Материал для лабораторной диагностики гепатита а

Гепатит А считается врачами относительно мягкой формой инфекционного процесса из-за редких случаев хронизации заболевания, но в последнее время этот недуг приобретает более широкое распространение. Вирусный гепатит А является наиболее распространенной формой гепатита. Микробиологические исследования доказали, что передается от человека к человеку инфекция  парентальным путем, с пищей и питьем.

В некоторых случаях может иметь место молниеносный гепатит, такая разновидность патологического процесса способна закончиться смертельным исходом. По этой причине пускать развитие недуга на самотек нельзя.

Развитие болезни происходит в три этапа:

  • преджелтушная;
  • разгара болезни — желтушная;
  • реконвалесценции – выздоровления.

Сразу после инфицирования начинается инкубационный период, в течение которого, изменения не выявляются, этот период характеризуется накоплением вирусных частиц в организме.

Патогенез гепатита А сопровождается формированием в организме больного различных синдромов, представляющих собой комплексы симптомов, свидетельствующих о возникновении различных нарушений провоцируемых интоксикацией.

Проведение первичной диагностики

Диагностика гепатита А предполагает использование нескольких диагностических методов. При появлении подозрений на наличие указанной инфекции больной в первую очередь должен обратиться к врачу-инфекционисту для проведения экспресс-теста.

Осуществление первичного обследования у врача

Для диагностирования наличия заболевания инфекционисту достаточно провести беседу с пациентом, в процессе которой выясняются особенности способа жизни человека. После проведения беседы врач осуществляет осмотр больного, обследует печень методом пальпации и ставит первичный диагноз.

Так как большинство симптомов у различных типов вирусных инфекций сходны между собой, поэтому требуется лабораторная диагностика гепатитов.

После первичного осмотра и обследования врач дает направление на анализы.

Проведение лабораторной диагностики гепатита А во многом сходно с лабораторной диагностикой гепатита С.

При проведении первичной диагностики вирусного гепатита А показательной будет следующая информация:

  1. Посещал ли пациент в последнее время страны Азии и Африки, где недостаточно развита работа коммунальных служб. Это связано с тем, что передача инфекции осуществляется пищевым и водным путем.
  2. Соблюдает ли человек элементарные гигиенические правила.
  3. Важной является информация о том, контактировал ли пациент с больными гепатитом А.

На основании полученной информации врач может сделать предварительное заключение и проводить дальнейшую диагностику заболевания. Одновременно с проведением осмотра врач выясняет, как осуществляет функционирование пищеварительная система пациента, присутствуют ли признаки мышечной интоксикации. При проведении процедуры пальпирования доктор определяет размеры печени.

Очень часто течение заболевания происходит в безжелтушной форме, но опытный врач проводит осмотр склер глаз, появление даже небольшой желтушности говорит о возможном факте инфицирования организма.

Применение экспресс-теста в диагностике

В качестве первичного метода диагностики на наличие у пациента вирусной инфекции можно использовать экспресс-тест на определение антигена вируса гепатита А в составе кала или крови.

Фармацевтическая промышленность предлагает использовать два вида тестовых наборов – тест компании Vegal и иммуноферментные тест-системы Vintrotest Vitrotest HAV-IgM TK069.

Первая разновидность экспресс-тестов включает в своем составе весь комплект необходимых реактивов и инструментов. Для проведения исследования требуется не более 15 минут. Этот способ не дает 100% точности.

Иммуноферментные тест-системы Vintrotest Vitrotest HAV-IgM TK069 позволяют достаточно быстро определить присутствие антител IgM к вирусным частицам. Это исследование позволяет получить результат в домашних условиях уже через 15 минут.

Использование результатов гемотестов, несмотря на большое количество положительных отзывов о них, не могут использоваться в качестве единственного способа проведения диагностики.

