Ультра чувствительный анализ на гепатит с

Вирус гепатита С, РНК HCV, ультрачувствительный — ультрачувствительное количественное определение ДНК вируса гепатита С в крови, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Аналитическая чувствительность: РНК вируса гепатита С — 15 МЕ/мл или 38 копий/мл.

Ультрачувствительные тесты — это тесты с высокой аналитической чувствительностью. Тест позволяет проводить диагностику вируса гепатита С на ранних сроках, с момента инфицирования. Исследование помогает выявить инфекцию, даже в тех случаях, когда стандартные методы ПЦР-диагностики бессильны. Исследование оптимально для тестирования донорской крови.

Исследование вируса гепатита С ультрачувствительным методом, особенно актуально для пациентов, имеющих субклиническую форму гепатита, а также является достоверным способом оценки эффективности проводимой противовирусной терапии в процессе лечения.

Вирус гепатита С
Вирус гепатита С (ВГС, HCV) поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).

Основной путь передачи вируса гепатита С — кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже — заражение половым путём. Одним из основных факторов риска инфицирования является употребление инъекционных наркотиков.

Клинические проявления гепатита С
Основные клинические проявления гепатита С очень неспецифичны:

слабость;
утомляемость;
тошнота;
отсутствие аппетита;
потеря веса;
при циррозе печени может появиться желтуха.

Как правило, гепатит С протекает бессимптомно и в большинстве случаев диагностируется случайно. Гепатит C может вызвать как острую, так и хроническую инфекцию гепатита, которая влечет серьёзное пожизненное заболевание.

Попадая в организм, вируса гепатита С (HCV) проникает в макрофаги крови и гепатоциты печени, где происходит его возобновление. Печень повреждается главным образом за счет иммунного лизиса, также вирус оказывает прямое цитопатическое действие.

Гепатит с и аутоимунные осложнения
Сходство антигена вируса с антигенами системы гистосовместимости человека обусловливает возникновение аутоиммунных («системных») реакций. В программе системных проявлений HCV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, синдром Шегрена, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, гломерулонефрит, ревматоидный артрит и др. В отличие от других вирусных гепатитов, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину и в большинстве случаев переходит в хронические формы. Чаще всего хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и очень редко — к развитию гепато-целлюлярной карциномы. С большой частотой возникают аутоиммунные осложнения.

Длительность инкубационного периода от 6 до 8 недель. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезёнки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В 30% случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Очень редко возникает холестаз. Лабораторные показатели отражают цитолиз. При высоком уровне трансаминаз (более 5 норм) и признаках печеночно-клеточной недостаточности следует заподозрить микст-инфекцию: HCV+HBV.

Острый вирусный гепатит
Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остаётся невыявленным. Наиболее тяжёлые исходы хронического гепатита С — цирроз печени и гепатоцеллюлярная карцинома.

Показания:

для выявления скрытых (латентных) форм вируса гепатита С;
при наличии в крови антител к вирусам гепатита С, но неподтверждённом стандартными видами ПЦР-диагностики;
для оценки эффективности проводимой противовирусной терапии в процессе лечения и через 24 недели после окончания лечения;
для раннего выявления острого вируса гепатита С у лиц, контактировавших с заражённым человеком.

Подготовка
Кровь необходимо сдавать утром с 08.00–12.00 натощак или спустя 2–4 часа после последнего приёма пищи. Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.

Интерпретация результатов
Ответ выдается в количественном формате.

Референсные значения: не обнаружено.

Аналитическая чувствительность: РНК вируса гепатита С —15 МЕ/мл или 38 копий/мл.

Источник

Исследуемый биоматериал	Кровь венозная (с ЭДТА)
Метод исследования	ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR)
Cрок исполнения с момента поступления биоматериала в лабораторию	8 к.д.

Стоимость анализа: 2 700 Р

Взятие крови: 180 Р

Описание

Вирусный гепатит С (HCV) — инфекционное заболевание, вызываемое РНК-содержащим вирусом гепатита С. Путь передачи — преимущественно парентеральный и инструментальный. Источник инфекции — больной или носитель вируса. Инкубационный период в среднем 6-8 недель. Острый гепатит С часто не проявляется клинически на начальных стадиях заболевания, либо проявления неспецифичны (общая слабость, повышение температуры, боль в суставах и т.д.). Прогноз неблагоприятный — практически всегда формируется хроническая форма заболевания, а в дальнейшем развивается цирроз печени и гепатоцеллюлярный рак.
Выявление РНК ВГС говорит о наличии острого или хронического гепатита С.

