Когда можно сдавать анализ ифа на гепатита с

Диагноз гепатита С ставится на основе данных лабораторных исследований крови. От того, какие анализы на гепатит С сдаются, зависит, будет ли вовремя выявлено заболевание и назначено лечение. Эффективность лечебных мероприятий тоже оценивают по результатам анализов.

О гепатите С

Болезнь вызывает вирус гепатита С (HCV, hepatitis C virus). Этот РНК-содержащий вирус проникает в организм человека через кровь. Возможно инфицирование через вагинальную слизь, сперму, микротравмы слизистых оболочек.

Попадая в организм одним из этих путей, вирус поражает печень. Все вирусы являются внутриклеточными паразитами. И HCV – не исключение. Он размножается внутри печеночных клеток, гепатоцитов, из которых состоит печеночная ткань, паренхима.

После проникновения вируса в гепатоцит начинается многократное копирование с исходной материнской вирусной РНК новых дочерних РНК. Данный процесс называют репликацией. Затем вокруг образовавшихся РНК формируется капсула (капсид) и другие структурные элементы вирусной частицы (вириона).

Для репликации РНК и достройки вирионов требуются органические вещества. Вирус берет их у клетки. В конечном итоге гепатоцит не выдерживает такой нагрузки и погибает. Вышедшие из него вирусы проникают в новые гепатоциты.

Иммунная система, конечно, борется с HCV. И если у пациента крепкий иммунитет, вирус может быть уничтожен. Но это происходит редко. У большинства, несмотря на иммунное противоборство, вирусная активность сохраняется. Устойчивость вируса в немалой степени обусловлена его генетической изменчивостью. От набора генов, генотипа, закодированного в РНК вируса, в немалой степени зависит, как будет протекать болезнь, и насколько результативным будет лечение.

На фоне воспалительного процесса в паренхиме возрастает количество жировой ткани (стеатогепатоз). По мере гибели гепатоцитов паренхима замещается фиброзной тканью, и функции печени нарушаются. Крайняя степень фиброза, цирроз, сопровождается печеночной недостаточностью, вторичными изменениями других органов, расстройствами кровообращения и обмена веществ.

Поначалу незаметные для пациента, патологические изменения в печени формируются в течение долгих лет. Все это время вирус продолжает циркулировать в крови. Благодаря этому есть возможность сдать анализ на гепатит С.

Какие анализы нужно сдать на гепатит С

Показания к лабораторной диагностике – пищеварительные расстройства, тяжесть в правом подреберье, общая слабость, и другие признаки гепатита С. Тревогу должен вызвать тот факт, если этим симптомам предшествовали косметические и медицинские манипуляции. Болезнь не передается бытовым путем. Но если был интимный незащищенный контакт с инфицированным, анализ крови на гепатит С необходим. Лабораторная диагностика включает в себя несколько видов анализов:

Общий анализ крови

Он самый простой и наименее информативный. Неспецифические отклонения в общем анализе лишь косвенно свидетельствуют в пользу гепатита, и могут быть при других заболеваниях. Высокий уровень лейкоцитов (лейкоцитоз) вместе с ускоренным оседанием эритроцитов (СОЭ) – признак активного воспалительного процесса в печени. Повышение удельного веса лимфоцитов отмечается при вирусных инфекциях. А снижение уровня эритроцитов и гемоглобина возможно при угнетении кроветворной функции печени.

Биохимический анализ (биохимия)

Здесь важны два показателя – билирубин и трансаминазы. Билирубин – продукт естественного распада гемоглобина. В норме он обезвреживается печенью, и в составе желчи удаляется через кишечник. При поражении печени уровень билирубина повышается главным образом за счет свободной, не связанной с глукуроновой кислотой, фракции (непрямой билирубин). Хотя при хроническом течении гепатита С билирубин лишь слегка повышен или даже остается в пределах нормы.

Не менее важный показатель – трансаминазы (АСТ, АЛТ), внутриклеточные ферменты. При разрушении гепатоцитов они в большом количестве обнаруживаются в крови. Также в рамках биохимического анализа исследуют уровень и соотношение фракций белков, жиров (триглицеридов). В сравнении с общим анализом биохимия более информативна. Но по изменениям биохимических показателей нельзя судить, что у пациента именно гепатит С.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

А вот это уже специфический анализ крови на гепатит С. В рамках этого анализа обнаруживают антитела к вирусу. А если есть антитела, значит, есть и HCV. Антитела – это белки-иммуноглобулины, которые выделяются в ответ на антигены вируса гепатита С. Взаимодействие антигенов и антител приводит к образованию иммунных комплексов.

