Анализ пцр гепатита с сдавать натощак

Гепатит С переходит из острой фазы в хроническую в 80% случаев. Репликация болезнетворных вирусов в функциональных клетках печени ведет к дисфункции органа. Это обусловлено тем, что паренхиматозная ткань заменяется соединительной. В результате анамнез больного дополняется кровотечениями в ЖКТ, интоксикацией организма, проблемами со свертываемостью крови. Поэтому чем раньше будут диагностированы патологические изменения, тем больше у пациента шансов на выздоровление. Анализ ПЦР на гепатит С считается наиболее точным методом исследования.

Этот диагностический метод разрешено проводить спустя несколько дней после заражения. Полимеразная цепная реакция позволяет достоверно определить генотип и концентрацию вируса в крови. Чтобы сделать анализ, у пациента берут биологический материал, в котором может присутствовать РНК возбудителя.

ПЦР на гепатит С осуществляют в три этапа:

Качественный анализ – с его помощью определяют генетический материал возбудителя.
Количественное исследование – таким образом выявляют вирусную нагрузку.
Генотипирование – на этой стадии врач узнает разновидность заболевания.

Методику разработали около 30 лет назад. Ее применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний. ПЦР позволяет обнаружить уникальный генетический материал. Для этого используют праймеры. Так называют короткие нити РНК, которые присоединяют к началу гена.

Анализ ПЦР

В результате количество фрагментов болезнетворного вируса многократно увеличивается. Каждая фаза требует особого температурного режима и определенного промежутка времени. Молекула ДНК формируется в течение 3 минут. Амплификация включает в себя около 30 циклов. ПЦР делают в лаборатории посредством специального оборудования.

Показания к назначению

Сдача анализа ПЦР может быть обусловлена наличием клинических симптомов гепатита С. Процедура показана людям, которые:

контактировали с инфицированным человеком;
страдают от острых и хронических заболеваний печени;
проходят лечение от патологических изменений в паренхиматозной ткани;
входят в группу риска;
являются донорами крови и ее компонентов.

ПЦР осуществляют не только при гепатите С. Анализ используют в медицине, биологии, криминалистике. Определение специфических показателей – этап, необходимый для подбора лекарственной схемы.

Преимущества анализа

В схему диагностического обследования включают иммунофлуоресцентный анализ и ПЦР. С помощью первого можно определить концентрацию иммуноглобулинов. Эти вещества вырабатываются защитным механизмом после проникновения болезнетворных вирусов в организм. В отличие от ПЦР ИФА не обладает эффективностью во время инкубационного периода. С помощью полимеразной цепной реакции гепатит С можно выявить в первые 7 дней после инфицирования.

Данное клиническое исследование обладает следующими характеристиками:

Минимальная вероятность ложного результата.
Высокая эффективность.
Специфичность.
Чувствительность.
Универсальность.
Автоматизация процесса.
Безопасность.
Скорость получения показателей.

Единственным минусом ПЦР является ее техническая сложность. Это связано с тем, что врачу необходимо подобрать правильный состав нуклеотидов, в функциях которых синтез ДНК. Из-за повышенной чувствительности метода возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результатов.

Чтобы добиться точности значимых показателей, биологический материал тщательно очищают от медикаментозных препаратов и белковых соединений. Для подтверждения результата требуется сравнение ранее проверенных образцов. К факторам, провоцирующим ошибку, причисляют:

Нарушение техники забора анализа

Нарушение техники забора анализа.
Изменения в последовательности фрагментов РНК.
Совпадение синтезируемых нуклеотидов и генов болезнетворных вирусов.

Вероятность получения ложного результата при гепатите С присутствует из-за невозможности определения генетической основы заболевания. ПЦР-диагностика позволяет напрямую выявить возбудителя. С помощью амплификации ДНК происходит обнаружение болезнетворных микроорганизмов в продуктах питания, воде и почве.

Ограничения, касающиеся данного метода, не уменьшают его эффективности и популярности. Клиническое исследование проводят регулярно. Таким образом врач может оценить эффективность принятых лечебных мер. Необходимость в этом возникает из-за того, что вирус гепатита С способен мутировать. Отсутствие положительного эффекта означает адаптацию вируса к применяемым лекарственным средствам.

Подготовка к сдаче

Для того чтобы провести полимеразную цепную реакцию у больного, страдающего от гепатита С, берут венозную кровь. Обычно для изучения требуется две порции биологического материала. Посредством одной делается непосредственно ПЦР, а другую направляют на иммуноферментный анализ.

