Анализ крови на антитела вирусного гепатита с

Метод определения
Хемилюминесцентный иммуноанализ

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Показатель, характеризующий наличие антител (независимо от класса М и G) к вирусу гепатита C.

Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 3-х рабочих дней.

Антитела класса М начинают вырабатываться через 4 — 6 недель после инфицирования, их концентрация быстро достигает максимума. По прошествии 5 — 6 месяцев уровень IgM падает и повышается вновь во время следующей реактивации инфекции. Антитела класса G появляются с 11 — 12 недели после инфицирования, достигают пика концентрации к 5 — 6 месяцу и сохраняются в крови на более-менее постоянном уровне в течение всего периода болезни и реконвалесценции. Таким образом, суммарный уровень антител (total) определяется с 4 — 5 недели после инфицирования и далее.

Особенности инфекции. Гепатит С — вирусное заболевание, характеризующееся поражением печени и аутоиммунными нарушениями, часто имеющее первично-хроническое и латентное течение. Протекает в желтушной (5%) или безжелтушной (95%) формах. Вирус гепатита С (ВГC) относится к флавивирусам, достаточно устойчив во внешней среде. Три структурных белка вируса имеют сходные антигенные свойства, обусловливая выработку anti-HCV-core. В настоящее время выделено 6 генотипов вируса. Высокая степень генетической изменчивости HCV способствует «ускользанию» вируса из-под иммунного ответа. С этим связаны трудности в создании вакцины и лабораторной диагностике (серонегативный гепатит С), а также частое первично-хроническое течение заболевания. Гепатит С передается с кровью и биологическими жидкостями парентеральным, половым и трансплацентарным путями. Группу повышенного риска составляют лица, практикующие внутривенную наркоманию, беспорядочные половые связи, а также медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные. Проникая в организм, HCV попадает в макрофаги крови и гепатоциты печени, где происходит его репликация. Повреждение печени происходит в основном за счет иммунного лизиса, также вирус оказывает прямое цитопатическое действие. Сходство антигена вируса с антигенами системы гистосовместимости человека обусловливает возникновение аутоиммунных («системных») реакций. В программе системных проявлений HCV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, синдром Шегрена, идеопатическая тромбоцитопеническая пурпура, гломерулонефрит, ревматоидный артрит и др. По сравнению с другими вирусными гепатитами, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину, чаще переходит в хронические формы. В 20 — 50% случаев хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и в 1,25 — 2,50% — к развитию гепато-целлюлярной карциномы. С высокой частотой возникают аутоиммунные осложнения. Инкубационный период — 5 — 20 дней. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезенки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В трети случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Холестаз возникает крайне редко (5% случаев). Лабораторные показатели отражают цитолиз. При высоком уровне трансаминаз (более 5 норм) и признаках печеночно-клеточной недостаточности следует заподозрить микст-инфекцию: HCV+HBV.

При анонимном обследовании, заявке и полученному от клиента образцу биоматериала присваивается номер, известный только пациенту, и медперсоналу, оформлявшему заказ. ! Результаты исследований, выполненных анонимно, не могут быть представлены для госпитализации, профессиональных осмотров и не подлежат регистрации в ОРУИБ.

Источник

Фото 1 Гепатит С — один из наиболее опасных диагнозов, с которым может столкнуться человек. Это серьезное воспалительное заболевание печени.

Заражение всегда происходит через кровь, и лишь в 20% случаев острого течения заболевания его возможно вылечить. В остальных 80% гепатит С переходит в хроническую форму и нередко приводит к летальному исходу. Основным методом диагностики является определение наличие антител к заболеванию.

Что означает, если тела обнаружены?

Когда в организм человека попадает вирус, долгое время он не дает о себе знать. В этом заключается сложность диагностики и невозможность выявить заболевание до того, как человек успел заразить кого-либо из окружающих. Для гепатита С характерен долгий инкубационный период, иными словами — до первой симптоматики может пройти продолжительное время.

Во время проникновения любого инородного объекта в организм человека, будь то вирус, инфекция, другой болезнетворный организм, иммунная система сразу же его распознает и направляет все свои силы на борьбу с патогенным объектом. Это всегда очень мелкие, микроскопические частицы, которые человек не в состоянии увидеть невооруженным взглядом или почувствовать их проникновение.

Когда иммунная система обнаруживает чужеродный объект, она посылает сигналы о необходимости выработки иммуноглобулинов. Это специфические защитные вещества, которые связываются с патогеном, чтобы его уничтожить. Если речь идет, например, о банальном ОРЗ, иммунитету либо хватает сил справиться с вирусом, либо сразу же появляются симптомы — кашель, насморк, повышение температуры, слабость, и тогда человек обращается к врачу и начинает помогать иммунитету уничтожать болезнетворные частички путем приема противовирусных препаратов или антибиотиков.

