Образование антител при гепатите с

Фото 1 Гепатит С — один из наиболее опасных диагнозов, с которым может столкнуться человек. Это серьезное воспалительное заболевание печени.

Заражение всегда происходит через кровь, и лишь в 20% случаев острого течения заболевания его возможно вылечить. В остальных 80% гепатит С переходит в хроническую форму и нередко приводит к летальному исходу. Основным методом диагностики является определение наличие антител к заболеванию.

Что означает, если тела обнаружены?

Когда в организм человека попадает вирус, долгое время он не дает о себе знать. В этом заключается сложность диагностики и невозможность выявить заболевание до того, как человек успел заразить кого-либо из окружающих. Для гепатита С характерен долгий инкубационный период, иными словами — до первой симптоматики может пройти продолжительное время.

Во время проникновения любого инородного объекта в организм человека, будь то вирус, инфекция, другой болезнетворный организм, иммунная система сразу же его распознает и направляет все свои силы на борьбу с патогенным объектом. Это всегда очень мелкие, микроскопические частицы, которые человек не в состоянии увидеть невооруженным взглядом или почувствовать их проникновение.

Когда иммунная система обнаруживает чужеродный объект, она посылает сигналы о необходимости выработки иммуноглобулинов. Это специфические защитные вещества, которые связываются с патогеном, чтобы его уничтожить. Если речь идет, например, о банальном ОРЗ, иммунитету либо хватает сил справиться с вирусом, либо сразу же появляются симптомы — кашель, насморк, повышение температуры, слабость, и тогда человек обращается к врачу и начинает помогать иммунитету уничтожать болезнетворные частички путем приема противовирусных препаратов или антибиотиков.

При гепатите С иммунитету не хватает сил справиться с вирусом, но и симптоматика не появляется сразу. Пока вирус находится в организме, белковые соединения крови, выполняющие защитную функцию, — иммуноглобулины — продолжают образовываться.

Диагностика осуществляется обычно таким способом: небольшое количество крови пациента смешивают с чистыми антигенами (вирусами). Далее наблюдают за реакцией: если в крови присутствуют антитела к вирусу, то они свяжутся с антигенами, образуя прочный комплекс “антитело-антиген”. Соответственно, врач делает вывод о присутствии в организме гепатита С.

ВНИМАНИЕ! Наличие в крови антител к гепатиту С не является однозначным поводом к постановке диагноза.

В некоторых случаях возможен ложноположительный результат, поэтому обнаружение антител к гепатиту С — это не подтверждение того, что человек заражен. При таком результате требуется пройти еще несколько диагностических процедур.

Классификация

Существует несколько типов антител к гепатиту С, которые могут быть обнаружены при диагностике. Что они означают и в чем их отличия?

Иммуноглобулины G (анти-HCV IgB) встречаются чаще всего и в самом большом количестве. Антитела этого типа обнаруживаются на начальных этапах заражения, при вялотекущем течении болезни либо при инфицировании в прошлом. При наличии иммуноглобулинов к гепатиту С требуется дополнительное исследование ПЦР.
Антитела к ядерным структурам (анти-HCVcoreIgM) патогенного объекта. Маркеры этого типа обнаруживаются сразу же после заражения или в моменты острого протекания заболевания: при снижении иммунитета, при обострении хронической формы. Во время ремиссии антитела практически никогда не встречаются.
Антитела к структурным белковым соединениям возбудителя (анти-HCV total). Этот показатель — общее количество иммуноглобулинов G и М — очень важен в определении стадии заболевания и позволяет сделать вывод уже спустя 1-1,5 месяца после проникновения возбудителя в организм. Положительный маркер позволяет говорить о перенесенном заболевании или ее хроническом характере, потому как антитела сохраняются на всю жизнь.
Антитела к неструктурным белкам возбудителя (анти-HCVNS). Этот маркер указывает на наличие одного или сразу нескольких антител из трех: NS3, NS4, NS5. NS3 — маркер, который обнаруживается в самом начале заболевания и выступает в роли индикатора инфицирования. Если количество антител продолжает оставаться большим на протяжении долгого времени, можно сделать вывод о приобретении хронического характера заболевания.Другие же два вида маркеров характерны для поздней стадии гепатита. NS4 отражает степень поражения органа, а NS5 — показатель перехода гепатита в хроническую форму. Как только их количество начинается снижается, можно прогнозировать ремиссию.

