Вирус гепатита с рнк содержащий
«Выявление генов вируса гепатита С (HVC) в крови пациента является вторым этапом лабораторной диагностики этой инфекционной патологии. Чтобы обнаружить возбудителя, который не имеет клеточной мембраны и, соответственно, поверхностных антигенов, используют метод полимеразной цепной реакции. С помощью этого метода определяют непосредственно молекулу, в которой закодирована вся его генетическая информация — РНК.
Содержание
Что это значит?
Анализ на РНК вируса гепатита С
РНК вируса гепатита С: метод ПЦР
РНК гепатита С: качественный анализ
РНК гепатита С: количественный анализ
Гепатит С: анализы и расшифровка
РНК – Рибонуклеиновая кислота, наряду с ДНК входит в состав клеток всех живых организмов. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет способность к ее мутациям.
Исследование на наличие генома HVC назначают обычно после того, как проводят общий, биохимический анализ крови и получают положительный ответ на антитела (anti-HVC).
Что это значит?
Исследование на антитела к HVC является скрининговым, то есть с его помощью можно обследовать большие контингенты населения (медиков, беременных, пациентов стационаров, доноров, инъекционных наркоманов, ВИЧ-инфицированных). Отрицательный результат лабораторного анализа anti-HVC говорит о том, что в крови обследуемого не обнаружено иммунной реакции на вирус. Отрицательный результат может быть получен в таких случаях:
Если человек никогда не заражался гепатитом С.
Если чувствительность лабораторной тест-системы оказалась ниже, чем концентрация anti-HVC.
Если инфицирование произошло менее 2 месяцев назад и anti-HVC в крови еще недостаточно для определения. При ложноотрицательном ответе по причине человеческого фактора.
Если же получен результат, что антитела к HVC у больного обнаружены, это значит, что вирус гепатита С находился в организме обследуемого на момент проведения исследования или был в крови некоторое время назад. При положительном результате на anti-HVC возникает необходимость проведения дополнительных лабораторных исследований, которые обнаружат генетический материал самого возбудителя, определят концентрацию его генов (вирусную нагрузку, виремию) и установят генотип.
Анализ на РНК вируса гепатита С
Геном HVC в лабораторных условиях можно обнаружить с помощью нескольких исследований:
- разветвленной ДНК (р-ДНК);
- транскрипционной амплификации (ТМА);
- полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Метод р-ДНК — недорогой и простой способ обнаружения вирусного генома у большого количества обследуемых людей. Его главным недостатком является низкая чувствительность: выявляет HVC только при его концентрации свыше 500 МЕ/мл.
Метод транскрипционной амплификации обнаруживает в сыворотке крови нуклеиновые кислоты вируса. Анализ имеет высокую чувствительность (5-10 МЕ/мл), но он еще недостаточно внедрен в повсеместную лабораторную практику.
Метод ПЦР в России является самым распространенным и доступным лабораторным обследованием с высокой чувствительностью (от 50-60 МЕ/мл).
Исследование ПЦР выполняется в любой клинической лаборатории, имеющей соответствующую аккредитацию. Очень важным нюансом этого метода диагностики, который влияет на результат анализа, является чувствительность используемой в лаборатории тест-системы. Например, чувствительность диагностикума 60 МЕ/мл, как в лабораториях «Инвитро», позволяет обнаруживать вирусную РНК спустя 3 месяца после заражения. При низкой чувствительности тест-системы гены возбудителя могут не обнаруживаться даже спустя 4 месяца после инфицирования.
РНК вируса гепатита С: метод ПЦР
Метод ПЦР имеет множество преимуществ перед другими лабораторными исследованиями для обнаружения генов HVC:
- высокая чувствительность. Метод позволяет определять генетический материал возбудителя даже при его минимальной концентрации в образце;
- большая специфичность. Выявляет гены вируса определенного генотипа среди множества ДНК и РНК других возбудителей, что позволяет проводить генотипирование возбудителя;
- быстрота проведения. Отсутствие длительного процесса культивирования возбудителя сокращает время получения результата до нескольких часов; универсальность анализа.
