Тест системы ифа диагностики гепатита
Подготовка реагентов для ИФА
Все компоненты перед использованием выдержать не менее 30 мин при температуре от 18 до 25 °C. В случае выпадения кристаллов солей в ФСР-Т (х25 концентрат), прогреть его при температуре 37 °C до полного растворения осадка. Растворы готовить в зависимости от количества используемых стрипов иммуносорбента в соответствии с таблицей.
Рабочий раствор ФСР-Т хранить при температуре от 2 до 8 °C не более 3 сут. Рабочий раствор конъюгата и субстратный раствор готовить непосредственно перед применением. Не хранить. К+, К-, РИП и Стоп-реагент готовы к использованию.
После отбора необходимого количества оставшиеся концентраты реагентов и неиспользованные стрипы хранить плотно закрытыми в пакете в течение срока годности при температуре от 2 до 8 °C.
Подготовка к исследованию препаратов крови
Лиофилизированные препараты крови перед исследованием растворить в дистиллированной воде (если иное не указано в ФСП на препарат) и довести объем до номинального.
Все препараты иммуноглобулинов перед исследованием дополнительно развести рабочим раствором ФСР-Т до конечной концентрации белка:
— 10+1 мг/мл (для иммуноглобулинов внутривенного введения),
— 5+0,25 мг/мл (для иммуноглобулинов внутримышечного введения),
— 5+0,4 мг/мл (для иммуноглобулинов энтерального применения).
Растворенные препараты крови хранению не подлежат.
Проведение ИФА
Иммуносорбент перед использованием промыть 2 раза рабочим раствором ФСР-Т, заполняя лунки до краёв и удаляя промывающий раствор в ёмкость с дезинфицирующим раствором.
Во все лунки внести по 100 мкл РИП, добавить по 20 мкл контрольных или исследуемых образцов и перемешать пипетированием. При этом цвет раствора в лунках (за исключением К+) должен измениться с сине-фиолетового на сине-зеленый. При использовании 1 стрипа иммуносорбента контрольные образцы вносить каждый в 1 лунку. При использовании большего количества стрипов контрольные образцы внести не менее чем в 2 лунки каждый.
Планшет закрыть липкой лентой или крышкой и инкубировать при температуре 37 °C в течение 30-40 мин, затем промыть 5 раз как описано выше.
Во все лунки внести по 100 мкл рабочего раствора конъюгата, планшет закрыть липкой лентой или крышкой и инкубировать при температуре 37 °C в течение 30-40 мин, затем промыть 5 раз как описано выше.
Во все лунки внести по 100 мкл субстратного раствора, выдержать в течение 10-15 мин при температуре от 18 до 25 °C в защищённом от света месте, затем добавить по 50 мкл стоп-реагента и не позднее чем через 5 мин учесть результаты ИФА.
Учет и интерпретация результатов
Провести измерение оптической плотности (ОП) раствора в лунках иммуносорбента с помощью анализатора иммуноферментного при двух длинах волн. Тест-фильтр – 450 нм, референс-фильтр – 620-680 нм. Допускается одноволновое измерение при 450 нм.
Результаты оценивать, если среднее значение ОП в лунках с К- (ОПср.К-) не превышает 0,150, в лунках с К+ — не менее 1,000.
Исследуемые образцы, ОП которых не выше критического значения ОПкрит., оценивать как отрицательные. Образцы, ОП которых выше ОПкрит., оценивать как положительные. Значение ОПкрит. вычислять по формуле:
ОПкрит. = ОПср.К- + 0,150
Источник
Достоверность анализа
Чтобы оценить работоспособность защитных функций организма и выявить точные диагностические данные, проводят иммуноферментный анализ. В случаях инфицирования человека обнаруживаются кардинальные изменения в крови и получают результат ИФА на гепатит С положительный.
Метод изучения биологического материала ИФА относят к определению иммунохимических реакций, открывающих взаимосвязи антигенов и антител. В ходе проведения анализа к молекуле антитела химическим способом подсаживают антиген-экзим, служащий маркером, который указывает на компоненты процесса.
К компонентам иммуноферментного анализа относят:
- антитела:
- антитела промаркированные;
- antibodies-attacking-a-virus1-440×264 антиген;
- субстрат фермента;
- краситель-индикатор.
Процесс выработки антител и иммуноглобулинов запускается в момент проникания в организм пациента посторонних генов или болезнетворных бактерий.
Задачей иммуноглобулинов считают нейтрализацию антигенов, происходящую при их взаимодействии. В ходе взаимодействия иммуноглобулины формируют комплект антиген-антител, которые имеют количественные и качественные характеристики. Эти значения и изучаются в процессе исследования анализа.
