Третий анализ на гепатит отрицательный

Учитывая бессимптомное течение и высокую вероятность передачи HCV-инфекции, большое значение имеет диагностика на ранних стадиях патологии. Наиболее точной считается постановка полимеразной цепной реакции. В отличие от методов выявления серологических маркеров, ПЦР мало зависит от сопутствующих заболевания и общего состояния организма пациента. Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.

HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.

Основные стадии диагностического процесса приведены в таблице:

Проводимое исследование	Цели выполнения
Биохимический анализ крови и печеночные пробы	Позволяет оценить функциональную активность печени, уровень билирубина, показатели печеночных трансаминаз. Превышение нормы в 2 раза и более указывает на наличие заболевания
Клинические анализы крови, мочи и кала	Данные исследования неспецифичны, но по результатам можно установить наличие воспалительного процесса, оценить общее состояние пациента. Обнаружение билирубина в моче, изменение оттенка кала говорит в пользу поражения печени
Иммуноферментный анализ (ИФА)	Позволяет определить как наличие вирусной инфекции в организме, так и ее форму (острую или хроническую). Недостатком исследования является вероятность ложных результатов
Полимеразная цепная реакция	Дорогостоящий, сложный в проведении, но вместе с тем наиболее точный метод диагностики HCV. Позволяет подтвердить наличие вируса в организме человека, количественно установить уровень копий РНК, определить генотип HCV
Инструментальные обследования печени	Необходимо проведение УЗИ органов брюшной полости, установление стадии фиброза, оценка тяжести цирроза, исключение гепатоцеллюлярной карциномы

Окончательный диагноз доктор ставит только по результатам, указанным во всех исследованиях. Некоторые препараты, например, гепатопротекторы, витамины показаны уже в начале диагностического процесса. Но таргетные противовирусные средства назначают после получения всех данных.

Что такое ПЦР

Техника проведения полимеразной цепной реакции известна достаточно давно и успешно используется для диагностирования ряда вирусных заболеваний, и HCV не является исключением.

В настоящее время существует несколько методик постановки ПЦР, но в принципиальном плане этот процесс состоит из нескольких этапов:

Разрушение двойной нити ДНК под воздействием нагревания либо определенных химических веществ.
Присоединение к разделенным основанием ДНК так называемых праймеров – остатков нуклеотидной цепи РНК вируса (в большинстве современных тест-систем используются 5`-NTR-области генома HCV).
Специфический фермент, ДНК-полимераза, распознает праймер, провоцирует присоединение других нуклеотидных остатков.

По окончании третьего этапа полимеразной цепной реакции ДНК между двумя праймерами удваивается, а впоследствии происходит амплификация участка генома в геометрической прогрессии (2–4–8 и т.д.).

Чувствительность современных тест систем составляет 10–50 копий РНК в 1 мл крови.

Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. В соответствии с Международным стандартом ВОЗ для количественного определения вирусного генома служит образец плазмы крови в лиофилизированном виде, содержащий РНК первого генотипа вируса в концентрации 105 МЕ/мл.

При этом обращают внимание на количественные единицы, в которых выражены результаты исследований. Обычно количество копий РНК HCV указывают в абсолютном или логарифмическом выражении. Затем, в соответствии с международными стандартами, эту цифру пересчитывают при помощи специального коэффициента в международные единицы (МЕ). Таким образом конечные результаты обозначаются в МЕ/мл.

Для проведения количественного исследования применяют различные тест-системы и методики постановки полимеразной цепной реакции. Некоторые предназначены для оценки уровня виремии в плазме или сыворотке. Другие более эффективны и показательны при исследовании цельной крови.

Говорить о норме при интерпретации указанных в лабораторном бланке результатов не совсем корректно. Дело в том, что у здорового человека РНК вируса в организме отсутствует, а наличие частиц HCV вне зависимости от количественного показателя свидетельствует об инфицировании. В дальнейшем при помощи ПЦР оценивают эффективность лечения. При отрицательном результате на 4 неделе приема медикаментов, а затем и после окончания противовирусной терапии (на протяжении 48 недель) говорят о выздоровлении.

Виды исследования

Проведение полимеразной цепной реакции предполагает определение не только наличия РНК HCV в крови, но и определение количества копий вируса и анализ структуры генома. Такие возможности делают ПЦР одним из наиболее информативных и точных методов диагностики вирусного гепатита C.

