Количественный анализ вируса гепатита в
Гепатит B – вирусная инфекция, поражающая печень. Сегодня около 300 млн человек по всему миру являются носителями гепатита B.
У некоторых вирус переходит в цирроз печени или гепатоцеллюлярную карциному (первая стадия рака). Новые противовирусные стратегии исследования болезни имеют две задачи:
- определить, насколько организм чувствителен к вирусной нагрузке;
- определить, насколько вирус устойчив к приему лекарств и других медицинских вмешательств.
Особенности исследований на гепатит
Серологические исследования направлены на выявление в сыворотке крови антигенов и антител, но этот метод ненадежен. Поэтому ученые разработали метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Он позволяет не только качественно определить наличие вируса (есть или нет), но и количественно (в каком количестве присутствуют антитела в сыворотке крови).
Перед сбором крови врач должен выяснить:
- принимал ли пациент наркотические вещества внутривенно;
- являлся ли человек донором либо реципиентом (кому вливали кровь);
- проводились ли больному хирургические вмешательства;
- повреждался ли у пациента кожный покров;
- уверен ли человек в здоровье своего сексуального партнера;
- были ли контакты с зараженными вирусом гепатита B.
При остром гепатите положительный результат можно выявить через 1-2 недели после инкубации путем ПЦР.
Анализы крови для выявления вирусного гепатита В (ВГВ) берутся при:
- Диагностике острого гепатита в:
- период инкубации (1-2 недели);
- интенсивный период недуга (3-4 недели);
- период ранней стадии выздоровления.
- Диагностике ХВГ (хронического вирусного гепатита).
- При микс-гепатитах.
Также регулярно анализы берутся у людей, находящихся в группе риска, к ним относят:
- людей, нуждающихся в частых переливаниях крови;
- пациентов, проходящих постоянные процедуры очищения крови при почечной недостаточности;
- людей, больных СПИДом или ВИЧ-инфекцией;
- беременных женщин;
- медицинских работников, контактирующих с кровью;
- больных с симптомами заболевания печени.
- лечащихся от цирроза, рака и других заболеваний печени.
Подготовка к количественному анализу предполагает соблюдение таких правил:
- не курить за 1 час до сдачи анализа;
- не есть за 4 часа до процедуры;
- лучше всего количественный анализ сдавать после сдачи качественного;
- не пить алкоголь за сутки до исследования.
Эффективная терапия при заболевании влияет на уменьшение количества ДНК вируса в сыворотке. Через полгода после старта лечения количество вируса должно уменьшиться на 2-3 порядка. Если результаты анализов через время не изменились, или, наоборот, стали хуже, то в обязательном порядке меняется вся терапия, и автоматически острый гепатит переименовывается в хронический.
При попадании ДНК вируса гепатита в организм инфекция может пойти 2путями:
- репликативным (происходит развитие острого либо хронического гепатита, что в дальнейшем, без медицинского вмешательства, ведет к циррозу печени);
- интегративным (развитие бессимптомного, неактивного вирусоносительства, которое все-таки приведет к циррозу либо гепатоцеллюлярной карциноме).
Как происходит процедура забора крови? Врач стягивает предплечье больного жгутом и вводит иглу в вену на локтевом сгибе, после забирает кровь в шприц и переливает в специальную пробирку. Результаты будут готовы через несколько дней, срок зависит от места, где пациент сдает анализ.
Материалом служит сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты, которые помещают в пробирку с хорошо завинчивающейся крышкой. Но на результат может повлиять загрязненный материал для забора анализа, передержка материала (он хранится до 24 часов при температуре не более +4 °С).
к оглавлению ↑
Методы количественного анализа
Существует несколько способов количественного анализа, среди которых ПЦР, ИФА, биохимия.
к оглавлению ↑
ПЦР (полимеразная цепная реакция).
Это анализ на поверхностный антиген-белок, который составляет часть внешней оболочки вируса. После того, как вирусные частицы попали внутрь организма, они начинают интенсивное размножение на поверхности печени, уничтожая здоровые клетки органа. Новые молекулы выбрасываются в кровь.
Исходя из этого, исследуют уровень концентрации в сыворотке антител и определяют, есть заражение гепатитом B или нет.
