Анализ гепатита с положительный а рнк не о

Анализ на РНК вируса гепатита С относится к лабораторным способам выявления инфекции, применяемый для выявления патологии и контроля лечения. Исследование делается с помощью ПЦР — полимеразно-цепной реакции. Это альтернативный способ обследования, что дает возможность не проводить биопсию печени, имеющую ряд противопоказаний и побочных эффектов.

Что показывает анализ?

Определение РНК нужен, чтобы узнать, есть ли в крови вирусные клетки. Содержимое ядра этого возбудителя имеет морфологические особенности строения, уникальное соединение нуклеотидов между собой, что выявляется ультра микроскопическим методом. Понятие «качественно» обозначает не высокий уровень исследования, а то, что результаты анализа не обозначаются в числовых показателях, а говорят лишь о наличии или отсутствии возбудителя гепатита в кровеносном русле.

В журнале «Теоретические и прикладные аспекты современной науки» есть сведения о модификации ПЦР с флуоресцентной детекцией.

Альтернативный метод для биопсии.

Эта методика за 10 лет развития постоянно усовершенствуется и дает более точные результаты. Следует отметить, что вирусы постоянно мутируют с появлением новых подвидов. Существует 6 видов различных по структуре генотипов гепатита С, что значительно усложняет интерпретацию результатов обследования. Чтобы выявить все патологические частицы, нужно уметь различать и распознать эти генотипы. Для этого используется множество реактивов и приспособлений, способных выявить мельчайшие вирусы на ранних этапах развития.

Вернуться к оглавлению

Показания

Качественный анализ ПЦР на гепатит В и С рекомендуется проводить в следующих случаях:

желтуха неясной этиологии;
контакт с больным человеком или носителем вируса;
цирроз;
прогрессирующий асцит;
хроническое течение заболевания;
подозрение на патологии печени у беременных;
мониторинг результативности лечения;
профилактическое обследование;
появление симптоматики гепатита;
печеночная недостаточность;
противопоказания к проведению биопсии.

Вернуться к оглавлению

Как проводится анализ при гепатите С?

Подготовка

На несколько дней рекомендовано отказаться от жирной пищи и алкоголя.

Прежде чем сдать анализ на вирус гепатита, специалисты клинической лаборатории рекомендуют выполнить правила, чтобы диагностика РНК была максимально приближена к действительности:

За неделю до обследования нужно отменить медикаменты, влияющие на печень или на вирусную нагрузку. Если это невозможно или анализ делается для выявления эффективности лечения, об этом нужно сообщить врача.
Время сдачи крови — 9—10 часов утра. Обязательное условие проведения обследования — забор материала должен проводится натощак, а последний прием еды осуществляться не ранее, чем через 10 часов.
За 3—4 дня до ПЦР на гепатит С, важно придерживаться диеты, исключающую тяжелую, жирную, жареную пищу, повышающую нагрузку на печень.
Не рекомендуется за сутки до обследования заниматься тяжелой физической работой.

Вернуться к оглавлению

Как проводится анализ?

Качественный ПЦР РНК проводится с использованием венозной крови. Процедура проводится только стерильными и одноразовыми приспособлениями. Запрещается контактировать с раной пациента, дабы предотвратить заражение. Исследуемый материал набирают в стерильную пробирку, поскольку аналитическая чувствительность анализа высокая и даже незначительные нарушения способны изменить результат обследования.

Для анализа проводят забор крови из вены.

Материал отправляется в лабораторию, где помещается в центрифугу. После лаборант, применяя специальные реагенты разрушающие и выделяющие РНК конкретного вируса, потом образец изучается под микроскопом. Чувствительность метода постоянно повышается, что дает возможность определить вирус по одной клетке. Вывод обследования можно получить через 2—3 суток.

Вернуться к оглавлению

Расшифровка результатов

Показатели нормы

Если генетический материал не обнаружено — фиксируется «отрицательный» показатель. Эти сведения говорят о том, что в материале пациента возбудителя нет. Но есть опасность пропустить заболевание вследствие незначительной вирусной нагрузки на ранних этапах развития болезни. Качественный анализ на гепатит имеет нижнюю границу, выше которой реагирует на наличие РНК возбудителя, но результат выдается словом — «положительный» или «отрицательный» при чувствительности тест-системы от 50 МЕ/мл. Если количества РНК вируса в крови будет меньше, результат будет ложноотрицательным. В лаборатории «Инвитро» используются техники с чувствительностью от 15 МЕ/мл, что улучшает качество методики. Если количество микроорганизмов ниже этих показателей, норма на результате не будет отвечать действительности.

