Степень вирусной нагрузки при гепатите с классификация

При подтверждении HCV-инфекции, задача врача состоит в первую очередь в оценке состояния здоровья пациента. Но новейшие технологии лабораторной диагностики позволяют предположить, насколько высок риск осложнений, установить активность патологического процесса. Поэтому одним из основных диагностических параметров является вирусная нагрузка при гепатите С (Ц). Для этого показателя в медицинской литературе также применяют термин «виремия».

Исследование на вирусную нагрузку

Ключевую роль в определении схемы терапии играет генотип HCV. Как показывает практика, наиболее распространена первая разновидность, остальные встречаются несколько реже. Но именно 1 генотип крайне тяжело поддается лечению, и высокая виремия служит одним из предикторов неблагоприятного течения патологии. На основании количественного лабораторного теста специалист может назначить более эффективное лекарство нового поколения вместо часто применяемых комбинированных схем с софосбувиром.

Показатели вирусной нагрузки необходимы и для контроля проводимой противовирусной терапии. Виремию в обязательном порядке определяют до начала приема медикаментов, а затем исследование повторяют еще дважды в течение курса лечения. Устойчивая тенденция к снижению говорит в пользу хорошего «ответа» на препараты и наоборот, сохранение вирусной нагрузки на одном уровне либо увеличение цифр (по сравнению с первым анализом) требует быстрого изменения схемы терапии либо отмены приема медикаментов до выяснения причины резистентности.

Что значит вирусологическая нагрузка

При подозрении на гепатит С пациенту приходится сдавать множество анализов, названия которых понятны далеко не всегда. Попробуем разобраться в специальных медицинских терминах и обозначениях тестов, назначаемых врачом. Для обследования больного проводят анализы по двум основным методикам.

Серологическое исследование. В лабораторном бланке часто обозначается как anti-HCV. Тест предназначен для выявления антител (иммуноглобулинов) к возбудителю гепатита С, которые достигают определяемого уровня на 4–6 неделе после заражения. Но по титру АТ к HCV можно только приблизительно определить тяжесть заражения.
Молекулярные исследования. Включают несколько тестов. Обозначается как ПЦР (полимеразная цепная реакция). Анализ достаточно сложен в исполнении и позволяет установить РНК вируса в кровотоке. Самый простой тест – качественный, когда определяют только присутствие HCVв сыворотке. Количественный позволяет выяснить точное количество копий РНК в 1 мл крови. При помощи генотипирования устанавливают структуру вириона и точную разновидность HCV (I–VI).

Количественную ПЦР проводят не сразу. Максимально возможной чувствительностью характеризуются тест-системы, используемые для постановки качественного исследования. Но высокая стоимость анализа ограничивает его повсеместное применение. Для рутинной диагностики применяют более простой в проведении ИФА.

Дальнейшее обследование проводят при позитивном ИФА. Ранее качественная ПЦР считалась более чувствительной, чем количественная. Но современные тест-системы позволяют определить количество вируса гепатита С в крови при показателях 5 МЕ/мл и выше.

Лаборатории могут использовать разные наборы для постановки количественного анализа. Поэтому все исследования лучше проводить в одном месте, чтобы не допустить погрешности в показаниях тестов.

Анализ на гепатит С

Какая вирусная нагрузка бывает при гепатите С? Для ответа на этот вопрос используют не только числовые показатели.

Для удобства диагностики и прогнозирования исхода заболевания виремию делят на группы:

низкая;
высокая.

В некоторых медицинских источниках дополнительно используют термины «умеренная» и «очень высокая». На многих форумах пациенты нередко жалуются на погрешности при проведении количественной ПЦР. Дело в том, что разные тест-системы могут отличаться по интерпретации результатов. Если ранее виремию обозначали в копиях РНК/мл, сейчас все современные лаборатории указывают показатель в Международных Единицах ( МЕ/мл).

Как определить

Как определить вирусную нагрузку? Чтобы посчитать данный параметр, используют различные лабораторные методики. Их названия и краткое описание приведено в таблице.