Кровь для анализа ПЦР берут из вены

Подготовка имеет большое значение. Пациент сдает кровь на ПЦР утром на голодный желудок. За несколько дней до процедуры придется отказаться от вредных продуктов питания, спиртных напитков, никотина и наркотиков. Больному следует избегать половых контактов, чрезмерной физической и эмоциональной нагрузки. Бассейн и спортзал оказываются под запретом. Подготавливаться придется в любом случае.

Существуют особые указания относительно медикаментозных препаратов. Это касается антибиотиков и антидепрессантов. Женщины, у которых начались менструации, должны отсрочить сдачу анализа на гепатит С. Кольпоскопия также является поводом для отказа от процедуры.

Перечисленные правила довольно просты. Благодаря им, можно добиться максимальной достоверности данного диагностического метода. Расшифровывать результаты должен специалист. Самостоятельно интерпретировать их у пациента вряд ли получится.

Процесс сдачи анализа

ПЦР-диагностику осуществляют следующим образом:

Кровь помещают в термостат

Сначала забирают биологический материал. Кровь помещают в простерилизованные приспособления. Необходимый объем не превышает 1-1,5 мл. Держать кровь и ее компоненты следует не дольше 24 часов. Температура хранения не должна превышать 4 градусов по Цельсию.
После начинают клиническое исследование. Подготовленную кровь помещают в термостат вместе с амплификационной смесью. Обычно требуется не более 25 мл специального состава. Амплификация проводится в автоматическом режиме на протяжении нескольких часов.
Параллельно делают контрольные анализы. Для этого используют биологические материалы, взятые у здорового человека. Это поможет избежать ложных результатов.
Расшифровка и регистрация показателей. Генетический материал обнаруживают с помощью бромистого этидия. Благодаря специфическому воздействию, фрагменты ДНК высвечиваются. Наличие (отсутствие) вируса выявляют ориентируясь на данные таблицы.

Расшифровка результатов

Определить значение полученных показателей может только инфекционист и гепатолог. Анализ ПЦР вводят диагностический комплекс вместе с биохимическим исследованием крови, УЗИ, ИФА и биопсией. Диагноз ставят на основании всех результатов. Порядок расшифровки анализов зависит от этапа диагностического обследования.

Ультразвуковая диагностика

На первой стадии ПЦР положительным результатом теста считается обнаружение фрагментов ДНК болезнетворного вируса. При проведении количественного анализа определяют уровень вирусной нагрузки. Она может быть низкой (менее 8*10^5 МЕ/мл), средней (от 8*10^5 МЕ/мл), высокой (больше 2,4*10^7 МЕ/мл). Нормой (отрицательным результатом) считается отсутствие специфических антител и частиц вирусной РНК. На этапе генотипирования об инфекционном заражении свидетельствует РНК определенного генотипа.

При получении положительного результата больному назначают эффективную терапевтическую схему. При этом обязательно учитывают информацию о наличии вируса в крови, степени его активности и генотипе. Цена процедуры зависит от методики тестирования, вида биологического материала. К общей стоимости могут быть добавлены затраты за забор крови или других жидкостей. Последнее обусловлено тем, что возбудителя часто обнаруживают в урине, каловых массах и сперме.

Источник

ВИЧ и гепатит передаются парентерально, то есть через кровь. Некоторые гепатиты могут передаваться через другие биологические жидкости (кровь, сперма, секрет органов, менструальные выделения).

Случаи коинфекции, когда у человека гепатит сопровождается ВИЧ, широко распространены. Для определения патологий нужно сдать специализированные анализы (качественное, генотипное и количественное ПЦР-исследование, иммуноферментный анализ, иммунный блоттинг).

Чтобы получить достоверные результаты, нужно правильно подготовиться к исследованиям. Накануне сдачи анализов желательно воздерживаться от приема определенных препаратов, отказаться от алкоголя, соблюдать диету. Сами анализы нужно сдавать натощак. Рассмотрим подробнее, как проводится диагностика ВИЧ с гепатитом, и выясним, каким образом осуществляется подготовка к забору крови.

В каких случаях нужно сдавать анализы крови на ВИЧ и гепатит?