Если есть подозрения на первые стадии гепатита нужно еще раз провести обследование или дополнить анализ количественным ПЦР.

Вернуться к оглавлению

Положительный показатель

Присутствие вируса дает положительный результат анализа.

Расшифровка ВГС отклонений от нормы означает, что в материале присутствует активный вирус. Положительный качественный анализ означает инфицирование пациента и относит его к носителям патогенной инфекции или больному активной формой болезни. У пациентов, проходящих терапию против гепатита С, этот тест не укажет на улучшение состояния. Он способен показать лишь полное выздоровление, когда РНК вируса полностью исчезнет из исследуемого материала. Поэтому нужно серьезно подходить к описанию результатов и избегать гипердиагностики. Всегда можно повторить тест и дополнить его другими исследованиями.

Вернуться к оглавлению

Что делать?

Положительный качественный ПЦР при гепатите С требует немедленного дополнительного исследования для постановки точного диагноза с последующим лечением. Для того чтобы удостовериться, нужно провести количественный ПЦР для подсчета вирусных частиц в определенном объеме материала. Это поможет узнать концентрацию патологического агента, от чего зависит диагностический вывод и дальнейшая тактика.

Лабораторную диагностику можно дополнить инструментальными методиками. Проведение биопсии является болезненной процедурой, имеющей ряд побочных эффектов. Но для подтверждения или опровержения диагноза гепатита С рекомендуется применение этого способа. Он подразумевает выделение вирусов непосредственно из печеночной ткани. Такое диагностическое мероприятие имеет 100% правильности результата.

Источник: EtoPechen.ru

Анализ на РНК вируса гепатита С

Молекулярное исследование показывает, есть НСV в крови или нет. Когда на бланке качественного анализа указан результат «гепатита С не обнаружено», больной не опасен для окружающих. Необходимо провести повторное тестирование через две недели, чтобы удостовериться в отсутствие РНК. Если качественный результат положительный (надпись «обнаружено»), проводится количественное тестирование.

Качественный анализ

Метод генетического исследования выявляет вирус в минимальной концентрации. Параметры ограничены чувствительностью прибора. Она колеблется в диапазоне от 10 до 500 МЕ/мл. Это референсные значения, ниже которых на бланке анализа будет написано «не обнаружено».

При выборе лаборатории важно спрашивать, каким оборудованием будет производиться анализ методом полимеразной цепной реакции. Выявить HCV при низкой виремии (концентрации возбудителя в пробах) можно на приборах чувствительности до 50 МЕ/мл.

Возможные результаты:

«обнаружено»;
«не обнаружено».

Когда в крови возбудитель присутствует в небольшом количестве, болезнь будет развиваться. Если основные биохимические показатели ниже референсных значений, есть подозрение на заражение, при результате теста «не обнаружено» лучше повторить качественный анализ через какое-то время.

Возможен результат «обнаружено». Только при хорошей иммунной защите организм способен самостоятельно справиться с возбудителем. Гепатит по симптоматике схож с другими болезнями, если выявить вирус на ранних стадиях болезни, снижается риск аутоиммунных осложнений.

Количественный анализ

Недостаточно обнаружить HCV, для определения схемы приема препаратов нужно знать концентрацию вируса в крови. По результатам количественного анализа ПЦР судят о вирусной нагрузке.

Определение количества РНК (удельного содержания возбудителя в одном мл крови) помогает установить стадию развития болезни. Вирус размножается постепенно. Нельзя путать стадию развития гепатита со степенью тяжести болезни. Люди, имеющие одинаковые результаты, анализа могут чувствовать себя по-разному:

при слабом иммунитете гепатит маскируется под ОРВИ;
при сильной защите возможная острая форма болезни, когда глобулины массово атакуют НСV;
возможно появление типичных для печеночных патологий симптомов, характерных для заболевания средней степени тяжести.

