Серая зона в анализе гепатита с

Гепатит С — это одно из самых опасных и трудно диагностируемых вирусных заболеваний. Для определения болезни используют метод ПЦР гепатита С. Это новая высокотехнологичная методика, что позволяет исследовать генетический материал на существование жизни в мельчайших частицах (молекулах) и наименьших количествах. Вирус гепатита очень стойкий, он способен долго жить в окружающей среде и отлично приживается в организме человека.

Что такое ПЦР?

Нынче существует огромное количество самых различных болезней. И не меньшее число методов их определения. Так как агенты инфекций научились с легкостью приживаться в окружающей среде и эволюционировать, то чтобы их диагностировать, применяются новейшие технологии. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце. О нем часто пишут: ищет иглу в стогу сена, а потом из игл строит стог.

Вернуться к оглавлению

Виды метода ПЦР

Качественное тестирование поможет определить присутствие вируса гепатита С в организме.

Выделяют качественный и количественный анализ на гепатит. Чтобы определить, находится ли вирус в организме, и тем, у кого нашли антитела к гепатиту С, проводят качественное тестирование. Расшифровка анализа выдает итог: «положительно»; «отрицательно». Негативное значение означает: либо человек здоров, либо агентов в крови еще недостаточно и их невозможно найти. Поэтому стоит провести повторное исследование через некоторое время.

Положительный результат говорит о существовании инфекции. Это практически всегда точное значение. Ошибочные результаты зависят обычно от человеческого фактора (неправильное хранение или несоблюдение правил проведения методики). Когда норма, итог — отрицательный. Перед проведением тестирования особых правил нет, просто берут кровь с вены.

Ежели нашли, проводят количественный анализ (вирусная нагрузка) — он дает числовые значения: сколько РНК вируса гепатита находится на данное время в установленном объеме исследуемого материала. При активном развитии инфекции ее можно обнаружить на 1−2 неделе у зараженного человека. Обычно исследуют также кровь, потому что агенты в ней свободно циркулируют.

Вернуться к оглавлению

Особенности количественного ПЦР анализа

Количественный ПЦР поможет подобрать наиболее эффективное лечение гепатита С.

Отличием количественного анализа есть то, что не все его проходят. Качественный — определяет наличие, а количественный — помогает с подтверждением заключения «вирус гепатита», прогнозом протекания болезни и определения хода лечения. Насколько эффективна терапия, смотрят по числу РНК до и во время лечения. Также с его помощью определяют назначение доз препаратов.

Вернуться к оглавлению

Показания

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
нахождение острого и хронического гепатита С;
существование микст-гепатитов;
при планировании лечения;
если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Также смотрят, какая вирусная нагрузка при гепатите: низкая — терапия проводится успешно; повышенная — лечение не эффективно и его нужно менять.

Вернуться к оглавлению

Для чего проводится на различных этапах течения болезни?

Анализ поможет контролировать результаты терапии на всех стадиях лечения.

На разных фазах заболевания исследование проводят, чтобы дать рецензию пользы лечения и планированию срока его дальнейшего проведения. При хороших ответах на терапию срок ее сокращают. В противном случае, при медлительном уходе вируса, курс лечения продлевают. ПЦР на гепатит делают на 1,4, 12, 24 неделе терапии. Когда показатели не падают по истечении 12 недель, то делают вывод, что терапия не подходит этому организму. Этот анализ используют для установления, насколько активна инфекция и какая вероятность ее передать. Например, при беременности есть риск заразить малыша. После терапии выявляют риск возобновления болезни.

Вернуться к оглавлению

Расшифровка

После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена. «Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему. Таблица 1. Расшифровка количественного анализа РНК вируса

Цифровое обозначение числа вируса, МЕ/мл	Описание итога
Не обнаружено	Норма для здорового человека. Вирус не найден или исход ниже грани чувствительности методики.
До 1.8*10^2	Обнаружено в концентрации ниже линий границы.
До 8*10^5	Обнаружен вирус при хорошем прогнозе болезни и эффективном лечении. Низкая вирусная нагрузка.
Больше 8*10^5	Обнаружено вирус и большая вирусная нагрузка.
Больше 2,4*10^7	Обнаружен вирус в концентрации выше линейного диапазона.

