Причины ложноположительного результата на гепатит в

В мире официально зарегистрировано более 350 миллионов людей с хронической инфекцией гепатита В и С. ВОЗ отнесла заболевание к категории опаснейших, поскольку оно трудно поддается лечению. Показатель смертности по причине гепатита в 2016 году достиг уровня гибели людей от туберкулеза и ВИЧ. Поэтому при обнаружении в результатах исследования значения «положительно», пациент воспринимает это как приговор. Важно знать при каких обстоятельствах может быть выявлен ложноположительный анализ на гепатит С и В.

Особенности вирусного гепатита

Вирус характеризует высокая степень устойчивости в окружающей среде: к химическому или физическому разрушающему воздействию. Вирусы гепатита В и С способны сохранять жизнеспособность в течение нескольких недель, находясь на различных предметах, а в крови – до полугода.

Наиболее частые пути заражения – через кровь, инфицирование половым путем и от матери к ребенку происходит в меньшем проценте случаев.

Гепатит С именуются «ласковым убийцей», поскольку вирус может длительное время нарушать работу клеток печени, при этом маскируясь под симптомы других патологий. Поэтому его выявление чаще происходит случайно при подготовке к операции, беременности или донорству. Более 40 лет человек может являться носителем вируса, не зная об этом.

Прогноз исхода во многом зависит от наличия или отсутствия сопутствующих болезней. Особую угрозу для жизни пациента представляет обстоятельство сочетанного инфицирования вирусом гепатита С и ВИЧ. Носительство вируса гепатита В менее опасно для жизни и реже заканчивается летальным исходом, при условии отсутствия сопутствующей инфекции.

Диагностические методы

Для диагностики гепатита применяют 2 метода исследования:

• полимеразная цепная реакция (ПЦР) – выявление в биоматериале нуклеиновых кислот (ДНК или РНК) путем многократного копирования отдельных их специфических участков. Преимущество – специфичность и чувствительность методики достигает абсолютных значений. Риск получения ошибочных результатов сведен к минимуму;
• иммуноферментный анализ (ИФА) – определение наличия специфических белковых иммуноглобулинов (антител) класса М и G.

Иммуноферментный анализ крови

После прохождения вирусом первых барьерных структур начинается ответная реакция иммунитета человека. Следует отметить, что достаточная концентрация для обнаружения иммуноглобулинов накапливается через 1–3 месяца после заражения. Известны случаи их отсутствия более чем 12 месяцев, у 5% инфицированных они не выявляются вообще.

Для острой стадии болезни характерны иммуноглобулины класса М и G к специфическому белку нуклеокапсида core. При хронизации инфекции выявляется преимущественно класс G к белкам core и NS. В случае необходимости проведения подтверждающего теста определяются оба класса иммуноглобулина к двум типам белка.

При необходимости определения конкретного генотипа вируса ставится полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени. В зависимости от генотипа подбирается лечение. Первый генотип наиболее трудно вылечить, для него характерны наиболее тяжелые последствия для здоровья человека. При этом 2 и 3 генотип излечиваются в 80% случаев за полгода.

Причины ложноположительного результата

Причиной ложноположительного результата является ошибки врачей

По статистике, результаты анализа ИФА в 15% случаев показывают ошибочно ложные данные, а среди беременных женщин процент ошибок достигает 20–30%.

Среди основных причин можно выделить недостаточную компетентность врача, который не проинформировал пациента о правилах подготовки к сдаче биоматериала и не учитывает возможность получения ложноположительных результатов. Увидев в строке результатов «положительно», врач выносит окончательный диагноз – гепатит и назначает лечение. Подобный подход в корне неверный, поскольку постановка диагноза по однократному анализу недопустима.

Не следует исключать и человеческий фактор в виде ошибки лаборантов. По неопытности или невнимательности сотрудник лаборатории может случайно перепутать пробирки, маркирующие штрих-коды или сами результаты анализов.

Данные статистики гласят, что 60% ошибок случается именно на преаналитическом этапе. Неправильное взятие или хранение взятых образцов крови – еще одна причина получения ложноположительного результата анализа.