Ультрачувствительные тесты — это лабораторные исследования с существенно более высокой аналитической чувствительностью, чем стандартные тесты (20 МЕ/мл и ниже). Данное исследование дает возможность диагностировать HCV на начальной стадии. Ультрачувствительный тест — наилучший вариант лабораторного тестирования донорской крови. Тест рекомендован для раннего выявления HCV у любых лиц из групп риска по данному заболеванию и для контроля эффективности проводимого лечения.

Вирус гепатита С (ВГС, Hepatitis C virus, HCV) относится к семейству Flaviviridae. Анализ на ВГС методом ПЦР направлен на выявление в крови пациента возбудителя этого заболевания. Обнаружение РНК свидетельствует о том, что вирус размножается в организме. Биологическим материалом для исследования служит венозная кровь. Анализ на РНК вируса гепатита С ультра дает возможность выявить заболевание на ранней стадии. В этот период специфические антитела в организме еще не вырабатываются, показатели функций печени находятся в пределах нормы, и диагностировать заболевание с помощью других методик невозможно.

Общие сведения

Инфекция чаще всего передается через кровь. Заразиться можно через донорскую кровь и ее препараты, многоразовые шприцы, инструменты для медицинских манипуляций, нанесения татуировок и прочее. Заражение ребенка от инфицированной матери или во время полового контакта возможно, но встречается редко. Вирус поражает печень, способен размножаться в клетках крови и может приводить к развитию синдрома Шегрена, криоглобулинемии и других ассоциированных заболеваний.

Вирусный гепатит часто остается не выявленным, так как протекает бессимптомно. Заболевание протекает с ярко выраженными симптомами только в 15% случаев инфицирования. При этом наблюдается потеря аппетита, ломота в теле, тошнота, потеря веса, иногда желтуха. У 60-85% инфицированных людей гепатит С переходит в хроническую форму. Течение хронического заболевания характеризуется скудно выраженными симптомами, повышением концентрации печеночных ферментов. Без соответствующего лечения может развиться цирроз, гепатоцеллюлярная карцинома, печеночная недостаточность.

Интерпретировать результаты анализа HCV Ultrasensitive, поставить диагноз и назначить лечение может только врач. При необходимости назначаются дополнительные исследования.

Подготовка

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Показания

Показания к исследованию:

· симптомы гепатита С;

· сомнительные результаты, полученные в ходе серологического исследования;

· повышенные биохимические показатели функций печени;

· анализ назначается пациентам из группы риска заражения гепатитом С;

· рождение ребенка от инфицированной матери.

Результаты анализа используются для раннего выявления гепатита С, дифференцированной диагностики гепатитов, проверки донорской крови. Также исследование назначают перед началом противовирусной терапии, через 6 и 24 месяца после ее окончания. Его результаты используются для мониторинга течения заболевания, оценки эффективности терапии.

Интерпретация результата

Результаты лабораторных исследований не являются единственным критерием, учитываемым лечащим врачом при постановке диагноза и назначении соответствующего лечения, и должны рассматриваться в комплексе с данными анамнеза и результатами других возможных обследований, включая инструментальные методы диагностики.
В медицинской компании «LabQuest» Вы можете получить персональную консультацию врача службы «Doctor Q» по результатам исследований во время приема или по телефону.

Источник

Содержание статьи:

Диагностика гепатита C с помощью ПЦР-исследования

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) все чаще находит применение в клинической практике для определения причин возникновения различных вирусных заболеваний, в том числе для диагностики вирусного гепатита С.

Для его диагностики активно применяют ПЦР в различных ее модификациях. С помощью ПЦР на гепатит С возможно установить факт наличия в крови пациента РНК вируса гепатита С и точно поставить диагноз.

Вариации анализа
Качественный вариант ПЦР при заболевании
Количественный вариант ПЦР
Ультрачувствительный метод ПЦР диагностики

Вариации анализа

Методика ПЦР стала доступна врачам несколько десятилетий назад. Она основана на множественном копировании определенного фрагмента вирусной или бактериальной РНК или ДНК, с последующей детекций (распознаванием данного фрагмента) в сыворотке крови пациента.

При этом существует два принципиально отличающихся метода ПЦР-исследования: количественный и качественный.

Качественный метод позволяет только ответить на вопрос: имеется ли в биологическом материале (сыворотка крови, слюна, семенная жидкость и т. д.) генетический материал определенного вируса?

Количественный метод, в свою очередь, позволяет определить количество этого генетического материала, что необходимо в ряде случаев для определения стадии заболевания или оценки эффективности терапии.