Все применяемые на практике методы постановки полимеразной цепной реакции приведены ниже в порядке проведения (каждый последующий тест назначают при положительном результате предыдущего):

Анализ ПЦР на гепатит С качественный, проводится только для обнаружения РНК вируса в крови.
Количественное исследование ПЦР. Расшифровка проводится согласно общепринятым нормам. В зависимости от результата вирусологическая нагрузка может быть низкой, умеренной или высокой. Данный показатель является одним из предикторов исхода терапии HCV.
Генотипирование (во многих частных лабораториях предлагается в комплексе с количественным анализом, что снижает общую стоимость). Обозначение генотипа HCV осуществляется одной из арабских цифр (с 1 по 6). На территории России чаще выявляют генотип 1 или 3, несколько реже – 2, 4–6 диагностируют в единичных случаях. Ранее при использовании интерфероновых схем лечения разновидность HCV определяла длительность и эффективность терапии. Современные противовирусные средства отличаются широким спектром действия, но некоторые из них прописывают только при 1–4 генотипах HCV.

Генотипирование проводится только один раз, перед началом терапии. По мере приема медикаментов количественные нормы гепатита С необходимы врачу для оценки эффективности противовирусных препаратов. После окончания курса лечения проводят качественное исследование ПЦР.

Особенности количественного анализа

Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.

Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:

вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).

Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.

Показания

До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.

В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:

положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
положительный результат качественной ПЦР;
контроль проводимого лечения.

При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.

Нам каких этапах заболевания проводится

Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:

до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.

Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.

Как подготовиться к исследованию

Чтобы расшифровка анализа ПЦР не была ошибочной, необходимо соответствующим образом подготовиться к забору крови. За некоторым исключением правила не отличаются от таковых при других исследованиях.

Необходимо:

сдавать кровь строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории);
процедуру проводить в первой половине дня (как можно раньше);
в день анализа после пробуждения пить можно только воду; чай, кофе, газированные и/или сладкие напитки, соки и т.д. противопоказаны;
за 3–5 часов до сдачи крови нельзя курить;
если невозможно прервать прием каких-либо медикаментов, сообщить названия принимаемых лекарств лаборанту и врачу, который будет интерпретировать полученные данные.

Наличие гепатита С уже подразумевает полный отказ от спиртного и строгую диету (стол №5). Но если анализ проводится на этапе диагностики, за 5–7 дней до забора крови обязателен контроль питания с исключением тяжелых для печени продуктов и алкоголя.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С

Обычно, когда пациент получает на руки результаты анализов, в бланке приведены показатели нормы, полученные значения и краткая интерпретация. Однако расшифровка анализа крови на гепатит С должна проводиться только врачом. Количественная ПЦР – один из этапов диагностики, поэтому врач сопоставляет приведенные цифры с полученными ранее результатами.

В зависимости от полученных показателей определяется степень вирусной нагрузки или полное отсутствие РНК HCV в организме.

Если проведен количественный анализ на гепатит С, расшифровка проводится в соответствии с таблицей:

Значение показателя	Уровень вирусной нагрузки
РНК вирус не обнаружены (либо количество копий меньше чувствительности тест-системы)	Норма, человек здоров либо анализ проведен в инкубационный период патологии
1,8×102–7,9×105 МЕ/мл	Низкая вирусная нагрузка. Указывает на недавнее инфицирование, латентное течение либо эффективность противовирусных препаратов
8×102–2,3×107 МЕ/мл	Умеренная вирусная нагрузка. Обычно отмечается при хронической форме HCV. Прогноз лечения благоприятный при условии соблюдения рекомендаций врача
2,4×107 МЕ/мл и выше	Высокая виремия. Очень вероятны тяжелые осложнения (вплоть до рака печени)

Чтобы точно расшифровать анализ и не допустить ошибочных результатов, оценивать данные количественной ПЦР можно только после выявления серологических маркеров качественной ПЦР. При ИФА обязательно указывается коэффициент позитивности. Также принимают во внимание данные ультразвукового обследования, эластографии и биопсии, если исследование проводилось.

Норма

Количественный анализ ПЦР проводят только в том случае, если положительны другие показатели крови при гепатите С.

Получение отрицательного результата возможно при:

самостоятельном выздоровлении (в медицинской литературе приведена статистика, по которой порядка 15% случаев инфицирования HCV остаются незамеченными, иммунная система человека полностью устраняет вирус);
раннем вирусологическом ответе (при оценке результатов в ходе противовирусной терапии);
при ошибочных данных предыдущих исследований (маловероятно, так как предварительно обычно назначают ИФА, качественную ПЦР, печеночные пробы).