При гепатите С иммунитету не хватает сил справиться с вирусом, но и симптоматика не появляется сразу. Пока вирус находится в организме, белковые соединения крови, выполняющие защитную функцию, — иммуноглобулины — продолжают образовываться.

Диагностика осуществляется обычно таким способом: небольшое количество крови пациента смешивают с чистыми антигенами (вирусами). Далее наблюдают за реакцией: если в крови присутствуют антитела к вирусу, то они свяжутся с антигенами, образуя прочный комплекс “антитело-антиген”. Соответственно, врач делает вывод о присутствии в организме гепатита С.

ВНИМАНИЕ! Наличие в крови антител к гепатиту С не является однозначным поводом к постановке диагноза.

В некоторых случаях возможен ложноположительный результат, поэтому обнаружение антител к гепатиту С — это не подтверждение того, что человек заражен. При таком результате требуется пройти еще несколько диагностических процедур.

Классификация

Существует несколько типов антител к гепатиту С, которые могут быть обнаружены при диагностике. Что они означают и в чем их отличия?

Иммуноглобулины G (анти-HCV IgB) встречаются чаще всего и в самом большом количестве. Антитела этого типа обнаруживаются на начальных этапах заражения, при вялотекущем течении болезни либо при инфицировании в прошлом. При наличии иммуноглобулинов к гепатиту С требуется дополнительное исследование ПЦР.
Антитела к ядерным структурам (анти-HCVcoreIgM) патогенного объекта. Маркеры этого типа обнаруживаются сразу же после заражения или в моменты острого протекания заболевания: при снижении иммунитета, при обострении хронической формы. Во время ремиссии антитела практически никогда не встречаются.
Антитела к структурным белковым соединениям возбудителя (анти-HCV total). Этот показатель — общее количество иммуноглобулинов G и М — очень важен в определении стадии заболевания и позволяет сделать вывод уже спустя 1-1,5 месяца после проникновения возбудителя в организм. Положительный маркер позволяет говорить о перенесенном заболевании или ее хроническом характере, потому как антитела сохраняются на всю жизнь.
Антитела к неструктурным белкам возбудителя (анти-HCVNS). Этот маркер указывает на наличие одного или сразу нескольких антител из трех: NS3, NS4, NS5. NS3 — маркер, который обнаруживается в самом начале заболевания и выступает в роли индикатора инфицирования. Если количество антител продолжает оставаться большим на протяжении долгого времени, можно сделать вывод о приобретении хронического характера заболевания.Другие же два вида маркеров характерны для поздней стадии гепатита. NS4 отражает степень поражения органа, а NS5 — показатель перехода гепатита в хроническую форму. Как только их количество начинается снижается, можно прогнозировать ремиссию.

Существует еще один маркер — HCV-RNA, который можно выявить только с применением высокочувствительных тестов. Суть исследования заключается в поиске генетического кода возбудителя в крови человека. Достоинство этого метода диагностики в возможности выявить заболевание еще на доклинической фазе, когда антитела отсутствуют.

Время появления

Разные виды антител появляются спустя разное время после попадания в организм возбудителя. Благодаря этим особенностям можно выявить заболевание на начальных этапах, определить стадию гепатита, форму (острую или хроническую), а также уровень активности вируса.

Раньше всего можно обнаружить иммуноглобулины М: уже в первые 6 недель после попадания вируса в организм. Как только их число начинает снижаться, можно говорить об окончании острой фазы и переходе гепатита в хроническую форму.
Антитела к суммарным иммуноглобулинам могут быть обнаружены на втором месяце инфицирования
Спустя 3 месяца после заражения обнаруживаются иммуноглобулины G. Наличие антител этого типа в крови говорит о переходе гепатита в хроническую фазу.
Маркеры к неструктурным белкам выявляются в разное время: NS3 обычно обнаруживается в первые 2-3 месяца после заражения, а NS4 и NS5 — на более поздних стадиях заболевания.

Способы определения

Фото В настоящее время для диагностики гепатитов применяются две группы методов:

Серологический метод, или иммуноферментный анализ (ИФА).
Молекулярно-биологический.

Каждый из этих методов может применяться и для скрининга, и для подтверждения диагноза, и рассматриваться в рамках пролонгированного мониторинга пациента, вылечившегося от гепатита С.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Данный метод эффективен на ранних стадиях заболевания, когда никаких внешних признаков гепатита не обнаружено. Для исследования требуется антиген — вирус гепатита С — и кровь пациента. На лабораторном стекле антиген и биологический материал смешиваются, после чего специалист изучает раствор под микроскопом с целью выявления антител к HCV.

СПРАВКА! ИФА позволяет не только выявить наличие антител, но и по типу обнаруженных маркеров сделать вывод о стадии и форме протекания гепатита С.

