Референсные значения в анализах крови на гепатит с расшифровка

Вирусный гепатит в настоящее время излечим, однако сложности могут возникнуть при диагностике заболевания. В особенности это касается ВГС — «ласкового убийцы», который часто протекает бессимптомно. Нередко выявить наличие вирусной инфекции можно только при комплексной диагностике.

Но как проводится расшифровка анализов на гепатит? Какие методы диагностики проводятся, в зависимости от типа заражения? Какова расшифровка анализа на гепатит С или В? Ответы на эти вопросы вы сможете найти в нашей статье.

Виды анализов на гепатит

Прежде чем говорить о расшифровке анализа на гепатит В или С, следует выяснить, какие методы аналитической диагностики этого заболевания существуют в современной медицинской практике. Способ определения болезни зависит от путей заражения. Так как гепатиты В и С преимущественно передаются через кровь, для определения вирусной нагрузки и подтверждения диагноза проводится анализ этой биологической жидкости. Образец крови берется из вены пациента для дальнейшего изучения в лабораторных условиях.

Также диагноз подтверждается аппаратным способом при помощи ультразвукового обследования и эластометрии печени. Данные методы позволяют определить степень заражения и площадь пораженных вирусом тканей жизненно важного органа. Также для расшифровки анализов на гепатит большое значение имеет определение примерного срока инфицирования.

Исследования образцов биологических жидкостей, проводимые при диагностике гепатовируса, делятся на:

• Качественные — нацелены на определение наличия патогена;
• Количественные — определяют вирусную нагрузку и степень инфицирования.

В зависимости от типа вируса, для определения его наличия проводятся разные анализы. Рассмотрим их подробнее.

Гепатит В

Вирусный гепатит В является не только опасным, но и чрезвычайно заразным вирусным заболеванием. Кроме того, эта болезнь опасна большим количеством осложнений, среди которых: цирроз, фиброз и онкологические новообразования в печени. Поэтому правильная расшифровка анализа на гепатит В очень важна. Своевременная диагностика может спасти пациенту жизнь.

С целью определения гепатовируса типа В проводятся следующие анализы:

• На австралийский антиген (HBs) — может быть качественным или количественным тестом. Положительный результат тестирования свидетельствует о хроническом или остром течении болезни. Однако отрицательный результат не является гарантией отсутствия вирусного заболевания;
• На HBеAg — качественный анализ. Если данный антиген не обнаруживается, то говорить об отсутствии болезни можно только при отсутствии других иммуноглобулинов;
• На Anti-HBс-total — качественный анализ, позволяющий установить факт заражения, но не помогающий в установлении фазы болезни (хронической или острой);
• На Anti-HBс IgМ — тест с вариантами результатов «положительно», «отрицательно» и «сомнительно». Если результат сомнителен, следует сдать тест еще раз через 2 недели;
• На Anti-HBе — количественный анализ, позволяющий выявить уровень вирусной нагрузки;
• Выявление ДНК возбудителя заболевания — позволяет определить вероятность инфицирования.

Гепатит С

Вирусный гепатит С также передается через кровь, однако является менее заразным. Тем не менее, это заболевание довольно распространено как в России, так и за ее пределами. Сдача анализов на обнаружение ВГС необходимо для определения самого заболевания, его стадии и подходящей для терапии схемы лечения оригинальными индийскими препаратами. При диагностике гепатита С проводятся следующие анализы:

• На анализ на антигены ВГС (аnti-HCV-total ) — качественный тест. Обнаруженные иммуноглобулины являются одними из основных маркеров заболевания;
• На антитела IgG (recomBlot HCV IgG) — качественное тестирование. Положительный результат говорит о наличии заболевания, отрицательный — о его отсутствии. Исключением является проведение диагностики у пациентов, родившихся с антителами матери либо во время инкубационного периода заболевания;
• Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — тест на выявление флававируса. Может быть как качественным, так и количественным.

В каких случаях требуется диагностика гепатовируса?

В первую очередь диагностические меры применяются к пациентам, у которых наблюдаются следующие симптомы:

• Тошнота и рвота;
• Болевые ощущения в области печени;
• Осветление (обесцвечивание) фекальных масс и потемнение мочи;
• Желтушный оттенок склер и кожных покровов;
• Общее недомогание, имеющее сходство с гриппозными проявлениями;
• Апатичное или депрессивное состояние.

Однако, ввиду бессимптомного течения хронической формы вирусных гепатитов, сдавать анализы рекомендуется и в ряде профилактических мер.