Когда сдается анализ на гепатит С для оценки вирусологической нагрузки, расшифровка проводится врачом. Считается, что показатели нормы – это полное отсутствие РНК HCV в крови. Но для исключения скрытой инфекции исследование рекомендуют повторить через несколько недель.

Какие показатели крови указывают на гепатит С

Перед началом диагностического обследования необходимо точно знать, какие показатели крови указывают на HCV. С одной стороны это позволит избежать пациенту лишних финансовых трат на ненужные анализы, с другой – сэкономит время.

Так, при гепатите С показательны такие данные:

позитивный ИФА вне зависимости от класса обнаруженных антител; но данный параметр оценивают на фоне других результатов, так как некоторые особенности работы иммунной системы могут повлиять на правильность исследования;
позитивная качественная ПЦР (чувствительность и специфичность метода достигает 100%);
определение количества копий вируса при количественной ПЦР.

Косвенными признаками HCV является превышение норм печеночных трансаминаз, билирубина, лейкоцитоз, ускорение СОЭ, наличие билирубина в моче.

При расшифровке результатов принимают во внимание сокращения, как обозначается гепатит С в анализах. Обычно вирусную нагрузку указывают в МЕ/мл или IU/ml, а РНК вируса английской аббревиатурой RNA HCV.

Бывает ли ложный тест

В отличие от ИФА вероятность ложного результата ПЦР практически нулевая. Ошибки возможны только в результате человеческого фактора, то есть при нарушении правил забора крови, хранения образцов и непосредственно проведении исследования.

Преимущества количественного исследования методом ПЦР

Специалисты в области гепатологии подчеркивают, что количественная ПЦР не имеет аналогов и является одним из основных исследований для пациентов с HCV. Механизм проведения анализа сводит к минимуму вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Для получения результатов требуется несколько дней. Забор крови не требует особой подготовки, возможен практически в любой клинической лаборатории и не сопровождается какими-либо значимыми болевыми ощущениями. Но основным преимуществом такого анализа является высокая точность, достигающая 100%.

Автор: Александра Малкина

Источник: med88.ru

HCV крови: что это такое?

HCV полностью расшифровывается, как Hepatitis C Virus и является фактически Гепатитом С. Анализ на HCV – это лабораторные диагностические мероприятия, направленные на выявление в крови вируса гепатита. Анализ можно сдать бесплатно как в государственной поликлинике, так и в частной. Для этого не требуется специальная подготовка, но только кровь нужно сдавать утром и натощак.

Сам анализ точно обозначается аббревиатурой в лабораторных анализах Anti HCV, то есть специальный антиген, который при наличии заболевания дает своеобразный «иммунный ответ». Выявление антигена включает в себя исследование суммарного количества иммуноглобулинов IgMи IgG. IgM означает острую стадию заболевания, а IgG – хроническую, но в любом случае реакция окажется положительной. Данный анализ способен это выявить, но существует множество различных методик диагностики:

ПЦР в режиме «реального времени»;
Иммуноферментный анализ (Anti HCV);
Иммуноблог Line Blog;
Экспресс-методика, выполняемая в домашних условиях.

Все они одинаково эффективны и служат дополнительном вариантом обнаружения вируса, но чаще всего, а особенно в муниципальных поликлиниках, пациенты сдают анализ на Anti-HCV ввиду его наибольшей информативности. Анализ Anti HCV делится на несколько типов: суммарный (общий подсчет IgM и IgG), так и отдельный Anti HCV IgM (острая стадия) и Anti HCV IgG (хроническая стадия). В качестве биоматериала для анализа всегда выступает венозная кровь, так как именно там первоначально мутирует вирус.

Гепатит С – очень коварное заболевание, которое обходит стороной иммунную защиту организма. Первоначально вирус проникает в кровь, а потом непосредственно в клетки печени, где начинается активно размножаться и мутировать, провоцируя ее медленное разрушение за счет генома самого вируса или иммунных клеток, которые активизируются для борьбы с чужеродным инфекционным агентом. По этой причине данный вид гепатита относят к РНК вирусу (генетически сложный).

