Пцр гепатит с отрицательный почему диагноз остается

Пцр гепатит с отрицательный почему диагноз остается

Гепатит С отрицательно – запись, которую ожидает увидеть каждый человек, сдающий анализ на наличие вируса. Но коварство вирусного гепатита в том, что у пациентов с сильным иммунитетом после заражения может пройти длительное время, прежде чем анализ покажет наличие инфекции и появятся симптомы. Поэтому после получения отрицательного результата нельзя быть уверенным в полном здоровье, особенно если человек находится в группе риска по заражению. 

Какие бывают анализы на гепатит

Основные анализы крови – качественная и количественная ПЦР, выявляющие наличие частиц вирусов, их концентрацию и генотип. Данное исследование наиболее информативно для отслеживания стадии болезни и эффективности противовирусной терапии, что позволяет корректировать схему лечения. 

Иммуноферментное исследование, или ИФА, показывает количество иммуноглобулинов IgM и IgG, вырабатывающихся в организме после инфицирования. Часто при отрицательной полимеразной цепной реакции на гепатит в крови обнаруживаются антитела, свидетельствующие о выздоровлении или переходе инфекции в хроническую (вялотекущую) форму. 

Что значит отрицательный результат анализа на гепатит С

Иммуно-ферментный метод выявляет наличие иммуноглобулинов к вирусным частицам. По их виду и количеству можно определить давность заражения и стадию, на которой заболевание сейчас. Присутствие антител класса М свидетельствует о недавнем заражении и острой форме патологии. Через полгода после инфицирования и при переходе гепатита в хроническую форму обнаруживаются иммуноглобулины класса G.

Если иммунитет человека когда-либо контактировал с вирусом, результат будет положительным. Отрицательный ИФА на гепатит С регистрируется при отсутствии болезни и если иммунная система никогда не сталкивался с вирусом. Ложноотрицательный результат ИФА получают на ранних стадиях гепатита, пока иммуноглобулины не успели выработаться. Это период называют диагностическим (серологическим) окном и он длится не более 6 месяцев.

Исследование HCV RNA, или РНК вируса гепатита С, является высокоточным диагностическим методом. Полимеразная цепная реакция выявляет количество вирионов в 1 мл крови, а также их генотип. Эти данные очень важны, так как позволяют подобрать наиболее подходящие противовирусные препараты.

В расшифровке анализов крови на гепатит при отрицательном итоге будут указаны следующие данные: «не найдено» или «не обнаружено». Даже незначительное присутствие вирусных частиц – подтверждение заражения. 

Отрицательный качественный ПЦР на гепатит С не всегда свидетельствует об отсутствии патологии. Иногда исследование показывает ложноотрицательный результат, если:

  1. анализ проводился в первые дни после заражения;
  2. были совершены ошибки при заборе и хранении биоматериала;
  3. пациент проходил длительное лечение уколами Гепарина. 

Чтобы исключить инфекцию, проводится количественный подсчет вирусов в крови (вирусная нагрузка, или виремия).

Если анализ ПЦР на гепатит С отрицательный, то с вероятностью в 99% можно утверждать, что заболевание отсутствует. Человеку, не входящему в группу риска заражения, не стоит беспокоиться. Но если существует вероятность инфицирования, необходимо пройти более тщательное обследование через несколько недель.

Что делать с полученными данными

Отрицательный анализ на РНК вируса гепатита и вирусную нагрузку у человека, не имеющего симптомов поражения печени, не увлекающегося наркотическими веществами, не ведущего беспорядочной половой жизни, является нормой. Нет необходимости проводить повторное исследование. 

Но если существует вероятность заражения, человек близко контактировал с носителем инфекции, присутствуют признаки заболевания или обнаружены антитела, требуется повторное обследование через две недели, месяц и через полгода. 

Расшифровка анализов должна проводиться квалифицированным специалистом – гепатологом или инфекционистом. При этом важно учитывать референсные значения лаборатории, в которой проводилось исследование. Все диагностические центры используют различные реагенты, оборудование и анализаторы, что может сказаться на интерпретации результатов. Врач, расшифровывающий полученные данные, должен в первую очередь руководствоваться референсными значениями лаборатории, и только потом сравнивать их с общепринятыми стандартами. 