Универсальная процедура проведения исследования позволяет одновременно использовать один образец крови человека для обнаружения генетического материала разных возбудителей. Эти преимущества позволяют считать ПЦР «золотым стандартом» лабораторной диагностики вирусного гепатита С вместе с иммуноферментным анализом на anti-HVC.
ПЦР — это исследование, используемое для определения генов HVC в крови обследуемого человека. Исследование состоит из нескольких этапов:
- Отбора образца биоматериала.
- Многократного увеличения концентрации копий РНК в отобранном образце.
- Обнаружения генетического материала с помощью специальных тест-систем.
После забора венозной крови у пациента проводят искусственное инициирование процесса множественного реплицирования (амплификации, копирования) генов HVC.
Для этого определенным способом несколько раз изменяют температуру внутри пробирки с биоматериалом. Когда количество копий РНК в пробирке достигает необходимого значения, проводят обнаружение возбудителя с помощью специальных тест-диагностикумов.
ПЦР-диагностика бывает
- качественной (обнаруживает присутствие вируса),
- количественной (определяет концентрацию вирусных генов в единице объема)
- генотипической (устанавливает генотип возбудителя).
РНК гепатита С: качественный анализ
Задача качественного ПЦР — определение наличия HVC в представленном биоматериале. Это исследование проводится обычно для скрининговой диагностики заболевания или выявления носительства. Назначают его после того, как выявят anti-HVC методом ИФА.
Чтобы поставить диагноз гепатита С, достаточно обнаружить генетический материал HCV качественно, то есть без подсчета его концентрации в объеме крови. Результатом качественного ПЦР может быть: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено».
Точность метода соответствует 95%. При этом точность самих тест-диагностикумов достигает 100%, а 5% — это человеческий фактор, который всегда присутствует в лабораторных исследованиях. Чтобы избежать ложноотрицательного анализа, особенно у людей с низкой виремией, необходима высокая чувствительность применяемой в исследовании диагностической системы. Чувствительность тест-системы должна быть не меньшей, чем 60 МЕ/мл.
РНК гепатита С: количественный анализ
Количественный анализ назначают тогда, когда нужно знать уровень виремии в организме человека. Показаниями для проведения этого исследования являются:
- положительный результат качественного ПЦР при условии обнаружения антител к вирусу;
- установление стадии патологии;
- определение вирусной нагрузки при гепатитах;
- выбор комбинации противовирусных препаратов;
- мониторинг вирулогического ответа на проводимую противовирусную терапию;
- оценка вероятности перехода острого гепатита С в хронический.
Результат анализа выражается в МЕ/мл (международных единицах в 1 мл сыворотки) или в копиях/мл (количестве копий генов вируса в 1 мл сыворотки). Количественный ПЦР не имеет нормы: в норме ген HVC в крови человека обнаруживаться не должен. Полученные результаты обследования сравнивают с референсными значениями, установленными для той или иной степени вирусной нагрузки.
Так, показатели (в МЕ/мл):
- ниже 4×10*5 считаются низкой виремией;
- от 4×10*5 до 8×10*5 — средней;
- свыше 8×10*5 — высокой.
Чем больше копий вирусной РНК в крови, тем агрессивнее протекает заболевание и больше риск передачи вируса окружающим. Но уровень вирусной нагрузки — не единственный показатель, влияющий на тяжесть течения патологии и дальнейший прогноз для пациента: важен также генотип возбудителя.
Установление генотипа необходимо для назначения правильной схемы лечения. От него также зависит прогноз для здоровья и жизни пациента. Например, вирус 3 генотипа чаще приводит к фиброзу или циррозу печени, в сравнении с пациентами носителями 1 генотипа.