к оглавлению ↑

Качественный вариант ПЦР при заболевании

Использование качественного варианта ПЦР-анализа при данном заболевании позволяет обнаружить факт присутствия РНК вирусного гепатита С в биологических жидкостях (сыворотка крови, слюна и т. д.) больного. При этом результат анализа может быть только двух видов: положительный или отрицательный. Очень важна в этом случае его правильная расшифровка.

положительный результат при определении РНК вирусного гепатита С говорит врачу о том, что в исследуемой биологической жидкости находится РНК данного вируса. Соответственно, пациент инфицирован им, а, значит, возможна постановка диагноза вирусного гепатита С. Однако всегда стоит помнить о возможности возникновения ложных положительных результатов анализа;
отрицательный результат ПЦР-анализа свидетельствует об отсутствии РНК вируса гепатита С в исследуемой биологической жидкости, или же, содержание молекул РНК в исследуемой жидкости было слишком мало и располагалось ниже границы чувствительности ПЦР-метода. Отрицательный результат анализа не всегда может указывать на отсутствие вируса в крови. Возможность ложных отрицательных результатов анализа должна всегда учитываться лечащим врачом.

При развитии острой формы заболевания гепатита С проведение качественного ПЦР-исследования позволяет установить факт заболевания уже через 1-3 недели после попадания вируса в организм человека.

Ложные отрицательные результаты могут появиться в результате:

попадания в биологический материал (кровь) загрязняющих субстанций;
использование Гепарина для предотвращения свертывания крови в пробирке или его применение пациентом;
попадание в исследуемый материал веществ из окружающей среды, блокирующих ферменты, используемые в ПЦР.

Пациент не должен соблюдать специальных рекомендаций перед проведением качественного метода ПЦР-диагностики. Для этого необходимо только взять кровь из вены пациента на анализ.

к оглавлению ↑

Количественный вариант ПЦР

Использование количественного анализа ПЦР позволяет определить не только сам факт присутствия вируса в крови, но и количество вирусных частиц в любой биологической жидкости (так называемую вирусную нагрузку). С помощью данной разновидности ПЦР можно определить число копий РНК вируса гепатита С, которые циркулируют в определенном объеме.

Результат данного типа ПЦР выражается в числовых значениях, где единицей измерения является международные единицы на миллилитр – МЕ/мл.

Проведение подобной разновидности ПЦР-диагностики используется в определенные сутки лечения вирусного гепатита С. Первое определение вирусной нагрузки происходит при поступлении больного человека в больницу. В дальнейшем анализ проводят на 1-ой, 4-ой, 12-ой и 24-ой неделях с начала применения лекарственных средств. Уже на 12-ой неделе можно сказать, эффективна терапия или нет.

Специально подготавливать пациента к проведению исследования не требуется. Рекомендуется не курить в день сдачи анализа. В качестве исследуемого материала используют кровь из вены.

После того как была проведена количественная ПЦР, необходимо произвести расшифровку полученных результатов. Понятия «норма» в подобных случаях не существует. Для расшифровки применяется специально разработанная градация показателей:

результат исследования: не обнаружено – РНК вирусного гепатита С в венозной крови пациента не выявлена (результат отрицательный), или же она содержится в очень низком количестве, не позволяющем методу ее определить (<40 ME/мл – порог чувствительности количественного ПЦР);
результат исследования: <8*105 МE/мл – положительный результат теста. Такой уровень вирусной нагрузки очень низкий. Является показателем эффективности терапии и благополучного течения заболевания;
результат исследования: >8*105 МE/мл – положительный результат теста. Уровень нагрузки очень высокий. Плохой прогноз течения заболевания и необходимость коррекции или замены используемых лекарственных средств.

Важно запомнить, что полученный уровень вирусной нагрузки не отражает тяжесть течения патологии и степень разрушения печени. Для этого существуют другие методы биохимических исследований. Для правильного подбора методов лечения необходимо знать генотип вируса гепатита С.

Что же показывает вирусная нагрузка:

Высокий уровень концентрации вирусных частиц в биологических жидкостях, а особенно в крови, связан с высоким риском передачи вируса при половых контактах или во время беременности от матери плоду.
Количество вирусных частиц является отражением эффективности применяемых лекарственных средств и позволяет рационально выбирать препараты и используемые дозы.

к оглавлению ↑

Ультрачувствительный метод ПЦР диагностики

На сегодняшний день можно пройти так называемую ультра ПЦР на определение вируса гепатита С. Полностью этот метод называется ПЦР с гибридизационно-флуоресцентным исследованием в режиме реального времени.