После использования такого метода рекомендуется  провести дополнительные лабораторные исследования. Помимо этого, в связи с тем, что появляющиеся симптомы могут свидетельствовать о наличии в организме не только гепатита, а также, например, у взрослых людей алкогольного гепатоза и некоторых других заболеваний печени. По этой причине требуется проведение дифференциальной диагностики. Дополнительно нужно установить какая разновидность вируса поразила организм и спровоцировала появление болезни.

Анализы при диагностике гепатита А

Проведение диагностических мероприятий при подозрении на наличие патологии требует проведения целого комплекса исследований.

При диагностировании недуга применяются лабораторные и инструментальные методы проведения исследований.

Использование клинических способов диагностирования патологии

Показательные данные позволяет получить биохимический анализ крови и мочи.

В том случае, если выявлены повышенный билирубин, а также увеличенная концентрация печеночных ферментов, то это означает, что развивающийся в организме гепатит уже привел к нарушению работы клеток печеночной паренхимы.

Читайте также:  Гепатит с анализ цена харьков

Проведение детальной расшифровки анализа крови и мочи позволяет определить в некоторых случаях степень повреждения печени и организма в целом.

Наиболее показательными лабораторными методами диагностики гепатита А являются:

  • анализ мочи;
  • общий анализ крови;
  • биохимия крови;
  • коагулограмма.

Лучше всего сдавать анализы натощак, это позволит получить наиболее точные результаты.

Присутствие вируса в организме можно увидеть по анализу мочи, при появлении в ней билирубина, она начинает светлеть. У здорового человека в моче оно не выявляется, при наличии гепатита А наблюдается повышение концентрации в составе мочи уробилиногена. При тяжелом течении патологии в моче выявляется наличие низкомолекулярных плазменных белков, которые не должны выявляться в моче здорового человека.

При общем анализе крови при гепатите А наблюдается снижение концентрации гемоглобина и лейкоцитов. Помимо этого фиксируется снижение концентрации тромбоцитов. Эти изменения свидетельствуют о наличии аномальных процессов в печени.

Биохимия крови позволяет выявить отклонения в концентрации печеночных ферментов. Такие отклонения свидетельствуют о патологических нарушениях в функционировании печени и разрушении гепатоцитов.

После проведения первичного осмотра и лабораторных анализов можно поставить диагноз, но для качественной диагностики требуется проведение дополнительных тестов и исследований.

Использование лабораторных методов

После ряда анализов врач-инфекционист направляет больного для количественных и качественных обследований гепатита А.

Существует ряд методик, позволяющих определить количество вируса в организме и степень его агрессивности.

Наиболее распространенными методами проведения такой диагностики являются:

  1. Иммуноферментная диагностика.
  2. Ультразвуковое исследование.
  3. Полимеразная цепная реакция.

Наиболее точной и специфической диагностикой является выявление РНК вируса в крови при помощи ПЦР.

Применение иммуноферментного обследования

Для точного определения наличия антител к вирусу необходимо проверить кровь на маркеры. Специфическими маркерами являются иммуноглобулины класса М анти-HAV IgM. Наличие этого компонента можно установить с первых дней после проникновения патогена в организм при помощи методики ИФА.

Иммуноглобулины появляются в организме больного в первые месяцы развития патологии. Выработка антител у больного происходит в независимости от тяжести, формы и симптомов болезни. Эти антитела носят название ранних, это связано с тем, что спустя полгода после инфицирования их уже невозможно выявить методом ИФА в организме. Спустя 6 месяцев наблюдается их возврат в крови пациента, после возвращения анти тела способны сохраняться в составе крови на протяжении всей жизни.

Наличие указанных антител к вирусу является доказательством того, что человек инфицировался гепатитом А и у него выработался иммунитет к этому патогену. Аналогичные антитела появляются у человека, если ему делалась прививка против вируса в качестве профилактики развития патологии.

Для определения наличия маркеров требуется сдать кровь для проведения лабораторных тестов. Сотрудники клинической лаборатории в процессе проведения тестов имеют возможность выявить не только само наличие антител, но и их количество в организме пациента.

