Метод ихл на гепатит с это
Выбор исследований и оценка результатов на вирусные гепатиты.
Применяемые лабораторные технологии:
- ИХЛА (иммунохемилюминесцентный анализ) – количественный высокочувствительный анализ на выявление серологических маркеров
- ИФА (иммуноферментный анализ) – полуколичественный или качественный средне-чувствительный анализ на выявление серологических маркеров
- ПЦР (полимеразная цепная реакция) – качественный и количественный анализ на выявление в крови ДНК и РНК живых вирусов в период репликации
- HbsAg — поверхностный антиген вируса гепатита В.
Метод ИФА (отечеств.) – предел обнаружения от 0.1 нг/мл, результат (+) или (-)
Положительный тест подтверждают дополнительным исследованием. Возможно получение ложно-отрицательных результатов у 5-7% лиц, имеющих низкие уровни HBsAg или редкие субтипы вируса гепатита В.HBsAg – метод ИХЛА (Эбботт, США) – предел обнаружения от 0.05 МЕ/мл, выявляет все мутантные формы вируса.
Результат отрицательный при уровне менее 0.05 МЕ/мл, положительный результат — более 0,05 МЕ/мл.
Появляется через 1-2 недели после инфицирования. При выздоровлении исчезает через 1.5 месяца. Выявление его после 6 месяцев означает переход заболевания в хроническую форму.
Отрицательный результат возможен у 0.01-0.05 % лиц с очень низкими уровнями HBsAg.
Положителен у больных острым ВГВ с начала заболевания и у всех больных с хроническими формами; бессимптомное носительство антигена возможно и после выздоровления у лиц с ослабленным иммунитетом в связи с низкой продукцией антиHBsAg. - AntiHBcor — суммарные антитела к сердцевинному антигену вируса гепатита В. Поскольку сам антиген (HBcor) находится в печеночной клетке и в крови не обнаруживается, о его наличии судят по появлению в крови антител к нему.
AntiHBcor — метод ИХЛА (Эбботт, США) – результат в виде цифрового коэффициента обратной реакции:
От 1 до 3 – отрицательный
От 0 до 1 – положительный. Чувствительность теста – 1РЕI unit/ml.
Тест становится положительным с 4 недели у больных острым ВГВ. Выявляется у всех переболевших ВГВ ранее с выздоровлением в течение всей жизни (даже без HBsAg в крови); у больных любыми формами хронического ВГВ.
Кровь доноров, положительных по антиHBс, считается непригодной для переливания, даже при отрицательном результате исследования на HBsAg.
- AntiHBcorIgM – острофазовые антитела к сердцевинному антигену гепатита В (ИФА) отечеств. – результат (+), (-). Антитела выявляются при остром ВГВ с 2 по 8 месяц, при хроническом ВГВ указывают на наличие текущего обострения.
Оценивается только в совокупности с HBsAg и антиHBcor.
- AntiHBs — антитела к поверхностному антигену гепатита В — количественно (ИХЛА) DPC, США – пределы обнаружения – от 3 до 2000 мЕ/мл
Менее 10 мЕ/мл – отрицательный результат
Более 10 мЕ/мл — положительный
Антитела появляются у больных в периоде реконвалесценции. Активная выработка антител приводит к связыванию и удалению HBsAg из кровотока при выздоровлении. Уровень их достигает пика через 6-8 месяцев; антитела могут сохраняться длительное время как показатель активации иммунитета к ВГВ у лиц, переболевших с выздоровлением. У лиц, вакцинированных против ВГВ, антитела являются показателем эффективной иммунизации при уровне от 10 мЕ/мл и более, согласно критериям ВОЗ.
Эффективный иммунитет после прививки от ВГВ сохраняется до 10 лет, контролируется по уровню антиHBs.
- НВеAg – внутренний антиген вируса гепатита В — ( метод ИФА) – результат (+), (-). Антиген выявляется на неделю позже HBsAg, держится до 2 месяцев острого периода ВГВ; является маркером максимальной заразности больного, наличие его у беременной означает риск заражения плода в 60-80%.
Обнаруживается при хроническом активном гепатите, при хроническом персистирующем гепатите. Заменяется на антиНВе спустя 6 месяцев от начала заболевания.