Вернуться к оглавлению

Норма количественного анализа на гепатит С

Когда человек здоров, норма есть — «не обнаружено». У заболевших людей нормой будет снижение дозы вируса в результатах на логарифмическую единицу, что проявляется убыванием числа нулей в анализе на один (например, с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл). Рамки диапазона концентрации вируса, что определяет амплификатор, находятся в границах 1,8*102 — 2,4*107 МЕ/мл. Трактовка исхода:

низкая концентрация — от 600 МЕ/мл до 3*104 МЕ/мл;
средняя — от 3*104 МЕ/мл до 8*105 МЕ/мл;
высокая — выше 8*105 МЕ/мл.

Вернуться к оглавлению

Отклонения

Для определения степени поражения печени назначают биопсию.

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса. На получение недостоверного результата могут повлиять отдельные факторы, например, загрязнение образцов; присутствие в крови гепарина и веществ, замедляющих действие компонентов ПЦР; ошибки лабораторий; несоблюдение правил проведения теста.

Также результат в нескольких лабораториях может различаться, возможно, была другая методика проведения исследований. Чтобы узнать, насколько поражена печень и опасность болезни, недостаточно провести количественный ПЦР гепатита. Дополнительно проходят биохимические процедуры и биопсию.

Планируя лечение, проводят генотипирование вируса. В связи с тем, что гепатит С способен изменяться, существует несколько групп. Для разных типов лечение может отличаться. Бывают ситуации, когда присутствует несколько видов, но анализ находит один, тот, что преобладает. Тогда тест пересдают.

Вернуться к оглавлению

Плюсы метода

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение. Плюсы методики:

Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вируОписание итогаса.
Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.
https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Посредством этого исследования провести диагностику могут каждому для удостоверения факта отсутствия болезни. Но для достоверных фактов нужно четко соблюдать инструкции. ПЦР используют в разных отраслях: криминалистике, для установления отцовства, для диагностирования различных вирусов, для выявления аллергии на лекарства, клонировании генов, мутагенезе, секвенирование ДНК.

Источник: infopechen.ru

Источник

Гепатит С – вирусная патология, от которой страдают функциональные клетки печени. Заболевание имеет несколько разновидностей, каждая из которых характеризуется своими особенностями. Схема лечения подбирается больному в индивидуальном порядке. Недуг выявляют с помощью клинического анализа на антитела. Обычно они образуются в организме при проникновении вируса. Но положительный анализ на гепатит С не является поводом для паники. В любом случае диагноз ставится на основании результатов, полученных при комплексном обследовании.

Вирус гепатита С

Присутствие антител в крови пациента означает то, что его организм переборол или еще борется с инфекцией. В первом случае возбудитель вообще отсутствует, а наличие антител свидетельствует о пожизненном иммунитете. Анализ назначают:

при беременности;
во время подготовки к оперативному вмешательству;
при наличии заболеваний печени;
перед сдачей крови и ее компонентов в качестве донора;
по желанию.

Клиническое исследование на определение Anti-HCV может показать ложноположительный результат. Даже если он в последующем подтвердится, у больного будут шансы на полное выздоровление. Все зависит от генотипа, тяжести заболевания, наличия (отсутствия) осложнений, индивидуальных особенностей и хронических заболеваний, уже имеющихся у пациента. Большое значение имеет общее состояние здоровья и наследственность.

Могут ли результаты быть ложными

Для анализа на гепатит кровь берут из вены

В редких случаях анализ на антитела, спровоцированные вирусом гепатитом С, является ложноположительным. Окончательно подтвердить диагноз можно с помощью диагностического метода ПЦР. Посредством его определяют уже не антитела HCV, а частицы РНК-вируса, который является возбудителем. Для проведения анализа потребуется небольшое количество венозной крови и определенный период времени.

Нет необходимости специально готовиться к процедуре. Результат специфического исследования получают через 7 рабочих дней. Если он положительный, значит гепатит С в анамнезе больного все же присутствует. В сложившихся обстоятельствах пациенту следует сходить на прием к гепатологу или инфекционисту. Последний является специалистом более широкого профиля.

При получении ложноположительного результата (даже при отсутствии внешних признаков недомогания) человек должен принять меры, перечисленные выше. Гепатит С часто протекает в латентной (скрытой) форме. В этом случае симптомы появляются уже после возникновения осложнений.

Больной может стать инфекционным носителем. Данная фаза характеризуется тем, что пациент сам не болеет, но других людей заразить способен. При этом изолировать его от социума не рекомендуется. Такое отношение окажет негативное влияние на нервную систему. Инфекция не передается воздушно-капельным и бытовым путем. Просто окружающим и пациенту, страдающему гепатитом C, придется соблюдать жесткие профилактические меры.