По результатам одного только ИФА нельзя ставить диагноз. Обычно обнаружение маркеров является сигналом для дополнительной диагностики при помощи метода ПЦР или повторного ИФА.

По словам специалистов, точность данного метода достигает 95%. Однако с помощью иммуноферментного анализа невозможно выявить наличие самого вируса, а присутствие в крови антител может свидетельствовать о уже перенесенном гепатите С или другом заболевании (например, аутоиммунном). И если говорить о вероятности обнаружения антител в 95%, то у 40% из них сам вирус может быть не обнаружен. Поэтому ИФА недостаточно, чтобы диагностировать гепатит С, и в любом случае требуется дополнительное исследование — с помощью метода RIBA.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Наиболее информативным и точным методом диагностики, по которому уже можно судить о наличии гепатита С, является ПЦР. Отличие этого метода в том, что с его помощью обнаруживают не антитела к вирусу, а сам вирус, точнее — его РНК.

Так, если при помощи ИФА можно только сказать, что инфицирование есть или имело место быть, но ПЦР позволяет определить активность вируса, прогнозировать исход заболевания.<

Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью метода ПЦР возможно уже через 1-2 недели после заражения, поэтому данный метод считается более достоверным.

Несмотря на высокую точность метода, его тоже нельзя считать основанием для постановки диагноза.

ВНИМАНИЕ! По рекомендациям ВОЗ постановка диагноза возможна только в том случае, если вирус в крови человека был обнаружен трижды.

В остальном метод ПЦР применяется с разными целями:

В качестве подтверждения или опровержения результатов ИФА;
Для отделения гепатита С от других форм гепатита;
Для выявления острой стадии гепатита С;
Для разделения инфицирования новорожденных от серопозитивных по вирусу гепатита С матерей;
Для отслеживания эффективности терапии.

Расшифровка результатов

Фото 4 Если говорить об иммуноферментном анализе, там может быть только два результата: положительный или отрицательный. В первом случае говорят, что антитела к вирусу гепатита С обнаружены, во втором — нет. Ни один, ни другой результат не могут считаться истинными, пока не будет проведено несколько анализов либо исследований разными методами.

В исключительных случаях требуется количественное обозначение результатов: тогда наличие антител выражается в цифрах или нескольких знаках “+” или “–”.

Метод ПЦР также может выражать количественные или качественные показатели. Количественный анализ позволяет сделать вывод об интенсивности развития заболевания, эффективности лечения или, напротив, развитии резистентности к противовирусным препаратам.

СПРАВКА! Количественное определение РНК вируса позволяет сделать прогноз об эффективности лечения интерфероном-альфа.

Так, в зависимости от количества вирусных частиц, выделяют низкий (от 102 до 104), средний (от 105 до 107) и высокий (свыше 108) уровень концентрации в организме.

Качественное обозначение результатов ПЦР-исследование также выражается в знаках “+” и “–” и означает, что вирус либо присутствует, либо отсутствует.

Почему антитела в крови есть, а вируса нет?

Ситуация, при которой антитела обнаружены, а вируса гепатита С нет, называется ложноположительный результат. Это основная причина, которая не позволяет ставить диагноз на основе только данных ИФА. Ложноположительный результат нередко встречается у беременных, при аутоиммунных заболеваниях, при проведении анти-ВИЧ-терапии и других заболеваниях.

Еще одно возможное объяснение — это уже вылеченное заболевание. То есть, по сути, гепатит С в течение некоторого времени протекал бессимптомно или был принят за другое заболевание (иногда — обычное ОРЗ), но иммунитет сам смог побороть вирус гепатита С. Наличие антител G в крови говорит о том, что иммунитет уже сталкивался с вирусом, но если результаты ПЦР-теста отрицательные, беспокоиться не о чем.

При обнаружении специфических антител в крови человека необходимо сдавать повторный анализ через 2-3 недели. После этого может потребоваться проведение иных клинических, инструментальных, серологических и биохимических исследований.

Полезное видео

Также рекомендуем посмотреть видео, в котором рассказывается о диагностике гепатита С:

Заключение

Анализ на выявление антител к гепатиту С — показательный, но не ключевой метод диагностики. Нередко положительный результат ИФА шокирует беременных женщин или тех, у кого никогда не было подозрения на гепатит С. На основании одного только ИФА или ПЦР нельзя ставить диагноз: требуются дополнительные методы исследования, в том числе — биопсия и УЗИ печени, повторные серологические или биохимические анализы, которые уже могут стать поводом для диагностирования гепатита С. В настоящее время наиболее точным и информативным считается метод ПЦР.

