Экспресс тест на вирусные гепатиты гепатит а
Тест «РЭД вирус гепатита А» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления вирус гепатита А в кале.
Производитель: ООО «РЭД», Россия
НАЗНАЧЕНИЕ
Тест «РЭД вирус гепатита А» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления вирус гепатита А в кале.
КРАТКАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Вирус гепатита А вызывает острое инфекционное заболевание печени, называемое гепатитом А. Вирус передается фекально-оральным путем через продукты питания и воду, как правило, при недостаточном уровне санитарных условий и перенаселенности.
Основные симптомы заболевания – высокая температура, общее недомогание, потеря аппетита, диарея, тошнота, боли в животе, темная моча, желтуха (окрашивание склер и кожи в желтый цвет). Тяжесть заболевания и смертность увеличиваются с возрастом. У заболевших детей младше 6 лет обычно не проявляются тяжелые симптомы и только у 10% наблюдается желтуха. У большинства подростков и у взрослых болезнь, как правило, протекает в более тяжелой форме и желтуха отмечается в 70% случаев.
Инкубационный период составляет от 2 до 6 недель, в среднем – 28 дней.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце вируса гепатита А он вступает в реакцию с нанесенными на стартовую зону специфическими моноклональными антителами против вируса гепатита А, меченными окрашенными частицами, и продолжает движение с током жидкости. В аналитической зоне тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенного иммунного комплекса.
В контрольной зоне тест-полоски специфический окрашенный иммунный комплекс образуется независимо от наличия в тестируемом биологическом материале вируса гепатита А.
В том случае, если в анализируемом образце присутствует вирус гепатита А, на тест-полоске образуются две параллельные окрашенные линии (красная аналитическая, обозначенная буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа. В случае отсутствия в анализируемом образце вируса гепатита А на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа.
СОСТАВ
- Один комплект тестов «РЭД вирус гепатита А» включает:
тест-полоски иммунохроматографические «РЭД вирус гепатита А» в кассетах из пластика белого цвета – 5, 10 или 20 шт.; - пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
- этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
- инструкцию по применению теста «РЭД вирус гепатита А» – 1 шт.
Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем.
Комплект тестов «РЭД вирус гепатита А» упакован в картонную коробку.
НЕОБХОДИМЫЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
- контейнеры для сбора образцов кала;
- одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
- часы или таймер.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
- Чувствительность теста «РЭД вирус гепатита А» составляет > 99%.
- Специфичность теста «РЭД вирус гепатита А» составляет > 99%.
- Время проведения анализа – 10 мин.
Тест «РЭД вирус гепатита А» не дает ложноположительных результатов с энтеровируса ми, аденовирусом, астровирусом, ротавирусом и норовирусом.
Каждый тест «РЭД вирус гепатита А» предназначен для одного определения наличия вируса гепатита А в кале человека.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Тест «РЭД вирус гепатита А» предназначен только для in vitro диагностики.
Все компоненты теста «РЭД вирус гепатита А» в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Не следует использовать тесты «РЭД вирус гепатита А» после истечения срока годности.
При проведении определения следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. исследуемые образцы биологического материала следует рассматривать
как потенциально инфицированные.
Использованные тесты и остатки биологического материала должны быть помещены в специальный контейнер для санитарных отходов.
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.
Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер. Следует отбирать образцы кала для анализа в первые 1-2 недели после появления симптомов заболевания, т.к. спустя месяц после инфицирования количество вируса гепатита А значительно уменьшается.
Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С
и ниже.
Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.
Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ
Рис.1.
1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество анализируемого образца. Для этого ввести стержень в 3 разные зоны образца, собрав примерно 150 мг кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, отобрать 150 мкл с помощью пипетки. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).
2. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД вирус гепатита А» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С).
3. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.
4. Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД вирус гепатита А», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полоской и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.
Рис. 2.
5. 4 капли (примерно 100 мкл) жидкого образца внести в круглое окошко кассеты,
обозначенное буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе
с жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать
отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД
вирус гепатита А».
6. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свиде-
тельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализи-
руемом образце кала вируса гепатита А (рис. 3-1).
Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (С и Т) свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала вируса гепатита А (рис. 3-2). Интенсивность красной аналитической линии (Т) в тестовом окошке кассеты может меняться в зависимости от концентрации вируса гепатита А в образце.
В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только красная аналитическая линия (Т), результат анализа признается недействительным (рис. 3-3). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД вирус гепатита А».
Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД вирус гепатита А».
Результаты, полученные с использованием теста «РЭД вирус гепатита А», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
Тесты «РЭД вирус гепатита А» должны храниться при температуре от 2 до 25°С в упаковке предприятия-изготовителя в сухом месте в течение всего срока годности. Замораживание тестов «РЭД вирус гепатита А» не допускается.
Срок годности тестов «РЭД вирус гепатита А» – 24 мес. с даты изготовления.
После вскрытия упаковки тесты «РЭД вирус гепатита А» должны быть использованы в течение 2 ч при хранении в сухом месте при комнатной температуре.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение Инструкции по применению теста «РЭД вирус гепатита А».