Для регистрации результата в ходе тестирования иммуноферментного анализа у человека забирают биологический материал. Обычно для этих целей используют венозную кровь, но в определенных ситуациях необходим анализ спинномозговой жидкости, стекловидного тела или околоплодных вод беременной женщины. Главной особенностью этого теста является его высокая достоверность, которая составляет порядка 80%.
К плюсам иммуноферментного анализа также относят:
- метод ИФА превосходит прочие тесты по точности определения важных показателей в десятки раз;
- для выполнения ИФА не требуется много времени, результаты, подтверждающие или опровергающие наличие вируса в организме, получают довольно быстро;
- стоимость проведения ИФА доступна большинству категорий населения, в отличие от прочих тестов;
- проведение ИФА дает возможность обнаружить проблему при начальных проявлениях, что значительно облегчает последующий процесс лечения человека;
- все стадии проведения этого анализа автоматизированы;
- высокая степень унификации теста.
К негативным проявлениям данного анализа относят возможность ложноположительных и отрицательных результатов. Сомнительные итоги могут регистрироваться при различных патологических состояниях, беременности и при употреблении медикаментозных средств, которые влияют на выработку организмом антител.
Ложноположительный результат
Вирус гепатита С
С помощью проведения иммуноферментного анализа подсчитывается количество антител к вирусу гепатита С. В ходе исследования определяется число этих образований по IgM типу, который соответствует острому течению недуга и IgG, обнаруживаемому при хронической форме.
Антитела IgM регистрируют в течение двух недель после инфицирования организма пациента вирусом гриппа С в острой форме, срок существования этих образований от 3 до 5 месяцев.
Антитела IgG вырабатываются спустя несколько месяцев после поражения организма, но их существование подтверждается в течение десяти лет, даже при условии полного выздоровления пациента.
Отрицательный результат тестирования дает возможность утверждать, что антитела обоих типов отсутствуют в организме и на данный момент гепатит С не обнаружен. Следует учитывать, что если человек заразился в течение последних двух недель, определение патологии невозможно.
Положительный результат теста показывает наличие того или иного типа антител в организме пациента. Данный показатель характеризует инфицирование гепатитом С в острой или хронической форме. Следует учитывать, что фиксация этих образований не дает возможность однозначно указывать на заражение человека, вполне допустимо, что он является только носителем. Бывают случаи, когда при расшифровке данных фиксируется ложноположительный результат.
Это происходит в результате фиксирования лабораторными приборами антител, которые производятся защитной системой человека в ответ на следующие патологии:
- аутоиммунное воспаление;
- проникновение в организм пациента прочих инфекций;
- при беременности.
Статистика проведения иммуноферментного исследования показывает, что ложноположительный вывод регистрируется в 15% всех результатов, подтверждающих наличие вируса. Для беременных женщин данный показатель еще выше.
Причины ложноположительных результатов
Недостоверный вывод тестирования на гепатит С выявляется при сбоях функционирования внутренних органов и технических сбоев, то есть халатного отношения медицинского персонала к своим обязанностям. Ошибки обнаруживаются не более чем в 15% случаев, но их можно избежать, выполняя следующие правила:
Перед сдачей анализа нельзя курить
- для сдачи анализа необходимо выбирать только проверенные, сертифицированные лаборатории с обученным медицинским персоналом;
- накануне проведения анализов следует прекратить употребление любых медикаментозных препаратов, если прием лекарства обусловлен состоянием пациента, он должен предупредить персонал лаборатории об этом факте;
- процедура обычно проводится утром натощак, но перед этим пациенту не следует проявлять излишнюю физическую активность и курить;
- непосредственно перед проведением анализа рекомендуется определить температуру тела, она не должна превышать норму.
При сомнении в правильности выводов тестирования, назначается повторный анализ. В идеале требуется проведение трех исследований биологического материала на гепатит С.
Если первый тест показал наличие антител в крови пациента, а последующие два не выявили эти образования, можно утверждать, что инфицирования организма вирусом гепатита С нет. Существует ряд заболеваний, которые влияют на результат тестирования крови на наличие вируса гепатита С.
https://youtu.be/WckrECLnx3I
Некоторые патологии сопровождаются выработкой антител, и в этом случае подтверждение наличия вируса гепатита С в организме пациента производится с помощью других методов исследования, так как многократно повторяющиеся ошибки при ИФА анализе не дают гарантии правильного диагноза.
Комплексное изучение с применением исследования биологического материала человека в лабораторных условиях и с использованием инструментальных методов позволит выявить истинную причину недомогания, и исключить гепатит С.
