Вирус гепатита с количественный референсное значение
Значения гепатита С в анализах всегда разные. Они зависят от вирусной нагрузки, генотипа HCV, наличия антител в крови и состояния иммунной системы. Существуют референсные значения, в которые должны укладываться те или иные результаты. Они подразделяются на взрослые и детские, могут различаться в зависимости от пола, возраста больного. На их основании врачи ставят диагноз и назначают лечение. Расшифровкой показателей занимается только врач.
Что такое референсные значения в анализах
Референтные значения — это границы, в которые должны уложиться результаты полученных анализов, чтобы их посчитали нормальными. Например, при диапазоне от 10 до 20, 10 — это нижняя граница, а 20 — верхняя. Если показатели исследований выше или ниже нормы, это свидетельствует о наличии той или иной проблемы со здоровьем.
Каждая лаборатория располагает собственным оборудованием, которое может отличаться от других. Поэтому референсные значения также могут быть различными. Врачи должны ориентироваться не на общие нормы, а на данные той лаборатории, где было проведено исследование.
На результаты также влияет:
- режим и характер питания;
- потребление алкоголя;
- состояние стресса;
- физическое переутомление;
- время суток.
Отклонения в показателях допускаются лишь тогда, когда врач проинформирован о факторах, способных исказить общую картину показателей.
Результаты диагностики на гепатит С
Итоговые значения зависят от вида анализа на гепатит. Если есть подозрение на инфицирование, одновременно сдается кровь для анализов ИФА и ПЦР. Чтобы результат был корректным, необходимо соблюдать основные рекомендации:
- Биологический материал следует сдавать только натощак в утреннее время.
- Кушать можно минимум за 10 часов до процедуры.
- За сутки до забора необходимо исключить жирную, сладкую еду, алкогольные напитки.
Итоги обследований на вирус HCV можно увидеть уже спустя сутки.
Что показывает ИФА
Иммуноферментный анализ выявляет наличие антител к гепатиту С в крови (анти-HCV). Они проявляются в срок от двух до шести недель после инфицирования.
Нормальное значение этого исследования — «не обнаружено». Антитела к гепатиту должны полностью отсутствовать.
Положительный результат может косвенно подтверждать диагноз. В такой ситуации назначается повторная сдача крови совместно с ПЦР.
При острой форме гепатита С в заключении указаны иммуноглобулины IgM. При хроническом течении заболевания (более полугода от заражения) в плазме обнаруживаются иммуноглобулины IgG. Также подобное значение может свидетельствовать о столкновении с болезнью в прошлом. Если одновременно выявлены два типа иммуноглобулинов, значит, идет обострение хронического гепатита.
Вот значения гепатита С на разных фазах болезни:
- во время острой формы — IgM+, IgG+;
- скрытая (латентная) форма — IgM-, IgG+;
- хронического течение — IgM+, IgG+;
- в процессе выздоровления — IgM-, IgG+, HCV-.
Анализ ИФА при гепатите С иногда бывает недостоверным. Больной может увидеть псевдоотрицательный результат в остром периоде инфекции. Иногда антитела к гепатиту С появляются на протяжении 3-5 месяцев с момента инфицирования, поэтому сразу они не определяются.
Также ложноотрицательные значения появляются у людей, которые проходят лечение сифилиса, онкологии, аутоиммунных заболеваний. В этом случае чувствительность ИФА колеблется в пределах 50-95%. У 8% ВИЧ-положительных больных диагностируется ложноотрицательный результат – их организм не производит антитела.
Значение количественной ПЦР
Полимеразная цепная реакция — это количественное исследование крови, благодаря которому определяется концентрация вируса гепатита. Это наиболее достоверный анализ, позволяющий обнаружить вирусные агенты, а не антитела.
Вирусная нагрузка при гепатите С означает то, сколько единиц вирусной РНК присутствует в 1 мл биологического материала.
Когда человек здоров, референтный результат — отрицательный (в крови нет вирусных частиц). При разной вирусной нагрузке референсные значения различны:
- От 0 до 1,8×102 МЕ на 1 мл — количество вирусной РНК ниже уровня установленного значения. Это означает, что вирусные агенты присутствуют в крови, но в очень маленькой концентрации (при одновременно проведенном качественном ПЦР).
- От 1,8×102 до 7,9×105 МЕ на 1 мл — вирусная активность не очень высокая.
- От 8×105 до 2,3×107 МЕ на 1 мл — присутствует HCV с высокой вирусной нагрузкой.