Его последствия могут быть необратимыми, так как без лечения вирус трансформируется либо в цирроз печени, либо в рак. Еще одна опасность кроется в его бессимптомном носительстве, а особенно в острой стадии заболевания. Никакой желтухи или высокой температуры обычно не наблюдается. При хроническом течении гепатита С уже может появляться «стертая» симптоматика в виде болей в правом боку, плохого самочувствия, вялости, апатии и т.д.

Вирус передается чаще всего через кровь, половой акт. В редких случаях возможно инфицирование новорожденного от матери во время родов, но важно помнить, что у ребенка в течении первые 2-ух лет присутствуют в крови антитела матери, а потом все приходит в норму. В таком случае обследование детей на Гепатит С лучше проводить после 2-ух лет жизни.

Анализ при беременности

В целях безопасности беременной женщине необходимо сдать анализ крови на HCV. Заражение женщины в положении чревато серьезными и необратимыми последствиями, а особенно на самых ранних сроках беременности. В первый триместр возможна гибель плода, развитие выраженной плацентарной недостаточности и другие серьезные осложнения. В любом случае перед планированием ребенка или во время беременности необходимо сделать анализ-скрининг на все разновидности гепатита.

Заражение на поздних сроках тоже не сулит благоприятный исход, так как это может вызвать преждевременные роды, выкидыш и к тому же заражение плода. Острая стадия гепатита С в такой период, как правило, очень ярко проявляет себя, и женщина крайне тяжело вынашивает ребенка. Это грозит тяжелыми последствиями не только плоду, но и самой женщине, так как ее организм будет переживать сильную интоксикацию. Прерывание беременности при таком состоянии противопоказано.

Хроническая форма гепатита во время беременности, как правило, проявляет себя менее ярко, но все зависит от того, проходила ли женщина полноценный курс лечения и как она себя чувствует сейчас. У многих будущих матерей возникает вопрос: не заразится ли ребенок гепатитом С внутриутробно? Такая возможность существует всегда. Медики подсчитали такую вероятность примерно в 30%. Это с условием, что гепатит С протекает в хронической форме и в стадии ремиссии.

Мнение эксперта

Ковалева Елена Анатольевна

Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.

Задать вопрос эксперту

Риски заражения повышаются, когда вирус гепатита активно размножается и его становится очень много. В таком случае женщине необходимо сдать специальный количественный анализ РНК HCV, который проводят методом ПЦР.

В таком лабораторном исследовании точно подсчитывают в МЕ/мл РНК вируса. Если ничего не обнаружено или концентрация вируса менее 15 МЕ/мл, то внутриутробный риск заражения совсем минимален. К тому же в целях безопасности необходимо сдать биохимию крови на печеночные фракции (общий, прямой, непрямой билирубин, АCАТ, АЛАТ), которые в идеале должны быть в норме.

Следует отметить, что риски повышаются, когда во время беременности происходят различного рода осложнения. В таком случае при планировании ребенка или в период его вынашивания необходимо сдать следующие анализы:

Anti HCV;
Anti HCV IgM (острый гепатит);
Anti HCV IgG (хронический гепатит);
РНК HCV (количественный метод);
РНК НСМ (качественный метод);
Биохимия крови на печеночные фракции.

Норма (референсные значения) в анализах HCV

Изначально все зависит от того, какой анализ сдает пациент. В медицинской диагностике лабораторные исследования подразделяются на качественные и количественные. Если это качественное исследование на антитела Anti HCV, то нормой в таком случае будет исключительно фраза «не обнаружено». Иными словами, вирус должен в идеале вообще отсутствовать и не выявляться ни в острой, ни в хронической форме.

Любой положительный результат может косвенно подтверждать диагноз, так как в случае утвердительного результата врач в любом случае назначит пересдачу анализа. Аналогично и с качественными исследованиями методом ПЦР, где абсолютно идентичные референсные значения.

В количественном методе РНК также нормой должно либо «не обнаружено», либо показатели выявляются меньше 15 МЕ/мл, а все остальные цифры подтверждают диагноз гепатита С.

Значения более 100000000 МЕ/мл уже серьезная угроза жизни и здоровью, что требует немедленной врачебной помощи. Можно сказать, что в любом случае независимо от методики исследования именно отрицательные результаты всегда являются нормой.