Почему ИФА положительный, а ПЦР отрицательный

Человек начинает паниковать, если ПЦР отрицательный, но есть антитела к гепатиту С. Но выявление иммуноглобулинов в плазме крови не повод отчаиваться. Наличие антител часто показатель того, что иммунитет человека когда-либо сталкивался с вирусом, но смог его побороть, болезнь не развилась или прошла в легкой форме. Даже если инфекция не распространилась, вырабатывается иммунная память. Она проявляется в виде постоянной циркуляции в крови антител, защищающих организм от заражения той же инфекцией. Иммуноглобулины могут сохраняться до 8-10 лет после болезни.

У переболевшего человека при отрицательном ПЦР на гепатит С обнаруживают антитела класса G, свидетельствующие о ранее перенесенной инфекции. Они могут годами присутствовать в организме. Если после трех последовательных ПЦР-исследований РНК не были обнаружены, врачи делают запись: «здоров, постинфекционный иммунитет». После выздоровления важно обследоваться дважды в год, чтобы своевременно отследить, если болезнь снова начнет развиваться. 

Читайте также:  Клинические исследования гепатита с в москве

Если обнаружены антитела класса М, но ПЦР отрицательный, это может свидетельствовать о раннем этапе развития болезни (первые 4-6 недель) и низкой вирусной нагрузке. Чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз, необходимо пройти повторное обследование. Если и вторая сдача анализа не выявила РНК вирусов, пациент считается здоровым. 

Другие причины положительного ИФА при негативном ПЦР:

  1. Наличие аутоиммунных заболеваний.
  2. Присутствие других инфекций в организме. 
  3. Недавно поставлена вакцина от гепатита Б, гриппа или столбняка.
  4. Наличие опухолевидных образований.
  5. Несоблюдение требований к взятию и транспортировке материала.

У беременных женщин часто регистрируются ложноположительные результаты из-за изменений гормонального фона, приводящими к модификации свойств крови и повышенному содержанию цитокинов. 

Если у женщины во время беременности впервые обнаружены антитела, ей необходимо пройти всестороннее обследование. После рождения ребенка уровень иммуноглобулинов снижается или они полностью исчезают из крови женщины. 

Источник

В настоящее время заражение HCV-инфекцией приобретает масштабы эпидемии. Если раньше заболевание считали проблемой определенных социально неблагополучных категорий населения (наркоманов, женщин и мужчин, предоставляющих/пользующихся сексуальными услугами), сейчас заразиться можно во время эстетических манипуляций, в кабинете у стоматолога и т.д. Поэтому ранняя диагностика вируса, включая анализ на антитела к гепатиту С, приобретает все большее клиническое значение.

Положительный анализ на гепатит С

Патология опасна скрытым течением. При одном из самых распространенных генотипов HCV – 1b заболевание быстро переходит в хроническую форму, не проявляя при этом специфических симптомов. Лишь у небольшой части пациентов возникает астенический синдром, непереносимость физических нагрузок, возможно периодическое повышение температуры до субфебрильных цифр. Часто подобные признаки списывают на переутомление или ОРВИ. 

Доктора нередко сталкиваются со случаями, когда положительные результаты анализов на вирус обнаруживаются в ходе профилактического скрининга (например, на этапе подготовки к беременности или постановке на учет в женской консультации, оформлении медицинских документов и т.д.). 

Современные технологии позволяют выявить гепатит Ц на ранних стадиях, через несколько недель после заражения. Это улучшает прогноз развития заболевания, предупреждает поражение тканей печени и внутренних органов. 

Специалисты рекомендуют регулярно проверяться на HCV. Сдать необходимые исследования можно либо по направлению от терапевта, либо в любой частной лаборатории. Одним из предлагаемых исследований является ИФА – иммуноферментный анализ, задача которого выявить специфические антитела (АТ) к вирусу гепатита С. Данный тест отличается высокой чувствительностью и служит основой для дальнейших диагностических мероприятий. 

Что такое антитела к гепатиту С в крови?

Чтобы разобраться в вопросе, что это значит, антитела к вирусу гепатита С, следует кратко остановиться на механизме формирования иммунного ответа. Это соединения белковой структуры, которые при проникновении патогена в организм вырабатываются на поверхности определенного вида лимфоцитов и попадают в системный кровоток. Основная функция антител состоит в связывании с вирусом, препятствуя проникновению в клетку и последующей репликации.