Чтобы реакция антиген-антитело была заметной для диагностики, используют антитела, меченные ферментами. Отсюда и название анализа. Практический интерес представляют иммуноглобулины класса М и G (IgM и IgG). В острой стадии гепатита С выделяются IgM. У большинства пациентов болезнь спустя несколько месяцев переходит в хроническую форму.

При этом IgM исчезают, и обнаруживаются IgG. Таким образом, ИФА позволяет не только диагностировать гепатит С., но и определить стадию заболевания. Но на основе ИФА нельзя судить о тяжести гепатита. Нельзя определить и генотип вируса. Ведь сам вирус не обнаруживается, а лишь антитела к нему.

Читайте также:  Болотов борис и гепатит в

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Анализ ПЦР на гепатит С – самый сложный, но самый достоверный. Суть его заключается в обнаружении РНК вируса в сыворотке крови пациента. Принцип ПЦР заключается в многократном воспроизведении или амплификации участков РНК вируса. Это напоминает естественную репликацию, но только в искусственных условиях с применением дорогостоящего оборудования.

В зависимости от целей проведения разработаны три разновидности анализа.

1. Классическая ПЦР. Качественный анализ на гепатит С. Здесь определяется сам факт наличия вируса. Обнаружена РНК HCV – человек болен, не обнаружена – здоров.

2. Количественная ПЦР. Здесь измеряют вирусную нагрузку – концентрацию вирусных частиц в объеме крови. Для этого проводят ПЦР в реальном времени, и определяют количество образовавшихся РНК копий. Вирусную нагрузку определяет в МЕ (международных единицах) в 1 мл сыворотки крови:

  • Низкая: менее 3 х 104 МЕ/мл
  • Средняя: 3 х 104-8 х 105 МЕ/мл
  • Высокая: более 8 х 105 МЕ/мл.

Нормы количественных показателей ПЦР зависят от используемого оборудования, и могут различаться в разных лабораториях. Но в любом случае, чем выше уровень вирусной нагрузки, тем тяжелее протекает заболевание, и тем больше риск фатальных осложнений.

3. Генотипирование. В данном исследовании с помощью ПЦР определяется генотип и подтип или квазитип HCV. В зависимости от этого назначается схема лечения. Анализ на генотип гепатита С проводится методом секвенирования, когда определяют последовательность нуклеотидов в цепи вирусной РНК.

Где сдать анализы на гепатит С?

Общий анализ, биохимию, и ИФА делают в любом лечебном учреждении. ПЦР возможна только в крупных лечебно-диагностических центрах, где есть соответствующее оборудование. С результатами диагностики можно ознакомиться спустя 3-5 дней.

Что делать, если анализ положительный

Если выявил анализ крови гепатит С, возможно два варианта. Первый вариант – обследуемое лицо действительно инфицировано вирусом. Второй вариант – ложноположительный результат связан с диагностическими ошибками. В большей степени это характерно для ИФА. В ходе выполнения этого анализа иногда развиваются перекрестные иммунные реакции, когда иммуноглобулины реагируют на другие антигены, сходные с антигенами HCV. Среди конкретных причин:

  • аутоиммунные заболевания
  • опухолевые процессы
  • туберкулез
  • недавняя вакцинация
  • простудные заболевания
  • глистные инвазии
  • беременность.

Ошибочный результат анализа на гепатит С может быть связан с неправильной подготовкой. Кровь для исследования сдается утром натощак. Последний прием пищи допускается не позднее, чем за 12 ч. до исследования. В течение последних нескольких дней следует воздержаться от приема алкоголя, переедания с употреблением жирной, жареной пищи с острыми приправами, пряностями.

Если результат анализа на гепатит С позитивный, необходима ПЦР. Если РНК вируса при ПЦР не обнаруживается, а ИФА показывает наличие антител, то, скорее всего, ответ ИФА ложноположительный.

Исключение составляют излечившиеся от гепатита С. У них нет вируса, следовательно, ПЦР не обнаружит РНК. Но выделившиеся во время болезни JgG могут еще долго циркулировать в крови. Достоверность ПЦР максимальна, 98-99%. Но не абсолютна – в 1-2% случаев возможны ошибки. Поэтому при подозрении на ложный ответ спустя 3-4 мес. нужно повторить ИФА и ПЦР.