Материал для исследования берется натощак. ПЦР проводится в аппарате под названием амплификатор.
Алгоритм анализа ПЦР:
- Сначала расщепляют ДНК на 2 самостоятельные цепочки с помощью повышения температуры материала для исследования в амплификаторе.
- Материал немного охлаждают с помощью азота. Праймеры находят нужные последовательности в молекуле ДНК и присоединяются к ним.
- Элонгация – третий шаг, когда два праймера присоединяются к двум цепочкам ДНК. При помощи фермента ДНК-полимеразы происходит достраивание участка ДНК от присоединившегося к нему ранее праймера. Таким образом, на участке в области праймеров в каждой из цепочек ДНК образуется вторая комплементарная цепочка ДНК.
В дальнейшем эти шаги повторяются множество раз, и за несколько часов выполняется 35-45 циклов, образуются миллиарды копий искомого образца. Если такие копии есть, то высчитывается их количество на 1 мл материала для анализа.
к оглавлению ↑
ИФА
Помимо ПЦР, существует метод ИФА (иммуноферментного анализа). Он определяет не только поверхностные антитела, но и расположенные внутри и взаимосвязанные с предыдущими антигенами, а также их количество.
к оглавлению ↑
Биохимия
Еще один метод количественного анализа. При попадании вируса из поврежденных клеток печени в организм выбрасываются ферменты, если их количество больше нормы, то можно говорить о заражении. Кроме того, нужно определить вирусную нагрузку (ДНК-HBV), сдать печеночные пробы (на билирубин с фракциями, АЛТ, АСТ, щелочную фосфатазу, гамму-ГТ). Обязательным является посещение инфекциониста, который при необходимости направляет больного на фиброэластометрию, подбирает курс лечения.
к оглавлению ↑
ПЦР в реальном времени
В этом методе поиск копий происходит после каждого цикла, а не после 35-45, Метод работает так же, как и ПЦР, позволяет определять количество копий в образце для исследований. Тем самым время проведения анализа заметно сокращается, при этом гарантирован 100 % результат.
к оглавлению ↑
Обнаружение ДНК гепатита B
Установление количества ДНК гепатита B очень важно, так как при малом показателе прогноз болезни более благоприятный, чем при большем. Концентрацию ДНК ВГВ измеряют в копий/мл либо me/мл
1 me/мл = 2,83×10 копий/мл
Результаты данного анализа могут быть следующими:
- ДНК вируса не обнаружена, если его нет в организме либо концентрация очень мала, 90 me/мл = 200 копий/мл;
- ДНК вируса обнаружена в количестве ниже нормы концентрации, 2×106 копий/мл;
- ДНК вируса находится в среднем количестве, при 2×106-2×109 копий/мл;
- ДНК вируса больше 2×109 копий/мл, концентрация антител высокая, что говорит о прогрессе заболевания.
Если результат анализа положительный, то диагностируется:
- носительство вируса гепатита B;
- заболевание хроническим гепатитом;
- заболевание острым гепатитом B.
Если результат отрицательный, то:
- вируса в организме нет;
- возможно наличие гепатита B в период выздоровления (если предыдущие анализы являлись положительными).
В редких случаях отрицательный результат анализа на ДНК вируса гепатита B говорит о быстром и злокачественном течении болезни.
Решение о сдаче анализа на вирус принимает:
- терапевт;
- вирусолог;
- гематолог;
- инфекционист.
Количественный анализ является обязательным при диагностике заболевания и должен состояться еще до начала терапии. Но необходимо помнить о том, что гепатит B иногда тесно переплетается с гепатитом D, что может создавать дополнительные сложности при проведении такого анализа. Поэтому следует учитывать и такие варианты осложнений:
- коинфекция – происходит заражение сразу двумя видами гепатита B и D. Такое заболевание протекает намного сложнее и болезненнее. Хронической формы у такого недуга нет, потому что в большинстве своем болезнь заканчивается летальным исходом;
- суперинфекция – к ранее спавшему гепатиту D присоединяется острый ВГB, в этом случае болезнь перетекает в хроническую с неблагоприятным прогнозом.
Рекомендуем прочитать:
загрузка…
Якутина Светлана
Эксперт проекта VseProPechen.ru
Статья помогла вам?