Регулярно сдавать кровь на мониторинг патогена рекомендуется:

• Лицам, ухаживающим за инфицированными;
• Медперсоналу, регулярно контактирующему с зараженной кровью и другими биологическими жидкостями;
• Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;
• Инъекционным наркоманам;
• Больным, страдающих от ВИЧ-инфекции;
• Лицам, ведущим беспорядочную половую жизнь.

Важно вовремя определить наличие гепатовируса в крови больного. Чем раньше будет диагностирована болезнь, тем быстрее ее удастся победить при помощи инновационных противовирусных препаратов.

Как подготовиться к сдаче крови?

Результаты анализа крови на выявление ВГС могут быть неточными, ложноположительными или ошибочными. Чтобы этого не случилось, нужно учитывать все нормы подготовки и проведения диагностики:

• В течение дня до сдачи крови на экспертизу нельзя употреблять продукты с большим содержанием сахара и трансжиров. За 8 часов до анализов нельзя есть вообще;
• Накануне диагностики запрещается употребление алкоголя и курение сигарет. Это создает дополнительную нагрузку на печень, из-за чего анализы могут быть неточными;
• За день до сдачи крови следует поберечь себя от стрессов и физических перенагрузок. Это также может негативно сказаться на результатах диагностики.

Являться в лабораторию для сдачи образца крови необходимо утром, примерно в 8 часов. Из вены кровь берется при помощи стерильного шприца. В рамках собственной безопасности пациенту важно следить за тем чтобы медицинский работник не применял ранее использованный шприц.

Расшифровка анализов

Расшифровка анализов проводится в лабораторных условиях компетентными медработниками. Результаты передаются лечащему врачу или напрямую пациенту в зависимости от особенностей отдельного медицинского учреждения или независимой лаборатории.

Фиксируются результаты диагностики на бумажном носителе. Период готовности расшифровки зависит от типа анализа. Чаще всего результаты готовы в период от нескольких часов до 1 суток после сдачи.

Расшифровка анализа на гепатит В

Расшифровка анализа на выявление вирусного гепатита В производится в условиях лаборатории. Ниже представлены ключевые данные, на которые опираются исследователи, изучая предоставленный пациентом образец крови:

1. При определении австралийского антигена, референсное значение составляет 0,5 МЕ/мл. При меньшей концентрации антигена результат теста можно считать отрицательным. Если же значение выше указанного, это может свидетельствовать о наличии инфекции в острой форме. Также наличие австралийского антигена может свидетельствовать о вирусоносительстве;
2. Референсное значение антител к HBs-антигену вируса гепатита B (Anti-HBs) — 10 МЕ/мл. Высокий показатель говорит об успешном иммунном ответе на вакцинацию от гепатита В. Низкий показатель свидетельствует о том, что вакцина не оказала ожидаемого действия;
3. Более 40 МЕ/л патогенной ДНК в сыворотке крови пациента говорит о заражении гепатовирусом типа В. Если концентрация вирусного ДНК в предоставленном образце крови ниже указанного серединного предела, человек наверняка здоров, либо его болезнь находится на стадии инкубационного периода.

Расшифровка анализа на гепатит С

Одним из основных методов диагностики ВГС является определение фрагментов РНК возбудителя в плазме крови пациента. При расшифровке этого анализа на гепатит С важно учитывать, является ли он качественным или количественным. Положительный показатель качественного теста позволяет говорить о наличии заражения.

В свою очередь, при количественном РНК-анализе:

• Показатель ниже предела 15 МЕ/мл — патоген не обнаружен, или его концентрация находится ниже порога чувствительности теста;
• От 15 до 100 000 000 МЕ/мл — вирусное РНК выявлено. Это говорит об инфицировании организма человека гепатовирусом типа С.

Результаты количественного теста на РНК в сыворотке крови расшифровываются следующим образом:

• Ниже 60 МЕ/мл — возбудитель вирусного гепатита С не обнаружен;
• От 60 до 108 МЕ/мл — положительный результат в пределах линейного диапазона;
• От 108 и выше — повышенная концентрация РНК возбудителя.

Еще одним немаловажным анализом, расшифровка которого требуется при диагностике гепатита С, является ПЦР. Показатели, по которым можно отследить вирусную нагрузку, колеблются в пределах 10 до 500 МЕ/мл. Если результат ниже минимального уровня, гепатит С не обнаруживается. Завышенный показатель говорит о высокой вирусной нагрузке.

Если диагностирован вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого влияет на назначение лечебной схемы, строго обязателен. В отличие от генотипирования, подобное исследование выполняется несколько раз: непосредственно на этапе комплексной диагностики заболевания и в ходе терапии. Доктору важно знать количественное содержание вируса в крови пациента, чтобы назначить адекватное лечение.