- AntiНВе IgG (ИФА) – антитела к внутреннему антигену гепатита В — появляются по окончании острого периода ВГВ, что означает благоприятный прогноз, особенно при нарастании титра. Могут обнаруживаться в крови в течение 2-5 лет.
- AntiHVD суммарные — антитела к вирусу гепатита Д — (ИФА) качественно – результат (+), (-). Маркер инфицированности текущего или перенесенного ранее ВГД. Заболевание возможно только на фоне имеющегося ВГВ как суперинфекция.
- AntiHCV суммарные — антитела к вирусу гепатита С — (ИФА) – результат (+) или (-). Используется как первичный скрининг на наличие ВГС; основанием для диагноза не является, так как возможны как ложно-положительные, так и ложно отрицательные результаты. Положительный результат подтверждают и повторяют анализ другой тест-системой. Появляются антиВГС не ранее, чем через 5 недель от момента заражения (возможно и через 30-50 недель). Ложно-отрицательные результаты возможны при использовании низкочувствительных тест-систем, не выявляющих вирусы некоторых генотипов, чаще 1а и 3а.
AntiHCV (ИХЛА) Эбботт, США – высокочувствительный третьего поколения количественный тест на определение антител к восьми антигенам вируса гепатита С всех генотипов: Nc, E1/s,E2/Ns1, Ns2-5. Результат (+) или (-) и в виде коэффициента позитивности, позволяющего видеть изменения в динамике. Ложноотрицательный результат возможен в самом начале заболевания (так называемое серонегативное окно).
У лиц, больных гепатитом С тест положителен как вне обострения, так и при обострении. - AntiHCVIgM — острофазовые антитела к вирусу гепатита С (ИФА) качественно – результат (+), (-).
Наличие антител характерно для острой фазы ВГС, обострения хронического ВГС.
- ПЦР (полимеразная цепная реакция)– анализ на выявление ДНК-РНК (DNA-RNA) живых вирусов гепатитов В,С, Д в крови – высокочувствительный тест на наличие острого ВГ или обострения хронического заболевания. Положительный тест свидетельствует о текущей репликации вируса в печеночной ткани с выходом вируса в кровь. Тест может быть отрицательным у выздоровевших после острого ВГ (до15% случаев), при хронических гепатитах вне обострения (при отсутствии репликации и деструкции печеночной ткани), на фоне противовирусной терапии, при подавлении репликации вируса гепатита С у пациентов с сочетанным гепатитом В, Д, А.
Определение РНК вируса гепатита С в крови является золотым стандартом – наиболее чувствительным и ранним тестом для диагностики заболевания (положителен с 7-21 дня от момента инфицирования, в отличие от антител). Вирусемия в течение более 6 месяцев – свидетельство хронизации болезни. Количественный анализ (вирусная нагрузка) используется для определения показаний и контроля за лечением антивирусными препаратами гепатитов В и С.
Определение генотипа вируса гепатита С (HCV) используется для выявления устойчивых к препаратам интерферона типов вируса (1b) и выбора тактики лечения.
Источник
Гепатит С — заболевание, вызываемое РНК-содержащим вирусом. Вирус может передаваться через кровь, через нестерильные медицинские инструменты, при трансплантации органов и тканей, при половом контакте, от матери к ребенку во время беременности и родов. Он размножается в клетках печени и вызывает развитие острого или хронического гепатита. Вирус гепатита С имеет несколько генотипов, вследствие частых мутаций он устойчив к воздействию механизмов иммунной защиты человека.
Вирусный гепатит С чаще всего протекает бессимптомно. Только в 15% случаев острого заболевания наблюдают тошноту, признаки интоксикации, отсутствие аппетита, желтуха бывает редко. Меньшая часть пациентов переносит гепатит С как острое заболевание и полностью выздоравливает, у большей части инфицированных развивается хронический гепатит С. Длительно текущее хроническое заболевание может привести к циррозу или раку печени.