Эта методика определения патологии относится к высокоточным лабораторным методам, требующим наличие специального оборудования и реактивов.

Проведение ультразвукового исследования

Применение ультразвукового исследования позволяет выявить наличие нарушений вызванных инфекционным процессом в структуре и форме печени. Такие нарушения являются частым спутником при развитии у человека гепатита А.

В процессе исследования выявляется наличие пятен на органе что говорит о повышении эхогенности, наличие уплотнений может свидетельствовать о развитии в печени цирроза.

УЗИ может помочь диагностировать присутствие в железе любых серьезных изменений на самых ранних стадиях их прогрессирования. Так, например, при помощи ультразвука выявляются нарушения, возникающие в результате развития холестаза и цитолиза гепатоцитов.

УЗИ может быть назначено человеку для подтверждения наличия вирусной инфекции даже в случае наличия у него на руках результатов ИФА, это требуется для того чтобы определить полную картину развивающихся патологических изменений в тканях железы.

Для получения максимально точной картины нарушений УЗИ рекомендуется проводить натощак, а за два дня до процедуры исключить из рациона питания такие продукты как:

  • горох;
  • фасоль;
  • свежие фрукты;
  • молоко;
  • капусту;
  • соки.

Исключение указанных компонентов из рациона связано с тем, что они усиливают процессы газообразования, а это в свою очередь приводит к неточностям при проведении ультразвукового обследования.

Осуществление обследования ПЦР

Метод ПЦР дает возможность определить уровень нуклеиновых кислот и присутствие чужеродной ДНК или РНК.

Использование ПЦР позволяет выявить генетический материал патогена еще на самой начальной стадии, когда в составе крови отсутствуют антитела. Эта методика диагностики является наиболее многогранной и точной, что позволяет проводить наиболее раннюю диагностику заболевания.

Читайте также:  Антитела к вирусу гепатита с суммарные архитект положительный

Использование этого метода оправдано в тех случаях, когда требуется получение наиболее точного результата в максимально короткие сроки для предотвращения распространения инфекционного процесса.

Недостатком методики является высокая стоимость инструментов необходимых в процессе анализа, а также его недоступность в целом ряде стран с высокой степенью распространения вирусной инфекции.

Методика ПЦР дает возможность определить чувствительность вируса к определенным противовирусным препаратам и определяет точное расположение очагов заболевания – мест наибольшего скопления частиц патогена. Наличие у лечащего врача такой информации позволяет подобрать наиболее оптимальный вариант проведения терапевтических мероприятий.

Специфичность методики составляет около 98%. Наличие у ПЦР высокой степени чувствительности позволяет его использовать, как наиболее показательный при проведении диагностики гепатита А.

Источник

Диагностика гепатита А основана на эпидемиологических, клинических и лабораторных данных. Лабораторная диагностика основана на выявлении маркеров репликации вируса — антител IgM и IgG к антигенам возбудителя и проведение генетического анализа — обнаружение в сыворотке крови вирусной РНК. Ограниченное значение имеет методика выявления антигенов вируса, что связано с тем, что пик их образования приходится на период инкубации и самый ранний желтушный период. Культуральное исследование для диагностики гепатита А используется редко. На многослойных культурах клеток вирусы не растут. Предпочтение отдается лейкоцитарным или органным культурам.

Рис. 1. Желтуха у больного.

Клинические данные, указывающие на гепатит А

При диагностике заболевания следует учитывать тот факт, что наиболее часто заболевание регистрируется у детей от 5 до 14 лет. У детей в возрасте до 5-и лет в 80% болезнь протекает бессимптомно в безжелтушной форме. У детей старшего возраста и взрослых желтушная форма заболевания регистрируется в 70% случаев.