Чаще всего причиной ложноположительного результата анализа являются следующие патологии:
- инфекционные заболевания острого или хронического типа;
- рак или доброкачественные новообразования во внутренних органах;
- заболевания аутоиммунного типа, при течении которых образуются антитела к собственным клеткам организма пациента;
- туберкулез;
- малярия;
- склеродермия;
- герпес;
- рассеянный склероз;
- артрит.
Все перечисленные заболевания являются причиной возникновения сбоев в иммунной системе человека, в результате чего иммуноглобулины начинают вырабатываться с превышением нормы, что и становится помехой для постановки точного диагноза и подтверждения наличия вируса гепатита С в организме пациента.
После соприкосновения с источником инфекции организм человека может успешно подавить воспаление, но антитела, при проведении ИФА, все еще обнаруживались в крови, что стало причиной ложноположительного результата теста.
Довольно часто такой результат тестирования регистрируется у беременных женщин, поэтому без повторного анализа, подтверждение заболевания у такого пациента, не проводится.
Причиной отклонений от нормы становится изменения в организме женщины, которая ждет ребенка. В этот период у нее происходит перестройка внутренних органов, что выражается в следующих процессах:
- изменяется гормональный фон;
- в крови формируются специфические белки, вследствие чего меняется ее состав;
- уровень цитокинов увеличивается.
Помимо перечисленных факторов, влияющих на итоги иммуноферментного анализа, нужно отметить ошибки медицинского персонала, приводящие к обнаружению ложноположительных выводов тестирования:
- недостаточная квалификация персонала, проводящего забор биологического материала;
- сбои в функционировании лабораторного оборудования;
- подмена проб по халатности;
- ненадлежащее хранение биологического материала (нарушение температурного режима).
При проведении иммуноферментного анализа следует учитывать, что пациент мог недавно получить прививку против гриппа, гепатита или столбняка. Этот факт нужно обязательно довести до сведения лечащего врача или медицинского персонала в лаборатории, чтобы была назначена другая дата исследования.
Что делать, если результат положительный
Регистрация антител в биологическом материале пациента, указывающая на присутствие вируса гепатита С в организме, не всегда является окончательным диагнозом заболевания. Ложноположительные результаты иммуноферментного анализа нередки, и повторные тесты часто опровергают первоначальные выводы.
При положительных анализах нужно обратиться к гепатологу
Нужно понимать, что ИФА тест дает возможность выявить количественные и качественные изменения в биологическом материале человека и определить характер течения заболевания. Делать окончательное заключение об инфицировании гепатитом С можно только после комплексного изучения состояния пациента с применением других лабораторных и инструментальных исследований.
Если положительный результат выявлен надлежащим образом, человеку следует отправиться к специалистам: инфекционисту и гепатологу. Только профильный врач сможет определить, какие тесты необходимо пройти дополнительно до назначения курса терапии
По данным медицинской статистики, в мире инфицировано гепатитом С почти 4% населения, но этот показатель явно занижен, так как многие носители недуга не подозревают о своей проблеме. Поэтому проведение ИФА теста в качестве профилактической меры поможет выявить заболевание на начальной стадии и быстро справиться с болезнью.
Источник
Федеральное государственное бюджетное учреждение Здравоохранения «Центральная Медико-Санитарная Часть № 15 Федерального Медико-Биологического Агентства»
ИНН 7423003855
КПП 745901001
Другая периодичность
Место поставки
Российская Федерация, Челябинская обл, Снежинск г, 456770, Челябинская область, г. Снежинск, ул. Дзержинского, дом 13, корпус 11.