Источник

Гепатит С — заболевание, вызываемое РНК-содержащим вирусом. Вирус может передаваться через кровь, через нестерильные медицинские инструменты, при трансплантации органов и тканей, при половом контакте, от матери к ребенку во время беременности и родов. Он размножается в клетках печени и вызывает развитие острого или хронического гепатита. Вирус гепатита С имеет несколько генотипов, вследствие частых мутаций он устойчив к воздействию механизмов иммунной защиты человека.

Вирусный гепатит С чаще всего протекает бессимптомно. Только в 15% случаев острого заболевания наблюдают тошноту, признаки интоксикации, отсутствие аппетита, желтуха бывает редко. Меньшая часть пациентов переносит гепатит С как острое заболевание и полностью выздоравливает, у большей части инфицированных развивается хронический гепатит С. Длительно текущее хроническое заболевание может привести к циррозу или раку печени.

На старте заболевания начинают образовываться антитела к компонентам вируса, сначала иммуноглобулины М, позже иммуноглобулины G. Специфические антитела к вирусу гепатита С могут быть обнаружены в крови через 3–8 недель после попадания вируса в организм, однако в некоторых случаях они могут отсутствовать в течение нескольких месяцев. В этом случае инфицирование можно подтвердить исследованием крови на РНК вируса гепатита С. После перенесенной инфекции у выздоровевших пациентов специфические антитела сохраняются в течение многих лет с постепенно снижающейся концентрацией и могут обнаруживаться в низком количестве на протяжении всей жизни. Антитела к гепатиту С не защищают от повторного заражения при новой встрече с вирусом.

В группу риска по гепатиту С входят врачи и медсестры, люди, пользующиеся медицинскими и косметическими услугами, наркозависимые, пациенты, которым проводилось переливание крови или пересадка органов, дети, рожденные зараженными матерями-носителями вируса гепатита С.

Анализ на антитела к вирусу гепатита С (HCV), суммарные, позволяет выявить специфические иммуноглобулины, наличие которых говорит о возможной инфекции или ранее перенесенном заболевании. Тест является скрининговым, сдают его обязательно при госпитализации, перед плановыми операциями и во время беременности.

В каких случаях обычно назначают исследование

при обследовании пациентов, готовящихся к плановой госпитализации или операции;
при профосмотрах и диспансеризациях;
при подозрении на контакт с инфицированной кровью или нестерильными медицинскими инструментами;
при появлении симптомов поражения печени;
при обследовании беременных.

Что именно определяют в процессе анализа

Выявляют наличие специфических суммарных антител к вирусу гепатита С методом ИХЛА — модификации иммуноферментного анализа.

Что означают результаты теста

Результат «Не обнаружено» — значит, что в сыворотке крови пациента нет специфических антител к гепатиту С. Это может быть, если пациент здоров и никогда не встречался с вирусом гепатита С. Отсутствие антител возможно в течение короткого периода в начале заболевания, когда вирус попал в организм, а иммунная система еще не выработала антитела к вирусу гепатита С (так называемый период «серологического окна»).

Результат «Обнаружено» — значит, что антитела к вирусу в крови выявлены. Положительный результат выдают всегда с результатами подтверждающего теста. В подтверждающем тесте определяют антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С.

Результат исследования (пример):

Антитела к вирусу гепатита С, сумм	ОБНАРУЖЕНО
Антитела к гепатиту С, подтверждающий тест
Core (антитела к структурным белкам вируса гепатита С)	15.26
NS3 (антитела к неструктурному белку NS3 вируса гепатита С)	0.65
NS4 (антитела к неструктурному белку NS4 вируса гепатита С)	0.02
NS5 (антитела к неструктурному белку NS5 вируса гепатита С)	0/02

Антитела могут быть выявлены у пациентов в нескольких случаях:

пациент болен в настоящее время острым или хроническим гепатитом С;
пациент когда-то перенес гепатит С как острое заболевание и теперь здоров, антитела остались как иммунологическая память о контакте с вирусом;
у пациента редкий случай неспецифической реакции сыворотки крови с используемой тест-системой.

Выявление антител к вирусу гепатита С не означает наличия заболевания и требует дополнительного обследования пациента. В случае положительного ответа необходима консультация лечащего врача или врача-инфекциониста и назначение дополнительных тестов. Может быть назначено ПЦР-исследование на HCV (выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента), биохимические маркеры — АЛТ, АСТ, ГГТ, щелочная фосфатаза, билирубин, общий анализ крови с лейкоцитарной формулой, коагулограмма.

Сроки выполнения теста

Результат исследования «Не обнаружено» можно получить уже на следующий день после сдачи анализа. В случае необходимости выполнения подтверждающего теста результат может быть задержан на 1–2 дня.

Подготовка к анализу

Кровь можно сдавать не ранее чем через 3 часа после приема пищи в течение дня или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.

Источник