Существует еще один маркер — HCV-RNA, который можно выявить только с применением высокочувствительных тестов. Суть исследования заключается в поиске генетического кода возбудителя в крови человека. Достоинство этого метода диагностики в возможности выявить заболевание еще на доклинической фазе, когда антитела отсутствуют.

Время появления

Разные виды антител появляются спустя разное время после попадания в организм возбудителя. Благодаря этим особенностям можно выявить заболевание на начальных этапах, определить стадию гепатита, форму (острую или хроническую), а также уровень активности вируса.

Раньше всего можно обнаружить иммуноглобулины М: уже в первые 6 недель после попадания вируса в организм. Как только их число начинает снижаться, можно говорить об окончании острой фазы и переходе гепатита в хроническую форму.
Антитела к суммарным иммуноглобулинам могут быть обнаружены на втором месяце инфицирования
Спустя 3 месяца после заражения обнаруживаются иммуноглобулины G. Наличие антител этого типа в крови говорит о переходе гепатита в хроническую фазу.
Маркеры к неструктурным белкам выявляются в разное время: NS3 обычно обнаруживается в первые 2-3 месяца после заражения, а NS4 и NS5 — на более поздних стадиях заболевания.

Способы определения

Фото В настоящее время для диагностики гепатитов применяются две группы методов:

Серологический метод, или иммуноферментный анализ (ИФА).
Молекулярно-биологический.

Каждый из этих методов может применяться и для скрининга, и для подтверждения диагноза, и рассматриваться в рамках пролонгированного мониторинга пациента, вылечившегося от гепатита С.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Данный метод эффективен на ранних стадиях заболевания, когда никаких внешних признаков гепатита не обнаружено. Для исследования требуется антиген — вирус гепатита С — и кровь пациента. На лабораторном стекле антиген и биологический материал смешиваются, после чего специалист изучает раствор под микроскопом с целью выявления антител к HCV.

СПРАВКА! ИФА позволяет не только выявить наличие антител, но и по типу обнаруженных маркеров сделать вывод о стадии и форме протекания гепатита С.

По результатам одного только ИФА нельзя ставить диагноз. Обычно обнаружение маркеров является сигналом для дополнительной диагностики при помощи метода ПЦР или повторного ИФА.

По словам специалистов, точность данного метода достигает 95%. Однако с помощью иммуноферментного анализа невозможно выявить наличие самого вируса, а присутствие в крови антител может свидетельствовать о уже перенесенном гепатите С или другом заболевании (например, аутоиммунном). И если говорить о вероятности обнаружения антител в 95%, то у 40% из них сам вирус может быть не обнаружен. Поэтому ИФА недостаточно, чтобы диагностировать гепатит С, и в любом случае требуется дополнительное исследование — с помощью метода RIBA.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Наиболее информативным и точным методом диагностики, по которому уже можно судить о наличии гепатита С, является ПЦР. Отличие этого метода в том, что с его помощью обнаруживают не антитела к вирусу, а сам вирус, точнее — его РНК.

Так, если при помощи ИФА можно только сказать, что инфицирование есть или имело место быть, но ПЦР позволяет определить активность вируса, прогнозировать исход заболевания.<

Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью метода ПЦР возможно уже через 1-2 недели после заражения, поэтому данный метод считается более достоверным.

Несмотря на высокую точность метода, его тоже нельзя считать основанием для постановки диагноза.

ВНИМАНИЕ! По рекомендациям ВОЗ постановка диагноза возможна только в том случае, если вирус в крови человека был обнаружен трижды.

В остальном метод ПЦР применяется с разными целями:

В качестве подтверждения или опровержения результатов ИФА;
Для отделения гепатита С от других форм гепатита;
Для выявления острой стадии гепатита С;
Для разделения инфицирования новорожденных от серопозитивных по вирусу гепатита С матерей;
Для отслеживания эффективности терапии.

