HBeAg – ядерный ‘е’-антиген вируса гепатита В

Антиген, находящийся в ядре вируса. Появляется в крови одновременно с HBsAg и сохраняется в течение 3-6 недель. HBeAg появляется в крови больного острым гепатитом В одновременно с HBsAg или вслед за ним и сохраняется в крови 3-6 недель. Указывает на активное размножение и высокий риск передачи вируса при половом контакте, а также перинатально. Инфекционность HBeAg-положительной сыворотки в 3-5 раз выше, чем HBsAg-положительной. Выявление HBeAg в крови более 8-10 недель свидетельствует о переходе заболевания в хроническую форму. При отсутствии репликативной активности вируса во время хронической инфекции HBeAg не выявляется. Его появление же свидетельствует о реактивации вируса, что чаще происходит на фоне иммуносупрессии.

При лечении вирусного гепатита В исчезновение HBeAg и появление антител к HBe-антигену свидетельствует об эффективности терапии.

anti-HBc (Ig M) – специфические антитела класса IgМ к ядерному ‘core‘ антигену вируса

Начинают вырабатываться еще до клинических проявлений, указывают на активную репликацию вируса.

Появляются в крови через 3-5 недель, сохраняются в течение 2-5 месяцев и исчезают в период выздоровления.

anti-HBc – суммарные антитела (IgM+IgG) к ядерному ‘core’ антигену вируса гепатита В

Важный диагностический маркер, особенно при отрицательном значении HBsAg. Антитела класса IgM вырабатываются через 3-5 недель. Антитела класса IgG начинают вырабатываться с 4-6-го месяца и могут сохраняться пожизненно. Подтверждают контакт организма с вирусом.

anti-HBs – суммарные антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В

Появляются медленно, достигая максимума через 6-12 месяцев. Указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител. Выявление этих антител свидетельствует о выздоровлении и развитии иммунитета. Обнаружение антител в высоком титре в первые недели заболевания может быть связано с развитием гипериммунного варианта фульминантного гепатита В.

anti-HBe – антитела к ‘е’-антигену вируса гепатита В

Появляются на 8-16-й неделе после инфицирования у 90 % больных. Свидетельствуют о завершении острого периода болезни и начале периода реконвалесценции. Могут сохраняться до 5 лет после перенесенного заболевания.

HBV (ДНК) – ДНК вируса гепатита В

Маркер наличия и репликации вируса. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Это особенно важно в сложных диагностических случаях. При инфицировании мутантными штаммами вируса результаты теста на специфические антигены HBsAg и HBeAg могут быть отрицательными, но при этом риск распространения вируса и развития заболевания у зараженного человека сохраняется.

Качественное определение ДНК вируса играет важную роль в раннем выявлении гепатита В у людей с высоким риском инфицирования. Генетический материал вируса обнаруживается в крови на несколько недель раньше, чем HBsAg. Положительный результат ПЦР за период более 6 месяцев указывает на хроническую инфекцию. Определение вирусной нагрузки (количество ДНК вируса в крови) позволяет оценить вероятность перехода заболевания в хроническую форму.

Повышенные уровни печеночных трансаминаз при положительном результате ПЦР являются показателями необходимости проведения терапии. Во время лечения вирусного гепатита В исчезновение ДНК вируса свидетельствует об эффективности лечения.

Для чего используется исследование?

• Для оценки серологического профиля;
• для выяснения стадии заболевания и степени контагиозности;
• для подтверждения заболевания и уточнения его формы (острая, хроническая, носительство);
• для наблюдения за течением хронического гепатита В;
• для оценки эффективности противовирусной терапии.

Когда назначается исследование?

• При выявлении у пациента поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg);
• при подозрении на инфицирование вирусом гепатита В и сомнительных результатах серологических тестов;
• при микст-гепатитах (сочетанные вирусные гепатиты В и С);
• при динамическом наблюдении за больным гепатитом В (определение стадии процесса при совместном исследовании на другие специфические маркеры инфекции).

Что означают результаты?

Референсные значения

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

• [07-004] anti-HBc, IgM
• [07-005] anti-HBc, антитела
• [07-007] anti-HBs, антитела
• [07-024] HBeAg
• [07-025] HBsAg
• [07-111] anti-HBe, антитела
• [09-008] HBV, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Острый гепатит В. Выделяют «дикий» штамм (естественный) и «мутантный» штамм (вид) вируса. Определение штамма вируса имеет определенное значение при выборе противовирусного лечения. Мутантные штаммы вируса несколько хуже поддаются лечению в сравнении с «диким».

Хронический гепатит В (ХВГВ). Выделяют три серологических варианта:

1. ХВГВ с минимальной активностью (ранее использовали термин «носительство HBsAg»);
2. НВе-негативный ХВГВ;
3. НВе-позитивный ХВГВ.

Интерпретация сочетаний серологических маркеров гепатита В



Кто назначает исследование?

Инфекционист, гастроэнтеролог, гепатолог, эпидемиолог.

[09-009] HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

[06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)

[06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ)

[06-013] Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)

[40-120] Билирубин и его фракции (общий, прямой и непрямой)

[06-045] Фосфатаза щелочная общая

[06-004] Альбумин в сыворотке

[03-011] Фибриноген

[40-483] Лабораторное обследование функции печени

Литература

• А. М. Сокурова, ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Минздрава России, Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов, УДК: 616.36-002:578.891.
• Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.