Как найти антиген к гепатиту с

В ответ на внедрение чужеродного агента иммунная система человека вырабатывает иммуноглобулины (Ig). Эти специфические вещества предназначены для связывания с чужеродным агентом и его обезвреживания. Определение противовирусных антител имеет большое значение для диагностики при хроническом вирусном гепатите С (ХВГС).

Содержание
Как выявить антитела?
Суммарные антитела к гепатиту С
Расшифровка анализа на антитела к гепатиту С
ПЦР: обнаружение антигенов гепатита С
Носитель антител к вирусу гепатита С
После лечения гепатита С антитела остаются

Как выявить антитела?

Антитела к вирусу в крови человека выявляет метод ИФА (иммуноферментный анализ). Эта методика основана на реакции между антигеном (вирусом) и иммуноглобулинами (antiHVC). Суть метода состоит в том, что в специальные планшеты вносят чистые вирусные антигены, антитела к которому ищут в крови. Затем в каждую лунку добавляют кровь больного. Если в ней есть антитела к вирусу гепатита С определенного генотипа, в лунках происходит образование иммунных комплексов «антиген-антитело».

Спустя некоторое количество времени в лунки добавляют специальное красящее вещество, которое вступает в цветную ферментную реакцию с иммунным комплексом. По плотности окраски проводят количественное определение титра антител. Метод имеет высокую чувствительность – до 90%.

К преимуществам метода ИФА можно отнести:

высокую чувствительность;
простоту и быстроту проведения анализа;
возможность проведения исследования при малом количестве биологического материала;
невысокую себестоимость;
возможность ранней диагностики;
пригодность для скрининга большого количества людей;
возможность отслеживать показатели в динамике.

Единственным недостатком ИФА является то, что он определяет не сам возбудитель, а лишь реакцию иммунной системы на него. Поэтому при всех преимуществах метода для постановки диагноза ХВГС его недостаточно: требуется проведение дополнительных анализов, выявляющих генетический материал возбудителя.

Суммарные антитела к гепатиту С

Современная диагностика с помощью метода ИФА позволяет обнаружить в крови пациента как отдельные фракции антител (IgM и IgG), так и их общее количество — antiHVC total. Эти иммуноглобулины с диагностической точки зрения являются маркерами ХВГС. Что означает их обнаружение? Иммуноглобулины класса М определяются при остром процессе. Они могут выявляться уже спустя 4-6 недель после заражения. G-иммуноглобулины являются признаком хронизации процесса. Их можно обнаружить в крови спустя 11-12 недель после инфицирования, а после лечения они могут сохраняться до 8 и более лет. При этом их титр постепенно снижается.

Бывают случаи, когда у здорового человека при проведении ИФА на antiHVC total обнаруживают противовирусные антитела. Это может быть как признаком хронической патологии, так и следствием самопроизвольного излечения пациента. Такие сомнения не позволяют врачу установить диагноз ХВГС, руководствуясь только ИФА.

Различают антитела к структурным (ядерным, core) и неструктурным (nonstructural, NS) белкам вируса. Целью их количественного определения является установление:

активности вируса;
вирусной нагрузки;
вероятности хронизации процесса;
степени повреждения печени.

AntiHVC core IgG – это антитела, которые появляются при хронизации процесса, поэтому для определения острой фазы ХВГС не используются. Своей максимальной концентрации эти иммуноглобулины достигают к пятому-шестому месяцу болезни, а у длительно болеющих и не получающих лечения пациентов они определяются в течение всей жизни.

AntiHVC IgМ являются антителами острого периода и говорят об уровне виремии. Их концентрация нарастает в течение первых 4-6 недель болезни, а после перехода процесса в хронический – уменьшается вплоть до исчезновения. Повторно в крови больного иммуноглобулины класса М могут появляться при обострении заболевания.