Уже на стадии терапии анализ крови на уровень HCV предназначен для оценки эффективности принимаемых лекарств. По данным клинических исследований, на фоне подавляющего большинства противовирусных препаратов прямого действия количественный тест демонстрирует отрицательный результат уже на 21–28 день. Однако о полном выздоровлении речь идет в том случае, если негативные данные сохраняются на протяжении двух лет с последнего дня приема таргетных таблеток.

Для установления числового значения генома возбудителя гепатита С в сыворотке крови обычно пользуются молекулярной технологией ПЦР. Только таким образом можно точно посчитать уровень виремии: данный термин обозначает концентрацию копий (частиц генома) возбудителя гепатита С в определенной единице крови. Прочие методы, например, выявление core-антигена иммуноферментным тестом применяются гораздо реже из-за высоких финансовых затрат и сложностей, касающихся технического выполнения исследования. 

Лабораторные исследования методом ПЦР

Полимеразная цепная реакция до недавнего времени была лишь экспериментальным методом анализа и не была широко распространена в клинической практике. Принцип методики основан на так называемой амплификации – способности определенного участка генома патогена  к многократному копированию.

Это достигается при помощи обязательных компонентов выполнения ПЦР: 

• праймера, структура которого практически идентична определенным участкам РНК HCV,
• фермента, обеспечивающего реакцию амплификации.

Сам процесс лабораторного исследования происходит в буферном растворе, в котором содержится фиксированная комбинация катионов и анионов. Таким образом возможно поддержание оптимального для течения ПЦР уровня рН. Набор для проведения ПЦР содержит и протеины, используемые в качестве своего рода «строительного материала» при амплификации.

Структура праймера такова, что он может взаимодействовать только со строго определенным возбудителем. На этом принципе основана специфичность анализа методом ПЦР. Если иммуноферментные серологические исследования зависят от индивидуальных параметров иммунной системы человека, ПЦР направлена исключительно на выявление РНК возбудителя HCV. 

Еще одна особенность проведения подобного исследования состоит в том, что расшифровка ПЦР гепатита С возможна как с использованием компьютерных программ (обычно используется, когда необходимо количественно установить содержание вируса в крови) и микроскопических методов. В норме у здорового в плане вирусного поражения печени человека патоген в крови отсутствует. Выявление возбудителя HCV методом ПЦР, будь то качественное либо количественное исследование, однозначно указывает на инфицирование. 

Виды тестов

При помощи постановки ПЦР можно не только определить виремию, то есть фактический уровень патогена в кровотоке, но и генотип вируса. Все доступные исследования, выполняемые по такой методике, приведены в таблице.

При гепатите С проводится все три исследования ПЦР. Алгоритм диагностики состоит в следующем:

1. Общие клинические исследования («стандартный набор» – кровь, моча, биохимия и печеночные пробы), дополнительно могут назначать ревматоидные тесты и ряд других анализов при подозрении на аутоиммунные процессы;
2. Серологическое исследование (ИФА) на выявление антител к возбудителю гепатита С. Изначально показан тест Anti-HCV Total.
3. Качественная ПЦР, предназначена для подтверждения результатов ИФА.
4. Количественная ПЦР, выполняется при подтвержденном диагнозе HCV-инфекции.
5. Генотипирование, также проводится при установленном факте заражения. 

Если человек желает самостоятельно обследоваться на гепатит С, рекомендуют сдавать ИФА. Дальнейшие обследования проводят в зависимости от полученных результатов. Если ИФА отрицательный и человек не предъявляет никаких жалоб, повторное тестирование проходят через год. Но при наличии симптомов патологии (в том числе и неспецифических, например, сильная слабость, утомляемость, боли в правом подреберье) следует сдать качественную ПЦР. 

Характеристика количественного анализа

В целом, техника выполнения ПЦР по большому счету одинакова, как для качественного, так и количественного исследования. Образец биологического материала смешивают с тест-раствором, который содержит специальные соединения. Их роль состоит в стимуляции деления РНК патогена (причем строго специфичного генетического материала возбудителя). 

В результате концентрация HCV достигает лабораторно определяемого уровня. На данном этапе возможно проведение качественного анализа. Однако после сложных подсчетов (обычно для этих целей используют компьютерные программы) устанавливают количественный показатель содержания HCV. После этого полученный результат переводят в Международные Единицы и фиксируют в лабораторном бланке. 

В некоторых случаях вместо ПЦР используют другие методики – разветвленной ДНК и транскрипционной амплификации. Но из-за сложности выполнения и более низкой чувствительности большинство специалистов предпочитают выявлять количественные нормы гепатита С именно при помощи ПЦР. 