Дайте нам об этом знать — поставьте оценку
Загрузка…
Источник
Гепатит В – распространённая вирусная инфекция, передающаяся от человека к человеку. Гепатит разрушает клетки печени, что может стать причиной формирования цирроза. Присутствие в крови гепатита делает носителя потенциально опасным. Данное заболевание передаётся от матери к ребёнку, распространяется половым путём.
Лабораторные исследования крови больного вирусом гепатита имеют следующие цели: подтверждение диагноза, выявление прогресса в лечении, контроль состояния пациента, определение формы болезни.
Количественный анализ на гепатит Б проводится для определения уровня антигенов и подбора правильного курса лечения. Он позволяет диагностировать заболевание во время инкубационного периода и выявить носителя вируса.
Что такое количественный анализ на гепатит Б?
Проникая в тело человека, антигены начинают размножение на поверхности печени и попадают в кровь. Количественный анализ – современная разработка в области генной инженерии для точной диагностики инфекции в печени. С его помощью устанавливается количество ДНК гепатита Б в крови пациента. Присутствие невысокого содержания вируса допустимо, но требует контроля. Превышение этого показателя свидетельствует о необходимости врачебного вмешательства.
У ряда заражённых вирус гепатита Б не сопровождается симптомами, поэтому количественные анализы назначаются:
- женщинам во время беременности;
- работникам медицинской сферы;
- ВИЧ-инфицированным;
- при патологиях печени;
- перед переливанием крови.
Если в крови обнаружен вирус, состояние пациента необходимо отслеживать. Через установленный временной промежуток потребуется вторичная сдача количественного анализа. Контроль необходим при всех формах заболевания, включая бессимптомный латентный гепатит.
Существуют различные вариации количественного анализа: полимеразная цепная реакция, биохимия, ИФА.
Следить за уровнем инфекции в организме необходимо людям с заболеваниями печени – цирроз, рак. Причиной развития этих патологий может быть долгое время прогрессировавший вирус гепатита В.
Показания к исследованию
Количественный анализ назначается для того, чтобы определить наличие вируса гепатита. У пациентов с диагностированным гепатитом данное исследование выявляет степень поражения организма инфекцией. При хронической форме количественный анализ определяет стадию заболевания.
Проведение количественного анализа назначают людям, находящимся в группе риска, при положительных показателях предыдущих исследований. Поскольку инфекция передаётся от женщины к плоду, во время беременности назначается проведение этой процедуры. Заражение возможно при проведении операций, если использовавшиеся инструменты были нестерильны.
Подготовка и проведение количественного анализа
Подготовка пациента к сдаче количественного анализа влияет на результаты исследования. Необходимо воздержаться от употребления спиртных напитков за день до сдачи крови. Проводить забор разрешается не ранее, чем через четыре часа после еды. Следует отказаться от курения.
Перед забором биоматериала врач обязан уточнить у пациента, является ли он донором крови, узнать о перенесённых операциях, выяснить наличие контактов с заражёнными людьми.
Данную процедуру рекомендуется проводить после проведения первичного исследования. Забор крови происходит из вены. Собранный материал хранится в пробирке. Произвести изучение биоматериала требуется за 24 часа после забора.
Количественный анализ на полимеразную цепную реакцию выявляет вирус на инкубационной стадии спустя две недели после инфицирования.
Расшифровка количественного анализа на гепатит Б
Расшифровкой показателей занимается врач. Мера измерения в заключении – копии вируса на миллилитр крови. В норме этот показатель показывает отметку <750. Лечение назначается, если биохимическое исследование выявило присутствие вируса. Если показатель <105, дальнейшие меры определяются в зависимости от результатов проведения биопсии.
Показатель >105 свидетельствует о необходимости проведения медикаментозного лечения. Отказ от приёма препаратов и проведения терапии может стать причиной развития хронического гепатита.
Если в организме обнаружено >1*108 , данное заключение свидетельствует о том, что существует высокая вероятность перехода заболевания в хроническую форму. Для предотвращения развития болезни требуется многоплановое продолжительное лечение.
На результат исследования влияет проведённая ранее вакцинация или перенесённая острая форма гепатита Б.