На старте заболевания начинают образовываться антитела к компонентам вируса, сначала иммуноглобулины М, позже иммуноглобулины G. Специфические антитела к вирусу гепатита С могут быть обнаружены в крови через 3–8 недель после попадания вируса в организм, однако в некоторых случаях они могут отсутствовать в течение нескольких месяцев. В этом случае инфицирование можно подтвердить исследованием крови на РНК вируса гепатита С. После перенесенной инфекции у выздоровевших пациентов специфические антитела сохраняются в течение многих лет с постепенно снижающейся концентрацией и могут обнаруживаться в низком количестве на протяжении всей жизни. Антитела к гепатиту С не защищают от повторного заражения при новой встрече с вирусом.
В группу риска по гепатиту С входят врачи и медсестры, люди, пользующиеся медицинскими и косметическими услугами, наркозависимые, пациенты, которым проводилось переливание крови или пересадка органов, дети, рожденные зараженными матерями-носителями вируса гепатита С.
Анализ на антитела к вирусу гепатита С (HCV), суммарные, позволяет выявить специфические иммуноглобулины, наличие которых говорит о возможной инфекции или ранее перенесенном заболевании. Тест является скрининговым, сдают его обязательно при госпитализации, перед плановыми операциями и во время беременности.
В каких случаях обычно назначают исследование
- при обследовании пациентов, готовящихся к плановой госпитализации или операции;
- при профосмотрах и диспансеризациях;
- при подозрении на контакт с инфицированной кровью или нестерильными медицинскими инструментами;
- при появлении симптомов поражения печени;
- при обследовании беременных.
Что именно определяют в процессе анализа
Выявляют наличие специфических суммарных антител к вирусу гепатита С методом ИХЛА — модификации иммуноферментного анализа.
Что означают результаты теста
Результат «Не обнаружено» — значит, что в сыворотке крови пациента нет специфических антител к гепатиту С. Это может быть, если пациент здоров и никогда не встречался с вирусом гепатита С. Отсутствие антител возможно в течение короткого периода в начале заболевания, когда вирус попал в организм, а иммунная система еще не выработала антитела к вирусу гепатита С (так называемый период «серологического окна»).
Результат «Обнаружено» — значит, что антитела к вирусу в крови выявлены. Положительный результат выдают всегда с результатами подтверждающего теста. В подтверждающем тесте определяют антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С.
Результат исследования (пример):
Антитела к вирусу гепатита С, сумм | ОБНАРУЖЕНО |
Антитела к гепатиту С, подтверждающий тест | |
Core (антитела к структурным белкам вируса гепатита С) | 15.26 |
NS3 (антитела к неструктурному белку NS3 вируса гепатита С) | 0.65 |
NS4 (антитела к неструктурному белку NS4 вируса гепатита С) | 0.02 |
NS5 (антитела к неструктурному белку NS5 вируса гепатита С) | 0/02 |
Антитела могут быть выявлены у пациентов в нескольких случаях:
- пациент болен в настоящее время острым или хроническим гепатитом С;
- пациент когда-то перенес гепатит С как острое заболевание и теперь здоров, антитела остались как иммунологическая память о контакте с вирусом;
- у пациента редкий случай неспецифической реакции сыворотки крови с используемой тест-системой.
Выявление антител к вирусу гепатита С не означает наличия заболевания и требует дополнительного обследования пациента. В случае положительного ответа необходима консультация лечащего врача или врача-инфекциониста и назначение дополнительных тестов. Может быть назначено ПЦР-исследование на HCV (выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента), биохимические маркеры — АЛТ, АСТ, ГГТ, щелочная фосфатаза, билирубин, общий анализ крови с лейкоцитарной формулой, коагулограмма.
Сроки выполнения теста
Результат исследования «Не обнаружено» можно получить уже на следующий день после сдачи анализа. В случае необходимости выполнения подтверждающего теста результат может быть задержан на 1–2 дня.
Подготовка к анализу
Кровь можно сдавать не ранее чем через 3 часа после приема пищи в течение дня или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.
Источник
Что такое гепатит С и чем он опасен
Модель вируса гепатита С
Гепатит С — вирусное заболевание, при котором поражаются клетки печени, также патологический процесс может затронуть иммунные механизмы и другие внутренние органы. Инфицирование происходит преимущественно через кровь во время трансфузий, инвазивных процедур. Редко возможен путь передачи при половом контакте либо от матери ребёнку во время родов.