Источник
Что такое гепатит А?
Вирус гепатита А поражает ткань печени
Гепатит А (болезнь Боткина) — это остро протекающая вирусная инфекция, поражающая печень. В отличие от вирусных гепатитов В и С, это заболевание почти никогда не переходит в хроническую форму и не рецидивирует, после выздоровления организм переболевшего человека оказывается защищен от повторной инфекции.
Иммунная система легко «запоминает» вирусную частицу гепатита А и может быстро справиться с болезнью, если ранее уже с ней боролась, этот факт лег в основу изобретения вакцины против этого вида гепатита. Привитые люди, как и переболевшие, на всю жизнь сохраняют невосприимчивость к инфекции.
Гепатит А передается при бытовых контактах с больным, а также при употреблении загрязненных продуктов питания и воды. Вирус имеет высокую устойчивость, поэтому во многих случаях даже мытье овощей и фруктов с мылом, их легкая термическая обработка не спасают от инфицирования, воду для полного устранения опасных вирусных частиц необходимо кипятить не менее 10 минут, в некипяченой воде вирусы сохраняются месяцами.
Такая высокая устойчивость приводит к тому, что в странах с высокой инфицированностью населения и плохими санитарно-бытовыми условиями большинство людей переболевают гепатитом А еще в раннем детском возрасте. К таким странам относятся Китай, Индия, Таиланд, Монголия, все страны Африки и Южной Америки, Мексика, а также любимые туристические направления — Турция, Египет, Израиль. Болезнь, полученная в детском возрасте (до 6-10 лет) переносится достаточно легко, у младших детей в 80-90% случаев не наблюдается симптомов поражения печени, однако взрослые практически всегда болеют среднетяжелой и тяжелой формой гепатита А.
Кто входит в группу риска по заболеванию?
В группе риска — лица с патологией печени
Наибольшую опасность гепатит А несет для следующих групп населения:
- Не привитые от гепатита А подростки и взрослые, выезжающие в страны с высокой распространенностью инфекции среди местных жителей;
- Лица пожилого возраста (старше 60 лет);
- Люди, страдающие другими вирусными гепатитами (В, С), особенно в хронической форме;
- Пациенты с неинфекционными болезнями печени и желчного пузыря (цирроз, жировая дистрофия печени, желчнокаменная болезнь);
- Дети и взрослые, страдающие иммунным дефицитом по любой причине (наследственный дефицит выработки В- или Т-лимфоцитов, инфицированность ВИЧ, злоупотребление алкоголем, прием глюкокортикоидов);
- Онкологические больные.
У перечисленных категорий населения гепатит А чаще протекает в желтушной форме с выраженным поражением печени, кроме того, у них повышен риск молниеносной формы гепатита А, часто приводящей к летальному исходу.
Показания к проведению анализа
Боль в правом подреберье — показание для анализа
Главными показаниями к проведению анализа является возможный недавний контакт с больным человеком, а также имеющиеся симптомы болезни печени, возникшие внезапно на фоне относительного здоровья:
- Пожелтение или потемнение кожи, белков глаз;
- Тяжесть и ноющие боли в животе, особенно справа под ребрами;
- Рвота, диарея и другие симптомы несварения, продолжающиеся более 1-2 суток;
- Изменение нормального цвета мочи на темный;
- Изменение цвета каловых масс на светлый;
- Стойкое отсутствие аппетита;
- Изменение во вкусовых ощущениях, неприятный привкус во рту;
- Повышенная температура тела, ломота в мышцах и суставах.
Кроме этого, обследоваться нужно людям, отдыхавшим в неблагоприятным по вирусному гепатиту странах и оказавшимся там в очаге кишечной инфекции неустановленной природы. Инкубационный период гепатита А продолжается около месяца, при этом человек уже может заражать других людей, продолжая считать себя здоровым, поэтому после возвращения из поездки стоит проверить себя на эту инфекцию.
Подготовка к исследованию на гепатит А
Накануне теста стоит ограничить жирную пищу
Чаще всего для выявления инфицированности гепатитом А исследуют кровь, для экспресс-диагностики — кал пациента. Перед сдачей крови необходимо воздержаться от употребления жирных продуктов, стоит исключить и переедание накануне. Кровь сдается натощак утром, в случаях, когда результат нужно получить срочно, допустимо сдать кровь после голодания в течении 4-5 часов. Кал для диагностики инфекции собирают утром в стерильную емкость, за 1-2 суток до сдачи нужно отказаться от алкоголя.
Методы специфической диагностики гепатита А
Кровь пациента может исследоваться несколькими методами
Методы диагностики вирусного гепатита А подразделяются на группы в зависимости от того, что именно позволяют обнаружить в биологическом материале от пациента: генетический материал самой инфекционной частицы или специфические защитные белки иммунной системы человека, направленные против вируса. Оба варианта имеют свои недостатки и преимущества, поэтому выбор метода лучше всего доверить своему лечащему врачу.
