Презентация на тему лабораторная диагностика гепатитов

Диагностика гепатитов. II этап. Маркеры вирусных гепатитов. специфические для каждого вируса антигены или антитела, определяемые в крови (гепатоцитах) методом ИФА фрагменты ДНК/РНК вирусов, выявляемые у больного (методом ПЦР)

Маркеры вирусных гепатитов на примере гепатита В. HBsAg (ИФА); anti-HBcor IgG, Ig M (ИФА) HBeAg в крови (ИФА). HBcAg – определяется только в гепатоцитах anti-HBe IgG, Ig M (ИФА). DNA, DNA-p HBV Показателями активности гепатита (вирусной репликации) являются наличие в крови Ig M (параллельно с IgG), HBeAg, DNA, DNA-p

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg) Поверхностный белок вируса гепатита В, обнаруживается в сыворотке в трех различных формах: на поверхности неповрежденных инфекционных частиц, или как свободный протеин (нитевидный или сферический). Основной маркер острого и хронического гепатита В. В большинстве случаев HBsAg обнаруживается уже в инкубационном периоде и при остром течении гепатита выявляется в крови в течение месяцев. Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В дольше 6 месяцев после начала заболевания свидетельствует о возможной хронизации процесса. Возможно пожизненное носительство HBsAg. Из-за наличия различных форм HBsAg в сыворотке, при его обнаружении невозможно дифференцировать заболевание и HBsAg- носительство. Для этого необходимо провести дополнительные исследования (определение ДНК вируса гепатита В, HBeAg и антител к HBeAg).

Подтверждающий тест на поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg confirmatory) Методы иммуноферментного анализа, применяемые для определения HBsAg в сыворотке крови, являются скрининговыми, и в очень редких случаях могут давать ложноположительные результаты. Поэтому в случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности специалисты лаборатории ставят подтверждающий тест — повторное исследование сыворотки крови пациента с иммуноингибированием и разведением. Исследование проводится для подтверждения положительного результата исследования на HBsAg. Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В (anti–HВs) суммарные Показатель наличия иммунитета к вирусу гепатита В, проводиться перед вакцинацией и через 4 – 8 недель после вакцинации для контроля за эффективностью вакцинации. Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В (anti-HBc) IgM Антитела к HBcAg класса IgM выявляются в сыворотке при остром гепатите и реактивации хронического гепатита. При молниеносной форме течения заболевания, только этот тест может давать положительный результат.

Вирус гепатита В (HBV) количественно, ПЦР Определяется количество копий ДНК вируса гепатита B в 1 мл крови (вирусная нагрузка). Исследование проводится для контроля за эффективностью лечения. Антитела к антигену инфекционности вируса гепатита В (anti-HВe) суммарные Является показателем начала сероконверсии, свидетельствует о прекращении репликации вируса. Однако обнаружение антител к HBeAg не всегда является показателем отсутствия инфекционности. Иногда возможно появление мутантной, дефектной HBeAg-отрицательной формы вируса, т.е. вирус данный антиген синтезировать не способен или синтезирует в малых количествах, при этом, хотя в крови обнаруживаются антитела к HBeAg, высокая репликативная активность вируса сохраняется. Вирус гепатита В (HBV) качественно, ПЦР Определяется ДНК вируса гепатита В в крови. При положительном результате исследования необходимо провести количественное исследование.

Антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV) суммарные Антитела к HCV обычно определяются спустя 6-8 недель после инфицирования. В единичных случаях позже. Отрицательный результат не исключает недавно приобретенную инфекцию HCV. Положительный результат может свидетельствовать об остром или хроническом гепатите С. Данное исследование не позволяет различить острый и хронический гепатит, а также стадию выздоровления после гепатита С. Антитела к HCV необходимо определять у всех пациентов с незначительным повышением активности трансаминаз и у людей, относящихся к группе риска Антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV) IgМ Положительный результат может свидетельствовать об остром гепатите С или обострении хронического гепатита С. Отрицательный результат свидетельствует о том, что гепатит С не выявлен (при отрицательном результате исследования суммарных антител к гепатиту С), или у пациента хронический гепатит С вне обострения (при положительном результате исследования суммарных антител). Вирус гепатита С (HCV) (генотипирование), ПЦР Определяется генотип вируса для выбора схемы лечения. В настоящее время в лабораторной практике определяется 5 генотипов.

