Современные методы лабораторной диагностики гепатитов

Эпидемиология, диагностика и профилактика вирусных гепатитов являются важными вопросами в практической медицине. Ежегодно этими инфекциями болеют десятки миллионов людей. Согласно данным ВОЗ, в настоящее время насчитывается не менее 2 млрд пациентов, инфицированных только вирусом гепатита В. В России сохраняется высокий уровень заболеваемости и увеличивающаяся частота неблагоприятных исходов (переход болезни в хроническую форму и летальный исход), что определяет высокую значимость изучения клиники, диагностики и лечения вирусных гепатитов практикующими врачами и студентами медицинских вузов.

С чего начинается гепатит

От момента инфицирования до появления первых симптомов болезни проходит от двух — четырех недель при гепатите А до двух — четырех (или даже шести) месяцев при гепатите В. В течение этого периода вирус размножается и адаптируется в организме, а затем начинает проявлять себя. До того как кожа и слизистые приобретают характерный желтый оттенок, моча темнеет, а каловые массы, лишаясь желчи, становятся бесцветными, гепатит напоминает обычный грипп. У пациента повышается температура, возникает головная боль, ломота в теле, общее недомогание. При гепатитах В и С температура может не повышаться, но вирус проявляется болью в суставах, иногда появляются высыпания. Начальные симптомы гепатита С могут ограничиться снижением аппетита и слабостью. При бессимптомном течении диагностика вирусных гепатитов затруднительна.

Изменение клинической картины

Через несколько дней клиническая картина меняется. Появляются боли в подреберье справа, тошнота и рвота, пропадает аппетит, темнеет моча, обесцвечиваются каловые массы, медики фиксируют увеличение в размерах печени, иногда — селезенки. На этом этапе в крови обнаруживаются характерные изменения и становится возможной ранняя диагностика вирусных гепатитов: увеличивается билирубин, появляются специфические маркеры вирусов, печеночные пробы увеличиваются в восемь — десять раз. После появления желтухи общее состояние больного улучшается, но это не происходит у хронических наркоманов и алкоголиков, независимо от типа вируса, вызвавшего заболевание, а также при гепатите С. У остальных больных в течение нескольких недель происходит развитие симптомов в обратную сторону.

Клиническое течение может быть легкой, среднетяжелой и тяжелой степени. Фульминантная форма гепатита — самая тяжелая разновидность, при которой стремительно развивается некроз печени и обычно заканчивается летальным исходом. Но большую опасность представляет хроническое течение болезни, что характерно для гепатитов В, С и D. Характерными симптомами являются повышенная утомляемость, снижение работоспособности, невозможность выполнять физические нагрузки прежней интенсивности. Расстройство стула, боли в животе, мышцах и суставах, тошнота могут быть вызваны как основным заболеванием, так и сопутствующими. Потемнение мочи, сосудистые звездочки, кровоточивость, увеличение селезенки и печени, желтуха, похудение обнаруживается уже на серьезных стадиях, когда диагностика вирусных гепатитов не представляет сложности.

Особенности диагностики

Основными методами диагностики хронического вирусного гепатита или острой формы болезни являются лабораторные исследования: определение маркеров гепатита, характера изменения биохимических показателей крови. Проявляются гепатиты А, В, D и Е относительно одинаковыми симптомами (боль в области правого подреберья и в желудке, нарастающая слабость, диарея, тошнота и рвота, пожелтение кожи и белков глаз, увеличение печени). Гепатиты G и С долгие годы могут проявляться только непреходящей усталостью. При диагностике обязателен ПЦР-анализ на выявление ферментов генетической информации вируса, биохимический анализ крови, иммунологическое исследование, определяющее наличие антител к вирусу, определение уровня ферментов и билирубина.

Лучевой гепатит, интоксикационный и аутоиммунный

Вызвать заболевание могут не только вирусы, но токсины растительного или синтетического происхождения. Различные яды и отравляющие вещества, содержащиеся в растениях и грибах, способствуют гибели клеток печени. Диагностика проводится путем выявления уровня протромбина, ферментов, альбумина и билирубина. Лучевой гепатит является одним из проявлений лучевой болезни, возникает из-за радиационного воздействия. В клинической практике заболевание встречается редко, потому что пациент, чтобы попасть в зону риска, должен в течение 3-4 месяцев получать высокие дозы радиации (более 400 рад). Основной метод диагностики — биохимия крови и анализ на билирубин.