Когда показана ультра ПЦР:

В случаях подозрения на вирусный гепатит С у пациентов со скрытыми формами заболевания.
В случаях наличия у больного антител к вирусу гепатита С, но не подтвержденных ПЦР-диагностикой.
Для оценки эффективности проводимого лечения и подтверждения факта выздоровления.
В качестве скрининговой методики для раннего выявления заболевания у людей в популяции.

Для проведения исследования, как правило, используется венозная кровь пациента. Чувствительность ультра метода менее 10 МЕ/л, что в несколько раз выше, чем у стандартных количественных и качественных вариантов ПЦР-диагностики. Назначением ультра ПЦР занимается врач-инфекционист или врач-гепатолог.

Решающим этапом постановки диагноза и оценки лечения, является правильная расшифровка полученных результатов при ультра методе ПЦР. Всегда стоит помнить о том, что существует небольшая вероятность получения ложных отрицательных и ложных положительных результатов.

Для устранения подобных ситуаций, необходимо исключить загрязнение образцов крови и лабораторных материалов. С помощью применения ультра ПЦР возможно избежать ситуаций, которые приводят к ложным отрицательным результатам, и тем самым усложняют диагностику.

Диагностика гепатита С с помощью ПЦР РНК — количественный и качественный анализ, расшифровка

Своевременный и качественно проведенный анализ ПЦР на гепатит С позволяет подтвердить или исключить присутствие вируса в организме. Одно из главных достоинств методики — вирус можно обнаружить сразу после заражения, не дожидаясь явных проявлений симптомов заболевания.

Гепатит С вызывается вирусом HCV (hepatitis C virus), содержащим рибонуклеиновую кислоту. Основная опасность HCV — это длительный промежуток времени, который разделяет моменты заражения и появления реакций со стороны иммунитета (от полутора до шести месяцев). ПЦР дает возможность намного раньше определить наличие РНК вируса в крови, поставить точный диагноз, начать лечение.

Варианты анализа

Впервые методика была использована в начале 70-х годов прошлого столетия норвежскими учеными. В ее основе — многократное копирование определенного, относительно короткого участка ДНК вируса при помощи молекул РНК. И сравнивание полученных фрагментов с сывороткой крови человека.

Что такое ПЦР при гепатите? Проводимая полимеразная цепная реакция (ПЦР) показывает:

Присутствие или отсутствие вируса;
Количественный анализ поражения;
Генотип обнаруженного вируса гепатита.

На основе полученных данных определяется степень эпидемиологической опасности (степень инфицирования и риск передачи другим людям), а также прорабатывается последовательность терапевтических мероприятий.

Исследования ПЦР назначаются:

При выявлении симптомов воспаления печени;
Для профилактических скрининговых исследований;
Для обследования в случае доказанного контакта с больным человеком;
При диагностировании гепатитов разных классов;
Чтобы узнать степень активности вируса при хроническом гепатите;
Для оценки адекватности лечения.

Качественный анализ

Качественный ПЦР-анализ позволяет доказать или исключить присутствие ВГС (вируса гепатита С) в биологических жидкостях. Несмотря на то, что качественное исследование может дать только два результата — положительный либо отрицательный, правильно расшифровать данные очень важно.

Положительный. Указывает на присутствие вируса гепатита С в крови. Это значит — пациент инфицирован. Определенный процент оставляют на возможность получения ложного результата. Но постановка диагноза при наличии других симптомов уже возможна.
Отрицательный. Указывает на то, что РНК-вируса в исследуемом биоматериале не обнаружено. Или говорит о маленькой концентрации вируса, невысокой чувствительности теста. Отрицательный анализ тоже бывает ложным.

Пример качественного анализа ПЦР РНК

Если гепатит развивается в острой форме, то качественный вариант исследования указывает на присутствие вируса в организме уже через 3 недели после заражения.

Количественный анализ

Количественный ПЦР указывает на степень вирусной нагрузки, отображает концентрацию вируса в организме. Исследование дает представление, какое количество фрагментов РНК-вируса содержится в 1 см3 крови.

Результат обозначается по общепринятой системе МЕ/мл — международных единицах на миллилитр. При показателях до 600000 МЕ/мл концентрация вируса считается низкой,среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл, выше 800000 МЕ/мл — высокой.

Пример количественного анализа

Количественная диагностика назначается перед началом терапевтического курса и на 12 неделе для определения эффективности выбранного курса терапии.

Метод помогает оценить следующие факторы:

Степень инфицирования пациента. При высокой концентрации вируса повышается риск заразить окружение;
Правильность выбранной терапии;
Длительность лечения и возможный прогноз (при большой вирусной нагрузке терапия длится довольно долго).