Наименование теста	Описание
ПЦР	Отличается высокой чувствительностью, распространенностью и универсальностью
Метод разветвленной ДНК	Исследование просто в проведении и обычно применяется для тестирования большого количества образцов. На практике тест используется крайне редко из-за низкой чувствительности
Транскрипционная амплификация	Методика основана на амплификации генетических образцов вируса в крови. Способ отличается быстротой проведения, а чувствительность сопоставима с ПЦР. Но многие лаборатории только начинают переход на новые тест-системы

Как правило, исследование выполняют методом ПЦР. Но перед проведением теста необходимо обязательно поинтересоваться, какой методикой он проводится. Это нужно для правильной интерпретации результатов. Анализ рекомендуют выполнять по максимально чувствительным способам. Только таким образом можно определить ответную реакцию пациента на проводимую терапию и вовремя обратить внимание на признаки возможных осложнений.

Чувствительность диагностических методов

Чувствительность проводимого теста – это минимальное количество копий вируса, которое можно обнаружить при помощи данного исследования. При обследовании перед назначением терапии доктора не акцентируют внимание на особенностях методики выполнения анализа. Однако в последующем, когда речь идет об оценке эффективности лечения, важно выполнять тесты максимально чувствительным методом.

Характеристики применяемых на сегодняшний день способов определения виремии указаны в таблице.

Наименование исследования	Чувствительность теста
ПЦР	От 5–10 МЕ/мл
Методика разветвленной ДНК	От 600 МЕ/мл
Способ транскрипционной амплификации	От 5 МЕ/мл

При этом доктора обращают внимание пациентов, что в лабораториях для обозначения вирусной нагрузки градацию показателей проводят с использованием степеней (102, 104, 106 и т.д.). Поэтому расшифровку результатов анализа лучше доверить врачу, а все бланки дублировать и обязательно вклеивать в карту пациента.

Анализ на генотип гепатита С

Когда показан количественный анализ

Проблемой, как узнать уровень виремии, доктора занимаются уже после подтверждения диагноза HCV – инфекции. Тем более, современные тест-наборы, предназначенные для постановки качественной ПЦР, более чувствительны, чем системы для проведения количественного анализа. Нередко, лаборатории предлагают пакет, включающий анализ на вирусную нагрузку и генотипирование. Такой комплекс исследований обходится дешевле, чем выполнение тестов по отдельности.

Показания к установлению уровня виремии приведены в таблице.

Показания к сдаче анализа	Описание
Позитивный Anti-HCV и положительный качественный тест ПЦР	Подтверждают диагноз гепатита С, уровень вирусологической нагрузки устанавливается для определения дальнейшей тактики противовирусной терапии
Негативный Anti-HCV и позитивная качественная ПЦР	Такие результаты свидетельствуют об иммунодефиците. Его причину выясняют до начала лечения. Состояние мешает адекватной иммунной реакции (выработке антител) на возбудителя вируса. Количественный тест ПЦР служит дополнительным подтверждением диагноза и также влияет на последующую терапию
Период лечения	Современные противовирусные препараты принимают на протяжении 12 или 24 недель. При 12-недельном курсе терапии определены следующие сроки выполнения количественного теста: 21–28 день, 77–84 день (последняя неделя приема). При 24-недельном курсе лечения анализ на виремию сдают: на 4 неделе, на 12 неделе, на 24 неделе. Дополнительно пациент может сдать кровь на уровень виремии в любое время самостоятельно в частной лаборатории без направления от врача. При 48-недельном лечебном курсе (обычно проводится с применением интерферона и рибавирина): в течение 4 недели, в промежуток с 12 по 16 неделю, на 23–24 неделе, на последней неделе лечения.
После окончания терапии	Количественный анализ повторяют в течение 1–2 лет с момента окончания приема медикаментов с интервалом в 3 месяца. Если сохраняется негативный результат, в карточке делают пометку, что пациент выздоровел

Если по истечении двух лет после окончания терапии количественный тест вновь показал виремию (вне зависимости от уровня), говорят о повторном инфицировании. В таком случае все исследования проводят сначала. Определяют степень поражения печени при помощи эластографии, УЗИ и биопсии (инвазивная процедура, проводится по строгим показаниям).

Количественный анализ крови демонстрирует только уровень виремии (в цифровом значении). В ходе исследования не устанавливают разновидность вируса гепатита С. Для этого показано генотипирование.