Курс препаратов для лечения подбирается врачом-инфекционистом. Исходя из данных количественного анализа, он составляет терапевтический план. При назначении лекарств учитываются показатели биопсии. При низких значениях и незначительных отклонениях от нормы препараты назначаются гепатологом.
В ряде случаев одновременно с гепатитом Б протекают другие типы болезней печени. Это осложняет терапию и увеличивает вероятность возможных последствий. Опасное течение заболевание принимает в редких случаях и при отсутствии многопланового лечения.
Возможны ли ошибки при количественном анализе?
Заключение количественного анализа, в котором показатели в норме, не гарантирует отсутствия в крови ДНК вируса. Человек может являться носителем при малом количестве вируса.
Ошибка исследований возможна при несоблюдении подготовительных мер перед забором биоматериала. Также результаты исследований могут быть ложными из-за неправильных условий хранения пробирок с собранным биоматериалом.
Латентный гепатит, не имеющий признаков и не сказывающийся на самочувствии носителя, способен привести к проблемам с печенью и стать причиной развития цирроза. Поэтому людям, входящим в группу риска и имевшим контакты с больными, необходимо отслеживать показатели крови для предотвращения заболеваний печени.
Латентная форма заболевания потребует наблюдения у врача. Для профилактики гепатита рекомендуется провести вакцинацию и соблюдать правила личной гигиены.
Источник
Гепатит — патология печени воспалительного характера, появляющаяся из-за проникновения в орган вирусов или действия ядов, токсинов, приводящих к разрушению гепатоцитов (функциональных клеток органа). В нетяжёлой форме болезнь излечивается сама. В сложных случаях приводит к серьёзным осложнениям: фиброзу, циррозу или онкологии. Выявляются пять разновидностей вирусного гепатита: A, B, C, D и E. Разобраться, присутствует ли заболевание у данного человека, и в каком виде, можно по результатам специальных исследований.
Виды вируса
Возбудители гепатита – гепатотропные вирусы. Они проникают в клетки печени, встраиваются в их геном, нарушают структуру, приводят к некрозу ткани. В других органах приживаются редко. Вирусы не уничтожают печёночную клетку, а пользуются ею для размножения.
Иммунитет человека усиленно борется с вирусами, стараясь привести к их ослаблению и прекращению воспроизведения. Но чем сильнее борьба, тем больше погибает гепатоцитов. Это приводит к развитию воспаления (гепатит) и нарушениям функций печени.
При хорошем иммунитете печень самостоятельно может избавиться от вируса и победить недуг. Это случается при болезни типов А, Е и В. Если иммунная система проигрывает в борьбе, гепатит переходит в хронический (особенно при типах вируса С, D и реже В).
Выделяют пять видов заболевания:
- Гепатит А (возбудитель НАV). Путь передачи фекально-оральный. Нечистоплотность, немытые продукты и грязная вода – причины инфицирования. Иногда передаётся во время интимной близости. Часто имеет нетяжёлую форму и приводит к полнейшему выздоровлению с последующим формированием иммунитета. Редкие тяжёлые виды приводят к летальному исходу. Прививка проводится.
- Гепатит В (НВV). Попадает в организм через жидкий биологический материал (кровь, семенную жидкость) и ребёнку в момент появления на свет. При использовании бывшего в употреблении шприца при введении инъекционных препаратов (в зоне риска наркоманы). Через нестерильные и многоразовые инструменты в больничных учреждениях (по халатности персонала). Через вливание донорской крови без предварительной проверки. Есть вакцина.
- Гепатит С (НСV). Заражаются, как и при гепатите В. Вакцины пока не существует.
- Гепатит D (НDV) поражает только заражённых НВV. Из-за двойного натиска на печень увеличивается серьёзность недуга. Прививка от В защищает и от НDV.
Если вирусный гепатит длится долго и скрытно, это приводит к опасным и необратимым последствиям. Знание этого факта – стимул не упустить болезнь и своевременно принять меры.
Отзывы о вакцине Комбиотех от гепатита В
Гепатит В
Гепатит В – патология печени воспалительного характера, появляющаяся из-за проникновения в орган вируса В. Болезнь опасна риском получить цирроз печени или онкологию органа.