Биоматериал в современных лабораториях собирается стерильной одноразовой иглой-бабочкой в вакуумную пробирку с консервантом. После чего кровь аккуратно перемешивается с консервантом, это необходимо для исключения ее гемолиза (разрушения красных кровяных клеток). После взятия кровь отстаивается 30–40 минут при комнатной температуре с целью формирования сгустка. Затем хранится или транспортируется (при необходимости) в температурном диапазоне от +2 до +8 С°. Нарушение стандартной методики недопустимо.

Следует отметить, что ложноположительный результат характерен для дам в положении. Ситуация объясняется масштабной перестройкой всего организма женщины после зачатия, одна из которых затрагивает синтез цитокинов. Кроме этого, изменяется концентрация макро- и микроэлементов, перестраивается эндокринная система и гормональный фон. Это делает невозможным однозначную интерпретацию результатов анализа, особенно методом ИФА.

Во время беременности анализ на гепатит может показать ложноположительный результат

Установлена прямая зависимость между сроком беременности и частотой получения ложноположительных результатов в анализе на гепатит В или С. Чем выше срок, тем более велика вероятность ошибочных данных.

Патологии, влияющие на результат анализа

Важно знать, что антитела к вирусу гепатита могут сохраняться в кровотоке человека от 8 до 10 лет, а у некоторых – до конца жизни. Их функциональная активность после успешной терапии инфекции до сих пор неизвестна. Они не способны защищать от повторного инфицирования человека ввиду того, что не проявляют противовирусной активности.

Данный факт обуславливает получение положительных результатов при использовании метода ИФА. Поэтому методика применяется для первичной диагностики и скринингового обследования, но ее проведение нецелесообразно для оценки эффективности лечения и выздоровления пациента.

Среди патологий, влияющих на результат анализа, следует выделить аутоиммунные заболевания, злокачественные новообразования и смешанную инфекцию.

Аутоиммунные заболевания

Аутоиммунные патологии сопровождаются выработкой защитных белковых антител против собственных нормальных клеток и тканей. В норме подобные механизмы запускаются исключительно при попадании чужеродного биоматериала (антигенов) или аномальной мутации своих клеток (рак).

Известна форма аутоиммунного гепатита, частота встречаемости которого не превышает 20 случаев на 100000 обследуемых людей. Заболевание поражает людей вне зависимости от пола и возраста. Природа возникновения остается предметом дискуссий, а подбор эффективных методов лечения составляет серьезнейшую проблему в современной гепатологии. Согласно данным статистики, более половины выявленных случаев характеризуются тяжелой стадией, когда цирроз печени уже сформирован. Крайне важно дифференцировать вирусную форму гепатита от аутоиммунной, делать это вправе врач высокой категории.

Злокачественные поражения органов могут привести к выработке неспецифических для патологии иммуноглобулинов, которые ошибочно будут идентифицированы как антитела к вирусу гепатита В или С.

Смешанная инфекция активирует все защитные системы и механизмы в организме человека. Не исключена возможность выявления иммуноглобулинов класса М и G, вырабатываемых в ответ на микроорганизм, не связанный с вирусом гепатита. Ситуация усугубляется при выраженном иммунодефиците у человека.

Как не допустить ошибочного результата

Для исключения риска получения ложных данных ВОЗ рекомендует минимум трехкратное проведение анализа, желательно в разных лабораториях. Современные частные лаборатории при получении сомнительных или положительных результатов назначают бесплатные подтверждающие тесты. При этом сначала лаборатория сама повторяет анализ, а после отправляет биоматериал для исследования в экспертном НИИ.

Пациенту следует ознакомиться с правилами подготовки к сдаче биоматериала и неукоснительно их соблюдать. В случае ежегодного профилактического обследования достаточно сдать анализ методом ИФА, для дифференциальной диагностики предпочтение следует отдавать ПЦР.

Нежелательно проходить исследования в сомнительных частных лабораториях. Каждое лабораторное отделение должно иметь соответствующие лицензии на взятие и проведение медицинских анализов.

При сдаче крови обязательно нужно предупредить сотрудника лаборатории о наличии хронических патологий и аллергических реакций. Желательно за 1 сутки до анализа исключить прием любых лекарственных препаратов после предварительной консультации с врачом. При невозможности отмены следует проинформировать о принимаемых лекарствах лаборанта или врача.

Физические и эмоциональные нагрузки могут повлиять на работу органов и состав крови, поэтому за 12 часов их следует избегать. Спортивную тренировку вечером накануне визита в лабораторию желательно отменить.

