Пцр гепатит с как сдавать на тощак
Гепатит С переходит из острой фазы в хроническую в 80% случаев. Репликация болезнетворных вирусов в функциональных клетках печени ведет к дисфункции органа. Это обусловлено тем, что паренхиматозная ткань заменяется соединительной. В результате анамнез больного дополняется кровотечениями в ЖКТ, интоксикацией организма, проблемами со свертываемостью крови. Поэтому чем раньше будут диагностированы патологические изменения, тем больше у пациента шансов на выздоровление. Анализ ПЦР на гепатит С считается наиболее точным методом исследования.
Этот диагностический метод разрешено проводить спустя несколько дней после заражения. Полимеразная цепная реакция позволяет достоверно определить генотип и концентрацию вируса в крови. Чтобы сделать анализ, у пациента берут биологический материал, в котором может присутствовать РНК возбудителя.
ПЦР на гепатит С осуществляют в три этапа:
- Качественный анализ – с его помощью определяют генетический материал возбудителя.
- Количественное исследование – таким образом выявляют вирусную нагрузку.
- Генотипирование – на этой стадии врач узнает разновидность заболевания.
Методику разработали около 30 лет назад. Ее применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний. ПЦР позволяет обнаружить уникальный генетический материал. Для этого используют праймеры. Так называют короткие нити РНК, которые присоединяют к началу гена.
Анализ ПЦР
В результате количество фрагментов болезнетворного вируса многократно увеличивается. Каждая фаза требует особого температурного режима и определенного промежутка времени. Молекула ДНК формируется в течение 3 минут. Амплификация включает в себя около 30 циклов. ПЦР делают в лаборатории посредством специального оборудования.
Показания к назначению
Сдача анализа ПЦР может быть обусловлена наличием клинических симптомов гепатита С. Процедура показана людям, которые:
- контактировали с инфицированным человеком;
- страдают от острых и хронических заболеваний печени;
- проходят лечение от патологических изменений в паренхиматозной ткани;
- входят в группу риска;
- являются донорами крови и ее компонентов.
ПЦР осуществляют не только при гепатите С. Анализ используют в медицине, биологии, криминалистике. Определение специфических показателей – этап, необходимый для подбора лекарственной схемы.
Преимущества анализа
В схему диагностического обследования включают иммунофлуоресцентный анализ и ПЦР. С помощью первого можно определить концентрацию иммуноглобулинов. Эти вещества вырабатываются защитным механизмом после проникновения болезнетворных вирусов в организм. В отличие от ПЦР ИФА не обладает эффективностью во время инкубационного периода. С помощью полимеразной цепной реакции гепатит С можно выявить в первые 7 дней после инфицирования.
Данное клиническое исследование обладает следующими характеристиками:
- Минимальная вероятность ложного результата.
- Высокая эффективность.
- Специфичность.
- Чувствительность.
- Универсальность.
- Автоматизация процесса.
- Безопасность.
- Скорость получения показателей.
Единственным минусом ПЦР является ее техническая сложность. Это связано с тем, что врачу необходимо подобрать правильный состав нуклеотидов, в функциях которых синтез ДНК. Из-за повышенной чувствительности метода возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результатов.
Чтобы добиться точности значимых показателей, биологический материал тщательно очищают от медикаментозных препаратов и белковых соединений. Для подтверждения результата требуется сравнение ранее проверенных образцов. К факторам, провоцирующим ошибку, причисляют:
Нарушение техники забора анализа
- Нарушение техники забора анализа.
- Изменения в последовательности фрагментов РНК.
- Совпадение синтезируемых нуклеотидов и генов болезнетворных вирусов.
Вероятность получения ложного результата при гепатите С присутствует из-за невозможности определения генетической основы заболевания. ПЦР-диагностика позволяет напрямую выявить возбудителя. С помощью амплификации ДНК происходит обнаружение болезнетворных микроорганизмов в продуктах питания, воде и почве.
Ограничения, касающиеся данного метода, не уменьшают его эффективности и популярности. Клиническое исследование проводят регулярно. Таким образом врач может оценить эффективность принятых лечебных мер. Необходимость в этом возникает из-за того, что вирус гепатита С способен мутировать. Отсутствие положительного эффекта означает адаптацию вируса к применяемым лекарственным средствам.
Подготовка к сдаче
Для того чтобы провести полимеразную цепную реакцию у больного, страдающего от гепатита С, берут венозную кровь. Обычно для изучения требуется две порции биологического материала. Посредством одной делается непосредственно ПЦР, а другую направляют на иммуноферментный анализ.