Расшифровка результатов

Фото 4 Если говорить об иммуноферментном анализе, там может быть только два результата: положительный или отрицательный. В первом случае говорят, что антитела к вирусу гепатита С обнаружены, во втором — нет. Ни один, ни другой результат не могут считаться истинными, пока не будет проведено несколько анализов либо исследований разными методами.

В исключительных случаях требуется количественное обозначение результатов: тогда наличие антител выражается в цифрах или нескольких знаках “+” или “–”.

Метод ПЦР также может выражать количественные или качественные показатели. Количественный анализ позволяет сделать вывод об интенсивности развития заболевания, эффективности лечения или, напротив, развитии резистентности к противовирусным препаратам.

СПРАВКА! Количественное определение РНК вируса позволяет сделать прогноз об эффективности лечения интерфероном-альфа.

Так, в зависимости от количества вирусных частиц, выделяют низкий (от 102 до 104), средний (от 105 до 107) и высокий (свыше 108) уровень концентрации в организме.

Качественное обозначение результатов ПЦР-исследование также выражается в знаках “+” и “–” и означает, что вирус либо присутствует, либо отсутствует.

Почему антитела в крови есть, а вируса нет?

Ситуация, при которой антитела обнаружены, а вируса гепатита С нет, называется ложноположительный результат. Это основная причина, которая не позволяет ставить диагноз на основе только данных ИФА. Ложноположительный результат нередко встречается у беременных, при аутоиммунных заболеваниях, при проведении анти-ВИЧ-терапии и других заболеваниях.

Еще одно возможное объяснение — это уже вылеченное заболевание. То есть, по сути, гепатит С в течение некоторого времени протекал бессимптомно или был принят за другое заболевание (иногда — обычное ОРЗ), но иммунитет сам смог побороть вирус гепатита С. Наличие антител G в крови говорит о том, что иммунитет уже сталкивался с вирусом, но если результаты ПЦР-теста отрицательные, беспокоиться не о чем.

При обнаружении специфических антител в крови человека необходимо сдавать повторный анализ через 2-3 недели. После этого может потребоваться проведение иных клинических, инструментальных, серологических и биохимических исследований.

Полезное видео

Также рекомендуем посмотреть видео, в котором рассказывается о диагностике гепатита С:

Заключение

Анализ на выявление антител к гепатиту С — показательный, но не ключевой метод диагностики. Нередко положительный результат ИФА шокирует беременных женщин или тех, у кого никогда не было подозрения на гепатит С. На основании одного только ИФА или ПЦР нельзя ставить диагноз: требуются дополнительные методы исследования, в том числе — биопсия и УЗИ печени, повторные серологические или биохимические анализы, которые уже могут стать поводом для диагностирования гепатита С. В настоящее время наиболее точным и информативным считается метод ПЦР.

Источник

В ответ на внедрение чужеродного агента иммунная система человека вырабатывает иммуноглобулины (Ig). Эти специфические вещества предназначены для связывания с чужеродным агентом и его обезвреживания. Определение противовирусных антител имеет большое значение для диагностики при хроническом вирусном гепатите С (ХВГС).

Содержание
Как выявить антитела?
Суммарные антитела к гепатиту С
Расшифровка анализа на антитела к гепатиту С
ПЦР: обнаружение антигенов гепатита С
Носитель антител к вирусу гепатита С
После лечения гепатита С антитела остаются

Как выявить антитела?

Антитела к вирусу в крови человека выявляет метод ИФА (иммуноферментный анализ). Эта методика основана на реакции между антигеном (вирусом) и иммуноглобулинами (antiHVC). Суть метода состоит в том, что в специальные планшеты вносят чистые вирусные антигены, антитела к которому ищут в крови. Затем в каждую лунку добавляют кровь больного. Если в ней есть антитела к вирусу гепатита С определенного генотипа, в лунках происходит образование иммунных комплексов «антиген-антитело».