- От 2,4×107 МЕ на 1 мл и более — высокая виремия. Вероятно развитие тяжелых осложнений (цирроза, рака печени).
Количественное ПЦР-обследование назначается больным гепатитом С перед началом противовирусной терапии и в процессе нее на 3 месяце, чтобы оценить ее эффективность.
Исследование ПЦР может быть качественным, когда выявляется вирус в крови. Его необходимо проходить всем людям, у которых имеются антитела к гепатиту С. Стандартная чувствительность — 10-500 МЕ/мл. Когда показатели ниже указанных пределов, анализ недостоверный. Если благодаря качественному анализу вирус не обнаружен, человек признается здоровым.
Что делать с полученными значениями
Результаты анализов следует показать врачу. Значения количественной ПЦР диагностики позволяют определить:
- Вероятность передачи вируса от инфицированного здоровому человеку. Чем выше концентрация патологических агентов в крови, тем выше риск заражения гепатитом С.
- Какие препараты лучше использовать и какова эффективность противовирусной терапии.
- Длительность и прогноз лечения. При высоких показателях вирусной нагрузки терапевтический курс длится дольше.
Прямой связи между количеством вирусных частиц в крови и тяжестью заболевания нет. У инфицированного при высокой вирусной нагрузке может не быть серьезного поражения клеток печени.
В некоторых случаях значения анализов показывают отрицательный ПЦР, но положительный ИФА. Это говорит о том, что в данный момент вирус HCV не обнаружен, но ранее человек перенес острую форму гепатита С.
При ложноположительных результатах больному показаны повторные анализы, а также исследование на определение генотипа, печеночные пробы и УЗИ печени.
При подтверждении гепатита С назначается лечение. Оно может быть основано на приеме интерферонов или препаратов прямого действия, которые имеют меньше побочных эффектов и большую результативность (до 99%). Это Софосбувир, Даклатасвир, Велпатасвир, Ледипасвир. С их помощью вылечить хронический гепатит даже с циррозом печени можно за полгода.
Источник
Учитывая бессимптомное течение и высокую вероятность передачи HCV-инфекции, большое значение имеет диагностика на ранних стадиях патологии. Наиболее точной считается постановка полимеразной цепной реакции. В отличие от методов выявления серологических маркеров, ПЦР мало зависит от сопутствующих заболевания и общего состояния организма пациента. Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.
HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.
Основные стадии диагностического процесса приведены в таблице:
| Проводимое исследование | Цели выполнения |
| Биохимический анализ крови и печеночные пробы | Позволяет оценить функциональную активность печени, уровень билирубина, показатели печеночных трансаминаз. Превышение нормы в 2 раза и более указывает на наличие заболевания |
| Клинические анализы крови, мочи и кала | Данные исследования неспецифичны, но по результатам можно установить наличие воспалительного процесса, оценить общее состояние пациента. Обнаружение билирубина в моче, изменение оттенка кала говорит в пользу поражения печени |
| Иммуноферментный анализ (ИФА) | Позволяет определить как наличие вирусной инфекции в организме, так и ее форму (острую или хроническую). Недостатком исследования является вероятность ложных результатов |
| Полимеразная цепная реакция | Дорогостоящий, сложный в проведении, но вместе с тем наиболее точный метод диагностики HCV. Позволяет подтвердить наличие вируса в организме человека, количественно установить уровень копий РНК, определить генотип HCV |
| Инструментальные обследования печени | Необходимо проведение УЗИ органов брюшной полости, установление стадии фиброза, оценка тяжести цирроза, исключение гепатоцеллюлярной карциномы |
Окончательный диагноз доктор ставит только по результатам, указанным во всех исследованиях. Некоторые препараты, например, гепатопротекторы, витамины показаны уже в начале диагностического процесса. Но таргетные противовирусные средства назначают после получения всех данных.
Что такое ПЦР
Техника проведения полимеразной цепной реакции известна достаточно давно и успешно используется для диагностирования ряда вирусных заболеваний, и HCV не является исключением.
В настоящее время существует несколько методик постановки ПЦР, но в принципиальном плане этот процесс состоит из нескольких этапов:
- Разрушение двойной нити ДНК под воздействием нагревания либо определенных химических веществ.
- Присоединение к разделенным основанием ДНК так называемых праймеров – остатков нуклеотидной цепи РНК вируса (в большинстве современных тест-систем используются 5`-NTR-области генома HCV).