Антитела к неструктурным белкам (AntiHVC NS) выявляются в разные сроки болезни. Диагностически значимыми из них являются NS3, NS4 и NS5. AntiHVC NS3 – самые ранние антитела к вирусу ХВГС. Они являются маркерами острого периода болезни. По титру (количеству) этих антител определяют вирусную нагрузку на организм пациента.

AntiHVC NS4 и NS5 – антитела хронической фазы. Считается, что их появление связано с поражением ткани печени. Высокий титр AntiHVC NS5 указывает на наличие в крови вирусной РНК, а его постепенное снижение – на начало фазы ремиссии. Эти антитела длительное время после выздоровления присутствуют в организме.

Расшифровка анализа на антитела к гепатиту С

В зависимости от клинической симптоматики и результатов анализа на РНК вируса гепатита С данные, полученные после ИФА, могут трактоваться по-разному:

положительные результаты на AntiHVC IgМ, AntiHVC IgG и вирусную РНК говорят об остром процессе или об обострении хронического;
если в крови обнаружены только антитела класса G без генов вируса, это указывает на перенесенное, но излеченное заболевание. При этом РНК вируса в крови нет;
отсутствие в крови и AntiHVC и РНК вируса считается нормой, или отрицательным анализом на антитела.

Если выявлены специфические антитела, а самого вируса в крови нет, это не означает, что человек болен, но и не отрицает этого. Такой анализ считается сомнительным и требует повторного исследования через 2-3 недели. Таким образом, если в крови найдены иммуноглобулины к вирусу ХВГС, необходима комплексная диагностика: клинические, инструментальные, серологические и биохимические исследования.

Для постановки диагноза важен не только положительный ИФА, что означает наличие вируса в крови в настоящее время или ранее, но и обнаружение вирусного генетического материала.

ПЦР: обнаружение антигенов гепатита С

Вирусный антиген, а точнее его РНК, определяют методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Этот метод, наряду с ИФА, является одним из ключевых лабораторных анализов, позволяющих врачу поставить диагноз ХВГС. Назначается он тогда, когда получен положительный результат анализа на антитела.

Анализ на антитела является более дешевым, чем ПЦР, поэтому именно он используется для скрининга некоторых категорий населения (беременных, доноров, медиков, детей из группы риска). Вместе с исследованием на гепатит С чаще всего проводят и определение австралийского антигена (гепатит В).

Носитель антител к вирусу гепатита С

Если методом ИФА в крови пациента обнаружены AntiHVC к вирусу, но никаких клинических признаков гепатита С при этом нет, это может быть трактовано, как носительство возбудителя. Вирусоноситель может сам не болеть, но при этом активно заражать контактирующих с ним людей, например, через кровь носителя. В таком случае нужна дифференциальная диагностика: расширенный анализ антител и проведение ПЦР. Если анализ ПЦР окажется отрицательным, человек, возможно, перенес заболевание латентно, то есть бессимптомно, и самостоятельно излечился. При положительном ПЦР вероятность носительства очень высока. Как быть, если антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный?

Важно правильно трактовать анализы не только для постановки диагноза ХВГС, но и для контроля эффективности его лечения:

если на фоне проводимого лечения антитела к гепатиту С не пропадают, это указывает на его неэффективность;
если после противовирусной терапии вновь выявлены AntiHVC IgМ, это означает, что процесс снова активировался.

В любом случае, если по результатам анализов РНК вирус не обнаружен, но антитела к нему обнаружены, следует провести повторное обследование, чтобы убедиться в точности результата.

После лечения гепатита С антитела остаются

Остаются ли антитела в крови после курса лечения и почему? После эффективной противовирусной терапии в норме могут выявляться только IgG. Время их циркуляции в организме переболевшего человека может составлять несколько лет. Главным признаком излеченного ХВГС является постепенное уменьшение титра IgG при отсутствии вирусной РНК и IgМ. Если пациент вылечил гепатит С уже давно, а суммарные антитела у него остались, нужно провести идентификацию антител: остаточные титры IgG – это норма, а вот IgМ – это неблагоприятный признак.