Спустя некоторое количество времени в лунки добавляют специальное красящее вещество, которое вступает в цветную ферментную реакцию с иммунным комплексом. По плотности окраски проводят количественное определение титра антител. Метод имеет высокую чувствительность – до 90%.

К преимуществам метода ИФА можно отнести:

высокую чувствительность;
простоту и быстроту проведения анализа;
возможность проведения исследования при малом количестве биологического материала;
невысокую себестоимость;
возможность ранней диагностики;
пригодность для скрининга большого количества людей;
возможность отслеживать показатели в динамике.

Единственным недостатком ИФА является то, что он определяет не сам возбудитель, а лишь реакцию иммунной системы на него. Поэтому при всех преимуществах метода для постановки диагноза ХВГС его недостаточно: требуется проведение дополнительных анализов, выявляющих генетический материал возбудителя.

Суммарные антитела к гепатиту С

Современная диагностика с помощью метода ИФА позволяет обнаружить в крови пациента как отдельные фракции антител (IgM и IgG), так и их общее количество — antiHVC total. Эти иммуноглобулины с диагностической точки зрения являются маркерами ХВГС. Что означает их обнаружение? Иммуноглобулины класса М определяются при остром процессе. Они могут выявляться уже спустя 4-6 недель после заражения. G-иммуноглобулины являются признаком хронизации процесса. Их можно обнаружить в крови спустя 11-12 недель после инфицирования, а после лечения они могут сохраняться до 8 и более лет. При этом их титр постепенно снижается.

Бывают случаи, когда у здорового человека при проведении ИФА на antiHVC total обнаруживают противовирусные антитела. Это может быть как признаком хронической патологии, так и следствием самопроизвольного излечения пациента. Такие сомнения не позволяют врачу установить диагноз ХВГС, руководствуясь только ИФА.

Различают антитела к структурным (ядерным, core) и неструктурным (nonstructural, NS) белкам вируса. Целью их количественного определения является установление:

активности вируса;
вирусной нагрузки;
вероятности хронизации процесса;
степени повреждения печени.

AntiHVC core IgG – это антитела, которые появляются при хронизации процесса, поэтому для определения острой фазы ХВГС не используются. Своей максимальной концентрации эти иммуноглобулины достигают к пятому-шестому месяцу болезни, а у длительно болеющих и не получающих лечения пациентов они определяются в течение всей жизни.

AntiHVC IgМ являются антителами острого периода и говорят об уровне виремии. Их концентрация нарастает в течение первых 4-6 недель болезни, а после перехода процесса в хронический – уменьшается вплоть до исчезновения. Повторно в крови больного иммуноглобулины класса М могут появляться при обострении заболевания.

Антитела к неструктурным белкам (AntiHVC NS) выявляются в разные сроки болезни. Диагностически значимыми из них являются NS3, NS4 и NS5. AntiHVC NS3 – самые ранние антитела к вирусу ХВГС. Они являются маркерами острого периода болезни. По титру (количеству) этих антител определяют вирусную нагрузку на организм пациента.

AntiHVC NS4 и NS5 – антитела хронической фазы. Считается, что их появление связано с поражением ткани печени. Высокий титр AntiHVC NS5 указывает на наличие в крови вирусной РНК, а его постепенное снижение – на начало фазы ремиссии. Эти антитела длительное время после выздоровления присутствуют в организме.

Расшифровка анализа на антитела к гепатиту С

В зависимости от клинической симптоматики и результатов анализа на РНК вируса гепатита С данные, полученные после ИФА, могут трактоваться по-разному:

положительные результаты на AntiHVC IgМ, AntiHVC IgG и вирусную РНК говорят об остром процессе или об обострении хронического;
если в крови обнаружены только антитела класса G без генов вируса, это указывает на перенесенное, но излеченное заболевание. При этом РНК вируса в крови нет;
отсутствие в крови и AntiHVC и РНК вируса считается нормой, или отрицательным анализом на антитела.

