Сравнительная характеристика гепатитов в таблице
ТОП 10:
Гепатиты | А (HAV) | B (HBV) | С (НСV) | D (HDV) | Е (НЕV) | G (HGV) |
Таксономия возбудителя | Сем. Picornaviridae Род. Hepatovirus | Сем. Hepadnaviridae Род. Ortohepadnavirus | Сем. Flaviviridae Род. Hepacivirus | Неклассифицирован, вирус-сателлит (вироид) HBV | Сем. Hepeviridae Род. Hepavirus | Сем. Flaviviridae неклассифицирован, |
Морфология (форма, размер, наличие суперкапсида) | простой вирус, капсид икосаэдр 25-30 нм | сложный вируссферической и палочковидной формы 42 нм | сложный вирус сферической формы 55-65 нм | сложный вирус сферической формы 35-40 нм. | простой вирус икосаэдр 27-34нм | сложный вирус сферической формы 60 нм |
Геном | + РHK, линейная, нефрагментированная | ДНК кольцевая, двунитевая с однонитевым участком | + РHK, линейная, нефрагментированная | — РHK, кольцевая | + РHK, линейная, нефрагментированная | + РHK, линейная, нефрагментрованная |
Пути передачи | Фекально-оральный | Парентеральный | Парентеральный | Парентеральный | Фекально-оральный | Парентеральный |
Инкубацион-ный период | 14-45 дней | 2- 6 месяцев | 14 дней — 3 месяца | 2 — 6 месяцев | 14-45 дней | 14 дней — 6 месяцев |
Клинические проявления | Острые гепатиты | Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак | Часто хронический гепатит, цирроз, часто рак | Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак | Острые гепатиты, тяжело протекают у беременных | Часто хронический гепатит |
Специфичес-кая профилак-тика | Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет, ревакцинация через 4 года | Рекомбинантная, плановая с 1996 года. 12час, 1месяц,3 месяца ревакцинация через 5 лет | Нет | Вакцина против гепатита В из-за общности поверхностного HBsAg | Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет. | Нет |
Исследуемый материал | сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты. | сыворотка крови, биоптаты печени | сыворотка крови, биоптаты печени | сыворотка крови, биоптаты печени | сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты | сыворотка крови, биоптаты печени |
Маркеры | HAV РНК, HAV Ag, anti-HAV IgM, IgG | HBV ДНК, HBsAg, HBeAg, anti-HBsAg, anti-HBeAg, anti-HBc IgM, IgG | HCV РНК, anti-HCV IgM, anti-HCV IgG | HDV РНК, HDAg, anti-HDV IgM, IgG | HEV PНК, HEV Ag, anti-HEV IgM, IgG, | HGV РНК, anti-HGV |
Экспресс-диагностика | 1) ПЦР — РНК вируса (HAVRNA) выявляют в сыворотке крови, фекалиях, воде и пищевых продуктах. 2) ИФА — антиген вируса (HAVAg) выявляют в экстрактах фекалий; 3) Иммунная электрон-ная микроскопия (ИЭМ). | 1) ПЦР, метод молекулярной гибридизации — ДНК вируса (HBV DNA) в крови, биоптатах печени. 2) ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют антигены вируса : поверхностный антиген (HВsAg), “антиген инфекционности” (HВеAg); | ПЦР, метод молекулярной гибридизации в сыворотке крови — РНК вируса (HCV RNA)2) | 1) ПЦР, и метод молекулярной гибридизации — РНК вируса (HDV RNA) ; 2) ИФА, РИА, иммуноблотинг -антиген вируса (HDV Ag) . | 1) ПЦР обнаружение РНК вируса (HEV RNA) в сыворотке крови, испражнениях 2) ИФА — антиген вируса (HЕVAg), | ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR)обнаружение РНК вируса (HGV RNA) ; |
Вирусологичес-кие методы | Заражение клеточных культур, обезьян (шимпанзе) только для научных и производственных целей, в диагностике не применяют | Заражение обезьян (шимпанзе) только для научных целей, в диагностике не применяют | Нет | Нет | Нет | Нет |