Расшифровка результатов

Если в бланке анализа пациент видит рядом с аббревиатурой HCV фразу «не обнаружено», «отрицательно», то значит геном вируса гепатита С не выявлен и человек здоров, но в редких случаях это может означать заболевание гепатита на самых ранних стадиях. В этот период времени его очень тяжело обнаружить поэтому в случае сомнений необходимо пересдать анализ через 1-2 месяца.

Если рядом с аббревиатурой AntiHCVнаписана фраза «обнаружено», «положительно», то это означает, что в крови присутствует вирус и болезнь протекает в острой или хронической форме. В лучшем случае это может означать то, что пациент когда-то переболел гепатитом С. Обычно в такой ситуации человек сдает анализ Anti HCV на иммуноглобулины IgG и IgM, где выявленный IgM означает острую стадию заболевания, а IgG- хроническую. В качественных исследованиях РНК все то же самое, где отрицательный результат означает, что в 90% пациент здоров, а положительная реакция подтверждает присутствие вируса, но качественное исследование по своей природе не способно выявить количество, а также вид преобладающего иммуноглобулина.

Количественный метод РНК точно подсчитывает вирус и, если на бланке написано «не обнаружено», то это значит, что в организме вообще нет генома гепатита С, а численные показатели от 0 до 15 косвенно подтверждают диагноз, но указывают на его крайне низкую концентрацию. Это означает, что человек когда-то переболел гепатитом С и вирус находится в стадии ремиссии. В большинстве случаев врач просит пациента пересдать анализ, так как данный диапазон значений считается очень спорным.

Мнение эксперта

Ковалева Елена Анатольевна

Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.

Задать вопрос эксперту

Если цифры выходят за пределы 15 МЕ/мл, то это в действительности указывает на заболевание. В случае его подтверждения врач сразу же назначает лечение, потому что медлить в данном случае нельзя.

К сожалению, в частных лабораториях очень часто возникают исследовательские ошибки и люди получают на руки ложноположительные результаты. Особенно это актуально для методики ПЦР, так как такие заведения ввиду быстрого обслуживания населения и получения результатов используют крайне дешевые реагенты. В такой ситуации необходимо несколько раз пересдать анализ, так как вероятность ошибки нельзя исключать.

Цена на исследование

Данное исследование можно сделать в любой поликлинике по месту жительства абсолютно бесплатно, так как данный анализ входит в систему обязательного медицинского страхования (ОМС). Для этого только нужно обратиться к врачу-терапевту, который выпишет направление на их сдачу.

Примечательно то, что пациент может сдать лабораторные анализы в поликлинике на все виды гепатитов. Однако, есть в этом один недостаток: сроки ожидания результатов, которые могут длиться неделями.

В частных лабораториях цена зависит от типа исследования. Каждый вид гепатита стоит отдельно, но возможно, что в частной клинике предусмотрены и специальные скрининги-исследования, куда включены все его разновидности. Средняя цена такой смешанной диагностики составляет примерно от 2000 до 6000 рублей. Все зависит от того, какие типы анализов туда входят.

Если пациент сдает на гепатит С антитела (Anti HCV), то ценовой диапазон тут будет от 500 до 700 рублей без учета стоимости забора крови (150-250 рублей). Качественные и количественные исследования РНК, проводимые методом ПЦР стоят от 700 рублей до 18000. Такой значимый интервал цен зависит от вида исследования. Количественные методы диагностики гораздо дороже, чем качественные, потому что выполнять их сложнее. В любом случае право выбора остается за пациентом.

Заключение

В заключении необходимо сказать, что чаще всего Гепатит С выявляют в запущенной стадии, так как он протекает бессимптомно, а его обнаружение оказывается для людей неприятной случайностью. В таком случае необходимо регулярно и каждый год сдавать анализы на все разновидности гепатита.

При планировании беременности нужно тщательно провериться для собственной безопасности и здоровья будущего ребенка, так как вовремя начатое лечение способно избавить от непредсказуемых последствий.

Важно помнить, что Гепатит С — не приговор, так как сам вирус успешно поддается лечению. Анализы на HCV – действенный и эффективный лабораторный метод диагностики, с помощью которого выявляют сам вирус, а также его острую или хроническую форму. С помощью других методик исследования можно в точности подсчитать его количество. Таким образом, существует значительный спектр лабораторных анализов, которые способны многогранно выявить такое «коварное» заболевание.

загрузка…

Автор статьи

Врач-Лаборант. Опыт работы в клинико-диагностической службе 14 лет.

Написано статей

366

Отличная статья 1

Источник: MedicKon.com