Вирус гепатита С (HCV) качественно, ПЦР Определяется РНК вируса гепатита С в крови. Положительный результат свидетельствует о репликации вируса. При положительном результате должно проводиться количественное исследование, чтобы определить степень виремии. Метод выбора — так называемый Real time ПЦР. РНК вируса необходимо определять в случае положительного результата исследования на антитела, кроме того, и при отрицательном результате, если подозревается гепатит С (особенно в случае диализных пациентов). Исследование на РНК вируса гепатита С показано для новорожденных, рождённых от матерей больных гепатитом С. Так как у новорожденных в крови могут определяться материнские антитела, по этой причине обнаружение антител к HCV не может использоваться у этой категории пациентов Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV confirmatory) Определение суммарных антител к вирусу гепатита С является скрининговым тестом для диагностики заболевания. В случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности используют подтверждающий тест — определение широкого спектра антител к белкам специфичным для вируса гепатита С (core, NS1 NS2, NS3, NS4, NS5) в сыворотке крови больного. Исследование считается положительным, если выявляются антитела к 2 или более белкам вируса гепатита С. Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С используют для подтверждения специфичности скринингового метода.

Антитела к вирусу гепатита D (anti-HDV) IgM Антитела к вирусу гепатита D класса IgМ появляются в острый период «дельта-инфекции» (со 2-й недели). Антитела IgМ свидетельствуют об активной репликации вируса. Положительный результат исследования свидетельствует об остром периоде вирусного гепатита D, ранней стадии реконвалесценции, или персистирующем вирусном гепатите D. Отрицательный результат – отсутствие антител класса IgM к вирусу гепатита D Антитела к вирусу гепатита D (anti-HDV) суммарные Определяются IgG и IgM антитела. Скрининговое исследование, назначается, если подозревается новая или хроническая инфекция. Антитела к HDV обнаруживаются спустя недели после появления клинических признаков заболевания Вирус гепатита D (HDV) ПЦР РНК к вирусу гепатита D обнаруживается в крови при появлении клинических признаков заболевания. Как правило, результат исследования на ДНК вируса гепатита В в этот период отрицательный.

Дифференциальная диагностика хронического гепатита Хронические гепатиты дифференцируются между собой по указанным выше признакам С первичным билиарным циррозом печени (по гистологической картине, маркерам, антимитохондриальным АТ и др.) С болезнью Уилсона-Коновалова (по уровню церулоплазмина в крови и кольцу Кйзера-Фляйшера на роговице) С алкогольным поражением печени (жировой гепатоз)

10 Диагностика диффузных поражений печени Острый гепатит УЗ — признаки малоспецифичны: гепатомегалия, снижение эхогенности, болезненность при УЗ-пальпации, кажущееся усиление плотности протоков, углы закруглены. Очень часто поражается желчный пузырь: выражен отек стенки, резкая болезненность (дифференциальный диагноз с флегмонозным — пузырь небольшой, свободной желчи почти не содержит) УЗИ позволяет наблюдать за динамикой процесса

