Пцр гепатит с после еды

Гепатит С переходит из острой фазы в хроническую в 80% случаев. Репликация болезнетворных вирусов в функциональных клетках печени ведет к дисфункции органа. Это обусловлено тем, что паренхиматозная ткань заменяется соединительной. В результате анамнез больного дополняется кровотечениями в ЖКТ, интоксикацией организма, проблемами со свертываемостью крови. Поэтому чем раньше будут диагностированы патологические изменения, тем больше у пациента шансов на выздоровление. Анализ ПЦР на гепатит С считается наиболее точным методом исследования.

Этот диагностический метод разрешено проводить спустя несколько дней после заражения. Полимеразная цепная реакция позволяет достоверно определить генотип и концентрацию вируса в крови. Чтобы сделать анализ, у пациента берут биологический материал, в котором может присутствовать РНК возбудителя.

ПЦР на гепатит С осуществляют в три этапа:

Качественный анализ – с его помощью определяют генетический материал возбудителя.
Количественное исследование – таким образом выявляют вирусную нагрузку.
Генотипирование – на этой стадии врач узнает разновидность заболевания.

Методику разработали около 30 лет назад. Ее применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний. ПЦР позволяет обнаружить уникальный генетический материал. Для этого используют праймеры. Так называют короткие нити РНК, которые присоединяют к началу гена.

Анализ ПЦР

В результате количество фрагментов болезнетворного вируса многократно увеличивается. Каждая фаза требует особого температурного режима и определенного промежутка времени. Молекула ДНК формируется в течение 3 минут. Амплификация включает в себя около 30 циклов. ПЦР делают в лаборатории посредством специального оборудования.

Показания к назначению

Сдача анализа ПЦР может быть обусловлена наличием клинических симптомов гепатита С. Процедура показана людям, которые:

контактировали с инфицированным человеком;
страдают от острых и хронических заболеваний печени;
проходят лечение от патологических изменений в паренхиматозной ткани;
входят в группу риска;
являются донорами крови и ее компонентов.

ПЦР осуществляют не только при гепатите С. Анализ используют в медицине, биологии, криминалистике. Определение специфических показателей – этап, необходимый для подбора лекарственной схемы.

Преимущества анализа

В схему диагностического обследования включают иммунофлуоресцентный анализ и ПЦР. С помощью первого можно определить концентрацию иммуноглобулинов. Эти вещества вырабатываются защитным механизмом после проникновения болезнетворных вирусов в организм. В отличие от ПЦР ИФА не обладает эффективностью во время инкубационного периода. С помощью полимеразной цепной реакции гепатит С можно выявить в первые 7 дней после инфицирования.

Данное клиническое исследование обладает следующими характеристиками:

Минимальная вероятность ложного результата.
Высокая эффективность.
Специфичность.
Чувствительность.
Универсальность.
Автоматизация процесса.
Безопасность.
Скорость получения показателей.

Единственным минусом ПЦР является ее техническая сложность. Это связано с тем, что врачу необходимо подобрать правильный состав нуклеотидов, в функциях которых синтез ДНК. Из-за повышенной чувствительности метода возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результатов.

Чтобы добиться точности значимых показателей, биологический материал тщательно очищают от медикаментозных препаратов и белковых соединений. Для подтверждения результата требуется сравнение ранее проверенных образцов. К факторам, провоцирующим ошибку, причисляют:

Нарушение техники забора анализа

Нарушение техники забора анализа.
Изменения в последовательности фрагментов РНК.
Совпадение синтезируемых нуклеотидов и генов болезнетворных вирусов.

Вероятность получения ложного результата при гепатите С присутствует из-за невозможности определения генетической основы заболевания. ПЦР-диагностика позволяет напрямую выявить возбудителя. С помощью амплификации ДНК происходит обнаружение болезнетворных микроорганизмов в продуктах питания, воде и почве.