У человека обнаружены пять групп антител (их также именуют иммуноглобулинами – Ig):

  • тип А – вырабатываются вскоре после инфицирования и постепенно исчезают по мере устранения патогенной флоры (в результате иммунной активности или соответствующей терапии);
  • тип М – выделяются в острой фазе течения инфекции, обнаруживаются и при активизации хронического патологического процесса;
  • тип G – составляют более 70% от общей массы иммуноглобулинов человека, «отвечают» за формирование вторичного иммунного ответа;
  • тип D – выявлен сравнительно недавно, функции практически не изучены;
  • тип Е – выделяется при развитии аллергической реакции в ответ на попадание специфического раздражителя (аллергена).

Для диагностики гепатита C решающую роль играет наличие антител класса М и G. Положительный анализ методом ИФА не означает 100% диагноза гепатита C. Определение суммарных антител (М + G) – начальный этап диагностического процесса. В дальнейшем для подтверждения инфицирования проверяют наличие и фактический уровень РНК HCV методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). 

По результатам анализа ИФА доктор может определить, является ли человек носителем вируса, либо заболевание прогрессирует и требует немедленной терапии. Случаи самоизлечения и отсутствие поражений печени является результатом полноценной работы иммунной системы и активной выработки АТ, которые останавливают развитие вирусной инфекции. Именно в таком случае антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный. 

Подобную картину отмечают, если АТ обнаружены у ребенка. Обычно это происходит, если беременная женщина была инфицирована вирусом, либо получала соответствующую терапию до зачатия. При соблюдении необходимых мер профилактики и защиты от заражения, АТ исчезнут в 12–18 месяцев.

Виды антител

В клинической практике из всех разновидностей иммуноглобулинов у человека, значение имеют только два вида – IgM и IgG. Первые активно вырабатываются вскоре после проникновения патогена в клетки организма, вторые свидетельствуют о длительном, хроническом течении заболевания.

Читайте также:  Чем можно вылечить носительство гепатита с

Однако современные методы диагностики позволили расширить спектр определяемых ИФА антител:

Anti-HCV IgGПоложительный результат свидетельствует о хроническом течении заболевания, при отрицательном ПЦР возможно самоизлечение
Core-Ag HCVCore — часть структуры генома HCV. Появление АТ указывает на недавнее заражение и острое течение инфекции
Anti-HCV суммарный (total)Указывает на общий уровень АТ в организме человека. Позитивный результат сохраняется на протяжении всей жизни вне зависимости от ответа на лечение
Anti-HCVNS(3, 4, 5)Позволяет определить стадию и тяжесть патологии. АТ к NS3 выявляют сразу после заражения. АТ к NS4 указывает на тяжесть нарушений работы печени. АТ к NS 5 демонстрирует хроническое, упорное течение

Из перечисленных исследований на практике реально применяют только три: Anti-HCV IgG, Core Ag (антиген) и суммарный Anti-HCV. Последний анализ на антитела к структурным белкам финансово затратен, поэтому назначается только в критических случаях (например, необъяснимая резистентность к терапии, рецидив и т.д.).

Тест на гепатит С

Через какое время возможно выявление антител

Процесс выработки антител в значимых концентрациях в среднем занимает несколько недель. Однако в зависимости от того, какой обнаруживается маркер, возможно определение стадии и степени тяжести HCV-инфекции. 

Предполагаемые сроки выявления АТ представлена в таблице:

Тип серологического исследованияПриблизительное время определения методом ИФА
Общий Anti–HCVНа 4–6 неделе после инфицирования
Core-Ag HCVМожет определяться уже через несколько дней после заражения (при высокой чувствительности тест-систем). Однако подобная методика не получила распространения из-за высокой стоимости. Чаще проводится в комплексе с выявлением IgG к гепатиту С
Anti-HCV IgGНа 9–12 неделе после проникновения вируса в организм
Антитела к структурным белкамМожно выявить позже всех выделяющихся АТ

Тест, предполагающий выявление антител гепатита С, лучше проводить по назначению врача. В отличие от качественного ПЦР, в результатах которого указан однозначный вывод – обнаружен в организме HCV или нет, профессионально расшифровать данные серологического исследования может только специалист. 

