Вирус гепатита в содержит днк

Текущая версия страницы пока не проверялась опытными участниками и может значительно отличаться от версии, проверенной 31 декабря 2018;
проверки требуют 3 правки.

Ви́рус гепати́та B (англ. Hepatitis B virus, HBV) — ДНК-содержащий вирус из семейства гепаднавирусов, возбудитель вирусного гепатита B. В мире по различным оценкам от 3 до 6 % людей инфицировано вирусом гепатита B. Носительство вируса не обязательно сопровождается гепатитом, однако носитель вируса может заражать других людей.

Классификация[править | править код]

Выделяют 10 генотипов вируса: A, B, C, D, E, F, G, H, I и J. Различия между генотипами составляют более 8 %. Генотипы A и D распространены повсеместно; генотипы C и B характерны для Юго-Восточной Азии и Японии. Генотип Е распространен преимущественно в Африке. Генотип F был найден среди коренного населения Южной Америки и на Аляске. Генотип G спорадически встречается в различных частях света, в частности в Соединенных Штатах Америки и во Франции. Генотипы Е и G характеризуются низкой вариабельностью в последовательности нуклеотидов в геноме, по сравнению с другими генотипами.

Генотипы вируса гепатита B могут обладать различными биологическими свойствами. В последнее время все большое значение придаётся генотипу вируса в клинических аспектах течения вирусной инфекции, а также чувствительности к антивирусным препаратам. На сегодняшний день установлено, что инфекция, вызванная вирусом гепатита B генотипов В и С, коррелирует с повреждением печени; а инфекция, обусловленная вирусом гепатита B генотипа А, эффективно излечивается терапевтическими методами с использованием интерферона

Строение вирусной частицы[править | править код]

Вирион (вирус вне клетки хозяина) состоит из нуклеопротеида, капсида и суперкапсида. Капсид — икосаэдр размером 28 нм, внутри которого заключена ДНК вируса (нуклеопротеид). В состав капсида входит основной белок ядра (HBcAg — от «Hepatitis B core Antigen»). Суперкапсид представляет собой липидную мембрану, в которую встроены молекулы белка наружной оболочки — поверхностного антигена (HBsAg — от «Hepatitis B surface Antigen»). Диаметр вирусной частицы — 42 нм.

Строение генома[править | править код]

Геном вируса гепатита B представляет собой одну двуцепочечную кольцевую ДНК длиной около 3200 нуклеотидов (длина генома различна у разных изолятов). Одна из цепей («плюс-цепь») ДНК короче другой (её длина составляет 1700—2800 нуклеотидов). Вторая цепь тоже не является замкнутой и к её 5’-концу ковалентно присоединена молекула полимеразы (P).

В геноме вируса найдено 4 гена: S, С, Р, X, кодирующих соответственно HBsAg, HBcAg, полимеразу и белок-регулятор экспрессии генов. Кроме того, там есть регуляторные последовательности ДНК, ответственные за синтез белков и репликацию вируса. Гены частично перекрываются, что обусловливает малый размер генома.

Отличительной особенностью генома вируса гепатита В является его высокая информационная ёмкость (особенно на фоне того, что его ДНК является наименьшей по размеру среди всех известных ДНК-содержащих вирусов). Это достигается тем, что в молекуле ДНК, заключающей в себе геном данного вируса, имеется 6 перекрывающихся рамок считывания генов[2].

Репликация вируса[править | править код]

Несмотря на то, что вирус гепатита B является ДНК-содержащим вирусом, в его жизненном цикле имеется РНК-стадия. После проникновения вируса в клетку вирусная ДНК перемещается в клеточное ядро и транскрибируется с образованием полноразмерной прегеномной РНК трёх мРНК меньшей длины. Синтезированные РНК перемещаются в цитоплазму, где мРНК транслируются и прегеномная РНК вместе с полимеразой упаковывается в белковую оболочку. Полимераза вируса гепатита B способна осуществлять обратную транскрипцию, и на матрице прегеномной РНК синтезируется вирусная минус-цепь, а на её матрице — плюс-цепь.

Кроме того, геном вируса полностью или частично может интегрироваться в геном гепатоцита. При этом могут повреждаться гены гепатоцита, что приводит к раку печени.[источник не указан 3529 дней] По другим данным, вирус находится в клетке в эписомном состоянии, а онкогенным эффектом обладает белок Х — транскрипционный фактор, рекрутирующий транскрипционную машину клетки для синтеза РНК вируса[3]

Профилактика[править | править код]

Упомянутый выше поверхностный HBsAg-антиген, находящийся в наружной оболочке, применяют для производства высокоэффективной профилактической вакцины.