Серологическаядиагностика | ИФА, РИА в сыворотке крови выявляют Ig M-антитела (анти-HAV IgM) и Ig G-антитела (анти-HAV IgG). | ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют противовирусные антитела: антитела к поверхностному антигену (анти-HВsAg); антитела к сердцевинному антигену (анти-HВсAg IgM, IgG; антитела к “антигену инфекционности” (анти-HВеAg); | ИФА,в сыворотке антитела к вирусу (анти-HCV IgM, анти-HCV IgG) В донорской крови 1) ИФА с раздельным определением антител к различным белкам вируса, 2) иммуноблоттинг с рекомбинантными антигенами к белкам капсида (С22) и функциональным белкам (NS3-NS5) для выявления антител. | ИФА в сыворотке крови- антитела к вирусу (анти-HDV IgM, анти-HDV IgG). | ИФА в сыворотке крови- антитела к вирусу (анти-HЕV IgM, анти-HЕV IgG | ИФА в сыворотке крови- антитела против вирусного белка Е2 (анти-HGV Е2) |
Иммуноблоттинг—метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их (блоттинг — от англ. blot, пятно) из геля на нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Полоски с “блотами” антигенов выпускаются различными фирмами. 1. На эти полоски наносят сыворотку больного. 2. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. 3. Образовавшийся на полоске комплекс [антиген + антитело больного + антитело против Ig человека] выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.
Иммуноферментный анализ, или метод (ИФА) — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител
Иммунная электронная микроскопия – электронная микроскопия чаще вирусов, обработанных соответствующими антителами. Вирусы, обработанные иммунной сывороткой, образуют иммунные агрегаты (микропреципитаты). Вокруг вирионов образуется “венчик“ из антител, контрастированный фосфорно-вольфрамовой кислотой или другими электроннооптически плотными препаратами хорошо видимый в электронном микроскопе.
Радиоиммунный анализ (РИА), — высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген — антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J, 14С, 3Н, 51Сr и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение): интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) основана на амплификации, т. е . увеличении количества копий специфического (маркерного) гена возбудителя . Для этого двунитевую ДНК, выделенную из исследуемого материал а, денатурируют ( «расплетают» при нагревании) и достраивают (при охлаждении) к расплетенным нитям ДНК новые комплементарные нити . В результате из одного гена образуются два. Этот процесс копирования генов многократно по вторяется при заданных температурных режимах . Достраивание новых комплементарных нитей ДНК происходит при добавлении к искомым генам прай меров (затравки из коротких однонитевых ДНК, комплементарных 3′- концам ДНК искомого гена), ДНК — полимеразы и нуклеотидов.Для амплификации РНК вирусов применяют ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR).
Маркеры гепатита В
Гепатит B (ГВ) – острое или хроническое заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (ВГВ), протекающее в различных клинико-морфологических вариантах: от бессимптомных форм до злокачественных (цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома). Гепатит В встречается гораздо чаще протекает более остро и о заканчивается без осложнений. Но у 10% больных ВГВ переходит в хроническое течение, а в 1 % случаев развивается цирроз и первичный рак печени. На долю ГВ приходится около 15% всех острых гепатитов и не менее 50% хронических. Безжелтушные и субклинические формы инфекции, в основном, остаются нераспознанными (до 95% случаев). Заражение ВГВ происходит от «здоровых» вирусоносителей с нераспознанными хроническими или острыми формами ГВ при переливании крови и ее компонентов, при медицинских манипуляциях и сексуальных контактах. Вирус может передаваться от инфицированной матери к ребенку во время родов при нарушении целостности плаценты. В семьях больных хроническими формами ГВ и носителей HBsAg вследствие реализации гемоконтактов в быту. Вирус гепатита В чрезвычайно устойчив, при комнатной температуре сохраняется в течение 3 мес., в замороженном виде – 15–20 лет.