Если выявлены специфические антитела, а самого вируса в крови нет, это не означает, что человек болен, но и не отрицает этого. Такой анализ считается сомнительным и требует повторного исследования через 2-3 недели. Таким образом, если в крови найдены иммуноглобулины к вирусу ХВГС, необходима комплексная диагностика: клинические, инструментальные, серологические и биохимические исследования.

Для постановки диагноза важен не только положительный ИФА, что означает наличие вируса в крови в настоящее время или ранее, но и обнаружение вирусного генетического материала.

ПЦР: обнаружение антигенов гепатита С

Вирусный антиген, а точнее его РНК, определяют методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Этот метод, наряду с ИФА, является одним из ключевых лабораторных анализов, позволяющих врачу поставить диагноз ХВГС. Назначается он тогда, когда получен положительный результат анализа на антитела.

Анализ на антитела является более дешевым, чем ПЦР, поэтому именно он используется для скрининга некоторых категорий населения (беременных, доноров, медиков, детей из группы риска). Вместе с исследованием на гепатит С чаще всего проводят и определение австралийского антигена (гепатит В).

Носитель антител к вирусу гепатита С

Если методом ИФА в крови пациента обнаружены AntiHVC к вирусу, но никаких клинических признаков гепатита С при этом нет, это может быть трактовано, как носительство возбудителя. Вирусоноситель может сам не болеть, но при этом активно заражать контактирующих с ним людей, например, через кровь носителя. В таком случае нужна дифференциальная диагностика: расширенный анализ антител и проведение ПЦР. Если анализ ПЦР окажется отрицательным, человек, возможно, перенес заболевание латентно, то есть бессимптомно, и самостоятельно излечился. При положительном ПЦР вероятность носительства очень высока. Как быть, если антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный?

Важно правильно трактовать анализы не только для постановки диагноза ХВГС, но и для контроля эффективности его лечения:

если на фоне проводимого лечения антитела к гепатиту С не пропадают, это указывает на его неэффективность;
если после противовирусной терапии вновь выявлены AntiHVC IgМ, это означает, что процесс снова активировался.

В любом случае, если по результатам анализов РНК вирус не обнаружен, но антитела к нему обнаружены, следует провести повторное обследование, чтобы убедиться в точности результата.

После лечения гепатита С антитела остаются

Остаются ли антитела в крови после курса лечения и почему? После эффективной противовирусной терапии в норме могут выявляться только IgG. Время их циркуляции в организме переболевшего человека может составлять несколько лет. Главным признаком излеченного ХВГС является постепенное уменьшение титра IgG при отсутствии вирусной РНК и IgМ. Если пациент вылечил гепатит С уже давно, а суммарные антитела у него остались, нужно провести идентификацию антител: остаточные титры IgG – это норма, а вот IgМ – это неблагоприятный признак.

Не стоит также забывать, что бывают ложные результаты анализов на антитела: как положительные, так и отрицательные. Так, например, если в крови есть РНК вируса (качественной или количественной ПЦР), а антител к нему нет, это можно трактовать как ложноотрицательный или сомнительный анализ.

Причин появления ложных результатов несколько:

аутоиммунные заболевания;
доброкачественные и злокачественные опухоли в организме;
тяжелые инфекционные процессы; после прививки (от гепатитов А и В, гриппа, столбняка);
лечение интерфероном-альфа или иммунодепрессантами;
значительное повышение печеночных показателей (АСТ, АЛТ);
беременность;
неправильная подготовка к сдаче анализа (прием алкоголя, употребление жирной пищи накануне).

При беременности процент ложных анализов достигает 10-15%, что связано со значительным изменением реактивности организма женщины и физиологическим угнетением ее иммунной системы. Нельзя игнорировать также человеческий фактор и нарушение условий проведения анализа. Анализы проводятся «инвитро», то есть вне живых организмов, поэтому лабораторные ошибки имеют место быть. К индивидуальным особенностям организма, которые могут влиять на результаты исследования, относятся гипер- или гипореактивность организма.

Анализ на антитела, несмотря на все свои преимущества, не является 100%-ным поводом для постановки диагноза. Риск ошибок есть всегда, поэтому, чтобы избежать возможных ошибок, нужно комплексное обследование пациента.

Источник