- Специфический фермент, ДНК-полимераза, распознает праймер, провоцирует присоединение других нуклеотидных остатков.
По окончании третьего этапа полимеразной цепной реакции ДНК между двумя праймерами удваивается, а впоследствии происходит амплификация участка генома в геометрической прогрессии (2–4–8 и т.д.).
Чувствительность современных тест систем составляет 10–50 копий РНК в 1 мл крови.
Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. В соответствии с Международным стандартом ВОЗ для количественного определения вирусного генома служит образец плазмы крови в лиофилизированном виде, содержащий РНК первого генотипа вируса в концентрации 105 МЕ/мл.
При этом обращают внимание на количественные единицы, в которых выражены результаты исследований. Обычно количество копий РНК HCV указывают в абсолютном или логарифмическом выражении. Затем, в соответствии с международными стандартами, эту цифру пересчитывают при помощи специального коэффициента в международные единицы (МЕ). Таким образом конечные результаты обозначаются в МЕ/мл.
Для проведения количественного исследования применяют различные тест-системы и методики постановки полимеразной цепной реакции. Некоторые предназначены для оценки уровня виремии в плазме или сыворотке. Другие более эффективны и показательны при исследовании цельной крови.
Говорить о норме при интерпретации указанных в лабораторном бланке результатов не совсем корректно. Дело в том, что у здорового человека РНК вируса в организме отсутствует, а наличие частиц HCV вне зависимости от количественного показателя свидетельствует об инфицировании. В дальнейшем при помощи ПЦР оценивают эффективность лечения. При отрицательном результате на 4 неделе приема медикаментов, а затем и после окончания противовирусной терапии (на протяжении 48 недель) говорят о выздоровлении.
Виды исследования
Проведение полимеразной цепной реакции предполагает определение не только наличия РНК HCV в крови, но и определение количества копий вируса и анализ структуры генома. Такие возможности делают ПЦР одним из наиболее информативных и точных методов диагностики вирусного гепатита C.
Все применяемые на практике методы постановки полимеразной цепной реакции приведены ниже в порядке проведения (каждый последующий тест назначают при положительном результате предыдущего):
- Анализ ПЦР на гепатит С качественный, проводится только для обнаружения РНК вируса в крови.
- Количественное исследование ПЦР. Расшифровка проводится согласно общепринятым нормам. В зависимости от результата вирусологическая нагрузка может быть низкой, умеренной или высокой. Данный показатель является одним из предикторов исхода терапии HCV.
- Генотипирование (во многих частных лабораториях предлагается в комплексе с количественным анализом, что снижает общую стоимость). Обозначение генотипа HCV осуществляется одной из арабских цифр (с 1 по 6). На территории России чаще выявляют генотип 1 или 3, несколько реже – 2, 4–6 диагностируют в единичных случаях. Ранее при использовании интерфероновых схем лечения разновидность HCV определяла длительность и эффективность терапии. Современные противовирусные средства отличаются широким спектром действия, но некоторые из них прописывают только при 1–4 генотипах HCV.
Генотипирование проводится только один раз, перед началом терапии. По мере приема медикаментов количественные нормы гепатита С необходимы врачу для оценки эффективности противовирусных препаратов. После окончания курса лечения проводят качественное исследование ПЦР.
Особенности количественного анализа
Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.
Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:
- вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
- эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
- риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
- риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).
Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.
Показания
До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.
В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:
- положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
- положительный результат качественной ПЦР;
- контроль проводимого лечения.
При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.
Нам каких этапах заболевания проводится
Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:
- до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
- 4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
- последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
- 24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.
Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.
Как подготовиться к исследованию
Чтобы расшифровка анализа ПЦР не была ошибочной, необходимо соответствующим образом подготовиться к забору крови. За некоторым исключением правила не отличаются от таковых при других исследованиях.
Необходимо:
- сдавать кровь строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории);
- процедуру проводить в первой половине дня (как можно раньше);
- в день анализа после пробуждения пить можно только воду; чай, кофе, газированные и/или сладкие напитки, соки и т.д. противопоказаны;
- за 3–5 часов до сдачи крови нельзя курить;
- если невозможно прервать прием каких-либо медикаментов, сообщить названия принимаемых лекарств лаборанту и врачу, который будет интерпретировать полученные данные.