Расшифровка количественного анализа – дело специалистов. Международная система стандартов допускает оформление результатов в двух измерениях:

МЕ/мл;
копии/мл.

Пересчет результата производится по формуле:1 МЕ/мл = 4 копии/мл. У медиков приняты следующие количественные оценки:

ниже 180 МЕ/мл (720* к/мл) – малоопасная концентрация;
до 800 000 МЕ/мл – низкая концентрация;
свыше 800 000 МЕ/мл – высокая вирусная нагрузка;
свыше 25 000 000 МЕ/мл – сверхвысокая (критическая )концентрация НСV в крови.

Анализ на антитела (ИФА)

Обнаружение специфических белков, убивающих НСV, свидетельствует об иммунном ответе организма. ИФА определяет антитела, не только к гепатиту. Этим методом диагностируются другие виды патологий, инфекционных заболеваний.

Исследование проводится при подозрении на заражение, оно подтверждает или ставит под сомнение отрицательный результат ПЦР. Антитела – своеобразная иммунная память, они остаются у здорового человека до трех лет, реже – на протяжении всей жизни (устойчивая защита к вирусу).

Если у пациента антител нет, это говорит о невосприимчивости организма к возбудителю, он не распознается как чужеродный. Если проверяют пациента, не болевшего гепатитом, возможен результат «не обнаружено» на РНК и антитела.

Что значит, если РНК вируса не обнаружено?

Такой результат возможен, если:

человек здоров (возможен при проведении профосмотров, обязательном тестирование при поступлении больных на лечение в стационар);
концентрация НСV ничтожна, ниже порога чувствительности;
со времени заражения прошло менее 5 суток (вирус не выявляется сразу после попадания в кровяное русло);
произошла санация крови после лечения гепатита С, организм выработал мощную антивирусную защиту, подавил размножение возбудителя.

Для пациентов, у которых было инфицирование, кровь на стерильность проверяется на протяжении трех лет через каждые полгода. Если отрицательный результат подтверждается, человек признается полностью излечившимся.

Что значит, если РНК гепатита С не обнаружено, а антитела есть?

Присутствие антител говорит о хорошем иммунитете. Часть людей (до 10%) способны самостоятельно излечиваться. Организм способен подавить вирус, без препаратов. Часто НСV у таких людей нет, а ИФА-тест показывает присутствие антител.

Другой вариант подобных результатов – выздоровление пациента. Для эффективного иммунного ответа порой требуются годы. Хроническая форма с периодами ремиссий способна обостриться. Тяжело переносят гепатит С люди с острой формой заболевания, когда глобулины поражают гепатоциты, на которых остались следы пребывания возбудителя.

Наличие антител при отсутствии РНК – самый благоприятный результат комплексного обследования.

Когда нужно повторить анализы?

При ложноположительных и ложноотрицательных оценках повторные пробы назначаются сразу. Когда обнаруживают РНК и антитела одновременно, повторные тесты нужны для определения динамики развития болезни.

Традиционный курс лечения после выявления гепатита С предусматривает обязательное тестирование сначала через пару недель, затем на 4-1, 12-й, 24-й неделе. Больные не снимаются с учета до трех лет. Через каждые полгода проводится обследование.

При большой вирусной нагрузке частотность повторных проб меняется, врач корректирует тактику лечения. Подвид 1 генотипа НСV не сразу поддается лечению, подвиды 2,3 не очень устойчивы, быстро уничтожаются. Противовирусные средства принимаются разными курсами.

Что делать, если РНК обнаружена?

Пациент признается больным, если в анализах значение «РНК HCV обнаружена». Врач назначает схему лечения, диету. Вирусоноситель возлагает добровольные обязательства по соблюдению правил гигиена, снижающих риск передачи возбудителя.

Основные пути передачи – гематогенный и половой. Возможна вертикальная передача инфекции через плацентарный барьер или во время родов, планированную беременность лучше отложить до выздоровления.

Беременные одновременно посещают гинеколога и инфекциониста, чтобы снизить риск вертикальной передачи возбудителя. Препараты нового поколения без побочных действий, их назначают детям младшего возраста, беременным. Они эффективно борются с НСV, бояться гепатита С не нужно.