В зависимости от того, когда появляются те или иные антитела, доктор подбирает оптимальную схему терапии. Резистентные и хронические формы патологии часто требуют не только применения комбинации современных противовирусных препаратов, но и дополнительного назначения Рибавирина и/или Интерферонов пролонгированного действия (ПЕГ-ИФН).

Анализ ПЦР и ИФА: этапы диагностирования вируса

В настоящее время существуют два основных метода выявления HCV-инфекции:

  • серологические анализы (ИФА) – выявление специфических антител к HCV (anti-hcv);
  • молекулярно-биологические исследования, обнаруживающие РНК вируса (качественная и количественная ПЦР, генотипирование).

Двойная диагностика исключает риск ложноположительной, как и ложноотрицательной реакции. При выявлении anti-hcv с помощью ИФА доктор рекомендует исследование ПЦР (сначала качественное, затем количественное). 

Но иногда результаты обследования являются противоречивыми, и ответ на вопрос, что значит, антитела к гепатиту С обнаружены, а ПЦР отрицательная, зависит от ряда факторов. 

Методика расшифровки результатов ПЦР и ИФА приведена в таблице.

Данные Anti-HCV и HCV РНКПредполагаемый диагноз
+/+Острая или хроническая фаза HCV (требует дополнительной диагностики)
+/-Острое течение HCV, когда произошло выделение АТ, но РНК вируса в крови не обнаруживается. Такие же результаты возможны в период после перенесенного острого гепатита С
-/+
  • Ранний период после заражения;
  • хронический гепатит C на фоне иммунодефицита;
  • ложноположительный результат ПЦР.
-/-Отсутствие гепатита С

Обнаружение антигенов гепатита

Первичная лабораторная диагностика HCV начинается с определения основного маркера инфицирования – антител к антигенам вируса гепатита С. Они начинают появляться практически сразу после заражения, но в терапевтически значимых концентрациях обнаруживаются спустя несколько недель. Наличие АТ свидетельствует о перенесенном или текущем вирусе (при положительном результате ПЦР).

Лечение гепатита

ИФА проводится при помощи высокочувствительных современных, но в то же время финансово доступных тест-систем 2 и 3 поколения. Подобные наборы реагентов основаны на захвате специфических к HCV антител рекомбинантными белками, а затем определении вторичных АТ против IgG или IgM. Эти антитела помечены ферментами, катализирующими проведение реакции. 

ИФА тест-системы II поколения помимо обнаружения основных АТ способны обнаружить антитела против эпитопов, полученных из участка core и неструктурных белков (NS3, NS4). Таким образом достигается высокая чувствительность исследования и низкая вероятность ложных результатов. При помощи таких тестов HCV можно обнаружить через 2,5 месяца после заражения. 

ИФА – системы III поколения разработаны на основе антигена структурного протеина NS5 и высокоиммуногенного эпитопа NS3. Подобная методика позволяет существенно сократить время от попадания вируса в организм до выработки антител. 

Читайте также:  Дезинфицирующие средства от вирусов гепатита

Обнаружение IgM недостаточно для выявления острого или хронического течения HCV, так как у некоторых пациентов при длительном течении заболевания регулярно вырабатываются IgM, но в то же время не все больные «отвечают» на острую форму заболевания выделением IgM. 

Вероятность ложноположительных результатов (впоследствии отмечают исчезновение АТ) возрастает при:

  • беременности;
  • аутоиммунных патологиях;
  • положительных ревмопробах и др.

Возможность ложноотрицательных результатов присутствует при:

  • регулярном проведении гемодиализа;
  • ВИЧ;
  • злокачественных поражениях системы кроветворения.

Считается, что при HCV-инфекции одного ИФА недостаточно, так как АТ появляются не сразу. Кроме того, всегда присутствует вероятность ложных результатов. Поэтому обязательным в диагностике гепатита С является дополнительное проведение качественной и количественной ПЦР. 

Носитель HCV

Некоторые гепатологи считают, что такого термина, как «носитель HCV» не существует, человек или болен гепатитом С, или нет. Иногда подобный диагноз ставят при выявлении в крови антител к HCV, но отрицательном результате ПЦР.