Гепатологи отмечают, что уровень концентрации вируса не имеет прямого влияния на тяжесть заболевания. Даже при очень высокой вирусной нагрузке печень может оставаться без серьезных повреждений.

Определение генотипа

Способность к мутации вируса гепатита С очень высока. Поэтому важно определить его генотип перед началом долгого, дорогостоящего лечения. Всего существует 11 генотипов ВГС с большим числом подвидов.

Тест на генотип позволяет специалистам определить степень устойчивости вируса, подобрать адекватное лечение. Так, 1 генотип требует до 48 недель противовирусной терапии, а 2 и 3 лечатся быстрее и эффективнее (до 24 недель).

Генотипы вируса гепатита С

При генотипировании косвенно определяется состояние печени. Например, третьему генотипу свойственно развитие стеатоза — заболевания, при котором наблюдается накопление жира в тканях печени.

Тестовые системы при ПЦР не всегда выявляют тип вируса. Тогда пациент получает результат: «Не типируется». Это означает низкую чувствительность теста или нехарактерный подвид генотипа для географической зоны. Повторное диагностирование с более чувствительной системой позволят определить тип правильно.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для профилактики, а также лечения заболеваний печени наши читатели успешно используют эффективное средство…

Ультрачувствительный анализ

Метод ПЦР с применением гибридизационно-флуоресцентного исследования называется ультрачувствительным анализом (или ультра ПЦР).

Когда используется метод:

Если специалист, ведущий заболевание, обнаружил скрытые его формы;
При наличии антител к ВГС, не подтвержденных другим методиками;
Для подтверждения полного выздоровления после проведенной терапии;
Для выявления заболевания на ранней стадии при помощи скрининга.

Чтобы провести исследование, у пациента забирается венозная кровь. Этот способ дает чувствительность менее 10 МЕ/мл, а это в разы выше, чем при проведении типовых качественных и количественных анализов. Ультра ПЦР назначает гепатолог или инфекционист.

При обычных вариантах исследования возможно получение ложного результата. Это случается, если образцы крови или оборудование загрязнено. Ультрачувствительный анализ позволяет избежать таких ситуаций и облегчить диагностику.

Расшифровка анализов

Для получения адекватных результатов требуется строго соблюдать стерильность образцов биоматериала и условий проведения исследований. Любое отклонение дает неверные данные для аналитики, искажает картину заболевания, затрудняет постановку анализа и выбора правильного курса лечения.

Неточности при проведении анализа ПЦР случаются, поэтому рекомендуется пользоваться комплексным методом исследований.

По окончании лабораторных анализов доступны следующие данные:

Положительный/отрицательный (качественный анализ);
Вирусная нагрузка (количество фракций РНК, например, 630.920 МЕ/мл);
Номер генотипа HVC, например, 1;
Наименование используемого теста, например, Real-time.

Второй пункт традиционно считается наиболее важным. Он показывает степень вирусной нагрузки и является определяющим для выбора лечения.

Особенности

Не пытайтесь самостоятельно расшифровать анализ ПЦР. Его данные могут ввести неспециалиста в заблуждение. Например, качественный тест может быть отрицательным, а иммуноферментный анализ (ИФА), проведенный параллельно — положительным.

Это лишь значит, что вируса гепатита С на данное время в крови человека не обнаружено, но в прошлом у него была острая форма заболевания.

ИФА указывает на антитела, выработанные организмом после заражения. ИФА используется для первичных исследований, но достаточно надежным его специалисты не считают. Для конечной диагностики обычно выбирают данные ПЦР тестов.

Правила сдачи анализа

Кровь на ПЦР сдают непосредственно в лаборатории. Часто совмещают забор для 2 видов анализов — ПЦР и ИФА.

Чтобы результаты были корректными, требуется выполнение следующих правил:

Не принимать никакой пищи и напитков перед анализом;
Последний прием пищи должен состояться за 8 часов или более до забора биологического материала;
В предыдущий день перед сдачей анализа отказаться от жареной и жирной пищи;
Не менее суток перед сдачей не подвергаться физическим нагрузкам.

Метод ПЦР-диагностики считается быстрым и достоверным. Данные результатов можно получить на руки уже через сутки.

Видео

Stabilin – это специальная суспензия, применяемая для регуляции процессов обмена и восстановления регенерации и функций клеток печени…

Печеночные показатели биохимического анализа крови
Что такое эластометрия (фибросканирование) печени? Расшифровка результатов
Как подготовиться к УЗИ желчного пузыря, желчегонный завтрак
Пункционная биопсия печени — подготовка, виды и как берут

Source: lechenie-pechen.ru