( 1 оценка, среднее 5 из 5 )

Источник

«Выявление генов вируса гепатита С (HVC) в крови пациента является вторым этапом лабораторной диагностики этой инфекционной патологии. Чтобы обнаружить возбудителя, который не имеет клеточной мембраны и, соответственно, поверхностных антигенов, используют метод полимеразной цепной реакции. С помощью этого метода определяют непосредственно молекулу, в которой закодирована вся его генетическая информация — РНК.

Содержание
Что это значит?
Анализ на РНК вируса гепатита С
РНК вируса гепатита С: метод ПЦР
РНК гепатита С: качественный анализ
РНК гепатита С: количественный анализ
Гепатит С: анализы и расшифровка

РНК — Рибонуклеиновая кислота, наряду с ДНК входит в состав клеток всех живых организмов. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет способность к ее мутациям.

Исследование на наличие генома HVC назначают обычно после того, как проводят общий, биохимический анализ крови и получают положительный ответ на антитела (anti-HVC).

Что это значит?

Исследование на антитела к HVC является скрининговым, то есть с его помощью можно обследовать большие контингенты населения (медиков, беременных, пациентов стационаров, доноров, инъекционных наркоманов, ВИЧ-инфицированных). Отрицательный результат лабораторного анализа anti-HVC говорит о том, что в крови обследуемого не обнаружено иммунной реакции на вирус. Отрицательный результат может быть получен в таких случаях:

Если человек никогда не заражался гепатитом С.

Если чувствительность лабораторной тест-системы оказалась ниже, чем концентрация anti-HVC.

Если инфицирование произошло менее 2 месяцев назад и anti-HVC в крови еще недостаточно для определения. При ложноотрицательном ответе по причине человеческого фактора.

Если же получен результат, что антитела к HVC у больного обнаружены, это значит, что вирус гепатита С находился в организме обследуемого на момент проведения исследования или был в крови некоторое время назад. При положительном результате на anti-HVC возникает необходимость проведения дополнительных лабораторных исследований, которые обнаружат генетический материал самого возбудителя, определят концентрацию его генов (вирусную нагрузку, виремию) и установят генотип.

Анализ на РНК вируса гепатита С

Геном HVC в лабораторных условиях можно обнаружить с помощью нескольких исследований:

разветвленной ДНК (р-ДНК);
транскрипционной амплификации (ТМА);
полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Метод р-ДНК — недорогой и простой способ обнаружения вирусного генома у большого количества обследуемых людей. Его главным недостатком является низкая чувствительность: выявляет HVC только при его концентрации свыше 500 МЕ/мл.

Метод транскрипционной амплификации обнаруживает в сыворотке крови нуклеиновые кислоты вируса. Анализ имеет высокую чувствительность (5-10 МЕ/мл), но он еще недостаточно внедрен в повсеместную лабораторную практику.

Метод ПЦР в России является самым распространенным и доступным лабораторным обследованием с высокой чувствительностью (от 50-60 МЕ/мл).

Исследование ПЦР выполняется в любой клинической лаборатории, имеющей соответствующую аккредитацию. Очень важным нюансом этого метода диагностики, который влияет на результат анализа, является чувствительность используемой в лаборатории тест-системы. Например, чувствительность диагностикума 60 МЕ/мл, как в лабораториях «Инвитро», позволяет обнаруживать вирусную РНК спустя 3 месяца после заражения. При низкой чувствительности тест-системы гены возбудителя могут не обнаруживаться даже спустя 4 месяца после инфицирования.

РНК вируса гепатита С: метод ПЦР

Метод ПЦР имеет множество преимуществ перед другими лабораторными исследованиями для обнаружения генов HVC:

высокая чувствительность. Метод позволяет определять генетический материал возбудителя даже при его минимальной концентрации в образце;
большая специфичность. Выявляет гены вируса определенного генотипа среди множества ДНК и РНК других возбудителей, что позволяет проводить генотипирование возбудителя;
быстрота проведения. Отсутствие длительного процесса культивирования возбудителя сокращает время получения результата до нескольких часов; универсальность анализа.