Гепатолог-инфекционист

Расшифровка показателей в результатах анализов

На этапе количественной оценки виремии пациент уже находится под наблюдением врача. Если результат первичного анализа (anti-HCV) вызывает сомнения, терапевт направляет больного к узкому специалисту. Это либо инфекционист, либо гепатолог.

Если определяется вирусная нагрузка при гепатите С, расшифровка должна проводиться только врачом. Но общепринятые варианты трактовки представлены в таблице ниже.

Результаты исследований	Описание
8×105 МЕ/мл и более	Высокая виремия
7,9×105 МЕ/мл и менее	Низкая виремия
Некоторые зарубежные специалисты считают, что критическая граница между высокой и низкой вирусологической нагрузкой составляет 4×105 МЕ/мл
Виремия не определяется	РНК возбудителя либо отсутствует, либо его количества недостаточно для лабораторного определения

Отсутствие генетического материала HCV в крови является вариантом нормы.

Норма

При первичном обследовании, когда подтвержден диагноз гепатита С, о норме при количественном определении вируса речь не идет. РНК патогена будет обнаружено в крови в любом случае. Но во время лечения нормой считается отсутствие возбудителя HCV в плазме уже к середине курса терапии.

Необнаруживаемый уровень HCV на 4–6 неделе приема медикаментов служит предиктором успешного лечения. При этом анализ следует выполнять максимально чувствительными методами, которые смогут определить содержание патогена в количестве 5 МЕ/мл и выше. Нормой считают отсутствие вируса после окончания медикаментозной терапии.

Высокая

Высокой является виремия от 8×104 МЕ/мл и более (некоторые авторы называют число в два раза ниже – 4×104 МЕ/мл). Подобные показатели – один из неблагоприятных факторов течения патологии, говорят в пользу очень активной репликации вируса, быстром распространении HCV. Чем больше параметры виремии, тем выше вероятность развития осложнений – цирроза, фиброза, асцита, внепеченочных проявлений гепатита.

В таких случаях нужно особое внимание уделить состоянию печени. Обычно врач проводит все возможные лабораторные и инструментальные исследования, чтобы получить максимально полную картину и исключить скрытые патологии. Также слишком большие показатели виремии (особенно при невысоких титрах либо отсутствии антител) могут быть следствием проблем с иммунитетом (ВИЧ, иммунодепрессивные состояния и т.д.).

При отсутствии цирроза и коинфекций прописывают стандартную схему терапии (комбинации с софосбувиром). Если виремия снижается недостаточно быстро либо остается на прежнем уровне, принимают решение о смене тактики лечения.

Высокая виремия в сочетании с фиброзом и циррозом, требует серьезного подхода. Назначают длительный курс терапии, иногда показана трансплантация органа. В таком случае (если до пересадки остается полгода и менее) лечение не начинают, а проводят уже после хирургического вмешательства.

Прием у инфекциониста

Низкая

Если виремия составляет ниже 8×105 МЕ/мл, говорят о низкой вирусной нагрузке. Что означает такой показатель? Цифры служат предиктором выздоровления. При минимальном содержании патогена возможно носительство, когда HCV не прогрессирует, но это не означает пожизненного латентного течения болезни. Часто активизация процесса происходит спонтанно и незаметно для пациента.

К причинам сниженной виремии относят:

хорошую работу иммунной системы;
правильное питание с ограничением (в идеале, исключением) тяжелой для печени пищи;
строгое ограничение алкоголя;
отсутствие лекарственного гепатотоксического воздействия;
отсутствие коинфекций.

Иногда невысокое число виремии отмечают на фоне недавнего заражения. В таком случае доктора оценивают состояние пациента. При благоприятном прогнозе лечение не начинают, предоставляя иммунитету «возможность» самостоятельно побороть инфекцию.

При хроническом течении патологии на фоне низкой ВН лечение начинают незамедлительно. Однако отсутствие яркой активности HCV предполагает 100% положительный результат терапии практически у всех пациентов. Но минимальная виремия уже после проведенного курса приема противовирусных средств служит признаков возможного рецидива либо повторного заражения.