Редкой формой гепатита является аутоиммунный. Наука до сих пор не объясняет причины возникновения этого заболевания. При аутоиммунном гепатите организм дает сбой, собственные клетки начинают атаковать печень. Данная форма часто сопровождается другие аутоиммунные заболевания, но в редких случаях может проявляться и самостоятельно. Лабораторная диагностика базируется на исследовании уровня гамма-глобулинов и антител (lgG, АсТ и АлТ). Болезнь можно подозревать, если уровень IgG превышает нормальные показатели в два раза и более.

Лабораторная диагностика

Вирусные гепатиты распространены гораздо шире, чем другие типы заболеваний, поэтому стоит остановиться на лабораторной диагностике более подробно. Анализ крови может дать максимум информации о течении заболевания. Инструментальные методы, например, МРТ, УЗИ или КТ, малоэффективны. Такие процедуры позволяют оценить состояние и структуру печени, но не дадут информации о том, каким именно гепатитом заражен организм, как давно это произошло. Анализ назначается при подозрении на инфицирование вирусным гепатитом, при наличии симптомов и бессимптомном течении, для контроля иммунитета после вакцинации. Регулярно сдавать кровь для скринингового исследования рекомендуется лицам с повышенным риском инфицирования: работникам здравоохранения, детям инфицированных родителей, людям, не прошедшим вакцинацию, беременным женщинам, лицам с иммунодефицитными состояниями.

Подготовка к анализам крови

Лабораторная диагностика вирусных гепатитов предполагает забор венозной крови с внутренней поверхности локтевого сгиба. Для получения достоверных результатов пациенту необходимо определенным образом подготовиться к исследованию. Правила для всех анализов крови стандартны. За сутки до забора биологического материала из рациона следует исключить жирную пищу, употребление алкоголя, наркотиков и лекарств (только после консультации врача). За 30 минут до исследования исключить курение, физические нагрузки и стрессы. Кровь сдается натощак (после крайнего приема пищи пройти должно минимум 8, желательно — 12 часов), пить можно только минеральную воду без газа. Все анализы проводят до рентгенографии, физиотерапевтических процедур, УЗИ.

Что может повлиять на результат

Анализ крови является простой диагностической процедурой, которая позволяет заподозрить или подтвердить множество заболеваний. Но иногда можно получить ложноотрицательные или ложноположительные результаты. Повлиять на результат исследования может неправильный забор, хранение или транспортировка венозной крови, длительное хранение биологического материала до поступления в лабораторию, замораживание или термическая обработка крови пациента. Исказить результаты диагностики может прием определенных медикаментов. Ложноположительные результаты можно получить при наличии аутоиммунных заболеваний, в частности присутствия в крови ревматоиодного фактора. Самыми распространенными системными болезнями являются инсулинозависимый сахарный диабет, витилиго, псориаз, язвенный колит, непереносимость глютена, диффузный токсический зоб, СПИДВИЧ.

Диагностика гепатита А

Диагноз устанавливается на основании эпидемиологических данных и расспроса больного. Подозревать гепатит А врач может, если у пациента был контакт с больным желтухой примерно за 7-50 суток до ухудшения самочувствия, факт употребления сырой воды, немытых фруктов и овощей. Обычно заражаются гепатитом А люди в возрасте от 15 до 29 лет. Оцениваются симптомы болезни: резкое ухудшение самочувствия с повышением температуры тела и расстройством ЖКТ, присоединение желтухи, улучшение состояния на фоне желтушности кожных покровов и склер глаз, увеличение селезенки и печени в размерах.

Лабораторные методы

Диагностика острого вирусного гепатита А требует проведения общего и биохимического анализов, анализа на определение РНК вируса, выявления антител к вирусу. Для этого типа заболевания характерны низкий уровень лейкоцитов, высокая СОЭ, пониженный билирубин и альбумин. Специфические антитела удается определить только в начале заболевания, то есть практически сразу после завершения инкубационного периода. Самым надежным методом лабораторной диагностики вирусного гепатита А является ПЦР-анализ, позволяющий обнаружит антитела даже при их незначительной концентрации. ПЦР дает информацию о том, когда произошло заражение. Этот диагностический метод также дает возможность идентифицировать фрагменты РНК вируса. Лабораторные исследования нужно проводить два раза, чтобы исключить возможность получения ложноположительного или ложноотрицательного результата.