Ограничения, касающиеся данного метода, не уменьшают его эффективности и популярности. Клиническое исследование проводят регулярно. Таким образом врач может оценить эффективность принятых лечебных мер. Необходимость в этом возникает из-за того, что вирус гепатита С способен мутировать. Отсутствие положительного эффекта означает адаптацию вируса к применяемым лекарственным средствам.

Подготовка к сдаче

Для того чтобы провести полимеразную цепную реакцию у больного, страдающего от гепатита С, берут венозную кровь. Обычно для изучения требуется две порции биологического материала. Посредством одной делается непосредственно ПЦР, а другую направляют на иммуноферментный анализ.

Кровь для анализа ПЦР берут из вены

Подготовка имеет большое значение. Пациент сдает кровь на ПЦР утром на голодный желудок. За несколько дней до процедуры придется отказаться от вредных продуктов питания, спиртных напитков, никотина и наркотиков. Больному следует избегать половых контактов, чрезмерной физической и эмоциональной нагрузки. Бассейн и спортзал оказываются под запретом. Подготавливаться придется в любом случае.

Существуют особые указания относительно медикаментозных препаратов. Это касается антибиотиков и антидепрессантов. Женщины, у которых начались менструации, должны отсрочить сдачу анализа на гепатит С. Кольпоскопия также является поводом для отказа от процедуры.

Перечисленные правила довольно просты. Благодаря им, можно добиться максимальной достоверности данного диагностического метода. Расшифровывать результаты должен специалист. Самостоятельно интерпретировать их у пациента вряд ли получится.

Процесс сдачи анализа

ПЦР-диагностику осуществляют следующим образом:

Кровь помещают в термостат

Сначала забирают биологический материал. Кровь помещают в простерилизованные приспособления. Необходимый объем не превышает 1-1,5 мл. Держать кровь и ее компоненты следует не дольше 24 часов. Температура хранения не должна превышать 4 градусов по Цельсию.
После начинают клиническое исследование. Подготовленную кровь помещают в термостат вместе с амплификационной смесью. Обычно требуется не более 25 мл специального состава. Амплификация проводится в автоматическом режиме на протяжении нескольких часов.
Параллельно делают контрольные анализы. Для этого используют биологические материалы, взятые у здорового человека. Это поможет избежать ложных результатов.
Расшифровка и регистрация показателей. Генетический материал обнаруживают с помощью бромистого этидия. Благодаря специфическому воздействию, фрагменты ДНК высвечиваются. Наличие (отсутствие) вируса выявляют ориентируясь на данные таблицы.

Расшифровка результатов

Определить значение полученных показателей может только инфекционист и гепатолог. Анализ ПЦР вводят диагностический комплекс вместе с биохимическим исследованием крови, УЗИ, ИФА и биопсией. Диагноз ставят на основании всех результатов. Порядок расшифровки анализов зависит от этапа диагностического обследования.

Ультразвуковая диагностика

На первой стадии ПЦР положительным результатом теста считается обнаружение фрагментов ДНК болезнетворного вируса. При проведении количественного анализа определяют уровень вирусной нагрузки. Она может быть низкой (менее 8*10^5 МЕ/мл), средней (от 8*10^5 МЕ/мл), высокой (больше 2,4*10^7 МЕ/мл). Нормой (отрицательным результатом) считается отсутствие специфических антител и частиц вирусной РНК. На этапе генотипирования об инфекционном заражении свидетельствует РНК определенного генотипа.

При получении положительного результата больному назначают эффективную терапевтическую схему. При этом обязательно учитывают информацию о наличии вируса в крови, степени его активности и генотипе. Цена процедуры зависит от методики тестирования, вида биологического материала. К общей стоимости могут быть добавлены затраты за забор крови или других жидкостей. Последнее обусловлено тем, что возбудителя часто обнаруживают в урине, каловых массах и сперме.

Источник

Диагноз гепатита С ставится на основе данных лабораторных исследований крови. От того, какие анализы на гепатит С сдаются, зависит, будет ли вовремя выявлено заболевание и назначено лечение. Эффективность лечебных мероприятий тоже оценивают по результатам анализов.