Гепатит С: анализы и расшифровка
РНК Диагноз гепатита С невозможно поставить только по результатам только качественного и/или количественного анализа ПЦР: определения HVC и уровня вирусной нагрузки недостаточно для назначения адекватной противовирусной терапии. Потенциального больного нужно обследовать комплексно (клинически, лабораторно, инструментально), чтобы иметь объективную картину патологии. Правильно назначить комплекс обследований для установления диагноза гепатита С, а затем грамотно расшифровать полученные результаты может только врач.
Источник
Гепатит С – опасное вирусное заболевание, чреватое осложнениями. Из-за отсутствия специфической симптоматики, схожести с другими болезнями, выявляется только методами молекулярной диагностики. Для определения возбудителя проводится анализ ПЦР (метод полимеразной цепной реакции).
Существует ли ПРИВИВКА от Гепатита С?
ДаНет
Если РНК вируса гепатита С не обнаружена, это значит, что человек здоров, либо анализ взят слишком рано. Возбудитель становится активным только через пять дней, поэтому при подозрении на инфицирование проводится повторный тест. Если биохимические показатели в норме, человек признается здоровым.
Анализ на РНК вируса гепатита С
Молекулярное исследование показывает, есть НСV в крови или нет. Когда на бланке качественного анализа указан результат «гепатита С не обнаружено», больной не опасен для окружающих. Необходимо провести повторное тестирование через две недели, чтобы удостовериться в отсутствие РНК. Если качественный результат положительный (надпись «обнаружено»), проводится количественное тестирование.
Качественный анализ
Метод генетического исследования выявляет вирус в минимальной концентрации. Параметры ограничены чувствительностью прибора. Она колеблется в диапазоне от 10 до 500 МЕ/мл. Это референсные значения, ниже которых на бланке анализа будет написано «не обнаружено».
При выборе лаборатории важно спрашивать, каким оборудованием будет производиться анализ методом полимеразной цепной реакции. Выявить HCV при низкой виремии (концентрации возбудителя в пробах) можно на приборах чувствительности до 50 МЕ/мл.
Возможные результаты:
- «обнаружено»;
- «не обнаружено».
Когда в крови возбудитель присутствует в небольшом количестве, болезнь будет развиваться. Если основные биохимические показатели ниже референсных значений, есть подозрение на заражение, при результате теста «не обнаружено» лучше повторить качественный анализ через какое-то время.
Возможен результат «обнаружено». Только при хорошей иммунной защите организм способен самостоятельно справиться с возбудителем. Гепатит по симптоматике схож с другими болезнями, если выявить вирус на ранних стадиях болезни, снижается риск аутоиммунных осложнений.
Количественный анализ
Недостаточно обнаружить HCV, для определения схемы приема препаратов нужно знать концентрацию вируса в крови. По результатам количественного анализа ПЦР судят о вирусной нагрузке.
Определение количества РНК (удельного содержания возбудителя в одном мл крови) помогает установить стадию развития болезни. Вирус размножается постепенно. Нельзя путать стадию развития гепатита со степенью тяжести болезни. Люди, имеющие одинаковые результаты, анализа могут чувствовать себя по-разному:
- при слабом иммунитете гепатит маскируется под ОРВИ;
- при сильной защите возможная острая форма болезни, когда глобулины массово атакуют НСV;
- возможно появление типичных для печеночных патологий симптомов, характерных для заболевания средней степени тяжести.
Расшифровка количественного анализа – дело специалистов. Международная система стандартов допускает оформление результатов в двух измерениях:
- МЕ/мл;
- копии/мл.
Пересчет результата производится по формуле:1 МЕ/мл = 4 копии/мл. У медиков приняты следующие количественные оценки:
- ниже 180 МЕ/мл (720* к/мл) – малоопасная концентрация;
- до 800 000 МЕ/мл – низкая концентрация;
- свыше 800 000 МЕ/мл – высокая вирусная нагрузка;
- свыше 25 000 000 МЕ/мл – сверхвысокая (критическая )концентрация НСV в крови.