Что делать, если результат отрицательный

Здесь тоже возможны варианты. Первый – обследуемый всегда был здоров. Второй – у пациента был гепатит С, но он полностью излечился, снова здоров, и в лечении не нуждается. Третий – имеется ложноотрицательный результат. В данном случае ложный анализ тоже может быть обусловлен сопутствующими заболеваниями, неправильной подготовкой и техникой проведения. Но есть еще причины, связанные со сроком сдачи крови.

Для ИФА характерно т.н. диагностическое окно, когда вирус уже присутствует в организме, но антитела выработаны в малом количестве, и пока не обнаруживаются. Для ИФА продолжительность диагностического окна составляет 3-4 нед. Но в некоторых случаях этот период может длиться до 6 мес.

При подозрении на ложноотрицательный анализ нужно переходить к ПЦР. Здесь РНК выявляют спустя 10-14 дней, а в некоторых случаях через 3-4 дня после заражения. Поэтому если ИФА не показывает наличие антител, а РНК вируса при ПЦР обнаруживаются, значит, пациент инфицирован. Следует заметить, что в самом начале гепатита возможно проведение только качественной ПЦР. Количественная ПЦР и генотипирование будут информативными лишь спустя 4-6 нед. после заражения.

Какие анализы нужно сдавать во время лечения

По общему и биохимическому анализу крови можно судить о динамике воспалительного процесса, и о том, как восстанавливается печень и ее функции. Но ведущая роль принадлежит ПЦР. Количественную ПЦР проводят на 1, 2, 3, и 4 нед. лечения. По изменению вирусной нагрузки судят об эффективности лекарств и о вероятном исходе заболевания. Если вирусная нагрузка быстро снижается, это благоприятный признак, свидетельствующий о скором выздоровлении.

Читайте также:  Острый гепатит в с дельта агентом

Какие анализы сдавать после лечения

Курс лечения гепатита С в зависимости от тяжести и вирусного генотипа длится 12 или 24 нед. После этого нужна ПЦР. Если качественный анализ ПЦР не показывает наличие РНК HCV в крови, пациент считается вылечившимся. Специфическое лечение не требуется. Нужны неспецифические мероприятия, направленные на восстановление печени.

Чем лечить?

Для того чтобы выздороветь, нужно полностью уничтожить вирус. И тогда результаты анализа ПЦР станут отрицательными. Сделать это можно только с помощью противовирусных средств последнего поколения. SoviHep D, Velakast, Ledifos – эти и другие препараты производят индийские компании по американским лицензиям. Они содержат Софосбувир с Даклатасвиром, Велпатасвиром или Ледипасвиром. Все эти препараты подавляют фазы размножения HCV внутри гепатоцитов.

Всего лишь одна таблетка в день в течение 12 или 24 нед., и выздоровление наступает в 95-99% случаев при любом генотипе вируса и форме заболевания. Стоят индийские лекарства недорого. Купить препараты может любой пациент со средним достатком.

Но аптеки не продают их. У нас вы можете приобрести индийский Софосбувир. МедФарма работает на правах официального представителя компаний из Индии. Мы поможем выбрать нужное лекарство, и доставим его по вашему адресу в течение 3-5 дней.

Did you find apk for android? You can find new Free Android Games and apps.

Источник

Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.

Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.

Что такое ИФА?

Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.

Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.

Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.

ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.

В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.

Показания к ИФА на гепатит С

Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:

  • острых и хронических заболеваниях печени;
  • желтухе неясного генеза;
  • обследовании перед хирургическими вмешательствами;
  • стандартном обследовании доноров крови;
  • постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;
  • прохождении гемодиализа;
  • профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;
  • незащищенном сомнительном половом контакте;
  • рождении детей от инфицированных матерей.

В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.

Как проводится анализ?

За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.

Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).

Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:

  1. На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
  2. На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
  3. Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.
Читайте также:  Инкубационный период вич инкубационный период гепатита

Виды ИФА

Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:

  • По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
    a) конкурентный;
    b) неконкурентный;
  • По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
    a) гомогенные;
    b) гетерогенные;
  • 3) По принципу определения исследуемого вещества:
    a) прямой;
    b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.

Прямой метод ИФА

При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.

  1. В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
  2. Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
  3. Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.

Непрямой метод

При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.

  1. В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
  2. В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
  3. В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
  4. Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.

Расшифровка результатов

Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.

При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Положительный

При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.

Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.

Отрицательный

Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.

Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.

Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.

Ложноположительный

ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:

  • выполненной накануне вакцинации;
  • при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;
  • опухолевом процессе;
  • инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).

Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.

ИФА положительный, а ПЦР отрицательный: что это значит?

Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».

Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.

Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.

Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.

Источник