Как снизить высокую виремию

Когда проведен анализ на количественное определение HCV и выполнена расшифровка результатов теста, доктора принимают решение о тактике проводимой терапии.

Лечение заключается в назначении следующих препаратов:

Противовирусные препараты прямого действия (Мавирет, софосбувир, даклатасвир, Викейра Пак, велпатасвир, ледипасвир и т.д.). Отличаются высокой эффективностью (85–95% благоприятных исходов), безопасностью, коротким перечнем противопоказаний.
Комбинация интерферона с рибавирином. В настоящее время применяет редко из-за низкой эффективности (по сравнению с препаратами последнего поколения) и высокого риска противопоказаний. Но назначают при непереносимости противовирусных средств либо наличии других ограничений.
Гепатопротекторы (Эссенциале Форте, Гепа-Мерц, Карсил, Легалон и др.) Назначают всем пациентам уже при первом посещении врача по поводу жалоб на состояние печени. Принимают на протяжении длительного периода, как правило, до полного (или максимально возможного для данного пациента) восстановления печени.
Поливитаминные комплексы. Также принимают длительными курсами. В составе препаратов обязательно содержание витаминов группы В, антиоксидантов (витаминов А и Е, аскорбиновой кислоты), основных макро- и микроэлементов, незаменимых аминокислот.

Одним из немногих способов снизить вирусную нагрузку является правильно подобранное комплексное лечение.

Также для быстрого снижения виремии необходимо придерживаться строгой диеты. Во время консультации доктор подробно разъясняет особенности питания в соответствии со столом №5, при тяжелом состоянии пациента – №5а. Категорически противопоказан алкоголь (вне зависимости от крепости и количества). Рекомендуют отказаться от вредных привычек, особенно наркотической и никотиновой зависимостей.

Назначение лечения

Влияние показателя на лечение и прогноз

В настоящее время лечение гепатита С мало зависит от параметров виремии. Ключевую роль играет разновидность HCV. Если выявлен I генотип патогена и показатели виремии слишком высоки, предпочтение отдают препаратам последнего поколения. К примеру, вместо софосбувира с даклатасвиром или другими лекарствами прямого действия, прописывают Викейру Пак.

Темпы снижения виремии характеризуются термином «вирусологический ответ» (или сокращенно ВО).

В зависимости от сроков уменьшения концентрации HCV в крови различают:

ранний ВО – снижение виремии до неопределяемых концентраций на 12 неделе терапии;
очень ранний ВО – отсутствие показателей на 4 неделе терапии;
устойчивый ВО – сохранение негативного результата на протяжении полугода после окончания лечения;
возврат вирусной инфекции – повышение виремии после кратковременного снижения;
рецидив HCV – повторное появление вируса после успешного лечения.

Задача врача – добиться устойчивого вирусологического ответа, предикторами которого служит отсутствие виремии на 4 или 12 неделе лечения.

В целом, при нормальном состоянии печени (без цирроза) благоприятный прогноз вероятен и при высоком содержании HCV. Хотя гепатит С часто протекает без каких-либо клинических признаков, вполне реально вовремя диагностировать патологию. Для этого рекомендовано ежегодное проведение anti-HCV, а после перенесенного заболевания – качественное определение вируса методом ПЦР.

Источник

Вирусная нагрузка, или виремия – это количество генетического материала возбудителя в биологическом материале обследуемого человека. В случае с вирусным гепатитом С ген возбудителя представлен РНК (рибонуклеиновой кислотой) вируса, а ищут его в венозной крови. Установить уровень вирусной нагрузки позволяет такой современный лабораторный диагностический метод диагностики как анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции). Виремия определяется МЕ (международными единицами) в 1 мл крови или количеством копий РНК в 1 мл крови. Эти показатели можно конвертировать друг в друга: 1 МЕ приблизительно соответствует 4 копиям РНК. Те это показатель количества копий в 1 миллилитре крови пациента, например нагрузка 4,6*10’5 МЕ означает 460000 МЕ или 1,840 млн копий РНК в миллилитре крови.