ВГВ чаще всего поражает печень. однако ДНК и белки вируса обнаруживаются также в почках, селезенке, поджелудочной железе, коже, костном мозге и мононуклеарах периферической крови.
Маркеры ВГВ это ДНКвируса, вирусные антигены HBsAgи HBeAg, а также антитела к ним анти-HBs, анти-HBe, и к ядерному белку HBc -анти-HBc,которые могут бытьобнаружены в организме больного. Комплексное изучение маркёров позволяет правильно установить стадию инфекции ВГВ и прогнозировать ее дальнейшее развитие.
HBsAg —поверхностный антигенВГВ — белок его внешней оболочки. Это сложный антиген, состоящий из несколько антигенных детерминант, определяющих субтип HBsAg. Известны десять субтипов HBsAg: 7 основных — ауw1, ayw2, ayw3, ayw4, ayr, adr, adw2, adw4, adrq+, adrq– , и 5 редких: awr, adrw, adyr и adywr. На территории РБ преобладает HBsAg субтипа ауw (ayw2 – 57%; ayw3 – 37%)
HBсAg (HBcoreAg) — внутренний или сердцевинный (ядерный) антиген — белок нуклеокапсида, обеспечивающий репликативную активность ВГВ. HBeAg (HBprecoreAg) окружает ядерный, это конформационно измененный HBcAg. HBeAgобнаруживается исключительно в биоптатах печени в ядрах гепатоцитов, а HBeAgциркулирует в крови инфицированных лиц.
Источник
КАТЕГОРИИ:
Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748)
Острые вирусные гепатиты
18 – и летняя девушка обращается в клинику с жалобами на лихорадку, тошноту и рвоту в течение нескольких дней. Она не принимает никаких лекарств, но несколько раз в месяц напивается до полного отключения. Несколько месяцев назад она сделала себе татуировку на крестце в виде заходящего солнца. Недавно она проколола себе язык. При подробном расспросе она говорит, что может ее стул и стал светлее, просто она его так пристально не рассматривает. У нее около пяти новых сексуальных партнеров каждый год. При осмотре она желтушна.
Определение.Вирусный гепатит – это поражение печени одним из вирусов
гепатита A – E и G.
Этиология.Гепатиты А и Е передаются через зараженную воду и пищу. Они попадают в организм перорально, асимптоматичный инкубационный период длится несколько недель, в среднем 2 – 6 недель. Заболевание гепатитом А и Е длится от нескольких дней до нескольких недель, хронизации не происходит, они не приводят к развитию цирроза или печеночно-клеточной карциномы. Гепатиты B, C и D передаются парентеральным путем. Ими можно заразиться перинатально или при сексуальном контакте, переливании крови, уколе иглой и обмене иглами. Гепатит G был выделен из крови небольшого числа пациентов при скрининговых обследованиях доноров, но с определенной клинической формой еще не соотнесен. Гепатиты В и С могут переходить в хроническую форму и впоследствии в цирроз и рак печени. Четыре миллиона людей заражено гепатитом С в США. В США гепатит С – самая частая причина потребности в пересадке печени. При всех формах гепатитов может развиться фульминантный некроз и острая печеночная недостаточность.