ВИЧ – заболевание, которое развивается вследствие попадания в организм РНК-содержащего вируса рода Ретровирусов из семейства Лентивирусов. Существует два типа вируса иммунодефицита человека – ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Первый встречается очень часто, а второй – малораспространенный вариант, который встречается в основном в Западной Африке.

При попадании в организм возбудитель ВИЧ обнаруживает так называемые клеточные рецепторы CD4, прикрепляется к ним и проникает в клетки организма. Причем внутри клетки вирус синтезирует ДНК, которое встраивается в ядро хозяина. Вирусная ДНК синтезирует РНК для новых частиц вируса. Таким образом инфекция распространяется. Рецепторы CD4 содержат в себе клетки нервной и иммунной системы, поэтому именно они в первую очередь подвергаются поражению.

Теперь поговорим о вирусных гепатитах. Чаще всего встречаются гепатиты типа A, B, C. Гораздо реже встречаются типы D, F, E, G. Возбудителями воспалительных процессов в печени могут быть РНК и ДНК содержащие вирусные агенты. Самым опасным считается гепатит Ц, который часто протекает бессимптомно, и вызывает гепатоцеллюлярный рак и цирроз печени.

Показания к проведению анализа на ВИЧ и гепатит:

Был половой контакт с человеком, который является носителем вирусных агентов.
Беременность. При подготовке к родовой деятельности анализы сдаются обязательно, так как ВИЧ и гепатит могут передаваться от матери к ребенку.
Прохождение лечения при ВИЧ или гепатите. Анализы помогают контролировать эффективность терапевтических мероприятий и по необходимости вносить коррективы.
При подготовке к хирургическим вмешательствам.
Наркомания. Вирусные заболевания передаются парентерально, поэтому наркозависимые люди находятся в повышенной зоне риска. Заражение происходит при использовании одной и той же иглы. У наркоманов ВИЧ часто перестает в СПИД, так как под воздействием психотропных веществ сопротивляемость организма инфекционным агентам снижается в значительной мере.

Также рекомендуется проходить исследования людям, которые находятся в группе риска. Таковыми являются медработники, мастера тату/пирсинга/маникюра/педикюра.

Подготовка к анализам

Можно ли кушать накануне исследований?

Можно ли кушать перед сдачей крови на ВИЧ и гепатит? По словам специалистов, сдавать кровь нужно сугубо натощак. Это поможет получить более достоверные результаты исследований. Желательно воздерживаться от пищи в течение 6-8 часов до забора крови.

Многие специалисты вообще рекомендуют накануне исследований придерживаться диеты. Особенно, если человек помимо ПЦР и ИФА, будет сдавать биохимический анализ крови на печеночные ферменты.

Перед забором крови можно кушать:

Любые крупы.
Продукты с высоким содержанием клетчатки. Сюда относятся зелень, овощи, ягоды, фрукты.
Нежирные кисломолочные изделия.
Отварное мясо.
Рыбу.
Орехи.
Хлеб с отрубями, ржаной хлеб.

Рекомендуется воздерживаться от употребления высококалорийной трудноусваиваемой пищи. Так, лучше отказаться от полуфабрикатов, спиртных напитков, газировки, консервов, маринадов, острых и жирных блюд.

Почему нельзя употреблять алкоголь перед исследованиями?

С тем, можно ли кушать перед сдачей крови на гепатиты и ВИЧ, все понятно – исследования нужно сдавать исключительно натощак. Теперь поговорим об алкогольных напитках. Врачи утверждают, что пить спиртное перед исследованиями категорически запрещено.

Этому способствует несколько факторов. Во-первых, тесты на ВИЧ и гепатиты очень чувствительны, а алкоголь может привести к тому, что тест даст ложноположительный или ложноотрицательный результат.

Также спиртное опасно тем, что под его воздействием повышается активность печеночных ферментов. Как результат – изменяется картина биохимии, липидограммы, протеинограммы и других анализов.

В-третьих, иммунная система может неправильно отреагировать на спиртное. Если у человека иммунодефицит и воспалена печень, то ему употреблять горячительные напитки категорически запрещено.

Употребление спиртного накануне исследования зачастую приводит к тому, что ИФА (иммуноферментный анализ) дает ложный результат.

Основные рекомендации врачей

Перед тем, как сдавать анализ на Gepatit C, B, A, E, D, G, нужно прекратить прием определенных лекарственных средств. Врачи рекомендуют воздерживаться от приема медикаментов, которые влияют на свертываемость крови.