Кровь для анализа ПЦР берут из вены
Подготовка имеет большое значение. Пациент сдает кровь на ПЦР утром на голодный желудок. За несколько дней до процедуры придется отказаться от вредных продуктов питания, спиртных напитков, никотина и наркотиков. Больному следует избегать половых контактов, чрезмерной физической и эмоциональной нагрузки. Бассейн и спортзал оказываются под запретом. Подготавливаться придется в любом случае.
Существуют особые указания относительно медикаментозных препаратов. Это касается антибиотиков и антидепрессантов. Женщины, у которых начались менструации, должны отсрочить сдачу анализа на гепатит С. Кольпоскопия также является поводом для отказа от процедуры.
Перечисленные правила довольно просты. Благодаря им, можно добиться максимальной достоверности данного диагностического метода. Расшифровывать результаты должен специалист. Самостоятельно интерпретировать их у пациента вряд ли получится.
Процесс сдачи анализа
ПЦР-диагностику осуществляют следующим образом:
Кровь помещают в термостат
- Сначала забирают биологический материал. Кровь помещают в простерилизованные приспособления. Необходимый объем не превышает 1-1,5 мл. Держать кровь и ее компоненты следует не дольше 24 часов. Температура хранения не должна превышать 4 градусов по Цельсию.
- После начинают клиническое исследование. Подготовленную кровь помещают в термостат вместе с амплификационной смесью. Обычно требуется не более 25 мл специального состава. Амплификация проводится в автоматическом режиме на протяжении нескольких часов.
- Параллельно делают контрольные анализы. Для этого используют биологические материалы, взятые у здорового человека. Это поможет избежать ложных результатов.
- Расшифровка и регистрация показателей. Генетический материал обнаруживают с помощью бромистого этидия. Благодаря специфическому воздействию, фрагменты ДНК высвечиваются. Наличие (отсутствие) вируса выявляют ориентируясь на данные таблицы.
Расшифровка результатов
Определить значение полученных показателей может только инфекционист и гепатолог. Анализ ПЦР вводят диагностический комплекс вместе с биохимическим исследованием крови, УЗИ, ИФА и биопсией. Диагноз ставят на основании всех результатов. Порядок расшифровки анализов зависит от этапа диагностического обследования.
Ультразвуковая диагностика
На первой стадии ПЦР положительным результатом теста считается обнаружение фрагментов ДНК болезнетворного вируса. При проведении количественного анализа определяют уровень вирусной нагрузки. Она может быть низкой (менее 8*10^5 МЕ/мл), средней (от 8*10^5 МЕ/мл), высокой (больше 2,4*10^7 МЕ/мл). Нормой (отрицательным результатом) считается отсутствие специфических антител и частиц вирусной РНК. На этапе генотипирования об инфекционном заражении свидетельствует РНК определенного генотипа.
При получении положительного результата больному назначают эффективную терапевтическую схему. При этом обязательно учитывают информацию о наличии вируса в крови, степени его активности и генотипе. Цена процедуры зависит от методики тестирования, вида биологического материала. К общей стоимости могут быть добавлены затраты за забор крови или других жидкостей. Последнее обусловлено тем, что возбудителя часто обнаруживают в урине, каловых массах и сперме.
Источник
Гепатит С – заболевание, которое долгое время протекает без видимых признаков, а на поздней стадии приводит к тяжелым, нередко необратимым последствиям. Чтобы подтвердить или опровергнуть присутствие вируса в организме, назначают различные виды анализов – ПЦР, ИФА, а также иные исследования. Все их объединяет биологический материал – венозная кровь. Не существует строгих правил подготовки к анализу на гепатит С, но есть общие рекомендации, которых следует придерживаться, чтобы получить предельно достоверный результат.
Правила подготовки за 3-5 дней
К анализу на гепатит С готовятся поэтапно в течение нескольких суток. В этот промежуток желательно исключить факторы, которые могут повлиять на физиологическое состояние, а также биохимические, гормональные и гематологические показатели.
Питание
Сдача крови на гепатит С обычно проводится в период с 8 до 11 утра натощак. Время выбрано для того, чтобы между процедурой и последним приемом пищи прошло не меньше 8 и не больше 14 часов.
Если человек принимает пищу в этот промежуток, результаты исследования будут искажены:
- продукты с содержанием сахаров вызывают колебание глюкозы;
- жирная пища провоцирует изменение мутности проб крови, повышает холестерин, калий, щелочную фосфатазу и триацилглицериды;
- томаты, бананы, орехи повышают показатели серотонина;
- кофе и чай вызывают скачок кортизола, изменение показателей эритроцитов и лейкоцитов, глюкозы.