Пути проникновения болезни:
- использование бывшего в употреблении шприца при уколах,
- через нестерильные и многоразовые инструменты в медицинских учреждениях (по халатности персонала),
- использование без предварительной проверки донорской крови,
- практика незащищённых половых контактов,
- вертикальная передача от страдающей недугом мамы ребёнку.
Вовремя распознать болезнь и начать лечение поможет знание признаков заболевания:
- Приступы тошноты и позывы к рвоте.
- Потеря аппетита.
- Ощущение дискомфорта под рёбрами справа.
- Ноющие боли в суставах.
- Нарушения частоты и консистенции испражнений (фекалии бесцветные, моча тёмная).
- Появление желтушной окраски кожи.
- Вялость и быстро наступающая утомляемость.
Сегодня не существует медикаментов, до конца изгоняющих вирус из организма и полностью исцеляющих. Но если вовремя принять лечебные меры, обеспечить сохранность печени можно.
Что такое ДНК вируса гепатита b количественное определение
Обнаружить ДНК вируса гепатита В можно методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Заподозрить болезнь – по клинике, с помощью лабораторных и инструментальных методов. Вначале патология имеет скрытый характер (период инкубации), затем переходит в стадию обострения.
Со временем становится хроническим заболеванием, но это влияет численность вирусов и качество терапии. Очень важно не допустить последней стадии.
Существует качественный иммуноферментный анализ исследования на присутствие ДНК вируса. Но он не до конца объективен. При его проведении не обнаруживают присутствие болезнетворного патогена внутри органов.
Можно ли заразиться гепатитом Б после вакцинации
Он помогает выявить:
- как реагирует иммунитет на инфекцию,
- есть ли в крови антигены и антитела.
Поэтому контроль терапии усложнён. Доказать, что человек выздоровел, на основании этого метода нельзя. Обнаруживают и выявляют не подтверждённую качественным анализом ДНК вируса гепатита В с помощью количественного анализа.
Такой анализ достоверен и назначается в следующих случаях:
- Иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела положителен.
- Установлен факт наличия вирусной патологии печени.
- Есть вероятность нескольких видов гепатита.
- Если надо узнать, какова нагрузка вирусов на организм.
Если болезнь протекает легко и без осложнений, нет необходимости определения нагрузки вирусов. Пациента лечат на основании показаний ИФА.
Медицинской наукой разработан метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).При помощи данного анализа определяют и присутствие ДНК вируса, и его количество в крови.
Новое СП 3112341-08 о профилактике вирусного гепатита В
Выявление ДНК НВV методом ПЦР
Для выявления ДНК вируса гепатита B проводят ПЦР для подсчёта числа частичек НВV в единице объёма кровяной сыворотки. Показатель вируса гепатита считается нормальным при отсутствии двойника ДНК инфекта.
Такая диагностика имеет цель:
- Подсчитать число частиц вируса в единице объёма сыворотки.
- Подтвердить острый гепатит.
- Своевременно предотвратить переход недуга в хроническое состояние.
- Выявить носителей вируса с положительными результатами ИФА.
- Проследить возвращение вирусов после излечения.
- Принять верное решение о назначении терапии, её комбинировании или прекращении.
Пройдя инкубационный период, острый гепатит даёт положительный результат при ПЦР через семь-четырнадцать дней.
Перед назначением крови на анализ, доктор выясняет у пациента анамнез:
- вводились ли в вену наркотики,
- вливалась ли чужая кровь или сдавалась, как донорская,
- не было ли операций,
- были ли кожные повреждения,
- не было ли сомнительных половых связей,
- были ли контакты с инфицированными гепатитом В людьми.
Кровь берётся на анализ из вены на голодный желудок утром в период с 7 до 9 часов, чтобы результаты были достоверны.
К забору крови готовятся, соблюдая правила:
- не есть в течение 12 часовжирной пищи,не принимать алкогольные напитки, не курить,
- избегать физических и спортивных нагрузок,
- предупредить в лаборатории, если принимались лекарства (по возможности избежать приёма),
- детям до пяти лет за полчаса до забора крови выпивать по двести грамм кипячёной воды через десятиминутные промежутки.