Универсальная процедура проведения исследования позволяет одновременно использовать один образец крови человека для обнаружения генетического материала разных возбудителей. Эти преимущества позволяют считать ПЦР «золотым стандартом» лабораторной диагностики вирусного гепатита С вместе с иммуноферментным анализом на anti-HVC.

ПЦР — это исследование, используемое для определения генов HVC в крови обследуемого человека. Исследование состоит из нескольких этапов:

Отбора образца биоматериала.
Многократного увеличения концентрации копий РНК в отобранном образце.
Обнаружения генетического материала с помощью специальных тест-систем.

После забора венозной крови у пациента проводят искусственное инициирование процесса множественного реплицирования (амплификации, копирования) генов HVC.

Для этого определенным способом несколько раз изменяют температуру внутри пробирки с биоматериалом. Когда количество копий РНК в пробирке достигает необходимого значения, проводят обнаружение возбудителя с помощью специальных тест-диагностикумов.

ПЦР-диагностика бывает

качественной (обнаруживает присутствие вируса),
количественной (определяет концентрацию вирусных генов в единице объема)
генотипической (устанавливает генотип возбудителя).

РНК гепатита С: качественный анализ

Задача качественного ПЦР — определение наличия HVC в представленном биоматериале. Это исследование проводится обычно для скрининговой диагностики заболевания или выявления носительства. Назначают его после того, как выявят anti-HVC методом ИФА.

Чтобы поставить диагноз гепатита С, достаточно обнаружить генетический материал HCV качественно, то есть без подсчета его концентрации в объеме крови. Результатом качественного ПЦР может быть: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено».

syringe needle with droplet of blood in front of a finger and on blue bacjground

Точность метода соответствует 95%. При этом точность самих тест-диагностикумов достигает 100%, а 5% — это человеческий фактор, который всегда присутствует в лабораторных исследованиях. Чтобы избежать ложноотрицательного анализа, особенно у людей с низкой виремией, необходима высокая чувствительность применяемой в исследовании диагностической системы. Чувствительность тест-системы должна быть не меньшей, чем 60 МЕ/мл.

РНК гепатита С: количественный анализ

Количественный анализ назначают тогда, когда нужно знать уровень виремии в организме человека. Показаниями для проведения этого исследования являются:

положительный результат качественного ПЦР при условии обнаружения антител к вирусу;
установление стадии патологии;
определение вирусной нагрузки при гепатитах;
выбор комбинации противовирусных препаратов;
мониторинг вирулогического ответа на проводимую противовирусную терапию;
оценка вероятности перехода острого гепатита С в хронический.

Результат анализа выражается в МЕ/мл (международных единицах в 1 мл сыворотки) или в копиях/мл (количестве копий генов вируса в 1 мл сыворотки). Количественный ПЦР не имеет нормы: в норме ген HVC в крови человека обнаруживаться не должен. Полученные результаты обследования сравнивают с референсными значениями, установленными для той или иной степени вирусной нагрузки.

Так, показатели (в МЕ/мл):

ниже 4×10*5 считаются низкой виремией;
от 4×10*5 до 8×10*5 — средней;
свыше 8×10*5 — высокой.

Чем больше копий вирусной РНК в крови, тем агрессивнее протекает заболевание и больше риск передачи вируса окружающим. Но уровень вирусной нагрузки — не единственный показатель, влияющий на тяжесть течения патологии и дальнейший прогноз для пациента: важен также генотип возбудителя.

Установление генотипа необходимо для назначения правильной схемы лечения. От него также зависит прогноз для здоровья и жизни пациента. Например, вирус 3 генотипа чаще приводит к фиброзу или циррозу печени, в сравнении с пациентами носителями 1 генотипа.

Гепатит С: анализы и расшифровка

РНК Диагноз гепатита С невозможно поставить только по результатам только качественного и/или количественного анализа ПЦР: определения HVC и уровня вирусной нагрузки недостаточно для назначения адекватной противовирусной терапии. Потенциального больного нужно обследовать комплексно (клинически, лабораторно, инструментально), чтобы иметь объективную картину патологии. Правильно назначить комплекс обследований для установления диагноза гепатита С, а затем грамотно расшифровать полученные результаты может только врач.

Источник: Sofosbuvir-Daclatasvir.ru