Заболевание вызывается вирусом гепатита С (ВГС), который относится к роду Flavivirus и состоит из однонитевой РНК, включающей около 10 000 нуклеотидов. Особенностью ВГС является его способность к мутациям, что помогает вирусу избегать атак иммунной системы. Всего известно 6 генотипов ВГС, каждый из которых включает множество подтипов. Вариабельность ВГС не позволяет создать эффективную вакцину против гепатита С, что является одной из причин неуклонного роста инфицирования во всём мире.
Гепатит С — «ласковый убийца»
Болезнь начинается с острой стадии, которая в 85% случаев протекает бессимптомно, поэтому диагностируется гепатит С обычно уже на последующих этапах болезни. Примерно в четверти случаев острая стадия завершается самоисцелением, когда системе иммунитета удаётся полностью уничтожить вирус, при этом инфицированный человек зачастую даже не догадывается о том, что был болен. В остальных 75% заражений ВГС защитным клеткам организма удаётся лишь частично сдерживать размножение вируса. Гибель гепатоцитов сопровождается омертвением тканей печени и приводит к развитию патологий, опасных для жизни: циррозу и опухолевым образованиям в печени.
Гепатоцеллюлярный рак — одно из самых тяжёлых последствий гепатита С, является причиной летального исхода, в ряде стран Африки занимает первое место среди онкологических заболеваний мужского населения и третье место среди видов рака у женщин.
Согласно статистике ВОЗ во всём мире ежегодно осложнения гепатита С уносят жизни 700 000 людей.
Группа риска по гепатиту С
Наркозависимые лица — в группе риска
Заболевание быстро распространяется в среде наркоманов, на их долю приходится 2/3 случаев заражения гепатитом С. В некоторых странах наркозависимым людям предоставляется возможность бесплатного обследования и лечения во избежание распространения болезни. Так, в северных штатах Индии, где инфицирование гепатитом С среди наркоманов составляет 98%, ВОЗ организовала проект по скрининг-тестам и терапии.
К группе риска относятся люди, получающие донорскую кровь, хотя за последние десятилетия удалось значительно снизить количество заражений во время трансфузий путём тщательного обследования доноров. Однако существует невысокий процент случаев, когда гепатит С не выявляется при тестировании, что приводит к инфицированию реципиентов.
Любые процедуры, связанные с повреждением кожных покровов, при несоблюдении стерильных мер, могут спровоцировать передачу вируса от больного человека здоровому. Так, местом заражения может быть стоматологический кабинет, салон татуировок и пирсинга.
Незначительное число заражений происходит и при половом контакте, поэтому люди, чьи сексуальные партнёры являются носителями вируса, также входят в группу риска. Профилактическое обследование рекомендуется проводить и лицам, у которых среди ближайших родственников есть пациенты с гепатитом С. Инфицирование в данном случае может произойти при использовании одних и тех же бритвенных и маникюрных приборов, зубной щётки, то есть при несоблюдении мер личной гигиены. Воздушно-капельным путём, через одежду или посуду вирус не передаётся.
Показания к проведению исследования
Диагностика заболеваний печени — показание к исследованию
Анализ может быть назначен в качестве скрининг-теста, а также в профилактических целях при планировании и во время беременности, поступлении в стационар, в предоперационный период. Направление на выявление гепатита С выдаётся при наличии изменений в общих анализах мочи, кала, крови, а также следующих симптомах:
- повышенная утомляемость;
- нарушение сна;
- расстройство стула, изменение цвета кала на более светлый;
- цвет мочи становится темнее;
- желтушность слизистых и кожных покровов;
- головные, мышечные боли;
- боли в области правого подреберья;
- тошнота, рвота;
- непереносимость жирной пищи;
- рост температуры тела;
- увеличение размеров печени.
Правила подготовки
Пациенты должны быть подготовленными к тесту
- Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до исследования.
- В предыдущие сутки рекомендуется ограничить жирную, острую пищу, полностью исключить алкоголь.
- Физические и эмоциональные нагрузки должны быть сведены к минимуму.
- Исключается употребление лекарственных средств, если их приём отменить невозможно, необходимо предоставить список препаратов врачу.
- Курение следует прекратить минимум за 1 час до тестирования.
- В день сдачи анализа можно пить только чистую воду.