Анализ на антитела (ИФА)
Обнаружение специфических белков, убивающих НСV, свидетельствует об иммунном ответе организма. ИФА определяет антитела, не только к гепатиту. Этим методом диагностируются другие виды патологий, инфекционных заболеваний.
Исследование проводится при подозрении на заражение, оно подтверждает или ставит под сомнение отрицательный результат ПЦР. Антитела – своеобразная иммунная память, они остаются у здорового человека до трех лет, реже – на протяжении всей жизни (устойчивая защита к вирусу).
Если у пациента антител нет, это говорит о невосприимчивости организма к возбудителю, он не распознается как чужеродный. Если проверяют пациента, не болевшего гепатитом, возможен результат «не обнаружено» на РНК и антитела.
Что значит, если РНК вируса не обнаружено?
Такой результат возможен, если:
- человек здоров (возможен при проведении профосмотров, обязательном тестирование при поступлении больных на лечение в стационар);
- концентрация НСV ничтожна, ниже порога чувствительности;
- со времени заражения прошло менее 5 суток (вирус не выявляется сразу после попадания в кровяное русло);
- произошла санация крови после лечения гепатита С, организм выработал мощную антивирусную защиту, подавил размножение возбудителя.
Для пациентов, у которых было инфицирование, кровь на стерильность проверяется на протяжении трех лет через каждые полгода. Если отрицательный результат подтверждается, человек признается полностью излечившимся.
Что значит, если РНК гепатита С не обнаружено, а антитела есть?
Присутствие антител говорит о хорошем иммунитете. Часть людей (до 10%) способны самостоятельно излечиваться. Организм способен подавить вирус, без препаратов. Часто НСV у таких людей нет, а ИФА-тест показывает присутствие антител.
Другой вариант подобных результатов – выздоровление пациента. Для эффективного иммунного ответа порой требуются годы. Хроническая форма с периодами ремиссий способна обостриться. Тяжело переносят гепатит С люди с острой формой заболевания, когда глобулины поражают гепатоциты, на которых остались следы пребывания возбудителя.
Наличие антител при отсутствии РНК – самый благоприятный результат комплексного обследования.
Когда нужно повторить анализы?
При ложноположительных и ложноотрицательных оценках повторные пробы назначаются сразу. Когда обнаруживают РНК и антитела одновременно, повторные тесты нужны для определения динамики развития болезни.
Традиционный курс лечения после выявления гепатита С предусматривает обязательное тестирование сначала через пару недель, затем на 4-1, 12-й, 24-й неделе. Больные не снимаются с учета до трех лет. Через каждые полгода проводится обследование.
При большой вирусной нагрузке частотность повторных проб меняется, врач корректирует тактику лечения. Подвид 1 генотипа НСV не сразу поддается лечению, подвиды 2,3 не очень устойчивы, быстро уничтожаются. Противовирусные средства принимаются разными курсами.
Что делать, если РНК обнаружена?
Пациент признается больным, если в анализах значение «РНК HCV обнаружена». Врач назначает схему лечения, диету. Вирусоноситель возлагает добровольные обязательства по соблюдению правил гигиена, снижающих риск передачи возбудителя.
Основные пути передачи – гематогенный и половой. Возможна вертикальная передача инфекции через плацентарный барьер или во время родов, планированную беременность лучше отложить до выздоровления.
Беременные одновременно посещают гинеколога и инфекциониста, чтобы снизить риск вертикальной передачи возбудителя. Препараты нового поколения без побочных действий, их назначают детям младшего возраста, беременным. Они эффективно борются с НСV, бояться гепатита С не нужно.
( 1 оценка, среднее 5 из 5 )
Источник
Генотипирование гепатита С — необходимая процедура, которая иногда способна спасти жизнь человеку. Существует ряд заболеваний, которые на первоначальном этапе протекают бессимптомно, но способны значительно ухудшить качество жизни и даже привести к преждевременной смерти.