На наличие у больного гепатита А указывают следующие клинические данные:

  • Контакт с больным гепатитом А, употребление воды из непроверенных источников, немытых овощей и фруктов и др., посещение стран Азии, Африки и Латинской Америки в среднем за 14 — 28 дней до заболевания. Амплитуда колебания инкубационного периода находится в пределах 7 — 50 дней.
  • Острое начало заболевания с гипертермией, интоксикационным, диспептическим и астеновегетативным синдромами.
  • При желтушной форме заболевания преджелтушный период короткий.
  • Улучшение самочувствия больного с появлением желтухи.
  • Значительное повышение (в 5 — 40 раз) уровня аминотрансфераз (АЛТ и АСТ) в сыворотке крови и тимоловой пробы.

Для диагностики гепатита А используется, в основном, сыворотка крови и фекальные массы.

Рис. 2. Потемнение мочи и обесцвечивание кала — опорные признаки болезни.

к содержанию ↑

Диагностика заболевания с помощью серологических исследований

Идентифицировать гепатит в острой фазе можно только путем выявления в сыворотке крови специфических антител IgM и IgG. Данные маркеры заболевания выявляются с помощью серологических реакций ИФА (иммуноферментный анализ) и РИА (радиоиммунный анализ). Оба метода диагностики высокоспецифичны и высокочувствительны. При постановке РИА используются специфические IgG меченные радионуклидом 125И, при постановке ИФА — ферментом пероксидазой. С помощью реакции иммуннофллюоросценции можно исследовать биоптаты печени. Серологические методы диагностики используются также с целью эпидемиологического обследования контактных лиц.

  • IgМ начинают вырабатываться в организме больного уже с конца инкубационного периода и присутствуют в крови в течение 3 — 6 месяцев после перенесенного заболевания.
  • IgG начинают вырабатываться на 2 — 3 неделе заболевания и в последующем присутствуют в сыворотке крови пациента в течение всей жизни.

В разных регионах удельный вес здоровых лиц, имеющих антитела IgG в сыворотке крови к вирусу гепатита А, составляет от 30 до 60%.

Рис. 3. Антитела вырабатываются клетками иммунной системы больного в ответ на антигены вируса гепатита. Чем выше иммунный ответ, тем больше концентрация антител в сыворотке крови.

Антитела (иммуноглобулины) класса IgМ

IgМ («ранние» антитела) первыми вступают в борьбу с чужеродными микроорганизмами. Они начинают вырабатываться в организме больного уже с конца инкубационного периода — за 5 — 10 дней до появления первых симптомов гепатита А. Титр IgМ возрастает в 4 раза в первые 3 — 6 недель и далее постепенно снижается. Через 6 -8 месяцев (иногда 12 — 18 месяцев) IgМ исчезают. С помощью IgМ выявляется гепатит А, протекающий в безжелтушной, стертой и субклинической формах.

Определение антител к вирусу гепатита А класса IgМ является основным тестом специфической диагностики гепатита А. Их присутствие в сыворотке крови говорит об острой фазе или недавно перенесенном заболевании.

Антитела (иммуноглобулины) класса IgG

«Поздние» антитела IgG начинают вырабатываться иммунной системой на 2 — 3 неделе заболевания. Их титр нарастает медленно, максимум определяется на 4 — 6 неделе болезни и далее постепенно снижается. В последующем IgG присутствуют в сыворотке крови пациента в течение всей жизни. Обнаружение в сыворотке крови антител IgG у здоровых лиц говорит о ранее перенесенном заболевании. Специфические IgG вырабатываются у вакцинированных лиц.

Читайте также:  Можно при гепатите с пить безалкогольное пиво да или нет

Антитела (иммуноглобулины) класса IgА

Антитела класса IgA накапливаются в слизистых оболочках кишечника, верхних дыхательных и мочеполовых путей, они содержаться в слюне, слезной жидкости, молозиве и молоке и первыми защищают организм от чужеродных микроорганизмов. В сыворотке крови появление антител IgA происходит параллельно с появлением антител IgМ, но исчезают IgA из крови значительно быстрее. Антитела IgA определяются в фекалиях.