Если период голода продолжается более 14 часов, анализы дадут результат, который невозможно будет сопоставить со значением нормы.
За сутки до исследования нужно отказаться от жирной и чрезмерно сладкой пищи.
Питание должно соответствовать обычному режиму. Для ужина накануне сдачи подойдет нежирный творог, диетическое мясо птицы, каши на воде, яблоки, макароны из твердых сортов пшеницы, яйца, хлеб, нежирная рыба, суп на легком овощном бульоне.
Ограничения не касаются чистой питьевой воды. Ее можно употреблять в привычном режиме.
Ограничение физической активности
Накануне анализа крови на гепатит С рекомендуется отказаться от физических перегрузок (в том числе, от секса), поскольку это вызывает гормональные и биохимические перестройки в организме. Активные нагрузки влияют на следующие показатели:
- ферменты (креатинфосфокиназа, альдолаза, аспартатаминотрансфераза, лактатдегидрогеназа);
- гормоны (тестостерон, лютеинизирующий гормон, андростендион).
За сутки до исследования на гепатит желательно отказаться от посещения бассейна и тренажерного зала.
Алкоголь
За 3-5 дней до анализа надо исключить алкоголь. Он оказывает следующее влияние на показатели крови:
- снижает концентрацию эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов;
- повышает вязкость крови и скорость оседания эритроцитов;
- угнетает функцию печени и поджелудочной железы, за счет чего уровень сахара в лабораторных показателях снижается;
- повышает образование молочной и уксусной кислоты;
- повышает содержание азотистых веществ из-за усиленного распада белка;
- вызывает сгущение крови и повышает ее свертываемость;
- понижает концентрацию антител, создает картину, которая соответствует вирусному гепатиту и прочим инфекциям, аллергии, злокачественным опухолям, может вызвать ложноположительный результат;
- снижает выработку гормонов щитовидной железы (Т3 и Т4) и надпочечников (кортизол, альдостерон, андрогенный гормон ДЭА, норадреналин).
Медикаменты
Прием лекарств – самый надежный способ исказить результаты анализа на гепатит и прочих лабораторных показателей. Препараты оказывают физико-химическое и фармакологическое влияние.
Физико-химическое, или прямое, влияние выражается в том, что действующие вещества вмешиваются в сам ход анализа. Например, тетрациклин, хинидин и другие препараты обладают свойствами флюоресценции. Витамины А и В2 повышают оптическую плотность раствора и тем самым искажают показатели билирубина.
Биологическое, или опосредованное, влияние выражается в том, что лекарства связываются с белками, повышают или подавляют их синтез, оказывают побочное действие на разные органы и системы, вызывают токсический эффект при передозировке, а также накапливаются в тканях. Их прием накануне анализа может спровоцировать ложноположительные и ложноотрицательные результаты. Такой эффект заметен при приеме седативных, снотворных, психотропных и других препаратов.
Лаборатории рекомендуют перед анализом прекратить прием лекарств и выждать примерно 4-5 периодов полувыведения препарата. В среднем перерыв составляет около 3 суток. После анализа прием препаратов возобновляется.
Если лекарства жизненно необходимы и их нельзя отменить, предупредите лечащего врача, чтобы тот учел погрешности, вносимые препаратом.
Что еще может повлиять на точность анализа
Биохимические свойства крови изменяются под действием самых разных факторов:
- Курение. Изменяет секрецию некоторых биологически активных веществ. Рекомендуется отказ минимум за 60 мин. до анализа.
- Инструментальные обследования, например, ректальные, биопсия, МРТ, УЗИ, рентген и т.д. Нужен недельный перерыв между процедурой и анализом.
- Тепловые процедуры. Требуется суточный перерыв перед сдачей крови на анализ на гепатит С и приемом бани или сауны.
- Менструации у женщин. Вызывают колебания гормональных показателей.
- Диета. Скудное питание провоцирует скачок билирубина. Рекомендуется есть в привычном режиме, но исключить жирную пищу.
Эмоциональное состояние оказывает непосредственное влияние на на показатели. При психологическом напряжении повышается уровень гормонов, альбумина, глюкозы, холестерина, фибриногена. Чтобы справиться с невольным волнением, стоит прийти в лабораторию за 10-20 минут до взятия проб и немного отдохнуть. Тогда влияние факторов стресса будет минимальным.
Особенности забора крови
Для анализа на гепатит С подходит только венозная кровь. Взятие материала из пальца не практикуется: если конечности холодные или отекшие либо в них нарушено кровообращение, результат будет недостоверным.