Вирус гепатита С
Чем опасен гепатит С и как его выявить
Заразиться вирусом гепатита С может каждый. Если раньше эта болезнь передавалась преимущественно в среде наркоманов, то теперь наблюдается всплеск инфицирования практически во всех слоях населения. Гепатит С передается с кровью, поэтому заразиться им можно даже в медицинском учреждении или в салоне красоты.
Инкубационный период недуга составляет до полугода. Но бессимптомное развитие заболевания в хронической форме может длиться десятилетиями. В этот период поражается печень, вызывая цирроз и рак. Остро выраженный гепатит С проявляется:
- повышением температуры тела;
- апатией и усталостью;
- тошнотой, рвотой;
- неприятными ощущениями в области живота и суставах;
- желтухой кожи и склер.
При первых же подобных симптомах необходим скрининг, диагностика и лечение.
Всемирная организация здравоохранения неоднократно высказывала беспокойство темпами заражения гепатитом С во многих странах. В целях профилактики рекомендуют ежегодно сдавать анализ крови на это заболевание — серологический скрининг на антитела ВГС.
При выявлении гепатита С в организме человека проводят тест на рибонуклеиновую кислоту (РНК), чтобы определить форму заболевания — острую или хроническую.
При первом типе недуга около 1/3 всех пациентов не нуждаются в лечении, поскольку иммунная система этих людей самостоятельно справляется с инфекцией. Но одним из отличий вируса является его способность к мутации — изменчивости в строении гена.
Благодаря этому он может ускользать от иммунной системы и практически беспрепятственно разрушать здоровые клетки. В таком случае тест на РНК укажет на хроническую форму заболевания. Врачу при этом нужно будет:
- определить степень поражения печени (фиброз, цирроз) с помощью биопсии;
- провести установление генотипа вируса гепатита С.
Без специалистов не удастся распознать заболевание.
Генотипирование вируса гепатита С
Гепатит С — упрощенное название целого спектра вирусов, которые сгруппированы по генотипам и субтипам по различиям в структуре РНК. Соответственно, реакции на воздействие препаратов будут индивидуальными.
Из 11 известных генотипов наибольшее распространение в мире получили 6. Субтипов насчитывается около 500, и они отличаются своеобразной чувствительностью к препаратам.
Анализ на генотип вируса С нужен, чтобы подобрать адекватное лечение для каждого конкретного случая заболевания. От схемы терапии зависит ее продолжительность и результативность.
Итоги исследования позволяют спрогнозировать развитие заболевания, подобрать приемлемые терапевтические мероприятия, дозировки препаратов. В некоторых случаях и биопсия печени проводится только после выполнения генотипирования.
Генотипы 1 – 6
Генотипы возбудителя распределены по миру не одинаково:
- генотипы 1, 2, 3 типы наиболее распространены во всем мире;
- 1 и 2 имеют перевес в Западной Европе и Дальнем Востоке;
- 1 генотип – США;
- 4й –Северная Африка;
- 6й – Южная Африка;
- 1В тип – Япония.
Для постсоветского пространства характерными являются генотипы 1, 2 и 3 вируса гепатита С.
Генотипы 1b
Из субтипов на территории Центральной и Восточной Европы, а также в Азии наиболее часто встречается вирус гепатита С 1b. Его специфика:
- Форма недуга в основном хроническая.
- Бессимптомное протекание болезни (пациент может узнать о своей проблеме через десятилетия после заражения).
Вирус с высокой долей вероятности спровоцирует цирроз печени, гепатоцеллюлярную карциному, внепеченочные осложнения ( криоглобулинемический васкулит , злокачественные опухоли лимфатической системы), которые могут привести к летальному исходу.