Характеристика | Гепатит А | Гепатит В | Гепатит С | Гепатит D | Гепатит Е |
Инкубационный период (недель) | 2 – 6 (в ср. 4) | 4 – 26 (в ср. 13) | 2 – 20 | 4 – 8 | — |
Вирус | РНК | ДНК | РНК | Незавершенный РНК (требует наличия HbsAg) | РНК |
Начало | Внезапное (варьирует) | Постепенное (варьирует) | Постепенное (варьирует) | Внезапное (варьирует) | — |
Передача | Фекально-оральная | Парентеральная | Парентеральная | Парентеральная | Фекально-оральная |
Тяжесть | Легкий | Иногда тяжелый | Обычно субклинический | Ко-инфекция с гепатитом В | Легкий, кроме как у беременных |
Фульминантный гепатит | Редко | Очень редко (1 % больных с желтухой) | Крайне редко | Иногда при ко-инфекции | Редко |
Симптомы | Лихорадка, слабость, головная боль, анорексия, рвота, темная моча, желтуха | Как при гепатите А, но у 20 % симптомы сывороточной болезни (боль в суставах, сыпь) | Только у 20 % имеются симптомы | Как при гепатите А | Как при гепатите А |
Хронизация (%) | 5 – 10 | — | |||
Связь с переливанием крови (%) | Очень редко | 5 – 10 | Имеет место, но частота неизвестна | Редко | |
Профилактика после контакта | Иммуноглобулин Вакцина | Иммуноглобулин Вакцина | Нет | Нет | Неизвестно |
Приводит к циррозу | Нет | Да | Да | Да | Нет |
Приводит к гепато-целлюлярной карциноме | Нет | Да | Да | Да | Нет |
Носительство | Нет | Да | Да | Да | Нет |
Серология | Anti-HAV IgM IgG | HBsAg HBeAg Anti-HBs Anti-HBc Anti-HBe | Anti-HCV PCR-RNA | Anti-delta IgM IgG | Anti-Hep E IgM IgG |
Клинические проявления. Острые вирусные гепатиты любой этиологии проявляются желтухой, потемнением мочи, слабым окрашиванием стула, утомляемостью, потерей веса и болезненностью печени. При обследовании печень может быть увеличена. По клиническим проявлениям нельзя определить этиологию гепатита. На практике, те же симптомы могут быть при лекарственном или алкогольном гепатите. Гепатит В и С также может давать симптомы, сходные с сывороточной болезнью, такие как сыпь, боль в суставах, васкулит и гломерулонефрит. Иногда развивается криоглобулинемия. Гепатит В иногда приводит к узелковому периартерииту. Гепатит Е тяжелее протекает у беременных.
Диагностика.При всех формах вирусних и токсических гепатитов повышаются уровни общего и прямого билирубина. Вирусные гепатиты вызывают повышение АЛТ и АСТ, но обычно АЛТ повышается больше. АСТ обычно сильнее поднимается при лекарственном и алкогольном гепатитах. Щелочная фосфатаза и ГГТ повышаются реже, потому что эти ферменты отражают повреждение канальцев желчевыводящей системы или ее обструкцию. При массивном повреждении печени изменяются уровни протромбина и альбумина.
Наличие острой инфекции вирусами гепатитов A,C, D и Е подтверждают обнаружением антител класса IgM к каждому из вирусов. Наличие антител класса IgG свидетельствует о перенесенном заболевании. Активность гепатита С определяют по вирусной нагрузке крови с помощью ПЦР. Эта реакция не используется для первоначального установления диагноза. Гепатит В диагностируют по наличию поверхностного антигена, это первый вирусный маркер, уровень которого поднимается при болезни. Также наличие острого заболевания помогают подтвердить обнаружение HBeAg и антитела IgM. Присутствие HBeAg в крови свидетельствует об интенсивной репликации вируса и высокой степени заразности. На разрешение инфекционного процесса указывает утрата поверхностного антигена и развитие к нему антител. Антитела IgG к ядру вируса и антитела к HBeAg также подтверждают затухание острого процесса и могут быть единственными маркерами в крови в период окна (2 – 6 недель) между потерей поверхностного антигена и развитием к нему антител.
Лечение.Не существует эффективного лечения ни одной из форм гепатита. Хронический гепатит В можно лечить с помощью интерферона или ламивудина. При хроническом гепатите С применяют интерферон в сочетании с рибавирином. Развившийся цирроз печени необратим, и единственным выходом при ухудшении состояния будет пересадка печени.