Дополнительные методы диагностики. Лапароскопия с биопсией

Источник

1. Диагностика вирусных гепатитов

ДИАГНОСТИКА
ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ

2. Гепатит а

ГЕПАТИТ А
устанавливается на основании:
1) Расспроса больного и эпидемиологических данных:
• контакт с больными желтухой за 7–35 дней до начала заболевания;
• употребление сырой воды из случайных источников, немытых овощей и фруктов;
обычно молодой возраст больных — 15–29 лет ;
2) Симптомов болезни (острое начало с резким повышением температуры и
расстройством пищеварения, присоединение через несколько дней желтухи и улучшение
на этом фоне самочувствия, увеличение печени и селезенки)
• микросимптомы: признаки ваготонии, зуд кожи и боли в правом подреберье;
3) Лабораторных данных:
• гематологические сдвиги: лейкопения, относительный лимфоцитоз, замедление
СОЭ;
• повышение в крови билирубина и печёночных ферментов аланинаминотрансферазы
(АлАТ) и аланинаминотранспептидазы (АсАТ), высокий показатель тимоловой
пробы;
• специфическим маркером гепатита А являются антитела (иммуноглобулины) к
вирусу гепатита А класса М ( анти-НАV IgМ или анти-ВГА IgМ), выявляемые с
помощью иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотке крови с первых дней
болезни и далее в течение 3–6 мес;
• анти-ВГА IgМ вырабатываются у всех больных гепатитом А, их обнаружение —
ранний надёжный тест, позволяющий выявить любые варианты гепатита А и
поставить диагноз до наступления желтухи.

3. Дифференциальная диагностика

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ
ДИАГНОСТИКА
В продромальном периоде от:
• гриппа и других ОРВИ;
• энтеровирусной инфекций, пищевой
токсикоинфекций;
• тифо-паратифозных заболеваний, острого гастрита;
В желтушный период с:
• желтушными формами инфекционного
мононуклеоза;
• лептоспироза, псевдотуберкулеза;
• желтухами гемолитического, токсического генеза;
• хроническим гепатитом и циррозом печени;

4. 5. Гепатит В

ГЕПАТИТ В
1) Эпид. данные:
• внутривенное введение наркотических средств, переливания крови,
оперативные вмешательства, другие манипуляции, связанные с
нарушением целостности кожных покровов или слизистых,;
• случайные половые связи, тесный контакт с носителями вируса гепатита В
или с больными хроническими заболеваниями печени в сроки от 6 недель
до 6 месяцев до начала заболевания;
2) Клин.данные: постепенное начало, длительный преджелтушный период
с выраженной слабостью и нарушением пищеварения, боли в суставах и
высыпания, отсутствие улучшения самочувствия или его ухудшение с
появлением желтухи, увеличение печени.
3) Лаб.данные основывается на выявлении :
• биохимических маркеров цитолиза, проба остаётся в норме. При
сочетании гепатита В с Дельта-инфекцией мезенхимального воспаления,
холестаза, и обнаружении маркеров ВГВ;
• изменение гемограммы: лейкопения, лимфоцитоз, уменьшение СОЭ;
• в крови увеличиваются печёночные ферменты, а тимоловая (вирус
гепатита D) заболевание начинается более остро и протекает тяжелее, с
более выраженными симптомами и выраженными лабораторными
изменениями;

6.

Наиболее достоверным подтверждением гепатита В является
обнаружение иммуноглобулинов класса М (IgМ), которые
выявляются параллельно с НвsАg. Следует учитывать, что
отрицательный результат исследования крови на НВsАg не
исключает диагноза вирусного гепатита В. При сочетании острого
гепатита В с гепатитом D, помимо вышеперечисленных маркеров,
имеет значение обнаружение в крови маркеров дельта-вирусной
инфекции методом ИФА. Возможно также выявление РНК вируса
гепатита D методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

7.

Вирус гепатита В содержит 3 основных антигена: поверхностный
НВsАg, внутренний НВcАg (который можно определить только в
клетках печени) и связанный с ним НВеАg. Ко всем этим
антигенам в ходе инфекционного процесса образуются антитела.
Для обнаружения маркеров гепатита В наибольшее практическое
значение имеет иммуноферментный анализ (ИФА). Кроме того, в
крови больного можно определить ДНК вируса гепатита В методом
полимеразной цепной реакции (ПЦР). Основное значение для
определения вируса гепатита В является НВsАg, который
появляется в крови еще до появления симптомов болезни и
постоянно определяется в желтушном периоде.

8.