Подобная ситуация возможна в нескольких случаях:

  • пренатальный контакт с вирусом, АТ в крови ребенка сохраняются до 1,5–3 лет, затем отмечают, что они просто пропали;
  • перенесенная острая форма HCV, которая либо проходит без симптомов, либо протекает с вариабельной клинической картиной.

В любом случае эта проблема требует постоянного наблюдения врача. Обязательна ПЦР, ее повторяют регулярно (раз в несколько месяцев) и проведение других диагностических мероприятий. Также необходимо исключить состояния, повышающие риск ложноположительного результата ИФА.

Почему после лечения антитела остаются

При проведении контрольных анализов после окончания противовирусной терапии многих пациентов интересует вопрос, когда исчезают АТ и надолго остаются ли антитела после лечения гепатита С. Доктора предупреждают, что IgG могут циркулировать в крови несколько лет, однако их уровень должен постепенно снижаться. 

При проведении исследование методом ИФА на выявление суммарных антител, также возможен положительный результат. Но в таком случае требуется дифференцировать IgG и IgM. Обнаружение последних говорит в пользу рецидива заболевания и требует срочного начала дополнительного курса медикаментозного лечения оставшейся в организме инфекции. 

В норме после лечения гепатита С остаются IgG.

Медицинская лаборатория

Суммарные антитела

Анализ на суммарные антитела к вирусу гепатита С выявляет общее количество иммуноглобулинов без их дифференцировки – IgG + IgM. В бланках лабораторий такое исследование часто называют Anti-HCV Total. Отрицательный результат свидетельствует об отсутствии заболевания (за исключением отдельных случаев). Положительный результат требует дальнейшей диагностики.

Пациенту назначают:

  • ПЦР (сначала качественную, затем количественную);
  • дифференцированную серодиагностику (анализ для выявления титров IgG и IgM по отдельности);
  • ультразвуковое исследование печени;
  • печеночные пробы;
  • анализ на сопутствующие заболевания (ВИЧ, аутоиммунные патологии, расстройства кроветворения и иммунной функции).

Окончательный диагноз врач ставит только после получения всех результатов. Также обращают внимание на анамнез. Прохождение противовирусной терапии обязательно только после достоверного подтверждения наличия вируса в крови. 

Если суммарное определение АТ к HCV не укладывается в общепринятые нормы показано дальнейшее обследование. Начало лечения без дополнительных исследований противопоказано. 

Расшифровка результата анализа

Как правило, в бланке анализа на антитела к вирусу гепатита С приведены результаты и норма параметров. При некоторых типах исследований пишут титр АТ.

Данные анализаПредполагаемое состояние пациента
Anti-HCV суммарные положительные (с указанием титра)
  • наличие инфекции в острой или хронической форме;
  • остаточные явления после лечения;
  • рецидив;
  • «носительство» HCV (у детей до 3 лет);
  • ложноположительный результат.
Anti-HCV суммарные отрицательные
  • человек здоров;
  • ложноотрицательный результат.
Обнаружен IgM (с указанием титра), IgG отрицательныйНачало развития инфекции (недавнее заражение)
Выявление IgG (с указанием титра), IgM отрицательный
  • хроническое течение инфекции;
  • самоизлечение после перенесенной острой формы заболевания;
  • последствия противовирусного терапевтического курса (отмечается тенденция к снижению).
Выявлены и IgG и IgMРецидив хронического заболевания

Расшифровкой показателей ИФА должен заниматься только врач. Самолечение по результатам одного или нескольких исследований противопоказано. 

Пациенты из группы риска

Регулярно проводить серологическое исследование на выявление маркеров гепатита С необходимо определенной категории людей:

  • работникам медицинских учреждений;
  • с диагностированным ВИЧ;
  • при подготовке и в период беременности;
  • после полового акта с носителем вируса;
  • больным с онкологическими патологиями крови;
  • при неразборчивости в сексуальных контактах.

Также в категорию риска попадают люди, пристрастившиеся к инъекционным наркотическим препаратам, постоянно контактирующие с носителем вируса (например, муж/жена больны HCV). Но врачи-гепатологи обращают внимание пациентов на возможность ложных показателей исследования, что требует комплексной диагностики.

Источник