После укола иглой, зараженной биологическим материалом HBsAg-позитивного пациента, пострадавшему необходимо ввести иммуноглобулин и вакцину против гепатита В. Если у пострадавшего уже имеются достаточные уровни протективных антител, то никакой профилактики не показано. Для гепатита С не существует эффективных методов профилактики в таких случаях, так же как нет вакцины. Все медицинские работники, инъекционные наркоманы и другие представители группы риска должны быть вакцинированы от гепатита В. В настоящее время в США вакцинируют от гепатита В всех новорожденных. От гепатита А вакцинируют при наличии факторов риска, например при предстоящем путешествии в страну, где возможно заражение им пищи и воды.
Дата добавления: 2014-12-16; Просмотров: 601; Нарушение авторских прав?
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
Рекомендуемые страницы:
Читайте также:
Источник
ЗАНЯТИЕ № 31 ТЕМА:
ГЕПАТОТРОПНЫЕ ВИРУСЫ
ПЕРЕЧЕНЬ
КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
Вирусные гепатиты
A, B, C, D, E, G. Этиология. Сравнительная
характеристика основных биологических
свойств возбудителей вирусных гепатитов.Вирус
гепатита А. Структура и свойства HAV.
Пути проникновения и циркуляция в
организме. Патогенез, клиника, исход
заболевания. Лабораторная диагностика
гепатита А. Иммунитет, специфическая
профилактика, лечение.Вирус
гепатита E.
Структура вируса. Эпидемиология,
клинические формы, исход заболевания.
Вирусологическая и серологическая
диагностика.Гепаднавирусы.
Морфология, особенности репродукции
вируса гепатита В. Структура генома,
антигены, полипептидные фрагменты
HBs-Ag,
подтипы вируса.Гепатит В:
эпидемиология, патогенез, клинические
формы течения заболевания, исходы.
Лабораторная диагностика. Иммунитет,
специфическая профилактика, лечение.Гепатит D. Особенности
строения вируса. Характеристика
заболевания: коинфекция, суперинфекция.
Лабораторная диагностика, профилактика.Гепатит
С: классификация вируса, ультраструктура,
антигены. Общая характеристика
заболевания, исходы заболевания.
Диагностика гепатита C:
скрининговые методы, подтверждающие
тесты.Гепатит
G:
возбудитель, вирусологическая
диагностика. Посттрансфузионный гепатит
TTV:
характеристика вируса, вирусологическая
диагностика.
ЛАБОРАТОРНАЯ
РАБОТА
Лабораторная
диагностика гепатита А (инкубационный
период 14-45 дней)
Исследуемый
материал:кровь (сыворотка), фекалии,
вода и пищевые продукты
Выявление антигена
(реакции)ИФА — антиген
вируса (HAVAg) выявляют в экстрактах фекалий
со 2-й недели и до конца болезни;
Выявление вируса
(методы) Иммунная электронная
микроскопия (ИЭМ), в научных и
производственных целях используют
заражение обезьян и культур клеток
Выявление антител
(классы Ат, сроки, реакции)ИФА,
РИА IgM 4-8 недели,IgG
с 4 недели, остаются на всю жизнь
Генодиагностика
(сроки, реакции) ПЦР —
РНК вируса (HAV RNA)
Динамика появления
серологических маркеров гепатита А
| Оценка 1.Антиген 2.Основным 3.Антитела класса |
Лабораторная
диагностика гепатита В (инкубационный
период 2- 6 месяцев)
Исследуемый
материал
кровь
(сыворотка), биоптаты печени
Выявление
антигенов (очередность, сроки, длительность)
ИФА,РПГА
в сыворотке крови определяют поверхностный
антиген HВsAg
1-5
месяцев, “антиген инфекционности”
HBеAg
2-3 месяца; HBс
Ag в
крови не циркулирует в свободном виде,
его можно обнаружить только в биоптатах
печени- в ядрах гепатоцитов
Выявление
антител (классы Ат, сроки, реакции)
ИФА, РПГА
в сыворотке крови определяют: антитела
к поверхностному антигену (анти-HВsAg)-
с 6 месяцев; антитела к “антигену
инфекционности” анти-HВеAg с 4-5 месяцев).