Концентрацию ДНК ВГВ измеряют в копий/мл или me/мл.
В оценке результатов исследования ориентируются на следующие показатели:
- <, 2х10, что означает при расшифровке, что острая стадия не станет хронической,
- от 2х10^4 до 2х10^6 – в тридцати процентах случаев станет хроническим,
- >,2х10^6 –в девяноста пяти процентах случаев станет хроническим.
Количественный ПЦР – главный метод диагностирования обострений гепатита В, выявления скрытого носителя инфекции с высокой виремией НВV.
При каких заболеваниях делается ДНК вируса гепатита b количественное определение
ПЦР анализ на гепатит производится для обнаружения инфекции (ДНК НВV). Этот вид диагностического выявления вредоносных микроорганизмов приходит на помощь не только при гепатите В. Чтобы найти скрытных и трудно обнаруживаемых в органах возбудителей, ПЦР часто применяют для подтверждения или опровержения инфекции в гинекологической и урологической практике.
Исследуя кровь, обнаруживают:
- гепатиты А, В, С, D и ТТ,
- ВИЧ-инфекцию,
- патологии печени,
- герпес всех видов,
- цитомегаловирусы,
- энтеровирусную инфекцию,
- токсоплазмоз,
- краснуху,
- другие недуги, вызываемые вирусами.
Для диагностирования болезней этим методом подходит не только кровяная сыворотка. Другие биоматериалы тоже берутсядля анализа. Это слюна, мазки из половых органов, эякулят.
Следовательно, список болезней, при которых показана ПЦР-диагностика, расширяется:
- Туберкулёз.
- Сальмонеллёз.
- Дифтерия.
- Венерические недуги.
- Вирусные папилломы
ПЦР входит в ряд обязательных анализов для женщины, вынашивающей ребёнка. Чтобы не допустить патологического протекания беременности и отклонений в развитии малыша, надо исключить вероятность инфицирования матери опасными заболеваниями.
10 симптомов одновременного появления в организме возбудителей гепатита В и С
Срок выполнения анализа на ДНК вируса гепатита b количественным способом
ПЦР без ошибок с высокой точностью выявляет наличие вируса уже на ранней стадии. При исследовании методом ИФА антиген проявляется лишь спустя два месяца после заражения. При ПЦР – через тридцать дней. Выявляется не только обычный вирус, но и мутировавшие штаммы,что не может обнаружить никакой другой анализ.
Существуют стандартные цифры количественного показателя вируса. С ними сравнивают полученные при исследовании значения и делают выводы о степени развития болезни или её отсутствии. Данные анализа ПЦР выдаются через две недели.
Часто люди не знают, что переболели гепатитом B. Они путают его с простудой или гриппом. Из-за перенесённой болезни повышается риск в течение жизни приобрести серьёзные осложнения со стороны печени. Поэтому лучше перестраховаться и обратиться к инфекционисту.
К каким докторам следует обращаться для консультаций
Пациент, получив на руки результаты анализов, старается сам сделать выводы о наличии у него гепатита и определить стадию развития болезни. При этом часто допускается ошибка в оценивании реального положения вещей. Чтобы этого не было, приходят за консультацией к докторам.
Медицинские специалисты в этой области:
- Вирусолог.
- Гепатолог.
- Инфекционист.
Лечащим врачом анализ количественного ПЦР-теста расшифровывается, по результатуоцениваетсяхарактер течения гепатита В и показания к дальнейшей диагностике.
Помогает выбрать необходимое лечение или отменить его в случае отсутствия болезни у пациента.
Врач-инфекционист объективно оценит после расшифровки состояние здоровья пациента, назначит правильное лечение и даст консультацию.
Чтобы не получить проблем, связанных с этим недугом, гепатологи настоятельно рекомендуют ставить прививки от гепатита В. Введение вакцины – даёт стопроцентную гарантию, что человек будет ограждён от болезни.
Прививку делают:
- всем младенцам сразу после появления на свет,
- служащим медицинских учреждений,
- тем, кому делается вливание чужой крови.
Сколько будет действовать введённая вакцина, зависит от иммунитета каждого человека в отдельности (от 10 до 20 лет). Если надо, прививку делают повторно.
Загрузка…
Источник