Показания

Сейчас практически в любой частной лаборатории пациент может пройти обследования без каких-либо бумаг и направлений от терапевта. Количественное определение вируса гепатита С в крови не является исключением. Вопрос в том, когда целесообразна сдача теста?

Гепатологи рекомендуют проведение исследования в таких случаях:

• позитивный ИФА + положительная ПЦР;
• негативный ИФА + положительная ПЦР. 

Кроме того, количественное определение HCV показано и в ходе противовирусной терапии. Врач сравнивает результаты виремии, полученные до начала курса приема медикаментов, с результатами тестирования, проведенного уже во время лечения. Нормой считается негативная ПЦР к 12 неделе применения препаратов. А предиктором 100% выздоровления считают отсутствие виремии уже через месяц терапии.

Тестирование продолжают и после окончания лечения для исключения риска рецидива. Пациент должен сдавать такой тест на протяжении еще 2 лет. При отрицательном результате говорят о выздоровлении. Больного снимают с учета у гепатолога или инфекциониста и дают общие рекомендации относительно восстановления состояния печени. 

Если спустя 2 года количественный тест на HCV вновь положителен, все исследования повторяют заново. В таком случае предполагают повторное инфицирование и, возможно, другой генотип вируса. Но требуется новая схема лечения, а вероятность благополучного исхода существенно ниже. 

Когда информативно проведение теста

Сроки выполнения количественного определения вирусной нагрузки при подтвержденной HCV-инфекции указаны в таблице.

Как подготовиться

Сама методика постановки ПЦР менее чувствительна к особенностям функционирования внутренних органов, иммунной системы. Однако это не исключает соблюдения правил подготовки к проведению теста. В большинстве случаев количественный тест проводится при уже подтвержденном диагнозе гепатита С. 

Это подразумевает как минимум отказ от алкоголя и соблюдение строгой диеты (по столу №5 или №5а в зависимости от тяжести состояния больного). Лечащий врач уже ознакомлен с анамнезом, знает, какие лекарственные средства принимает пациент и от каких патологий страдает. Это облегчает расшифровку анализа ПЦР и снижает вероятность постановки ошибочного диагноза.

Но чтобы получить максимально точный результат необходимо:

• сдавать кровь натощак (после ужина должно пройти не менее 12 часов, завтрак противопоказан);
• посещать лабораторию следует в первой половине дня;
• до сдачи крови нельзя есть и пить что-либо кроме воды;
• нельзя курить за 8–10 часов до исследования.

Перечисленные правила нужно соблюдать перед каждой проверкой на количественное содержащие патогена. Если исследование проводят после лечения и врач разрешил ослабления в диете, за 7–10 дней до проведения тестирования необходимо вновь вернуться к строгому режиму питания. Что касается спиртного, ограничения сохраняются на протяжении всей жизни. 

Расшифровка количественного анализа крови на гепатит С

Ранее отечественные специалисты делили виремию на несколько групп: очень низкую, низкую, умеренную, высокую и очень высокую. Но в настоящее время расшифровка анализа крови на гепатит С проводится в соответствии с международными нормами. Сейчас виремию делят только на 2 группы. В таблице указаны вероятные данные количественного анализа на гепатит С (окончательная расшифровка вне зависимости от показателей должна проводиться врачом).

Но только специалист может грамотно расшифровать количественное исследование на HCV и отличить показатели нормы от критических, свидетельствующих об отсутствии результата от противовирусной терапии либо о рецидиве инфекции. Все анализы должны быть подшиты в амбулаторную карту, чтобы у доктора была полная информация об активности вирусной инфекции и ответной реакции на прием таргетных медикаментов.

Показатели нормы

Показатели нормы при расшифровке количественного анализа на гепатит С бывают только тогда, когда результат ПЦР отрицателен, то есть РНК вируса во взятом образце крови отсутствует. В остальных случаях наличие патогена свидетельствует о заражении. 

При подтверждении диагноза количественные показатели крови при гепатите С служат основой для оценки степени активности вирусного процесса. Высокая виремия повышает вероятность осложнений и сокращает срок наступления необратимых изменений в печени.

Вирусологическая нагрузка, превышающая 800 000 МЕ/мл служит основанием для проведения ряда инструментальных обследований:

• эластографии – диагностического метода для определения степени фиброза (разрастания и размеров очагов соединительной ткани);
• томографии – подробное рентгенологическое исследование, позволяющее исключить либо подтвердить наличие злокачественных или доброкачественных новообразований;
• биопсии печени, которая дает максимально полную информацию о структурных изменения в органе.