Антитела к сердцевинному антигену
(анти-HВсAg IgM и антиHВcAg IgG) служат индикатором
вирусемии и могут определяться в
гепатоцитах методом РИФ с 2 месяцев;
Генодиагностика.Выявление НК (сроки, реакции) ДНК
(HBV DNA вируса в крови и биоптатах печени
с момента заражения до выздоровления
(в среднем 6 месяцев) методом
ПЦР и молекулярной гибридизации
.
Динамика появления
серологических маркеров гепатита В
|
Оценка результатов 1. 2. 3. 4.Антитела 5. Анти-HBs-антитела |
Интерпретация
результатов серологического обследования
на гепатит В
Серологический | HBsAg | Анти-HBs | анти-НВс | HBеAg | Анти-HBе | ДНК ВГВ, копий/мл | |
HBc IgМ | HBc IgG | ||||||
Острый гепатит | +/– | –/+ | + | + | +/– | –/+ | +/– |
Хронический | + | – | – | + | – | + | <105 |
Хронический | + | – | +/– | + | +/–* | –/+* | >105 |
Иммунитет после | – | + | – | – | – | – | – |
Иммунитет после | – | + | – | + | – | +/– | – |
Лабораторная
диагностика гепатитов C, D, E
Гепатит
С (инкубационный
период 2 недели -3месяца)
Исследуемый
материал
кровь
(сыворотка), биоптаты печени
Скрининговые
тесты:
выявление
в
донорской крови
антител к белкам капсида (С22) и
функциональным белкам (NS3-NS5) вируса
тест-системами третьего поколения
ИФА-3,
Подтверждающие
тесты
в образцах с первично положительным
результатом ИФА проводят:
ИФА
с раздельным определением антител к
различным белкам вируса,иммуноблоттинг
с
использованием рекомбинантных антигенов
к белкам капсида
(С22) и функциональным белкам (NS3-NS5).
Оценка
результатов иммуноблотанализа
положительный
при выявлении антител к двум и более
АГ
Генодиагностика
РНК вируса
(HCV RNA) методом ПЦР и молекулярной
гибридизации на протяжении болезни
D
(инкубационный
период 2 недели -6 месяцев)
Исследуемый
материал
кровь
(сыворотка), биоптаты печени
Выявление
антигенов
(антигены, реакции) ИФА,
РИА,
иммуноблотинг
—
антиген вируса (HDVAg)
Выявление
антител
(реакции) Сыворотка
крови
ИФА
— анти-HDV IgM, анти-HDV IgG.
Генодиагностика
ПЦР, метод
молекулярной гибридизации — РНК вируса
(HDV RNA
Гепатит
Е (инкубационный
период 14-45 дней)
Исследуемый
материал:
кровь (сыворотка), фекалии, вода и пищевые
продукты
Выявление
антигена (реакции)
ИФА
— антиген вируса (HЕVAg),
Выявление
вируса (методы)
Иммунная
электронная микроскопия( ИЭМ),
Выявление
антител
ИФА
— анти-HЕV IgM в начале заболевания , анти-HЕV
IgG после заболевания)
Генодиагностика
сыворотка
крови, кал обнаружение РНК вируса (HEV
RNA) в ПЦР
на протяжении болезни
Гепатиты | А (HAV) | B (HBV) | С (НСV) | D (HDV) | Е (НЕV) | G (HGV) |
Таксономия |
Сем. Picornaviridae Род. |
Сем. Род. | Сем. Род. | Неклассифицирован, |
Сем. Род. | Сем. неклассифицирован, |
Морфология | простой 25-30 | сложный 42 нм | сложный 55-65 нм | сложный 35-40 нм. | простой 27-34нм | сложный 60 нм |
Геном | + РHK, линейная, | ДНК кольцевая, | + РHK, линейная, | — | + РHK, линейная, | + |
Пути передачи | Фекально-оральный | Парентеральный | Парентеральный | Парентеральный | Фекально-оральный | Парентеральный |
Инкубацион-ный | 14-45 дней | 2- 6 месяцев | 14 дней — 3 месяца | 2 — 6 месяцев | 14-45 дней | 14 дней — 6 |