Иногда больной, пройдя второй ключевой анализ, получает доказательства того, что в его крови нет активного РНК вируса. Это может свидетельствовать о самоизлечении или о переходе гепатита C в хроническую форму. Чтобы исключить (в худшем случае подтвердить) последнее предположение, рекомендуется обратиться в лечебное учреждение. Чем раньше это будет сделано, тем лучше для пациента.

Ложноположительные результаты анализа на гепатит часто наблюдаются у беременных женщин

Антитела, в функциях которых борьба с вирусом гепатита С, часто появляются у:

женщин, находящихся в положении;
больных, страдающих от аутоиммунных патологий, новообразований;
людей, принимающих иммунодепрессанты;
пациентов, отличающихся индивидуальными особенностями защитного механизма.

Ложноположительный результат на антитела вируса гепатита C может образоваться вследствие инфекционных заболеваний, перенесенных недавно. Подобные результаты получают люди, переболевшие гриппом, ангиной, туберкулезом. Anti-HCV появляются в крови после иммунизации против столбняка, гепатита B или гриппа. Иногда причиной ложноположительного результата на гепатит становится недосмотр медицинских работников. Лаборант может ошибиться при хранении образцов крови, неправильно их подготовить к процедуре или перепутать образцы.

Причин для получения положительного результата после проведения клинического анализа (помимо самого гепатита C) достаточно. Прежде чем расстраиваться, необходимо повторно сдать кровь. Лечение назначают только после прохождения полного диагностического обследования. Это обязательный этап, игнорировать который категорически запрещено.

Что делать при положительных результатах

УЗИ печени

После сдачи лабораторных анализов, пациент должен посетить лечащего врача. Он проанализирует полученные данные и поставит диагноз. При наличии сомнений специалист назначит дополнительные исследования (биопсия поврежденной паренхиматозной ткани, УЗИ). Они прояснят клиническую картину.

Каждый человек индивидуален, поэтому предугадать реакцию организма на болезнетворные вирусы гепатита C довольно сложно. В 20% случаев пациент вообще не замечает того, что был болен.

Если человек вел здоровый образ жизни и регулярно принимал профилактические меры, у него есть высокие шансы на самоизлечение. Устойчивость защитного механизма к вирусу гепатита C и другим болезнетворным микроорганизмам заметно снизится при наличии пагубных зависимостей, гиподинамии, неправильном рационе питания.

Продолжительность терапии напрямую зависит от разновидности гепатита C. Если диагностировали болезнь с генотипом 1 или 4, человеку придется отказаться от привычной жизни на длительный период времени. Успешность принятых лечебных мер определяется выбранной тактикой лечения, соблюдением дополнительных врачебных рекомендаций, используемыми медикаментозными препаратами.

Зачастую больному с гепатитом C необходима помощь психотерапевта

Если анализ на Anti-HCV и результаты, полученные после ПЦР, оказались положительными, пациенту может потребоваться помощь психотерапевта. Выявление гепатита C отрицательно скажется на качестве жизни. Также могут пострадать отношения с родными людьми. В сложившейся ситуации не следует делать поспешных выводов. При грамотном подходе течение гепатита C можно контролировать. Главное, регулярно принимать прописанные препараты и не забывать про диету. Больному, в анамнезе которого есть гепатит C, назначают диету, стол №5.

Анализ на гепатит С проводят довольно быстро, чего нельзя сказать о диагностическом обследовании в целом. Оно не ограничивается исследованиями, проводимыми в лаборатории. Пациенту придется пройти невролога, офтальмолога и остальных узкопрофильных врачей. Это позволит понять, насколько недуг повредил организм и имеются ли шансы на полное выздоровление. Чтобы сделать прогноз на несколько ближайших месяцев, потребуется наблюдение за состоянием больного.

В этом случае важен любой симптом, так как гепатит C часто проявляется посредством проявлений, которые входят в клиническую картину простудных заболеваний. Спутать грипп и гепатит C на начальной стадии просто. Поэтому данное заболевание очень опасно для человека. Меры, принимаемые для очищения и восстановления гепатоцитов, необходимо подбирать в полном соответствии с возрастом. У гепатита C нет ограничений, им может заразиться даже новорожденный ребенок.