Низкая вирусная нагрузка говорит о медленно развивающейся вирусной инфекции. Такой процесс не исключает прогрессирования поражения печени, но вероятность возникновения тяжелого декомпенсированного цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы низка. У такой категории пациентов редко возникают внепеченочные проявления гепатита С (кардиоваскулярные расстройства, аутоиммунные нарушения), что также повышает шансы не только успешной противовирусной терапии, но и быстрого общего восстановления.

Какие показатели крови указывают на инфицирование

При постановке диагноза назначают несколько исследований, таким образом ошибка в проведении тестирования исключается.

Основными маркерами при гепатите С служат:

1. Положительный результат иммуноферментного анализа. Но ИФА во многом зависит от состояния иммунной системы человека, поэтому на этапе первичной диагностики не исключают ложноположительный либо ложноотрицательный результат.
2. Коэффициент позитивности при гепатите С выше 1. Рассчитывается по титру антител. Иногда референсные значения могут отличаться в зависимости от используемой тест-системы, но физиологическая норма всегда указывается в бланке с результатами.
3. Положительный результат качественного теста ПЦР. Обнаружение РНК возбудителя патологии однозначно указывает на инфицирование.
4. Определяемая виремия  методом количественной ПЦР.

Косвенными лабораторными признаками гепатита С служат:

• повышение уровня печеночных ферментов, билирубина;
• изменение уровня лимфоцитов, в некоторых случаях, лейкоцитов, ускорение СОЭ.

Но при ответе на вопрос, какие показатели крови указывают на гепатит С, доктора руководствуются результатами ПЦР, так как ИФА может быть непоказательным при наличии определенных заболеваний (ВИЧ, аутоиммунных расстройств). Также неверные результаты вероятны при беременности, приеме некоторых лекарств. Не последнюю роль играет и анамнез.

При гепатите С антитела, как и РНК обнаруживаются при помощи тест-систем не сразу, а спустя как минимум 10–14 дней. ИФА может дать достоверный результат позже – через 4–6 недель после инфицирования. Поэтому если есть серьезные основания предполагать контакт с кровью больного, при негативном результате все анализы имеет смысл повторить через 1–1,5 месяца. 

Возможны ли ошибочные результаты

В современных лабораториях тестирование проводят с соблюдением всех норм (в соответствии с требованиями отечественного и зарубежного законодательства), но исключить вероятность ошибок и ложных результатов нельзя.

Если на выполнение ИФА оказывает влияние состояние иммунной системы человека, правильность выполнения ПЦР зависит от:

• соблюдения стерильности при заборе, транспортировке и работе с образцами крови пациента, чтобы исключить возможный контакт с контаминированными образцами;
• соблюдения температурного режима и других правил при хранении и перевозке пробирок с кровью;
• правильности постановки ПЦР (начиная от работы лаборанта и заканчивая функционированием автоматических диагностических систем);
• качества используемых лабораторных материалов.

Но количественный анализ проводится на основании уже выполненных исследований, которые однозначно указывают на наличие HCV (ИФА и качественная ПЦР). Поэтому при отрицательном результате на фоне подтвержденного диагноза исследование повторяют. Кроме того, обращают внимание, как обозначается гепатит С в анализах.

В некоторых клиниках могут пользоваться устаревшей системой, когда виремия указывается не в международных единицах, а в количестве копий. Иногда путаница возникает с подсчетом нулей в указанных цифрах. Именно поэтому расшифровкой обозначений в бланке результатов должен заниматься врач. 

Преимущества количественного теста

Определение вирусной нагрузки возможно и с использованием других методик, включая серологические. Так, исследование на антиген core считают альтернативой количественной ПЦР.

Но большинство врачей отдают предпочтение ПЦР благодаря:

• доступности и качеству тест-систем: их производством занимаются ведущие мировые фармацевтические и медикотехнологические корпорации;
• быстроте и простоте выполнения;
• высокой чувствительности: современные методики ПЦР позволяют обнаружить РНК патогена в количестве 5 МЕ/мл;
• универсальности: количественное определение проводится одинаковыми методиками вне зависимости от генотипа HCV;
• объективности вне зависимости от состояния здоровья пациента (в отличие от ИФА), что позволяет проводить исследования на разных этапах диагностики и лечения;
• отсутствию влияния на результаты принимаемых лекарств. 

Сейчас ПЦР остается основным методом количественного определения виремии. Тест используется повсеместно практически во всех лабораториях и больницах. Но во избежание ошибок, перед сдачей анализа нужно поинтересоваться, по какой технологии будет проводиться исследование, чтобы соотнести результаты дальнейших анализов.