Клинические | Острые гепатиты | Часто | Часто | Часто | Острые | Часто |
Специфичес-кая | Инактивированная | Рекомбинантная, | Нет | Вакцина | Инактивированная | Нет |
Исследуемый | сыворотка | сыворотка крови, | сыворотка крови, | сыворотка крови, | сыворотка крови, | сыворотка крови, |
Маркеры | HAV | HBV | HCV | HDV | HEV | HGV |
Экспресс—диагностика | 1) 2) 3) | 1) 2) ИФА, | ПЦР, | 1) 2) | 1) ПЦРобнаружение РНК вируса (HEV 2) ИФА | ПЦРс |
Вирусологичес-кие | Заражение | Заражение | Нет | Нет | Нет | Нет |
Серологическаядиагностика | ИФА, | ИФА, | ИФА, В 1) ИФА с раздельным 2) | ИФА | ИФА | ИФА |
Иммуноблоттинг
— метод
выявления белков, основанный на сочетании
электрофореза и ИФА или РИА. Антигены
возбудителя разделяют с помощью
электрофореза
в полиакриламидном геле, затем переносят
их (блоттинг — от англ. blot, пятно) из геля
на нитроцеллюлозную мембрану и проявляют
с помощью ИФА.
Полоски с “блотами” антигенов выпускаются
различными фирмами. 1. На эти полоски
наносят сыворотку больного. 2. Затем,
после инкубации, отмывают от несвязавшихся
антител больного и наносят сыворотку
против иммуноглобулинов человека,
меченную ферментом. 3. Образовавшийся
на полоске комплекс [антиген + антитело
больного + антитело против Ig человека]
выявляют добавлением хромогенного
субстрата, изменяющего окраску под
действием фермента.
Иммуноферментный
анализ, или метод (ИФА)
— выявление антигенов с помощью
соответствующих им антител, конъюгированных
с ферментом-меткой (пероксидазой хрена,
бета-галактозидазой или щелочной
фосфатазой). После соединения антигена
с меченой ферментом иммунной сывороткой
в смесь добавляют субстрат/хромоген.
Субстрат расщепляется ферментом и
изменяется цвет продукта реакции —
интенсивность окраски прямо пропорциональна
количеству связавшихся молекул антигена
и антител
Иммунная
электронная микроскопия
– электронная микроскопия чаще вирусов,
обработанных соответствующими антителами.
Вирусы, обработанные иммунной сывороткой,
образуют иммунные агрегаты
(микропреципитаты). Вокруг вирионов
образуется “венчик“ из антител,
контрастированный фосфорно-вольфрамовой
кислотой или другими электроннооптически
плотными препаратами хорошо видимый в
электронном микроскопе.
Радиоиммунный
анализ (РИА),
— высокочувствительный метод, основанный
на реакции антиген — антитело с
применением антигенов или антител,
меченных радионуклидом (125J, 14С, 3Н, 51Сr и
др.). После их взаимодействия отделяют
образовавшийся радиоактивный иммунный
комплекс и определяют его радиоактивность
в соответствующем счетчике (бета- или
гамма-излучение): интенсивность излучения
прямо пропорциональна количеству
связавшихся молекул антигена и антител.
Полимеразная
цепная реакция (ПЦР)
основана на амплификации,
т. е . увеличении количества копий
специфического (маркерного) гена
возбудителя
. Для этого двунитевую ДНК, выделенную
из исследуемого материал а, денатурируют
( «расплетают» при нагревании) и
достраивают (при охлаждении) к расплетенным
нитям ДНК новые комплементарные нити
. В результате из одного гена образуются
два. Этот
процесс копирования генов многократно
по вторяется при задан