Таким образом, получение ложноположительных результатов анализа на гепатит В или С имеет ряд весомых и обоснованных причин. Соблюдая правила подготовки к сбору биоматериала и выбирая компетентных специалистов и лаборатории, пациент существенно повышает точность полученных данных. Недопустима постановка окончательного диагноза по результатам одного исследования, а расшифровку проводит исключительно лечащий врач. Получение положительных результатов диктует необходимость повторных подтверждающих тестов в различных лабораториях.

Нередко возникает ситуация, когда тест на вирусный гепатит Б или С является ложноположительным. В данной статье речь пойдет о причинах таких явлений.

Виды ложноположительных анализов на гепатиты

Анализы на выявление гепатитов могут быть качественными (они указывают на наличие или отсутствие того или иного вируса гепатита в крови) или количественными (устанавливают форму заболевания, помогают контролировать течение болезни и эффективность терапии).

Ложноположительными могут быть результаты только качественных тестов. Причем, ошибка качественного анализа на гепатит B встречается очень редко. Чаще по вине самого исследуемого или по вине врачей происходит ошибка на гепатит C.

Качественный анализ на гепатит В

Качественный ПЦР-тест на ДНК вируса гепатита В подтверждает наличие вируса гепатита B в крови, что очень важно в тех случаях, когда диагноз сомнителен. Мутации вируса могут вызвать изменения HBsAg и HBeAg, которые в таком случае не определятся методом ИФА. При этом на прогноз заболевания и риск осложнений это не оказывает никакого влияния.

Важное достоинство ПЦР-теста — это тот факт, что ДНК вируса гепатита В появляется в крови раньше его поверхностного компонента белковой оболочки, что позволяет применять качественный анализ ПЦР для ранней диагностики гепатита Б у людей с высоким риском заражения.

Качественный анализ на гепатит С

Качественный ПЦР анализ указывает на наличие вируса в крови. Его результат может быть «обнаружено» или «не обнаружено».

Референсные значения (значение, которое должно быть в норме) — «не обнаружено». Результат «обнаружено» может свидетельствовать о том, что вирус размножается и инфицирует все новые клетки печени.

Качественный тест ПЦР имеет определенную чувствительность (10-500 МЕ/мл.). Это означает то, если вирус присутствует в крови в очень малой концентрации (ниже порога чувствительности метода), может быть получен результат «не обнаружено».

Поэтому, при проведении качественного ПЦР у пациентов с низкой виремией (концентрацией вируса), например, проходящих противовирусную терапию, важно знать чувствительность диагностической системы.

Для контроля вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии желательно использовать диагностическую систему с чувствительностью не ниже 50 МЕ/мл. Таким критериям соответствуют, например, анализаторы COBAS AMPLICOR ВГС-TEST (аналитическая чувствительность 50 МЕ/мл или 100 копий/мл), РеалБест РНК ВГС (аналитическая чувствительность 15 МЕ/мл или 38 копий/мл) и другие.

Кроме метода ПЦР для выявления РНК вируса гепатита С также используется метод транскрипционной амплификации (ТМА), обладающий лучшей чувствительностью (порядка 5-10 МЕ/мл.), однако этот метод в России пока не распространен.

Что такое ложноположительный результат

Ложноположительный анализ исследования на наличие специфических антител к гепатиту фиксируется в том случае, если результаты анализа носят положительный характер, однако при этом вирусный возбудитель в организме отсутствует. Это может происходить в результате воздействия внешних или внутренних факторов.

Ложный анализ выявляется при проведении дополнительного исследования путем ПЦР – диагностики, при которой вирус гепатита не обнаруживается. Таким образом, результат анализа крови на гепатит нельзя считать достоверным на 100%.

Именно поэтому для установления точного диагноза и в целях недопущения врачебной ошибки пациенту назначается комплексное обследование с проведением различных исследований.

Причины ложноположительных реакций в анализах на гепатиты С и В

Болезни пациента

Ложноположительный результат может обнаруживаться при развитии определенных патологических процессов в организме. К болезням и другим состояниям, которые вызывают подобное явление, относят:

• Заболевания аутоиммунного происхождения.
• Опухолевидные процессы доброкачественного или злокачественного характера.
• Запущенные инфекционные процессы в организме, о которых пациент не проинформировал лечащего врача.
• Различные дисфункции в деятельности иммунитета.
• Прием определенных медикаментозных средств, в составе которых присутствует гепарин. Прием иммуностимулирующих средств.
• Беременность.
• Новорожденные дети, у которых диагностированы внутриутробные инфекции.
• Повышенная концентрация криоглобулина в кровяной жидкости.
• Обострения заболеваний органов верхней дыхательной системы.
• Развитие аутоиммунного гепатита.
• Предварительно проведенная вакцинация против гриппа или столбняка. Прохождение курса лечения с помощью интерферона альфа.