Не стоит также забывать, что бывают ложные результаты анализов на антитела: как положительные, так и отрицательные. Так, например, если в крови есть РНК вируса (качественной или количественной ПЦР), а антител к нему нет, это можно трактовать как ложноотрицательный или сомнительный анализ.

Причин появления ложных результатов несколько:

аутоиммунные заболевания;
доброкачественные и злокачественные опухоли в организме;
тяжелые инфекционные процессы; после прививки (от гепатитов А и В, гриппа, столбняка);
лечение интерфероном-альфа или иммунодепрессантами;
значительное повышение печеночных показателей (АСТ, АЛТ);
беременность;
неправильная подготовка к сдаче анализа (прием алкоголя, употребление жирной пищи накануне).

При беременности процент ложных анализов достигает 10-15%, что связано со значительным изменением реактивности организма женщины и физиологическим угнетением ее иммунной системы. Нельзя игнорировать также человеческий фактор и нарушение условий проведения анализа. Анализы проводятся «инвитро», то есть вне живых организмов, поэтому лабораторные ошибки имеют место быть. К индивидуальным особенностям организма, которые могут влиять на результаты исследования, относятся гипер- или гипореактивность организма.

Анализ на антитела, несмотря на все свои преимущества, не является 100%-ным поводом для постановки диагноза. Риск ошибок есть всегда, поэтому, чтобы избежать возможных ошибок, нужно комплексное обследование пациента.

Источник

Гепатит С (ВГС, HCV) – серьезная болезнь вирусной природы, характеризующаяся поражением печеночных клеток, тканей. Поставить диагноз на основании клинической картины невозможно, поскольку клиника проявляется редко. Чтобы обнаружить и идентифицировать вирус пациенту нужно сдать анализ крови.

В условиях лаборатории осуществляются высокоспецифичные исследования, благодаря которым определяют антитела к гепатиту С. Они продуцируются иммунной системой, выступают ответной реакцией на внедрение в организм патогена.

Если были обнаружены антитела к гепатиту С, это значит, что иммунитет самостоятельно пытался бороться с возбудителем. С помощью исследования можно определить наличие/отсутствие патологии, предположить стадию патологического процесса.

При обнаружении антител паниковать не стоит, поскольку могут быть получены ложноположительные результаты. Для уточнения диагноза врачи всегда рекомендуют дополнительные методы. Рассмотрим подробно, какими анализами определяют антитела, их преимущества и недостатки с точки зрения достоверности, а также расшифруем уже полученные результаты.

Что такое антитела?

Под антителами подразумевают белковые микроэлементы, которые входят в класс глобулинов, синтезируемых иммунной системой. У каждой молекулы иммуноглобулинов существует своя последовательность аминокислот.

Благодаря этому антитела способны взаимодействовать только с теми антигенами, которые спровоцировали их формирование. Другие молекулы агенты иммунной системы не уничтожают.

Функциональность антител состоит в распознавании антигенов, после они с ними связываются, уничтожают. На синтез влияет инкубационный период.

Разновидности антител

Когда обнаружены антитела к гепатиту С, что это означает? Данный факт свидетельствует о борьбе иммунитета с патогенным агентом. Выявлять его наличие/отсутствие можно с помощью высокоспецифичных исследований.

Обнаруживать в крови больного могут такие антитела:

Их можно диагностировать в биологической жидкости взрослых и детей спустя 1 месяц после заражения. Сохраняются они в течение длительного времени – 6 месяцев. Если их нашли, то это говорит об остром течении патологии либо ухудшении иммунного статуса в совокупности с вялотекущей формой гепатита. Когда IgM достигает максимального значения, концентрация идет на спад.
Их можно обнаружить в крови через 3 месяца после инфицирования. Эти маркеры вторичны, требуются для уничтожения белковых компонентов патогенного вируса. Формирование IgG говорит о трансформации недуга в хроническую форму. Антитела сохраняются на определенном уровне в течение всего периода заболевания, и даже некоторое время после выздоровления.
Обнаружение суммарных антител к вирусу гепатита С (IgG + IgM) – совокупности глобулинов, которые представлены двумя классами, говорит о предполагаемом заражении. Такая совокупность выявляется спустя 2,5 месяца после проникновения вируса. Анализ считается универсальным.