Интерфероновые схемы лечения практически не дают никакой реакции. Терапия разновидности Даклатасвир + Асунапревир/Софосбувир позволяет достичь стойкого вирусологического ответа.
Генотипы 3а и 3в
Следующими по распространенности на территории Украины, Белоруссии и России являются РНК вируса гепатита С 3а и 3в. Он:
- значительно реже протекает в хронической форме;
- характеризуется поражением желчевыводящих путей и стеатозом (накоплением жира в печеночных клетках);
- реже приводит к циррозу;
- при подборе дозировки Рибавирина следует отталкиваться от веса пациента, а для недуга генотипа 3a количество препарата назначается врачом.
Подготовка к определению РНК вируса гепатита С
С чего нужно начинать диагностику и как определить генотип вирусного заболевания? Назначение на выполнение теста на генотип гепатита С дает инфекционист либо гепатолог. Для проведения манипуляций необходима кровь из вены пациента.
Перед процедурой сдачи анализов запрещается курить (хотя бы в течение получаса), употреблять алкогольные напитки или наркотические вещества.
Анализ на генотип гепатита С может не только подтвердить или опровергнуть поражение организма человека вирусом определенного типа, но в редких случаях даже не дать определенного результата. Если генотип не определяется, то это еще не означает, что человек здоров. В этом случае возможны 2 варианта:
- Нетипичный для данного региона вирус (нужны иные реагенты для проведения анализа на все возможные типы гепатита С).
- Низкая концентрация вирусной РНК в крови пациента (лаборатория, в которой проводили анализ, оснащена не столь мощной и чувствительной аппаратурой).
У некоторых пациентов в организме присутствуют сразу несколько генотипов вируса.
Гепатит С, генотипирование и соответствующее лечение которого были проведены успешно, у больного не исчезает. После избавления от одного вируса, следует приступить к лечению оставшегося в организме.
Влияют на результат и последующую терапию при генотипировании гепатита С условия сдачи анализа, хранения материала. Поэтому следует выбирать медицинское учреждение, имеющее опыт проведения данной процедуры. Персонал клиники должен быть обученным, а оборудование — новым и рабочим.
Возможно, разрабатываемые пан-генотипические схемы лечения со временем избавят от необходимости в генотипировании, однако на данный момент это один из основных анализов при выявлении гепапита С. Альтернативы такой процедуре пока не существует.
Норма количественного исследования РНК вируса гепатита С
Нормальным результатом количественного анализа на гепатит С для здорового человека считается полное отсутствие вируса в крови. На это должен указать качественный анализ, он проводится пациентам, у которых обнаружены антитела к вирусу.
Нормой при расшифровке анализов на гепатит С считается — «вирус не обнаружен».
Если количественный анализ с расшифровкой показал результат меньше 400 тыс. МЕ/мл, можно говорить о минимальной концентрации вируса в крови, но не об отсутствии заболевания.
Нагрузку более 800 тыс. МЕ/мл определяют как высокую. Однако среди специалистов нет согласия в определении минимальной и максимальной концентраций.
Границей считают 400 тыс. МЕ/мл.
Цены на определение РНК вируса гепатита С
Стоимость проведения исследования для пациентов при отсутствии страховых случаев колеблется в пределах от 500 до 5 000 руб. Такой разброс цен вызван качеством реактивов.
Набирает популярность метод ТМА (транскрипционная амплификация), известный пока только за пределами России. ТМА обладает хорошей чувствительностью (5–10 МЕ/мл).
Количественный анализ на гепатит С расшифровкой поможет пациенту вовремя предпринять необходимые меры для излечения заболевания либо быть уверенным, что ему ничего не угрожает. А также уберечь окружающих его знакомых и родственников от возможности заражения.
Проведение тестирования на наличие этого опасного вируса и особенно его определение методом ПЦР в большой степени определяет успешность проводимой терапии.
Автор статьи врач-инфекционист, гепатолог
© 2019 – 2020. Все права защищены.
Источник