Если лечение пройдет успешно, пациент сможет вернуться к прежней активной жизни. При этом он не должен забывать про меры предосторожности, иначе возникнет рецидив. Анализ на гепатит C после выздоровления всегда будет положительным, значит весомой пользы он уже не принесет. В этом случае врач будет отправлять пациента на прохождение более точных исследований.

Источник: medgepatit.com

Источник

Следует помнить, что бывает ложноположительный анализ на гепатит С, и такие результаты требуют перепроверки. Ведь гепатит С является самой тяжелой формой болезни, и положительная проба воспринимается как приговор.

Ряд причин может вызвать ошибочное тестирование болезни. Ложноположительный анализ на гепатит С хотя и встречается достаточно редко, но должен учитываться при диагностировании. Ошибка врачей в этом вопросе может нанести серьезную психологическую травму человеку.

Методы диагностики

Установить болезнь и назначить лечение могут только специализированные врачи: врач-инфекционист — на стадии острого гепатита и врач-гепатолог или врач-гастроэнтеролог — при хронической форме.

Для первичного диагностирования гепатита применяется иммуноферментный метод (ИФА). Этим способом устанавливаются маркеры наличия HCV-вируса в венозной крови человека, путем выявления и определения концентрации антител вируса.

Постановка диагноза методом ИФА имеет определенные сложности. Наличие антител не может однозначно указывать на наличие болезнетворного вируса в организме в данный момент: вирус может быть уже уничтожен, или антитела выработаны в результате реакции иммунной системы на другую инфекцию. Если получен отрицательный результат, то все ясно: организм никогда не имел контакта с вирусом гепатита. Другое дело — положительный результат, который может неправильно указывать на болезнь.

Для уточнения диагноза существуют иные способы исследования. Наиболее простые исследования — общий анализ крови, биохимический анализ крови, определение полимеразной цепной реакции ПЦР, УЗИ печени, селезенки, желчного пузыря и поджелудочной железы. Положительный итог первичного исследования проверяется дополнительным тестом рекомбинантного иммуноблоттинга РИБА.

Анализ результатов ИФА

Методом ИФА определяется суммарное содержание антител к вирусу гепатита С. В общем случае антитела подразделяются на IgM тип, вырабатываемый при острой форме болезни, и IgG тип, характерный для хронического процесса. Антитела IgM удается обнаружить через 10-14 дней после инфицирования организма, и существуют они 3-5 месяцев. Антитела IgG вырабатываются значительно позже, но продолжают находиться в организме в течение 8-10 лет даже после уничтожения вируса.

Отрицательный результат проверки ИФА говорит об отсутствии антител обоих типов. При этом следует помнить, что он не учитывает возможность проникновения вируса в организм в течение последних двух недель перед исследованием, так как антитела не успели выработаться.

Положительный результат указывает на наличие антител обоих типов или одного из них. Чаще всего это указывает на начало острой вирусной формы гепатита С или протекание хронической формы заболевания. Однако такой показатель может стать следствием уже вылеченной болезни или указывать, что человек является только носителем вируса. Иногда тест дает сомнительный результат анализа на гепатит С, что может быть вызвано рядом факторов.

Причины ложноположительного результата

В практике применения метода ИФА ложноположительный результат составляет до 15% от всех положительных результатов, причем для беременных женщин этот процент значительно выше.

К такому показателю могут привести следующие причины:

аутоиммунные формы заболеваний;
доброкачественные и злокачественные образования;
инфицирование другими сложными болезнетворными микроорганизмами.

Достаточно часто диагноз устанавливается ложно у беременных женщин. Это вызвано тем, что при беременности протекает процесс гестации, который сопровождается образованием специфических белков, изменением гормонального фона организма и микроэлементного состава крови, увеличением содержания цитокинов. Таким образом, пробы кровяной плазмы беременных женщин становятся сложными для однозначного анализа и ошибочно указывают на наличие антител к различным инфекционным вирусам, в т.ч. вирусу гепатита С.

Ложноположительные результаты могут устанавливаться у людей, зараженных другими инфекциями. Это связано с индивидуальными особенностями иммунной системы человека, которая неоднозначно отреагировала на проникновение болезнетворного вируса. Ситуацию усугубляет прием иммунодепрессантов.

На появление сомнительного результата может повлиять человеческий фактор. Причины самые прозаические:

недостаточная квалификация врача, проводящего анализ;
ошибка лаборанта;
случайная подмена пробы;
нарушения в подготовке образцов крови;
воздействие на образцы повышенной температуры.