Также в некоторых случаях результат может быть недостоверным, если инфицирование произошло совсем недавно, вирус находится в стадии инкубации.

В данном случае следует прислушиваться к своему организму, при появлении каких-либо сомнительных симптомов сразу же обращаться к доктору и проходить все назначенные диагностические мероприятия.

Ошибки исследования

Помимо физиологических факторов ложноположительный анализ может быть спровоцирован рядом внешних причин. К наиболее распространенным из них принято относить следующие:

1. недостаточно качественно проведенное исследование;
2. ошибки медперсонала, допущенные во время проведения анализа;
3. неверно подготовленные образцы крови;
4. случайно подмененные пробы;
5. начальная стадия развития заболевания;
6. нарушения, связанные с процессами транспортировки, а также хранения биоматериала;
7. низкая степень квалификации лаборантов;
8. воздействие на образцы крови повышенными температурами;
9. загрязнение биоматериала;
10. перекрестная реакция;
11. неспецифическая реакция.

Противоречивые показатели при определении антител к гепатиту С могут возникать при применении наборов для диагностики от различных фирм-производителей.

Зафиксированы случаи получения противоположных результатов при исследовании одной и той же сыворотки крови различными диагностическими тестами.

Дело в том, что диагностические наборы основываются на применении определенных антигенов для взаимодействия с антителами в биоматериале, что и становится причиной ложноположительного результата исследования.

Неправильная подготовка пациента к анализам

Одним из возможных факторов, влияющих на искажение результатов, является неправильная подготовка самого человека перед сдачей крови. Чтоб анализы не были ложноположительными, необходимо строго придерживаться правил подготовки:

• кровь для анализа сдается только натощак и желательно утром;
• за 12 часов до сдачи биологического материала нельзя принимать алкоголь, курить, также нужно исключить физическую активность и прием пищи;
• необходимо исключить прием лекарственных препаратов, а если это невозможно, то нужно проинформировать врача;
• детям до 5 лет перед сдачей крови на исследование необходимо поить ребенка кипяченой водой каждые 30 минут, причем 1 порция в среднем должна быть 150 мл.

Кроме того, вирус гепатита проявляется не сразу, его симптоматика заставляет себя ждать.

Сдача анализов в период беременности: особенности проведения процедуры

Будущим мамам во время беременности необходимо сдавать анализ на гепатит не менее 3 раз. При этом достаточно часто фиксируются ложноположительный тест на гепатит, что связано с определенными изменениями в организме беременной женщины.

Этому способствуют следующие причины:

1. Изменение гормонального баланса.
2. Нарушение обменных процессов.
3. Грипп.
4. Респираторные инфекции.
5. Процесс гестации.

Это объясняется вступлением в реакцию схожих белков, вырабатываемых иммунной системой беременной женщины при проникновении в организм чужеродных агентов патогенного характера.

Кроме того, образцы плазмы крови будущих мам принято считать сложными, что повышает вероятность недостоверных результатов анализа у беременных женщин. Также в этот период может быть зафиксирован ложноположительный анализ на гепатит В.

Поэтому при обнаружении в крови пациента антител к вирусам гепатита С или В, ему назначаются дополнительные исследования.

Дополнительная диагностика

В качестве дополнительной диагностики гепатита пациенту назначаются следующие виды исследовательских процедур:

• Тест на рекомбинантный иммуноблотинг.
• Анализ методом полимеразной цепной реакции.
• Анализ на билирубин.
• Ультразвуковое исследование брюшной полости, на определение структурных изменений в печени.

Ложноположительный анализ на выявление антител к гепатиту наблюдается достаточно редко, однако может стать для пациента настоящим псхоэмоциональным потрясением и причинить массу дискомфорта.

Специалисты рекомендуют не впадать в отчаяние в случае положительного результата анализа, а пройти дополнительные виды исследований на заболевание гепатитом.