- Все иные исследования и медицинские манипуляции проводятся после изъятия крови.
Методы диагностики гепатита С
Лабораторная диагностика проводится несколькими методами
Качественный метод
Через несколько недель, в некоторых случаях через несколько месяцев после проникновения в организм вируса иммунная система начинает вырабатывать защитные антитела к оболочке, элементам генома и ядру ВГС. Для определения специфических иммуноглобулинов используются анализы на антитела к ВГС. Это может быть иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) или иммуноферментный анализ (ИФА), которые основываются на выявлении комплексов антитело-антиген. На начальном этапе образуются иммуноглобулины класса М, затем подключаются иммуноглобулины класса G.
ПЦР-диагностика
Гепатит С является заболеванием, при котором наблюдается замедленный иммунный ответ, а в 5% случаев антитела против ВГС не определяются у пациента и через год после инфицирования. При помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) можно выявить ВГС на самых ранних сроках, что выгодно отличает данный метод диагностики от ИХЛА и ИФА. В основе анализа лежит обнаружение РНК вируса всех 6 генотипов ВГС.
Для контроля терапии исследуется интерлейкин-28-бета
Исследование на интерлейкин-28-бета
При инфицировании ВГС существует несколько путей развития болезни, включая самостоятельное уничтожение вируса системой иммунитета, медикаментозное лечение с устойчивым вирусологическим ответом (УВО), а также развитие болезни с переходом в последующие стадии, несмотря на терапию рибавирином и интерфероном. Реакцию организма на зарождение гепатита С долго не могли предугадать, пока не была обнаружена прямая связь между полиморфизмами гена интерлейкина-28-бета и УВО при гепатите С. Интерлейкин-28-бета относится к интерферонам 3 типа, обладающих способностью подавлять репликацию ВГС. Генетический анализ назначается перед началом лечения гепатита С для прогноза эффективности лечения и выбора тактики терапии.
Биохимический анализ крови
Биохимический анализ отражает целый ряд изменений в крови и печени при гепатите С. Печень продуцирует комплекс ферментов, участвующих в различных биохимических процессах организма. Снижение либо рост уровня ферментов позволяют выявить нарушения в работе печени. Изменение концентрации электролитов, жиров и белков в крови отражают последствия инфицирования ВГС.
Расшифровка результатов
Расшифровка теста — важный и ответственный этап диагностики
Качественный анализ
Положительный:
- острая либо хроническая фаза гепатита С;
- наличие заболевания в прошлом периоде.
Отрицательный:
- отсутствие инфицирования;
- инкубационный период (первые 4-6 и более недель после заражения);
- серонегативный вариант гепатита С (когда иммуноглобулины против ВГС не вырабатываются).
ПЦР
Отражает вирусную нагрузку и исчисляется в количестве вирусных частиц. Результаты могут быть представлены следующим образом:
- Отрицательный. РНК ВГС отсутствует либо количество ниже предела чувствительности.
- От 10^2 до 1х10^8 МЕ/мл — положительный результат со средней вирусной нагрузкой.
- > 10^8 МЕ/мл — высокий уровень концентрации РНК ВГС.
Комплекс лабораторных методов позволяет поставить верный диагноз
Интерлейкин-28-бета
- Генотип С/С. Высокая вероятность УВО при терапии рибавирином и интерфероном.
- Генотипы С/Т и Т/Т. Низкая вероятность УВО при противовирусной терапии.
Биохимический анализ
При гепатите С могут быть выявлены следующие отклонения:
- снижение альбумина;
- повышение билирубина;
- рост концентрации триглицеридов;
- повышенное присутствие аммиака;
- снижение либо повышение уровня железа;
- пониженный уровень мочевины;
- повышение концентрации аспартатаминотрансферазы (АсАт);
- значительный рост фермента аланинаминотрансферазы (АлАт);
- превышение нормы щелочной фосфатазы (ЩФ);
- повышенный уровень лактатдегидрогеназы (ЛДГ);
- появление в крови фермента сорбитолдегидрогеназы (СДГ);
- рост концентрации фруктозо-моносфат-альдолазы (ФМФА).
Отклонения от нормы ещё не являются поводом для постановки диагноза. Расшифровка показателей осуществляется в комплексе лечащим врачом.
Источник