Перечисленные антитела предстают структурированными. Кроме них также проводится исследование на выявление глобулинов, но не к вирусу, а белковым элементам. И эти антитела неструктурированные:

Anti-NS3. Диагностируют на ранней стадии, они говорят о высокой вирусной нагрузке.
Anti-NS4. Обнаруживают при затяжном воспалительном процессе, хроническом поражении печени.
Anti-NS5 говорят о том, что в крови имеется РНК возбудителя, то есть идет стадия обострения либо болезнь переходит из острой в хроническую форму.

Значения антител позволяют правильно поставить диагноз. С помощью исследований можно выявить возбудителя до появления симптоматики, осложнений.

Различия между антителами и антигенами

Антигенами называют чужеродные частички, которые провоцируют иммунный ответ. Это бактерии, вирусы и другие патогены. Антитела же являются белковыми соединениями, которые вырабатываются иммунитетом. Синтез оных происходит при внедрении чужеродной бактерии или вируса.

В лабораторных условиях можно определить антиген вируса В. Выявить же антиген ВГС не представляется возможным. Сам патоген обнаружен не был, а только мельчайшие фрагменты РНК, причем в минимальной концентрации. Поэтому ВГС так сложно диагностировать.

Основное отличие антигенов от антител состоит в том, что последние вырабатываются иммунной системой в ответ на появление первых. И на это не влияет способ заражения.

Вирус может передаваться парентеральным (через кровь), через половой контакт и вертикальным путем (от мамы ребенку).

Механизм формирования антител в крови

В здоровом организме антитела к вирусу гепатита С отсутствуют. Процесс запускается только в ответ на проникновение вируса. Образуются антитела в плазмоцитах, являются производными В-лимфоцитов.

Антитела начинают появляться в несколько этапов. Сначала в организм внедряется возбудитель, макрофаги определяют антигены. Макрофаги – это «полицейские», которые ищут чужеродное, уничтожают его. Макрофаги захватывают антигенов, изолируют, а после выводят из человеческого организма. Далее антигенная информация передается лимфоцитам. Они получают сведения от макрофагов.

После происходит синтез различных тел плазмоцитами. Они синтезируют молекулы, проводят подготовку для борьбы именно с ними. Универсальных антител для борьбы с различными патологиями не бывает. Антитела – это целенаправленное воздействие на чужеродные «объекты».

Читайте также: Вич и гепатит с лечение

Антитела – это не всегда подтверждение заболевания, поскольку хорошая работа иммунитета может подавить активность вируса. Тогда маркеры показывают, что вирус в организме был, но последний справился с ним самостоятельно.

Пациент может быть носителем антител на фоне отсутствия клинических проявлений. Такое происходит в период ремиссии либо после выздоровления.

Значение антител при диагностике гепатита С

Исследуют венозную кровь пациента для определения маркеров. Полученную биологическую жидкость очищают от форменных соединений, чтобы облегчить диагностический процесс, исключить отрицательный результат, являющийся ложным.

Если с помощью метода ИФА был получен положительный результат. То проводится дополнительное исследование. Только один анализ не может подтверждать наличие возбудителя, требуется несколько исследований. После положительного ИФА проводят ПЦР.

Главная проблема в том, что тест ИФА не может найти возбудителя, он определяет только реакцию иммунной системы. А это значит, что положительного результата мало для назначения лечения. Сдать анализ можно в поликлинике по назначению своего доктора или в платной лаборатории, например, Гемотест.