Содержание
Когда ищут вирусный антиген?
Метод ПЦР
Количественный анализ ПЦР показывает уровень виремии
Метод разветвленной ДНК (гибридизационного анализа)
Метод транскрипционной амплификации (ТМА)
Вирусная нагрузка при гепатите С: расшифровка

Когда ищут вирусный антиген?

Вирусный антиген в крови пациента ищут тогда, когда получают положительный результат анализа на антитела к вирусу гепатита С методом иммуноферментного анализа (ИФА). Что значит выявление антител к гепатиту С? Антитела(иммуноглобулины) к вирусу гепатита С могут быть в крови человека либо если он перенес заболевание ранее, либо, если он и сейчас заражен. Выявление вирусного генетического материала позволяет установить причину наличия антител в крови человека.

Виремия влияет на течение и агрессивность заболевания, а также на дальнейший прогноз для здоровья и жизни пациента. Высокие ее цифры указывают на высокую вирусную активность с риском высоких фиброзов в печени, а у беременных – на реальную угрозу внутриутробного заражения плода гепатитом С. Чем выше уровень виремии, тем опаснее болезнь и тем хуже ее прогноз. Низкая вирусная нагрузка и снижение ее в процессе противовирусного лечения является для пациента хорошим прогностическим признаком, высокий же уровень виремии и отсутствие ее снижения в ответ на проводимое лечение – неблагоприятным сигналом. Уровень виремии следует регулярно контролировать во время прохождения курса лечения. Ответная реакция вируса гепатита С является показательной и определяет длительность противовирусной терапии, которая может составлять от 12 до 24 недель.

Для установления РНК возбудителя в крови и определения уровня вирусной нагрузки может использоваться несколько лабораторных методов: ПЦР (самый распространенный), разветвленной ДНК и ТМА.

Метод ПЦР

ПЦР-анализ может обнаружить вирусную РНК гепатита С даже тогда, когда его количество в крови обследуемого человека минимально. Это дорогостоящий вид исследования, поскольку для него необходимы дорогие тест-диагностикумы. Суть метода состоит в том, что с помощью определенного температурного воздействия на пробирку с биоматериалом достигают множественного копирования РНК. Таким способом искусственно увеличивают количество генетического материала вируса в пробе.

В подготовленную таким образом пробу добавляют красящий фермент, который взаимодействует с РНК возбудителя, если таковой в пробе имеется. По плотности окрашивания проводят оценку вирусной нагрузки, сравнивая полученный цвет с цветной шкалой.

С целью обнаружения РНК вируса может проводиться один из трех видов ПЦР:

Качественный. Дает ответ на вопрос, есть ли вирус гепатита С в крови обследуемого. В норме получают ответ: «РНК не обнаружена». Этот тест на обнаружение антигена возбудителя необходим для установления факта заражения гепатитом С.

Количественный. Используют для контроля эффективности противовирусного лечения.

Генотипирование. Применяют для уточнения диагноза – установления генотипа возбудителя.

Количественный анализ ПЦР показывает уровень виремии.

Чувствительность этого теста позволяет обнаружить антиген при его содержании в крови от 50 МЕ/мл, а ультра тест имеет чувствительность от 15 МЕ/мл. В течение всего курса лечения с помощью количественного ПЦР уровень виремии устанавливают несколько раз: до начала лечения (первичный уровень), через 2 недели и при необходимости через 4 недели (в зависимости от длительности курса и вирусологического ответа ), также спустя полгода с начала лечения. Установление вирусной нагрузки после его окончания считается показательным, поскольку подтверждает или отрицает выздоровление пациента.

В отличие от качественного, количественный анализ ПЦР может иметь много вариантов ответа:

«РНК не обнаружено» – такой вариант ответа возможен тогда, когда вируса в крови пациента нет;

«ниже диапазона измерений» – такой ответ лаборатория может выдать, если качественным методом ПЦР следы возбудителя были обнаружены, а чувствительность количественного метода не позволила определить уровень виремии;

при обнаружении вирусной РНК лаборатория выдает результат в МЕ/мл или копиях/мл.

Зачастую цифровые результаты количественного анализа ПЦР выдаются на бланке с таблицей, в первой колонке которой указан искомый генотип возбудителя, во второй – полученный результат, в третьей – норма. Под нормой в каждой лаборатории принимаются диапазоны показателей, установленные производителями тест-систем для проведения анализа.