9. 10. Гепатит с

ГЕПАТИТ С
Для постановки диагноза вирусного гепатита С необходимо
провести следующее основные лабораторные и инструментальные
методы обследования:
• Биохимический анализ крови на аланинаминотрансферазу
(АлАТ), аланинаминотранспептидазу (АсАТ), билирубин;
• Кровь на антитела к вирусу гепатита С (анти-HCV);
• ПЦР (полимеразная цепная реакция — гепатит С) с целью
определения РНК вируса;
• Ультразвуковое исследование (УЗИ);
• Биопсию печени;

11.

Биопсия печени
Это стандартный способ определить, имеются ли в печени повреждения.
Процедура биопсии может быть некомфортной и иногда болезненной. При
проведении биопсии, в поверхность печени через кожу в области подреберья
вводится полая игла. Потом от печени забирается небольшой кусочек (несколько
миллиметров) и вытягивается на конце иглы. Затем этот кусочек исследуется для
того, чтобы определить уровень повреждения печени, если такое повреждение
присутствует. Результаты биопсии обычно определяются в течение 2-х или более
недель.
Биопсия печени является единственным, наиболее информативным
способом определения показаний к началу лечения гепатита С.
УЗИ печени
УЗИ дает специалистам ценную информацию. При УЗИ видно, что происходит с
печенью в настоящий момент. Например, УЗИ позволяет выявить начальные
признаки цирроза печени, и это дает возможность вам и врачу своевременно
начать лечение. Желательно проходить УЗИ 1-2 раза в год.
Важным моментом в оценке состояния организма при гепатите С является
исследование состояния желчного пузыря. Этот орган расположен прямо под
печенью, его работа тесно связана с работой печени. При гепатите С проблемы со
здоровьем нередко связаны не столько с печенью, сколько с желчным пузырем. Так,
например, боли в правом боку после грубых нарушений диеты чаще всего вызваны
не воспалением в печени, а нарушением работы желчного пузыря. Наличие
гепатита С может способствовать развитию воспаления в желчном пузыре –
холецистита, который потребует отдельного лечения.

12.

13.

Положительные результаты анализов на вирус гепатита С могут
означать следующее:
Хроническая инфекция, то есть имеется инфекционный вирусный
процесс, который вызвал не сильно выраженное поражение
печени.
Перенесённая в прошлом инфекция. Положительный результат
анализа может означать, что ранее сталкивались с этим вирусом,
но естественная защитная реакция организма помогла вам
преодолеть инфекцию. Почему одни люди могут успешно
справляться с вирусом, а другие нет, пока неизвестно. Вероятно, в
этом играют роль и разновидность вируса, и состояние защитных
сил организма.
Ложноположительный результат. При первом анализе крови у
некоторых больных может определяться положительный
результат, который не подтверждается при более углублённом
обследовании. Такая реакция может быть связана с другими
причинами, а не с вирусом гепатита С.

14. Гепатит д

ГЕПАТИТ Д
• Определение ВГД в крови радиоиммунным и
иммуноферментным методами не имеет существенного
практического значения.
• Для обнаружения ВГД в ткани печени используют
иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы
анализа.
• Основными являются серологические методы
исследования с обнаружением в крови анти-ВГД.
• При острой инфекции в крови обнаруживают анти-ВГД
IgM, а затем в течение нескольких месяцев антителаиммуноглобулины класса G. При хроническом гепатите
анти-ВГД IgM выявляются в крови в высоком титре в
течение всего периода репликации вируса.

15. Гепатит е

ГЕПАТИТ Е
Основанием для предположения о наличии гепатита Е является
сочетание симптомов острого гепатита с особенностями
заражения (пребывание за 2–8 недель до заболевания в
специфическом для гепатита Е регионе, употребление там сырой
воды, наличие подобных заболеваний среди окружающих).
Существенным подспорьем является отсутствие в сыворотке крови
маркеров гепатитов А и В. Специфическим маркером,
подтверждающим диагноз гепатита Е, являются антитела к вирусу
гепатита Е класса IgМ (анти-НЕV IgМ), выявляемые с помощью
иммуноферментного анализа ИФА в сыворотке крови в остром
периоде заболевания.

Источник