В настоящее время общепризнаны следующие причины, вызывающие ложные анализы:

Малоисследованные перекрестные реакции.
Беременность; наличие в организме рибонуклеопротеинов.
Острая инфекция верхних дыхательных путей.
Сложные формы гриппа, различные ретровирусы.
Недавняя вакцинация от гриппа, гепатита В или столбняка.
Болезни в форме туберкулеза, герпеса, малярии, некоторых видов лихорадки, артрита, склеродермии, рассеянного склероза, грыжи, почечной недостаточности.
Недавнее проведение альфа-интерфероновой терапии.
Индивидуальное повышение содержания билирубина в крови.
Проявление липемической сыворотки, индивидуальные особенности иммунной системы, выраженные в естественной выработке антител и активности иммунных комплексов, и некоторые другие.

Особенности заболевания

Гепатит С — это острая форма инфекционного поражения печени человека. Он вызывается HCV-вирусом, имеющим несколько генотипов и множество разновидностей.

Мутационные способности вируса вызывают сложности в диагностировании и лечении и приводят к тому, что до сих пор вакцина против этого заболевания не разработана.

Начальный период болезни протекает медленно и обычно не проявляет заметных симптомов. Инкубационный период такого гепатита может достигать 5 месяцев (наиболее характерно — 50 дней). Вялотекущая фаза (до 10 дней) может проявляться лишь в небольшой общей слабости организма и бессоннице. Активная аккумуляция антител и активизация аминотрансфераз приводит к потемнению мочи и желтухе на теле и белках глаз. Последующее прогрессирование болезни вызывает белизну кала, зуд и заметное увеличение печени. Содержание билирубина и аминотрансфераз в крови резко увеличивается.

Гепатит С — трудноизлечимое заболевание, и только порядка 20% людей излечиваются полностью без лекарств. Почти столько же людей, перенесших острое заболевание, получают статус носителей вируса гепатита С. Они, как правило, не болеют (т.е. печень остается в норме), но могут диагностироваться как больные при случайном обследовании на гепатит или, что гораздо хуже, стать источником инфекции для других.

Как показывает практика, почти у двух третей переболевших заболевание переходит в хроническую форму. Такая форма болезни может долго протекать без серьезных осложнений, но имеет характерные симптомы, такие как:

периодическая тошнота;
болевые ощущения в области живота;
нудные суставные боли;
частые поносы.

Дополнительные анализы

В случае получения положительного результата по методу ИФА его необходимо проверить другими способами. Прежде всего проводится исследование ПЦР. Метод ПЦР используется:

для уточнения результата ИФА;
отделения гепатита С от других типов гепатитов;
определения стадии развития болезни;
контроля проведения лечебных процедур.

Этот способ позволяет определить содержание, концентрацию и активность непосредственно вируса гепатита С, что позволяет более точно диагностировать заболевание. В то же время метод ПЦР тоже может привести к ложноположительному результату на фоне перекрестных реакций. Отсутствие дополнительных серологических маркеров не способно полностью исключить ошибку в диагностировании.

Всемирная организация здравоохранения рекомендует проведение трехкратных подтверждающих исследований.

Всеми доступными методами должен определяться уровень трансаминазы, концентрация HCV-вируса, генотип вируса, уровень виремии в крови, гистологические процессы в печени.

Весь комплекс диагностирования должен включать определенные исследования:

Анализ на ИЛ-28В определяет генотип вируса.
Общий анализ крови проводится на проверку содержания эритроцитов, гематокрита, лейкоцитов, тромбоцитов, моноцитов, СОЭ и других компонентов крови.
Биохимический анализ крови направлен на выявление содержания билирубина, АЛТ, АСТ, сывороточного железа и других составов.
Оценка функции печени производится по белковым фракциям, альбумину, коагулограмме.

Необходимо провести тесты на другие вирусные гепатиты, а также на ВИЧ. Оценка стадии болезни проводится путем биопсии печени, эластометрическими методами и фибротестами. Используются возможности УЗИ. Количественные исследования проводятся методом ПЦР для выявления антител к тиреоглобулину и тиреопероксидазе, тиреотропного гормона. В дополнение к ПЦР применяется УЗИ щитовидной железы.

Тесты на аутоиммунные отклонения должны быть направлены на установление антимитохондриальных и антинуклеарных антител, уточнение ревматоидного и антинуклеарного факторов. Только после проведения всего комплекса исследований можно утверждать положительный результат на гепатит С.

Источник: ogepatite.ru

Источник