Метод разветвленной ДНК (гибридизационного анализа)

Это устаревший метод, основным преимуществом которого является быстрота проведения и возможность одновременного проведения обследования нескольких пациентов. Минимальное количество РНК вируса в крови с его помощью обнаружить не удастся, поскольку он имеет низкую чувствительность – не менее 500 МЕ/мл. Используют метод разветвленной ДНК только для документального подтверждения наличия возбудителя в крови, когда этот факт уже установлен.

Суть метода заключается в использовании двух нуклеотидных зондов. Первый из них одним концом связывается с вирусной РНК, а другим фиксируется искусственно созданной молекулой-усилителем. Эту молекулу называют разветвленной ДНК. После процесса гибридизации с РНК вируса в среду вносят второй зонд, который подходит по структуре к молекуле-усилителю. Он помечен специальным красящим веществом. Таким способом усиливают сигнал, издаваемый нуклеотидом вируса, и улавливают его с помощью химический люминесценции.

Метод транскрипционной амплификации (ТМА)

Это самый высокочувствительный лабораторный метод определения и подсчета количества вирусного генома в крови. С помощью этого анализа можно обнаружить даже незначительное количество возбудителя в крови – 5-10 МЕ/мл. В настоящее время в российских лабораториях метод недостаточно распространен.

Вирусная нагрузка при гепатите С: расшифровка

Расшифровкой результатов количественных анализов ПЦР занимается лечащий врач. В научной медицинской литературе встречается расшифровка анализа в виде такой таблицы:

Референсные показатели, МЕ/мл

Уровень вирусной нагрузки

Варианты расшифровки

Вирус не определяется (отсутствует) или его количество ниже порога чувствительности теста

до 400 тысяч низкая нагрузка

400-800 тысяч средняя нагрузка

Требуется назначение стандартной схемы лечения или продолжение курса

свыше 800 тысяч высокая нагрузка

Очень большая вероятность развития осложнений гепатита (фиброза, цирроза)

Кроме непосредственного установления уровня виремии, для расшифровки результатов анализа очень важна ее динамика во времени: если в течение курса наблюдается положительная динамика уровня вирусной нагрузки, то есть она имеет тенденцию к уменьшению, это расценивается, как хороший вирусологический ответ на терапию; например, если БВО ( быстрый ответ не получен через 2 недели) после начала приёма препаратов и вирус ещё обнаруживается в крови при сдачи качественного анализа ПЦР, но наблюдается снижение вирусной нагрузки в 100 крат и более , через 1-2 недели терапии это можно считать благоприятным сигналом к продолжению лечения если проводимая терапия не оказывает влияния на уровень виремии или на фоне лечения наблюдается отрицательная ее динамика, то есть количество возбудителя в крови увеличивается, стоит задуматься о резистентности (устойчивости) возбудителя к используемой схеме лечения; если на фоне лечения резко увеличился уровень вирусной нагрузки, говорят о «вирусном прорыве». Такой результат анализа является крайне неблагоприятным и указывает на значительное ухудшение состояния больного.

При обнаружении в анализе ПЦР «вирусного прорыва» или отрицательной динамики виремии врачу необходимо быстро принимать решение, как снизить вирусную нагрузку у пациента. В зависимости от генотипа возбудителя к стандартной безинтерфероновой схеме лечения добавляют дополнительные препараты («Рибавирин», «Пегинтерферон»). Отзывы людей о вирусной нагрузке при гепатите С Большое количество пациентов, болеющих хроническим вирусным гепатитом С, сами умеют толковать цифры, полученные после анализа ПЦР. Существует много интернет-сообществ и специализированных форумов, на которых пациенты обмениваются результатами анализов, отзывами об эффективности лечения. Однако каждому больному гепатитом С необходимо помнить, что одинаковых случаев не бывает и использовать отзывы других пациентов как руководство к действию нельзя. Одних результатов теста на вирусную нагрузку недостаточно для оценки состояния больного: здесь нужна полная клиническая картина, результаты других лабораторных и инструментальных методов исследования, данные о проводимой противовирусной терапии и т.д.

Источник