Лаборант проводит пункцию вены стерильной иглой в локтевом сгибе. Если это по каким-либо причинам невозможно, прокол делается в венах кистей рук или берется сосуд выше большого пальца руки. У детей забор может быть выполнен из яремной, лобной или височной вены. При наличии шрама или гематомы в точке забора выбирается другое место.
Анализ на гепатит может проходить как в лаборатории, так и дома. Чтобы сэкономить время или исключить фактор волнения, следует поинтересоваться, выполняет ли лаборатория выездные исследования, и по возможности сдать кровь дома.
Анализ крови на гепатит проводится натощак. Чистить зубы или воспользоваться жевательной резинкой лучше после диагностики, так как это провоцирует скачок сахара. Перед пункцией исключите резкие движения.
Перед непосредственной сдачей необходимо несколько минут посидеть, восстановить глубокое дыхание, успокоиться.
Повторный анализ на гепатит C следует сдать в тех же условиях, что и в предыдущий раз (та же лаборатория, аналогичное время, забор из той же вены). Если анализ сделан в разных лабораториях и с разной подготовкой, это не покажет результат в динамике.
Когда будут готовы результаты
На продолжительность исследования влияет не только методика, но и расположение лаборатории. Например, если образцы отправляются в соседний крупный город, где проводится исследование, то результат задержится. В среднем диагностика гепатита выполняется в следующие сроки:
- определение билирубина, АСТ, АЛТ, ГГТ – 1 день;
- ПЦР количественный и генотипирование – 1 день;
- антитела IgM к белкам вируса гепатита С – 2 дня;
- ПЦР в качественном формате, ультрачувствительный тест – 4 дня;
- иммуноблот рекомбинантный, антитела к вирусу гепатита С, IgG – 5 дней;
- ПЦР с количественным выявлением РНК вируса в режиме реального времени – 5 дней;
- выявление РНК гепатита С в плазме крови у пациентов с хронической инфекцией – 10 дней.
Если лаборатория находится не в клинике, где берется анализ, то результат исследования приходит с задержкой.
Источник
Кровь на гепатит С сдается для выявления генотипа, формы и стадии заболевания. При положительном результате исследования врачи определяют индивидуальную методику лечения, исходя из полученных данных.
Сдавали ли Вы когда-нибудь кровь на гепатит С?
ДаНет
Разберемся как правильно сдавать анализ на гепатит С и рассмотрим особенности забора крови.
Кому нужно сдавать анализ на гепатит С?
Анализ на гепатит С в обязательном порядке сдается:
- Людьми, входящими в группу риска. Из-за повышенного риска заражения кровь на гепатит С рекомендуется сдавать каждые полгода. В эту группу входят:
- лица без постоянного полового партнера;
- любители пирсинга и татуировок;
- наркозависимые и заключенные;
- люди, контактирующие с кровью на работе (медперсонал, сотрудники спасательных служб).
- Работниками пищевых производств и учреждений с массовым скоплением людей (тюрьмы, пансионаты, школы, детские дома и сады). Обратите внимание, что сдача крови на гепатит С – не обязательный пункт для получения медкнижки. Учитывают только прививки, но из-за отсутствия вакцины гепатит С считается исключением.
- Донорами. При гемотрансфузии или пересадке органа доноры проходят тщательную проверку на наличие опасных заболеваний.
- Беременными женщинами, встающими на учет у гинеколога. Ранняя диагностика позволяет уберечь будущего ребенка от заражения.
- При прямом контакте с зараженным. Массовые вспышки гепатита С, болезнь близкого человека или незащищенный половой контакт с носителем вируса увеличивают риск заражения. Анализы на наличие антител к вирусу дают положительный результат только через 14 суток после заражения (в отдельных случаях инкубационный период длится до полугода), поэтому исследование назначают повторно с разницей в 2-4 недели.
- При повреждении кожи чужим шприцем, бритвой или другим сомнительным предметом.
Помимо перечисленных ситуаций анализ назначают при повышении показателей, отвечающих за состояние печени, или при затяжном простудном заболевании, сопровождающейся патологической усталостью и другими признаками гепатита С.
Подготовка к сдаче анализа
Перед забором крови на гепатит С важно соблюдать ряд правил, обеспечивающих достоверность итоговых результатов:
- Откажитесь от курения за 1 час до сдачи крови. Никотин и смолы искажают состояние сосудов кровеносной системы, изменяя значения важных показателей (гемоглобин, лейкоциты, эозинофилы, моноциты).