О гепатите С

Болезнь вызывает вирус гепатита С (HCV, hepatitis C virus). Этот РНК-содержащий вирус проникает в организм человека через кровь. Возможно инфицирование через вагинальную слизь, сперму, микротравмы слизистых оболочек.

Попадая в организм одним из этих путей, вирус поражает печень. Все вирусы являются внутриклеточными паразитами. И HCV – не исключение. Он размножается внутри печеночных клеток, гепатоцитов, из которых состоит печеночная ткань, паренхима.

После проникновения вируса в гепатоцит начинается многократное копирование с исходной материнской вирусной РНК новых дочерних РНК. Данный процесс называют репликацией. Затем вокруг образовавшихся РНК формируется капсула (капсид) и другие структурные элементы вирусной частицы (вириона).

Для репликации РНК и достройки вирионов требуются органические вещества. Вирус берет их у клетки. В конечном итоге гепатоцит не выдерживает такой нагрузки и погибает. Вышедшие из него вирусы проникают в новые гепатоциты.

Иммунная система, конечно, борется с HCV. И если у пациента крепкий иммунитет, вирус может быть уничтожен. Но это происходит редко. У большинства, несмотря на иммунное противоборство, вирусная активность сохраняется. Устойчивость вируса в немалой степени обусловлена его генетической изменчивостью. От набора генов, генотипа, закодированного в РНК вируса, в немалой степени зависит, как будет протекать болезнь, и насколько результативным будет лечение.

На фоне воспалительного процесса в паренхиме возрастает количество жировой ткани (стеатогепатоз). По мере гибели гепатоцитов паренхима замещается фиброзной тканью, и функции печени нарушаются. Крайняя степень фиброза, цирроз, сопровождается печеночной недостаточностью, вторичными изменениями других органов, расстройствами кровообращения и обмена веществ.

Поначалу незаметные для пациента, патологические изменения в печени формируются в течение долгих лет. Все это время вирус продолжает циркулировать в крови. Благодаря этому есть возможность сдать анализ на гепатит С.

Какие анализы нужно сдать на гепатит С

Показания к лабораторной диагностике – пищеварительные расстройства, тяжесть в правом подреберье, общая слабость, и другие признаки гепатита С. Тревогу должен вызвать тот факт, если этим симптомам предшествовали косметические и медицинские манипуляции. Болезнь не передается бытовым путем. Но если был интимный незащищенный контакт с инфицированным, анализ крови на гепатит С необходим. Лабораторная диагностика включает в себя несколько видов анализов:

Общий анализ крови

Он самый простой и наименее информативный. Неспецифические отклонения в общем анализе лишь косвенно свидетельствуют в пользу гепатита, и могут быть при других заболеваниях. Высокий уровень лейкоцитов (лейкоцитоз) вместе с ускоренным оседанием эритроцитов (СОЭ) – признак активного воспалительного процесса в печени. Повышение удельного веса лимфоцитов отмечается при вирусных инфекциях. А снижение уровня эритроцитов и гемоглобина возможно при угнетении кроветворной функции печени.

Биохимический анализ (биохимия)

Здесь важны два показателя – билирубин и трансаминазы. Билирубин – продукт естественного распада гемоглобина. В норме он обезвреживается печенью, и в составе желчи удаляется через кишечник. При поражении печени уровень билирубина повышается главным образом за счет свободной, не связанной с глукуроновой кислотой, фракции (непрямой билирубин). Хотя при хроническом течении гепатита С билирубин лишь слегка повышен или даже остается в пределах нормы.