Примечания[править | править код]

Источник

Вирусный гепатит B встречается не очень часто, так как существует вакцина, которая предупреждает инфицирование вирусом-возбудителем недуга. Детей прививают сразу же после рождения, а в дальнейшем вакцинация происходит по достижению совершеннолетия.

Тем не менее, распространенность гепатита B высокая. Распознать данное заболевание достаточно просто. Нужно лишь пройти ПЦР-исследование (полимеразная цепная реакция). При помощи анализа можно выявить ДНК вируса гепатита B. Для постановки более точного диагноза производится количественное исследование.

Лечат ВРВ сугубо консервативно. Пациенту назначаются интерфероны, поливитаминные комплексы, гепатопротекторы, противовирусные ЛС. Рассмотрим подробнее патогенез болезни и выясним, в каких случаях нужно сдавать ПЦР-исследование, и как его правильно расшифровать.

Патогенез и особенности вирусного гепатита Б

Гепатит Б (сокращенно ВРВ) – вирусное заболевание, при котором наблюдается воспалительный процесс в клетках печени. Недуг может привести к увеличению печени и изменению ее структуры. При отсутствии своевременной терапии гепатит перестает в цирроз или жировой гепатоз.

Возбудитель ВРВ – ДНК-содержащий вирус из семейства гепаднавирусов (сокращенно называют вирус ГВ или HBV). Антиген к инфекционном агенту был открыт только в 1964 году. Отличительная особенность вируса состоит в том, что он чрезвычайно стойкий к химическим и физическим факторам.

Читайте также:  Днк гепатита в методом пцр

Так, инфекционный агент не погибает при резких перепадах температур, под воздействием заморозки, а также при длительном воздействии кислой среды. Более того, врачи утверждают, что HBV может сохраняться при комнатной температуре до нескольких недель. К примеру, инфекционный агент может сохраняться на бритве зараженного человека, в пятнах крови, на различных медицинских инструментах. По различным оценкам, ВРВ страдают порядка 300 тысяч людей.

Выделяют 4 пути передачи инфекционного агента:

  1. Половой. При незащищенном половом контакте происходит травматизации слизистых оболочек половых органов, вследствие чего вирусу в разы легче попасть в кровоток, а оттуда в воротную вену и печень. HBV при защищенном половом акте не передается. Кстати, инфицирование при поцелуях и объятьях считается невозможным.
  2. Вертикальный путь. Инфекционный агент может поникнуть через плаценту. Также возможно инфицирование при прохождении ребенка через родовые пути. А вот через грудное молоко заразиться практически нереально.
  3. Бытовой. Заразиться можно, если здоровый человек использует одни и те же средства личной гигиены с носителем вируса.
  4. Парентеральный, то есть через кровь. Так, HBV можно заразиться при посещении стоматологических клиник, студий тату, косметологических салонов, маникюрных, педикюрных, кабинетов пирсинга. Возможно инфицирование при переливании крови, при трансплантации органов, во время гемодиализа, при оперативных вмешательствах.

Гепатит Б не передается воздушно-капельным путем. А при контакте с биологическими жидкостями человека (спермой, слюной, секретом внутренних органов, менструальными и влагалищными выделениями) вероятность инфицирования сохраняется.

ПЦР-исследование на ДНК вируса

Подготовка к анализу

Выше уже отмечалось, что для постановки диагноза нужно сдать ПЦР гепатита B. Чтобы исследование было точным, пациенту нужно соблюсти ряд несложных правил. Первое и самое главное – сдавать анализ натощак. Только так можно получить точный результат. Пить воду в день исследования можно.

Также накануне исследования крайне не рекомендуется принимать алкогольные напитки. В идеале – воздерживаться от приема спиртного хотя бы за 3-5 дней до проведения забора крови. Известны случаи, когда вследствие употребления алкоголя человек получал ложноположительный или ложноотрицательный результат. Хотя на сегодняшний день это считается практически невозможным, так как ПЦР – высокоточный анализ.

Не помешает:

  • В день исследования не курить.
  • Накануне сдачи соблюдать диету.
  • По рекомендации врача прервать прием препаратов, которые в той или иной степени способны оказывать влияние на полученный результат.
  • Избегать физических нагрузок.