ИФА-метод
Исследованию по этой методике подвергается сыворотка крови пациента, анализ длится 1-2 суток. Существует несколько вариантов ИФА-метода:
- Обнаружение Ig M — ранних иммуноглобулинов (защитных белков) против вирусного гепатита A;
- Обнаружение Ig G — иммуноглобулинов, обеспечивающих надежную защиту от вируса после прививки или перенесенного заболевания. В случае острой болезни их появление свидетельствует о том, что человек начал выздоравливать.
- Поиск Ig total (или суммарных антител к вирусу гепатита А) — наиболее общий тест, позволяющий определить, встречался ли организм пациента с вирусом гепатита А.
Главным достоинством метода является то, что врач с его помощью может оценить защитные силы организма пациента, а также стадию болезни: при выздоровлении нарастает количество Ig G и снижаются титры Ig M. Также ИФА-анализ используется для определения иммунитета к вирусу после прививки.
ПЦР
Выявление возбудителя возможно с помощью ПЦР-метода
ПЦР-анализ позволяет обнаружить непосредственно сами вирусные частицы в крови или фекалиях пациента, потому основным преимуществом его является высокая диагностическая надежность. ИФА-анализ может давать ложноотрицательные результаты на ранних стадиях инфицирования из-за того, что организм не успевает быстро выработать специфические защитные белки (иммуноглобулины), при этом ПЦР метод помогает обнаружить инфекцию в первые же дни. Точность ПЦР-анализа не зависит и от иммунного статуса пациента, потому он чаще всего показан лицам с ослабленным иммунитетом и людям пожилого возраста.
Экспресс-тест на гепатит А
Экспресс-тест на гепатит А проводят при помощи специальных тест-полосок, пропитанных индикаторным веществом. Это исследование позволяет выявить инфекцию очень быстро (в течении 1-2 часов может быть получен результат из лаборатории), кроме того, плюсом является его безболезненность, так как исследованию подвергаются фекалии.
Как и ПЦР-метод, экспресс-тест можно применять с первых дней болезни, однако он обладает меньшей надежностью и чаще требует дополнительных исследований.
Биохимический анализ при гепатите А
«Биохимия» позволяет оценить состояние печени
Биохимический анализ крови при гепатите А важен из-за того, что позволяет быстро оценить степень поражения клеток печени, а также динамику выздоровления. Чем тяжелее состояние пациента, тем сильнее будут изменены показатели биохимического анализа, при этом улучшение результатов — надежный критерий эффективности поддерживающей терапии.
К главным показателям, по которым оценивают состояние печени при вирусной инфекции, относятся:
- АлАТ — вещество, в больших количествах содержащееся в клетках печени (гепатоцитах), при их массовом повреждении обнаруживается в крови.
- Билирубин общий — повышение данного показателя встречается при многих видах поражения печени, в том числе неинфекционной природы. В случае вирусного гепатит А анализ позволяет оценивать, насколько сильно нарушено функционирование органа.
- Билирубин прямой — повышение уровня характерно для гепатитов различной природы, при гепатите А повышение прямого билирубина связано с пожелтением кожных покровов и изменением окраски мочи и кала.
- Щелочная фосфатаза — фермент, активность которого повышается при закупорке внутрипеченочных протоков. При диагностике состояния печени у пациентов с вирусным гепатитом А показатель позволяет оценить, затронута ли болезнью функция нормального отведения желчи.
Общий анализ крови при гепатите А
Важно сдавать и общий анализ крови
Регулярный общий анализ крови показан при любом инфекционном процессе для отслеживания динамики борьбы организма с патогеном (вирусом или бактерией). В случае вирусного гепатита А наиболее информативным оказывается уровень повышения лейкоцитов: чем он выше, тем активнее организм борется с вирусом, но также тем больше содержание живых вирусных частиц в крови и печени пациента. При выздоровлении уровень лейкоцитов может оставаться повышенным в течении 1-2 недель, но уже с первых дней улучшения будет наблюдаться его постепенное снижение.
Расшифровка результатов
Консультация доктора помогает расставить все точки над «и»
Методы специфической диагностики нужны для точного установления диагноза, так как показатели биохимического и общего анализа крови могут изменяться схожим образом при ряде различных заболеваний печени. Обнаружение иммуноглобулинов М (Ig M) при ИФА-исследовании или РНК вируса в крови ПЦР-методом являются надежным диагностическим критерием имеющейся острой инфекции. В норме иммуноглобулины М к вирусному гепатиту А не обнаруживаются, поэтому результат «Положительно» свидетельствует о болезни. Иммуноглобулины G или total (общие) могут обнаруживаться на протяжении всей жизни после перенесенной инфекции или после прививки.
Изменения в общем анализе крови не являются специфическим критерием для диагностики вирусного гепатита, но при лечении этот анализ повторяют наиболее часто, ведь он косвенно свидетельствует о стадии болезни и активности иммунного ответа пациента на вирус.
Биохимический анализ крови используется в диагностике состояния печени при любых формах гепатита, чем сильнее отклонения показателей от нормы, тем сильнее нарушены функции печени и большее количество клеток повреждено.
При установлении диагноза вирусного гепатита А наиболее важны специфические методы диагностики, в то время как при лечении на первый план выходят биохимический и общий анализ крови для контроля за состоянием пациента.
Источник