Не менее важный показатель – трансаминазы (АСТ, АЛТ), внутриклеточные ферменты. При разрушении гепатоцитов они в большом количестве обнаруживаются в крови. Также в рамках биохимического анализа исследуют уровень и соотношение фракций белков, жиров (триглицеридов). В сравнении с общим анализом биохимия более информативна. Но по изменениям биохимических показателей нельзя судить, что у пациента именно гепатит С.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

А вот это уже специфический анализ крови на гепатит С. В рамках этого анализа обнаруживают антитела к вирусу. А если есть антитела, значит, есть и HCV. Антитела – это белки-иммуноглобулины, которые выделяются в ответ на антигены вируса гепатита С. Взаимодействие антигенов и антител приводит к образованию иммунных комплексов.

Чтобы реакция антиген-антитело была заметной для диагностики, используют антитела, меченные ферментами. Отсюда и название анализа. Практический интерес представляют иммуноглобулины класса М и G (IgM и IgG). В острой стадии гепатита С выделяются IgM. У большинства пациентов болезнь спустя несколько месяцев переходит в хроническую форму.

При этом IgM исчезают, и обнаруживаются IgG. Таким образом, ИФА позволяет не только диагностировать гепатит С., но и определить стадию заболевания. Но на основе ИФА нельзя судить о тяжести гепатита. Нельзя определить и генотип вируса. Ведь сам вирус не обнаруживается, а лишь антитела к нему.

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Анализ ПЦР на гепатит С – самый сложный, но самый достоверный. Суть его заключается в обнаружении РНК вируса в сыворотке крови пациента. Принцип ПЦР заключается в многократном воспроизведении или амплификации участков РНК вируса. Это напоминает естественную репликацию, но только в искусственных условиях с применением дорогостоящего оборудования.

В зависимости от целей проведения разработаны три разновидности анализа.

1. Классическая ПЦР. Качественный анализ на гепатит С. Здесь определяется сам факт наличия вируса. Обнаружена РНК HCV – человек болен, не обнаружена – здоров.

2. Количественная ПЦР. Здесь измеряют вирусную нагрузку – концентрацию вирусных частиц в объеме крови. Для этого проводят ПЦР в реальном времени, и определяют количество образовавшихся РНК копий. Вирусную нагрузку определяет в МЕ (международных единицах) в 1 мл сыворотки крови:

Низкая: менее 3 х 104 МЕ/мл
Средняя: 3 х 104-8 х 105 МЕ/мл
Высокая: более 8 х 105 МЕ/мл.

Нормы количественных показателей ПЦР зависят от используемого оборудования, и могут различаться в разных лабораториях. Но в любом случае, чем выше уровень вирусной нагрузки, тем тяжелее протекает заболевание, и тем больше риск фатальных осложнений.

3. Генотипирование. В данном исследовании с помощью ПЦР определяется генотип и подтип или квазитип HCV. В зависимости от этого назначается схема лечения. Анализ на генотип гепатита С проводится методом секвенирования, когда определяют последовательность нуклеотидов в цепи вирусной РНК.

Где сдать анализы на гепатит С?

Общий анализ, биохимию, и ИФА делают в любом лечебном учреждении. ПЦР возможна только в крупных лечебно-диагностических центрах, где есть соответствующее оборудование. С результатами диагностики можно ознакомиться спустя 3-5 дней.

Что делать, если анализ положительный

Если выявил анализ крови гепатит С, возможно два варианта. Первый вариант – обследуемое лицо действительно инфицировано вирусом. Второй вариант – ложноположительный результат связан с диагностическими ошибками. В большей степени это характерно для ИФА. В ходе выполнения этого анализа иногда развиваются перекрестные иммунные реакции, когда иммуноглобулины реагируют на другие антигены, сходные с антигенами HCV. Среди конкретных причин:

аутоиммунные заболевания
опухолевые процессы
туберкулез
недавняя вакцинация
простудные заболевания
глистные инвазии
беременность.

Ошибочный результат анализа на гепатит С может быть связан с неправильной подготовкой. Кровь для исследования сдается утром натощак. Последний прием пищи допускается не позднее, чем за 12 ч. до исследования. В течение последних нескольких дней следует воздержаться от приема алкоголя, переедания с употреблением жирной, жареной пищи с острыми приправами, пряностями.