Если человек уже проходит противовирусную терапию, то прерывать прием ЛС накануне ПЦР не нужно. Цена комплексного ПЦР-исследования в частных лабораториях (Синево, Гемотест и пр.) стартует от 2000 рублей.

Качественный анализ

Обнаруживать ДНК ВРВ помогает качественный ПЦР-анализ. Он назначается не только при подозрении на гепатит Б. Проходить качественное исследование рекомендуется тем людям, которые проходят или закончили прохождение противовирусной терапии. ПЦР может назначаться людям, которые проживают с инфицированным человеком.

Цель качественного ПЦР – обнаружить ДНК вирусного агента. Расшифровка проводится очень просто. Качественный анализ дает либо положительный, либо отрицательный результат. В первом случае вирус обнаружен, во втором – нет.

Но есть один нюанс. Несмотря на то, что ПЦР достаточно точный анализ, получить ложноположительный или ложноотрицательный результат можно. По словам гепатологов, лучше сдать исследование два раза в разных лабораториях.

Количественный анализ

Количественный анализ на гепатит B проводится тоже в обязательном порядке при подозрении на наличие ВРВ в организме. Что такое количественное исследование и зачем оно нужно? Как понятно из названия, анализ помогает определить количество инфекционного агента в организме. При помощи исследования врач может оценить степень тяжести патологии.

Также количественный анализ нужно сдавать тем людям, которые уже проходят лечение. При помощи него можно определить эффективность терапевтических мероприятий, и по необходимости внести коррективы.

Единица измерения вируса – МЕ/мл. Иногда используется ДНК/мл (количество копий). Усредненное значение – 1 МЕ/мл = 5 копий/мл. Если результат анализа меньше 75 МЕ/мл, то ВРВ у пациента отсутствует.

Расшифровка количественного исследования следующая:

  1. До 2 * 105 копий/мл. Означает, что вирус ведет себя не очень активно. В таких случаях вылечить ВРВ относительно нетяжело.
  2. От 2 * 105 до 2 * 106 копий/мл. Означает, что активность вируса средняя. Инфекционный агент достаточно активен, и вероятность хронизации воспалительного процесса достаточно высокая.
  3. От 2 * 106 до 2 * 107. Виремия большая. Активность вируса очень высокая, воспалительный процесс протекает реактивно.

Дополнительные исследования при подозрении на гепатит Б

Помимо ПЦР, в обязательном порядке пациенту нужно сдать ИФА (иммуноферментный анализ). С его помощью можно обнаружить антитела к ВРВ. Если антитела есть, значит, с высокой долей вероятности вирусное заболевание у пациента присутствует. Рассмотрим основные антитела, единица их измерения – индекс.

Один из самых главных – HbsAb. Под этой аббревиатурой скрываются антитела к поверхностному белку вируса. При контакте иммунной системы с протеином ВРВ происходит выработка специфических антител, которые прикрепляются к вирусу и мешают ему проникнуть в клетки печени.

Еще есть анти-HBc (total) (HBcAb). Они представляют собой антитела к ядерному белку вируса гепатита Б. Но тут не все так просто. Наличие данных антител может свидетельствовать о том, что гепатит был в прошлом. То есть наличие этого маркера не говорит о том, что воспалительный процесс имеется именно сейчас.

Читайте также:  Гепатит в цена в иваново

Также могут обнаруживаться IgM анти-HBc (HBcAb IgM). Они формируются на начальных этапах развития недуга.

Если иммуноферментный анализ выявил, что у человека имеются IgM анти-НВс (НВсАb IgM) и анти-НВе (HBeAb), то это говорит о том, что воспалительный процесс протекает остро и заразность крови больного очень высокая. В норме данные антитела должны отсутствовать.

Чтобы оценить общую клиническую картину, помимо ПЦР и ИФА, пациенту могут быть назначены:

  • Общий анализ крови.
  • Биохимический анализ крови. Исследуется уровень печеночных ферментов (АСТ, АЛТ, щелочная фосфатаза, прямой и непрямой билирубин, ГГТ). При гепатите Б уровень ПФ повышается.
  • УЗИ печени. Воспалительный процесс приводит к тому, что орган становится отечным, несколько изменяется его структура, возможно наличие участков фиброза.
  • Биопсия печени. Предусматривает забор печеночных клеток и их дальнейшее гистологическое исследование. Обязательно используется в составе дифференциальной диагностики.