- Перенесите любые медицинские процедуры, влияющие на результат анализа (МРТ, УЗИ, рентген). Проведение допускается не позднее, чем за 3 дня до сдачи крови.
- Убедитесь, что тепловые процедуры (баня, сауна) были проведены не позднее, чем за 1 день до исследования.
- Обязательно выждите 2 недели после проведения хирургического вмешательства.
Менструации – не причина для откладывания даты исследования, но из-за небольшого искажения некоторых показателей рекомендуется указать точную дату менструального цикла.
Диета
Результат лабораторного исследования напрямую зависит от употребляемых продуктов, режима питания и периодов голодания. Для точности результатов важно:
- Исключить голодовки. Скудное питание или полное отсутствие пищи вызывает скачок билирубина – важнейшего маркера вирусного гепатита С.
- Отказаться за 2-3 дня от жирной пищи, повышающей мутность плазмы крови. Возникшее искажение мешает определению оптической плотности взятого образца.
- Придерживаться правильного и полноценного питания. Исключение ряда блюд (жирное, копченое, жареное, острое) не должно сказаться на пищевой ценности рациона. Обратите внимание, что рекомендация по ограничению соли в блюдах не означает полный отказ. Такая перемена может стать стрессом для организма.
- Избегать бобовых, кислых ягод и фруктов. После такой еды происходит повышение уровня билирубина, искажающее полученные данные.
Физическая нагрузка
Искажение показателей крови происходит под воздействием физических нагрузок. Главная причина происходящих изменений – ускорение метаболических процессов. Как правило, значения нормализуются после прекращения физической активности, но ряд показателей остается завышенным в течение суток.
За день до исследования избегайте:
- активных тренировок в тренажерном зале;
- велосипедных прогулок и бега;
- занятий на коньках и лыжах.
Обратите внимание, что речь идет только об интенсивных нагрузках. Отказ от привычных занятий йогой или легкой гимнастикой может также исказить результат из-за непривычно низкой активности.
Алкоголь
Алкоголь, как и никотин, оказывает прямое воздействие на кровеносные сосуды, поэтому его необходимо исключить из рациона за день до сдачи крови. Из-за происходящих нарушений можно получить ошибочное заключение о сахарном диабете.
Обратите внимание, что под запрет попадают любые виды продукции, содержащие алкоголь: напитки, горячие и холодные блюда, выпечка.
Лекарства
Большинство препаратов влияет на показатели крови, поэтому за 1-2 недели до процедуры следует прекратить их прием. Исключение составляют жизненно необходимые лекарства, ставящие жизнь пациента под угрозу при отмене приема.
Обязательно проконсультируйтесь с врачом о возможности отмены препарата или возможном изменении дозировки.
Сдавать кровь натощак или нет?
Перед сдачей анализа важно понимать нужно ли его сдавать натощак или все-таки нет.
Из-за активации внутренних процессов при непосредственном приеме пищи и во время ее переваривании кровь сдается только натощак. Отсутствие еды в течение 8 часов позволяет нормализовать привычные ритмы и вернуть реальные показатели.
За день до исследования нужно поужинать легким блюдом, чтобы избежать тяжести. Непосредственно перед сдачей запрещается чистить зубы или использовать жевательную резинку. Сахара, содержащиеся в зубной пасте, искажают полученные данные, мешая диагностике. Из напитков разрешена только простая вода без газов.
Особенности забора крови
Волнение перед процедурой повышает уровень гормонов, поэтому перед непосредственным забором крови рекомендуется присесть и расслабиться на 10 минут, не меняя занятого положения. Если по каким-то причинам пациент поднялся, то ему следует посидеть еще 5 минут, чтобы вернуться в прежнее состояние покоя.
При определении гепатита С анализируют венозную кровь, взятую из локтевого сгиба, тыльной стороны ладони или сосуда, находящегося чуть выше большего пальца руки. У детей до года обычно используют яремную, лобную или височную вену. При любом повреждении вены (шрам, гематома) выбирают более здоровый аналог на другом месте.
Обратите внимание, что большинство лабораторий осуществляет выезд на дом. Это экономит время пациента и позволяет минимизировать стресс.
Сроки получения результатов зависят от формы организации клиники и наличия собственной лаборатории. В частных организациях ответ готов уже на следующий день, а в городских поликлиниках ожидание затягивается на неделю и более.
При положительном результате исследования на гепатит С необходимо пройти несколько повторных исследований, исключающих внешние факторы. Обследуйтесь только в одном учреждении. Это позволит избежать путаницы в результатах.
Источник