С помощью методики ПЦР выявляют РНК возбудителя. Сомнительный результат возможен только при нарушении исследования. Так, если метод ПЦР выдает положительный результат, то требуется лечить больного.

ПЦР бывает:

Качественный метод – определяют наличие материала возбудителя, устанавливают его концентрацию либо выявляют вирусную нагрузку. Можно определить инфицирование до формирования антител, когда срок инкубационного периода только начался.
Количественный способ применяется уже во время терапевтического курса, цель – оценка проводимой терапии и эффективности используемых медикаментозных препаратов.

Взаимосвязи между концентрацией вируса в крови и тяжестью патологии нет. Количество копий влияет только на вероятность передачи ВГС, эффективность лечения.

Сроки обнаружения

Опасный недуг – гепатит С чреват тем, что долгое время протекает без симптомов, и в 80% случаев переходит в хроническое течение, которое чревато функциональными нарушениями печени, диффузными изменениями, циррозом, комой.

Аутоиммунные антитела разных видов появляются не одновременно. Благодаря этому можно предположить время заражения, стадию и риски. Все эти сведения нужны для составления схемы терапии. IgM (через месяц после заражения), IgG (через 3 месяца), IgG + IgM (2,53 месяца)

График и правила сдачи анализа

Анализ рекомендуется сдавать при наличии подозрений на гепатит, а также всем людям, которые попадают в группу риска. Это медицинские работники, беременные женщины, лица с наркотической зависимостью, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь.

Чтобы выявить антитела в организме, применяется метод ИФА. Для его проведения исследуется кровь пациента, взятая утром на голодный желудок. За 48 часов до исследования нужно скорректировать питание – отказаться от жирной, жареной, пряной, консервированной, копченой еды. Нельзя употреблять алкогольные напитки, курить.

За 24 часа до исследования надо выбирать только легкую пищу. Последний прием пищи должен быть за восемь часов до забора биологической жидкости. Для получения точных результатов рекомендуется исключить стрессы, чрезмерные психические и физические нагрузки. За 24 прекращают принимать лекарства. Если это невозможно, сказать врачу.

Расшифровка результатов

В норме суммарное значение в крови не регистрируется. Для количественной оценки используется показатель позитивности R. Он обозначает плотность исследуемого антитела в крови больного.

Его референтные показатели до 0,8. Колебание от 0,8 до 1 свидетельствует о сомнительном результате диагностики, требуется дальнейшее обследование. Положительный результат, когда R более единицы.

Таблица расшифровки:

Анти-HCV total (суммарные антитела)	РНК	Расшифровка
Отсутствуют	Отрицательный	Пациент здоров, при необходимости анализ можно повторить через 30 дней
Присутствуют	Нет	Присутствуют антитела к гепатиту С, а вируса нет, что указывает на перенесенное заболевание либо эффективное лечение.
+	+	Острая стадия патологии

Если результаты указывают на перенесенную патологию, это значит, что в некоторых ситуациях вирус может сам исчезать под натиском иммунной системы. Однако вторичное инфицирование не исключено, иммунитет не вырабатывается.

При развернутом исследовании результаты могут быть такие:

Анти-HCVIgM	Анти-HCVcoreIgG	Анти-HCVNSIgG	РНК	Что значит
+	+	—	+	Острая форма
+	+	+	+	Обострение хронической формы
—	+	+	—	Период ремиссии
—	+	+/-	—	Выздоровление либо хроническая форма

Верно расшифровать результаты исследования может только медицинский специалист. При постановке диагноза также учитывают клиническую картину, данные инструментальной диагностики, результаты исследований с помощью ИФА и ПЦР.

Если были выявлены ложноположительные, ложноотрицательные результаты, требуется провести повторное обследование. Последний анализ проводят в конце терапии, что подтвердить факт выздоровления.

Источник