Рис. 4. Специфические антитела IgM и IgG выявляются с помощью серологических реакций ИФА (иммуноферментный анализ) и РИА (радиоиммунный анализ).

к содержанию ↑

Анализ кала на гепатит А

Антигены вируса гепатита А можно выявить в экстрактах фекалий больного, для чего используются иммуноэлектронная микроскопия, иммуноферментный и радиоиммунный анализы. Наличие вирусов в каловых массах больного является 100% подтверждением диагноза, но их отсутствие не исключает наличие гепатита А.

к содержанию ↑

Диагностика заболевания с помощью ПЦР

РНК вируса (генетический материал) выявляют в сыворотке крови больного, фекальных экстрактах, пищевых продуктах и воде (водоемы, стоки и др.) с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Чувствительность данного метода диагностики составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, специфичность — 98%. РНК вируса выявляются с 3-й недели заболевания и еще около 20-и дней после появления первых симптомов заболевания. РНК вируса в фекалиях выявляются с 3-й недели заболевания и еще около 3-х месяцев после появления первых симптомов заболевания.

Рис. 5. РНК вирусов определяются методом проведения ПЦР.

к содержанию ↑

Выделение вирусов у лабораторных животных

Выделить вирусы гепатита А можно при заражении восприимчивых животных (обезьян мармозеток, шимпанзе или павианов), что производится только в высокоспециализированных лабораториях. Материал, полученный от зараженных животных, подвергается исследованию на обнаружение самих возбудителей и его антигенов вышеописанными способами.

Рис. 6. Выделить вирусы гепатита А можно при заражении восприимчивых животных (обезьян мармозет, шимпанзе или павианов), что производится только в высокоспециализированных лабораториях.

к содержанию ↑

Клинические и биохимические анализы

Клинические анализы при диагностике гепатита А, имеющие диагностическое значение:

  • Лейкопения или нормоцитоз.
  • Относительный лимфоцитоз.
  • Замедление СОЭ.

Биохимические анализы при диагностике заболевания, имеющие диагностическое значение:

  • Непродолжительное (в течение 1 — 2 недель) повышение активности аминотрансфераз АЛТ и АСТ в 5 — 40 раз. Их нормализация регистрируется к 21 дню заболевания.
  • Повышение уровня билирубина непродолжительное (1 — 2 недели), умеренное. Полная нормализация отмечается на 3-й неделе заболевания.
  • Значительное повышение тимоловой пробы в первые 10 дней желтушного периода.
  • Повышение уровня щелочной фосфатазы.
  • В случае развития на фоне основного заболевания панкреатита отмечается повышение уровня амилазы в моче и крови.
  • В случае развития основного заболевания на фоне алкогольной интоксикации в крови регистрируются высокие показатели у-ГТ (гамма-глютамилтрансферазы).

Рис. 7. У детей в возрасте до 5-и лет болезнь в желтушной форме протекает в 20% случаев. В 80% — бессимптомно в безжелтушной форме.

к содержанию ↑

Дифференциальная диагностика

Дифференциальную диагностику гепатита А следует проводить со следующими заболеваниями:

  • Вирусные гепатиты С, В и Е.
  • При безжелтушной форме в ранний, дожелтушный периоды, зачастую гепатит А протекает под маской ОРЗ или пищевой токсикоинфекции.
  • Рак большого сосочка 12-и перстной кишки.
  • Хронический гепатит и цирроз печени.
  • С желтухой могут протекать инфекционный мононуклеоз, токсоплазмоз, лептоспироз, псевдотуберкулез, цитомегаловирусная инфекция.

Рис. 8. Пожелтение кожи при гепатите.

Гепатит А

Статьи раздела «Гепатит А»

Самое популярное

ПОНРАВИЛАСЬ СТАТЬЯ?

Подпишитесь на нашу рассылку!

Источник