Если результат анализа на гепатит С позитивный, необходима ПЦР. Если РНК вируса при ПЦР не обнаруживается, а ИФА показывает наличие антител, то, скорее всего, ответ ИФА ложноположительный.

Исключение составляют излечившиеся от гепатита С. У них нет вируса, следовательно, ПЦР не обнаружит РНК. Но выделившиеся во время болезни JgG могут еще долго циркулировать в крови. Достоверность ПЦР максимальна, 98-99%. Но не абсолютна – в 1-2% случаев возможны ошибки. Поэтому при подозрении на ложный ответ спустя 3-4 мес. нужно повторить ИФА и ПЦР.

Что делать, если результат отрицательный

Здесь тоже возможны варианты. Первый – обследуемый всегда был здоров. Второй – у пациента был гепатит С, но он полностью излечился, снова здоров, и в лечении не нуждается. Третий – имеется ложноотрицательный результат. В данном случае ложный анализ тоже может быть обусловлен сопутствующими заболеваниями, неправильной подготовкой и техникой проведения. Но есть еще причины, связанные со сроком сдачи крови.

Для ИФА характерно т.н. диагностическое окно, когда вирус уже присутствует в организме, но антитела выработаны в малом количестве, и пока не обнаруживаются. Для ИФА продолжительность диагностического окна составляет 3-4 нед. Но в некоторых случаях этот период может длиться до 6 мес.

При подозрении на ложноотрицательный анализ нужно переходить к ПЦР. Здесь РНК выявляют спустя 10-14 дней, а в некоторых случаях через 3-4 дня после заражения. Поэтому если ИФА не показывает наличие антител, а РНК вируса при ПЦР обнаруживаются, значит, пациент инфицирован. Следует заметить, что в самом начале гепатита возможно проведение только качественной ПЦР. Количественная ПЦР и генотипирование будут информативными лишь спустя 4-6 нед. после заражения.

Какие анализы нужно сдавать во время лечения

По общему и биохимическому анализу крови можно судить о динамике воспалительного процесса, и о том, как восстанавливается печень и ее функции. Но ведущая роль принадлежит ПЦР. Количественную ПЦР проводят на 1, 2, 3, и 4 нед. лечения. По изменению вирусной нагрузки судят об эффективности лекарств и о вероятном исходе заболевания. Если вирусная нагрузка быстро снижается, это благоприятный признак, свидетельствующий о скором выздоровлении.

Какие анализы сдавать после лечения

Курс лечения гепатита С в зависимости от тяжести и вирусного генотипа длится 12 или 24 нед. После этого нужна ПЦР. Если качественный анализ ПЦР не показывает наличие РНК HCV в крови, пациент считается вылечившимся. Специфическое лечение не требуется. Нужны неспецифические мероприятия, направленные на восстановление печени.

Чем лечить?

Для того чтобы выздороветь, нужно полностью уничтожить вирус. И тогда результаты анализа ПЦР станут отрицательными. Сделать это можно только с помощью противовирусных средств последнего поколения. SoviHep D, Velakast, Ledifos – эти и другие препараты производят индийские компании по американским лицензиям. Они содержат Софосбувир с Даклатасвиром, Велпатасвиром или Ледипасвиром. Все эти препараты подавляют фазы размножения HCV внутри гепатоцитов.

Всего лишь одна таблетка в день в течение 12 или 24 нед., и выздоровление наступает в 95-99% случаев при любом генотипе вируса и форме заболевания. Стоят индийские лекарства недорого. Купить препараты может любой пациент со средним достатком.

Но аптеки не продают их. У нас вы можете приобрести индийский Софосбувир. МедФарма работает на правах официального представителя компаний из Индии. Мы поможем выбрать нужное лекарство, и доставим его по вашему адресу в течение 3-5 дней.

Did you find apk for android? You can find new Free Android Games and apps.

Источник