Наличие гепатита С уже подразумевает полный отказ от спиртного и строгую диету (стол №5). Но если анализ проводится на этапе диагностики, за 5–7 дней до забора крови обязателен контроль питания с исключением тяжелых для печени продуктов и алкоголя.
Расшифровка количественного анализа на гепатит С
Обычно, когда пациент получает на руки результаты анализов, в бланке приведены показатели нормы, полученные значения и краткая интерпретация. Однако расшифровка анализа крови на гепатит С должна проводиться только врачом. Количественная ПЦР – один из этапов диагностики, поэтому врач сопоставляет приведенные цифры с полученными ранее результатами.
В зависимости от полученных показателей определяется степень вирусной нагрузки или полное отсутствие РНК HCV в организме.
Если проведен количественный анализ на гепатит С, расшифровка проводится в соответствии с таблицей:
| Значение показателя | Уровень вирусной нагрузки |
| РНК вирус не обнаружены (либо количество копий меньше чувствительности тест-системы) | Норма, человек здоров либо анализ проведен в инкубационный период патологии |
| 1,8×102–7,9×105 МЕ/мл | Низкая вирусная нагрузка. Указывает на недавнее инфицирование, латентное течение либо эффективность противовирусных препаратов |
| 8×102–2,3×107 МЕ/мл | Умеренная вирусная нагрузка. Обычно отмечается при хронической форме HCV. Прогноз лечения благоприятный при условии соблюдения рекомендаций врача |
| 2,4×107 МЕ/мл и выше | Высокая виремия. Очень вероятны тяжелые осложнения (вплоть до рака печени) |
Чтобы точно расшифровать анализ и не допустить ошибочных результатов, оценивать данные количественной ПЦР можно только после выявления серологических маркеров качественной ПЦР. При ИФА обязательно указывается коэффициент позитивности. Также принимают во внимание данные ультразвукового обследования, эластографии и биопсии, если исследование проводилось.
Норма
Количественный анализ ПЦР проводят только в том случае, если положительны другие показатели крови при гепатите С.
Получение отрицательного результата возможно при:
- самостоятельном выздоровлении (в медицинской литературе приведена статистика, по которой порядка 15% случаев инфицирования HCV остаются незамеченными, иммунная система человека полностью устраняет вирус);
- раннем вирусологическом ответе (при оценке результатов в ходе противовирусной терапии);
- при ошибочных данных предыдущих исследований (маловероятно, так как предварительно обычно назначают ИФА, качественную ПЦР, печеночные пробы).
Когда сдается анализ на гепатит С для оценки вирусологической нагрузки, расшифровка проводится врачом. Считается, что показатели нормы – это полное отсутствие РНК HCV в крови. Но для исключения скрытой инфекции исследование рекомендуют повторить через несколько недель.
Какие показатели крови указывают на гепатит С
Перед началом диагностического обследования необходимо точно знать, какие показатели крови указывают на HCV. С одной стороны это позволит избежать пациенту лишних финансовых трат на ненужные анализы, с другой – сэкономит время.
Так, при гепатите С показательны такие данные:
- позитивный ИФА вне зависимости от класса обнаруженных антител; но данный параметр оценивают на фоне других результатов, так как некоторые особенности работы иммунной системы могут повлиять на правильность исследования;
- позитивная качественная ПЦР (чувствительность и специфичность метода достигает 100%);
- определение количества копий вируса при количественной ПЦР.
Косвенными признаками HCV является превышение норм печеночных трансаминаз, билирубина, лейкоцитоз, ускорение СОЭ, наличие билирубина в моче.
При расшифровке результатов принимают во внимание сокращения, как обозначается гепатит С в анализах. Обычно вирусную нагрузку указывают в МЕ/мл или IU/ml, а РНК вируса английской аббревиатурой RNA HCV.
Бывает ли ложный тест
В отличие от ИФА вероятность ложного результата ПЦР практически нулевая. Ошибки возможны только в результате человеческого фактора, то есть при нарушении правил забора крови, хранения образцов и непосредственно проведении исследования.
Преимущества количественного исследования методом ПЦР
Специалисты в области гепатологии подчеркивают, что количественная ПЦР не имеет аналогов и является одним из основных исследований для пациентов с HCV. Механизм проведения анализа сводит к минимуму вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов.
Для получения результатов требуется несколько дней. Забор крови не требует особой подготовки, возможен практически в любой клинической лаборатории и не сопровождается какими-либо значимыми болевыми ощущениями. Но основным преимуществом такого анализа является высокая точность, достигающая 100%.
Источник