| Наименование | Кол-во | Цена за ед. | Стоимость, ₽ |
|---|---|---|---|
Тест-система иммуноферментная для выявления поверхностного антигена (HВsAg) вируса гепатита В. Набор для выявления НВsAg методом твердофазного иммуноферментного анализа. Формат теста — не менее 480 определений, стрипированный. ОКПД2 21.10.60.196 | 10 набор | 6 800,00 | 68 000,00 |
Тест-система иммуноферментная для выявления поверхностного антигена (HВsAg) вируса гепатита В. Формат теста — не менее 192 определений, стрипированный. ОКПД2 21.10.60.196 | 1 набор | 9 000,00 | 9 000,00 |
Тест-система для подтверждения специфичности выявления HВsAg.Формат теста – не менее 200 определений. ОКПД2 21.10.60.196 | 2 набор | 9 240,00 | 18 480,00 |
Тест-система для выявления суммарных антител к cor-антигену.Формат теста – не менее 192 определений (стрипированный). ОКПД2 21.10.60.196 | 20 набор | 5 060,00 | 101 200,00 |
Тест-система иммуноферментная для выявления антител класса G к HBe антигену вируса гепатита В. Формат теста – не менее 96 анализов. ОКПД2 21.10.60.196 | 6 набор | 3 630,00 | 21 780,00 |
Тест-система иммуноферментная для качественного и количественного определения антител против HBsAg. Формат теста – не менее 96 анализов. ОКПД2 21.10.60.196 | 6 набор | 3 630,00 | 21 780,00 |
Тест-система иммуноферментная для выявления HBe антигена вируса гепатита В.Формат теста – не менее 96 анализов. ОКПД2 21.10.60.196 | 6 набор | 3 630,00 | 21 780,00 |
Тест-система иммуноферментная для выявления антител класса М к core-антигену вируса гепатита В. Формат теста – не менее 96 анализов. ОКПД2 21.10.60.196 | 6 набор | 3 080,00 | 18 480,00 |
Стандартный образец (СО) поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg). Стандартный образец для оценки чувствительности иммуноферментных тест-систем выявляющих HBsAg Наличие образца сыворотки, содержащей HBsAg в известной концентрации. ОКПД2 21.10.60.196 | 1 набор | 20 500,00 | 20 500,00 |
Образец для внутрилабораторного контроля качества исследований на HBsAg. Образец для внутрилабораторного контроля качества исследований на HBsAg. Наличие лиофилизированных образов сыворотки, содержащей HBsAg . Наличие алгоритма для построения контрольных карт и автоматической обработки полученных результатов. ОКПД2 21.10.60.196 | 1 набор | 2 530,00 | 2 530,00 |
Тест-система иммуноферментная для выявления суммарных антител к вирусу гепатита Дельта в сыворотке и плазме крови человека. Формат теста – не менее 96 анализов ОКПД2 21.10.60.196 | 6 набор | 3 500,00 | 21 000,00 |
Тест-система иммуноферментная для выявления антител к вирусу гепатита C. Формат теста – не менее 480 анализов, стрипированный. ОКПД2 21.10.60.196 | 7 набор | 6 600,00 | 46 200,00 |
Тест-система иммуноферментная для выявления IgM антител к core белку вируса гепатита С в сыворотке и плазме крови человека. Формат теста – не менее 96 анализов. ОКПД2 21.10.60.196 | 4 набор | 3 080,00 | 12 320,00 |
Тест-система иммуноферментная для идентификации спектра антител классов IgG и IgM к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С.Формат теста – не менее 12 анализов. ОКПД2 21.10.60.196 | 3 набор | 12 100,00 | 36 300,00 |
Образец для внутрилабораторного контроля качества исследований на HCV.Образец для внутрилабораторного контроля качества исследований на антитела к вирусу гепатита С. Наличие лиофилизированных образцов сыворотки, содержащей антитела к вирусу гепатита С. Наличие алгоритма для построения контрольных карт и автоматической обработки полученных результатов ОКПД2 21.10.60.196 | 1 набор | 2 530,00 | 2 530,00 |
Образец для внутрилабораторного контроля качества исследований на антиген р24 ВИЧ-Ag. Набор лиофилизированных сывороток, содержащих антиген р24 ВИЧ-1. Наличие программы для построения контрольных карт и автоматической обработки полученных результатов. ОКПД2 21.10.60.196 | 1 набор | 3 630,00 | 3 630,00 |
Преимущества
Участникам, заявки или окончательные предложения которых содержат предложения о поставке товаров в соответствии с приказом Минэкономразвития России № 155 от 25.03.2014
15,0%
Требования к участникам
Единые требования к участникам (в соответствии с частью 1.1 статьи 31 Федерального закона № 44-ФЗ)
Ограничения
Условия и ограничения допуска товаров из иностранного государства
1. В соответствии с приказом Министерства экономического развития РФ от 25 марта 2…
| Участник | Цена, ₽ | Первые части заявок | Вторые части заявок |
|---|---|---|---|
Победитель ООО «Диагностические системы-Урал» | ░░░ ░░░░░░ | ░░░░░ | ░░░░░ |
░░░ ░░░░░░░░░░░░ | ░░░ ░░░░░░ | ░░░░░ | ░░░░░ |
| Контракт с поставщиком | Сумма, ₽ |
|---|---|
№ 1742300385517000118 от 10.04.2017 ░░░ ░░░░░░░░░░░░░░░░ ░░░░░░░ ░ ░░░░░ ░░░░░░░░ ░░░ ░░░░░░░░░ | ░░░ ░░░░░░ |
Источник