По необходимости может быть рекомендована сдача ПЦР-исследование на РНК вируса гепатита C, так как случаи одновременного инфицирования гепатитом Б и гепатитом Ц весьма нередки. Причем оба заболевания передаются парентерально.

Что делать при наличии вируса в организме?

Если качественный тест был положительным, и пациенту был поставлен диагноз «вирусный гепатит B», ему нужно пройти комплексное лечение. При составлении схемы терапевтических мероприятий учитываются результаты теста на антитела и результаты количественного ПЦР-исследования.

Уничтожить вирус и купировать воспалительный процесс помогают специализированные противовирусные медикаменты. Препаратами выбора являются . Чтобы укрепить сопротивляемость организма инфекционным агентам, назначаются интерфероны, в числе которых Интераль-П, Интрон А, Пегасис, Пегинтрон.

Кроме того:

  1. Назначаются гепатопротекторы. Они помогают стабилизировать липидный и белковый обмен, снизить активность печеночных трансаминаз, купировать воспалительный процесс в паренхиме печени. Также под воздействием гепатопротекторов происходит нормализация детоксикационной функции печени, увеличивается синтез желчи и стабилизируется ее пассаж. При гепатите Б препаратами выбора являются Урдокса, Урсофальк, Лив 52, Карсил Форте, Эссенциале Форте Н, Резалют Про.
  2. Корректируется рацион. Больному нужно отказаться от продуктов, перегружающих печень. Таковыми являются сладости, жирные блюда, полуфабрикаты, острые овощи, кислые фрукты, свежая выпечка.
  3. Показан отказ от алкогольных напитков, так как они усугубляют течение воспалительного процесса и плохо сочетаются с противовирусными препаратами.

ВРВ вылечить полностью возможно. Хронизация воспалительного процесса происходит лишь у 10-20% пациентов.

Прогноз и профилактика заболевания

Лучшая профилактика гепатита Б – своевременное вакцинирование. Оно делается сразу после рождения, а затем по достижению совершеннолетнего возраста. Сколько длится послепрививочный иммунитет, сказать сложно.

Первоначально считалось, что человек остается устойчивым к воздействию ВРВ в течение 5-7 лет после прививки. Но исследования, проведенные еще в 80-х годах XX века, опровергли это. Медики выяснили, что иммунитет может сохраняться и до 25 лет. Но медработникам и людям, чья работа предусматривает контакт с кровью и другими биологическими жидкостями, все равно рекомендуется вакцинироваться каждые 5 лет.

Прогноз при вирусном гепатите Б благоприятный. Хронизация воспалительного процесса происходит достаточно редко, особенно если человек обратился за помощью своевременно. Если же воспалительный процесс запущенный, то вероятность перехода патологии в хроническую форму достаточно высокая.

Несвоевременное лечение может привести к различным последствиям. Так, хронический ВРВ часто приводит к развитию фиброза, который со временем перестает в цирроз.

Также на фоне воспалительного процесса могут развиться рак печени, дискинезия желчевыводящих путей, жировой гепатоз, острый холецистит, холангит. Есть еще одна особенность. При ВРВ пациент может заразиться гепатитом D. Репликация последнего возможна только при наличии HBV.

Источник

[09-009]
HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

2890 руб.

Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.

Синонимы русские

Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.

Синонимы английские

Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Единицы измерения

МЕ/мл (международная единица на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.

Читайте также:  При гепатите с падает гемоглобин

Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рождённые от матерей с ВГВ.

Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после  перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.

Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.

Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке (5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови,  присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).

Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
  • Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
  • Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
  • Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
  • Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

  • При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
  • При остром и хроническом вирусном гепатите В.
  • При микст-гепатитах.
  • До и во время противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено

  • «Не обнаружено» – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл);
  • от 75 до 1,2*10^5 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, низкая виремия;
  • от 1,2*10^5 до 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, средняя виремия;
  • более 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, высокая виремия;
  • > 1*10^8 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.



Важные замечания

  • Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
  • Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.

Также рекомендуется

  • HBsAg
  • anti-HBc, IgM
  • anti-HBc, антитела
  • anti-HBe, антитела
  • anti-HBs, антитела
  • HBеAg
  • HBV, ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • anti-HDV, антитела
  • Anti-HCV, антитела, ИФА
  • Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
  • Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
  • Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
  • Фосфатаза щелочная общая
  • Альбумин в сыворотке
  • Билирубин общий
  • Холестерол общий
  • Тромбиновое время
  • Фибриноген

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог.

Литература

  1. Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of  Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.

Источник