Диагностика гепатита В

В дифференциальной диагностике вирусных гепатитов помогают указания на внутривенное ведение наркотических средств, хирургические вмешательства, переливания крови и другие процедуры, связанные с нарушением целостности слизистых или кожных покровов, контакт с людьми, страдающими хроническими заболеваниями печени или больными гепатитом в сроки от шести недель до шести месяцев до ухудшения состояния, случайные половые связи. Для гепатита В характерно постепенное начало, длительный период с выраженной слабостью, болью в суставах, нарушениями пищеварения, кожными высыпаниями. С появлением желтушности кожных покровов улучшение самочувствия не наблюдается. Состояние некоторых больных даже ухудшается. Врач может зафиксировать увеличение печени. Желтуха при гепатите В проявляется не сразу, а постепенно.

Сочетание с гепатитом D

При сочетании вирусного гепатита типа В и дельта-инфекции (гепатита D) заболевание протекает тяжелее, симптомы и лабораторные изменения обычно более выражены. Особое значение для диагностики имеют специфические реакции. Вирус В содержит три антигена, к каждому из которых в ходе инфекционного процесса вырабатываются антитела. Поэтому большое практическое значение среди других методов лабораторной диагностики вирусных гепатитов имеет иммуноферментный анализ. В крови больного определяется ДНК вируса, в результатах ПЦР оцениваются маркеры инфекции. Наличие антител к HB-core Ag может означать, что когда-то пациент переболел гепатитом В, потому что антитела сохраняются продолжительный период после выздоровления. Иногда антитела сохраняются в течение всей жизни.

Диагностика гепатита С

Для диагностирования гепатита С назначают следующие инструментальные и лабораторные обследования: УЗИ, кровь на антитела к вирусу гепатита, биохимия крови, ПЦР-анализ с целью определения ДНР вируса, биопсия печени. Положительные результаты могут указывать на наличие хронической инфекции или перенесенное в прошлом заболевание. Вызвать изменения в крови может другой инфекционный вирусный процесс. Есть вероятность получения ложноположительного результата. При первом анализе может быть положительный результат, который в дальнейшем (при углубленном исследовании) не подтверждается. Такая реакция может быть связана с различными причинами, но не с вирусом гепатита.

Гепатита Е: диагностика

Диагностика вирусного гепатита Е основывается на сочетании симптомом острой формы болезни с особенностями заражения (посещение специфических для типа Е регионов за 2-8 недель до появления признаков болезни, употребление неочищенной воды, наличие схожих болезней у окружающих). Подозревать гепатит Е можно при отсутствии в крови маркеров гепатитов А и С. Подтверждается диагноз при наличии специфических антител к вирусу типа Е, которые можно выявить при помощи анализа ИФА в остром периоде заболевания. Дополнительным методом диагностики является УЗИ печени. Лечение предполагает борьбу с интоксикацией, обусловленной симптоматической терапией и поражением печени. Назначается щадящая диета, гепатопротекторы, дезинтоксикационные инфузии.

Дифференциальная диагностика

Если при симптомах гепатита в лабораторных анализах не обнаружены антитела, то нужно провести серологические тесты и определение антител к вирусу простого герпеса, токсоплазме, цитомегаловирусу. Лабораторные показатели могут изменяться при любой системной вирусной инфекции, сопровождающей поражение печени. При болях в правом подреберье, повышении температуры, желтухе, тошноте и рвоте иногда ставят ошибочных диагноз: острый холецистит, восходящий холангит, холедохолитаз. У пожилых людей требуется дифференцировать гепатит с механической желтухой, вызванной раком поджелудочной или холедохолитиазом. С гепатитом у беременных нередко путают заболевания печени (эклампсия, холестаз беременных, острая жировая дистрофия печени). В некоторых случаях приходится исключать наследственные нарушения обмена веществ.

Анализы при назначении терапии

При назначении противовирусной терапии обязательно проводятся дополнительные исследования. Таким образом, лечение и диагностика вирусного гепатита оказываются связаны. Необходимо полное обследование вируса (вирусная нагрузка, генотип), полная диагностика печени (УЗИ с допплерографией, биохимия, отражающая функциональное и структурное состояние печеночных клеток, оценка степени фиброза), анализы для исключения противопоказаний для назначения терапии (аутоиммунные антитела, анализ крови, гормоны, УЗИ щитовидной железы). Пациентам старше 40 лет назначается обследование дыхательной системы, сердца и сосудов. Если диагностируется гепатит В, то дополнительно при назначении терапии проводится анализ на устойчивость к препаратам, мутацию вируса, вирус-дельта.