Дело в том, что для получения точной клинической картины пациентам надо обязательно сдавать коагулограмму. Употребление ЛС, влияющих на свертываемость крови, приводит к получению ложных результатов. Прекращать прием противовирусных медикаментов не нужно. Напротив – их надо пить постоянно, чтобы врачу было легче определить течение ВИЧ и гепатита, если эти заболевания уже имеются.

Другие рекомендации:

Избегать накануне исследований физических перегрузок. Желательно за 3-4 дня до забора крови воздерживаться от занятий спортом.
Не курить в день исследования.
Избегать стрессов перед забором крови.

Пить воду в день исследования можно, а иногда даже нужно. Потребление жидкости помогает снизить густоту крови, соответственно, забор крови медработникам будет сделать легче.

Исследования при подозрении на ВИЧ и гепатит: расшифровка

Как сдать анализ на гепатит и ВИЧ? После прохождения подготовительных мероприятий больному нужно посетить поликлинику. На предплечье накладывается жгут, после чего человека просят «поработать кулачком».

Что касается цены анализов, то она достаточно высокая. Чтобы пройти комплексную дифференциальную диагностику, нужно заплатить не менее 3 тысяч рублей. Некоторые медики рекомендуют сдавать исследования в двух разных клиниках, чтобы исключить возможность врачебной ошибки.

Итак, для постановки точных диагнозов вполне достаточно:

Сдать ИФА (иммуноферментный анализ) на ВИЧ. Исследование помогает определить вирус-возбудитель в сыворотке крови, а точнее антитела к инфекционному агенту. ИФА-скрининг проводится в два этапа. При получении двух положительных результатов, ставится диагноз «ВИЧ-положительный».
Сдать иммунный блоттинг. Это новейший анализ на вирус иммунодефицита человека. Он отличается высочайшими показателями точности. Иммунный блоттинг включает в себя ИФА с предварительным разделением белков вируса электрофорезом. Чувствительность метода – от 99,3 до 99,7%.
Сдать ПЦР-исследование на маркеры гепатитов. Проводится количественный и качественный анализ. Качественное исследование помогает выявить вирус-возбудитель. После анализа человек получает либо положительный, либо отрицательный результат. Количественное исследование необходимо для того чтобы врач мог оценить тяжесть воспалительного процесса. По необходимости проводится ПЦР-анализ на генотип конкретного вирусного агента. Дело в том, что от генотипа будет напрямую зависеть схема лечебных мероприятий.
Сдать ИФА на антитела к вирусным гепатитам. Антитела – это специфические белки, которые вырабатывает иммунная система вследствие инфицирования. Но наличие антител не значит, что человек болен. По словам специалистов, можно получить положительный результат в случаях, когда у человека в прошлом была инфекционная патология.
Сдать анализ на антигены к вирусным гепатитам (HBsAg, HCV и пр.). При помощи него можно определить воспалительный процесс еще на ранних этапах.

При положительных результатах рекомендуется дополнительно обследовать печень, чтобы оценить, насколько вирусный воспалительный процесс повлиял на орган. Вполне достаточным будет пройти УЗИ. При гепатитах орган увеличивается в размере, его структура изменяется, контуры становятся нечеткими. В запущенных случаях видны участки фиброза или цирроза.

Также в обязательном порядке нужно сдать биохимический анализ крови. К нему надо готовиться за 5-7 дней до забора крови. Следует соблюдать диету, не принимать алкоголь и препараты, влияющие на свертываемость крови. Биохимия помогает оценить активность печеночных ферментов, липидный и белковый обмен, уровень сахара в крови.

В случае острой необходимости делается биопсия печени. Подготавливаться к ней нужно за неделю до забора тканей. Перед биопсией нельзя употреблять антикоагулянты, сердечные ЛС, НПВС, Аспирин. Биопсия проводится под местным наркозом. Она может показывать активность воспаления и степень фиброза печени, если он есть.

Написано статей

612

Источник: blotos.ru

Виды диагностики

Чтобы подтвердить болезнь, врачи делают общий и биохимический анализы крови, качественное исследование ПЦР и определяют генотип вируса.

Помимо этого врач может прибегнуть к инструментальным методам, подтверждающим гепатит С.

К ним относятся:

УЗИ внутренних органов брюшины;
рентгенологический анализ;
эндоскопия;
КТ;
МРТ;
биопсия печени.

Общие анализы

Начало диагностики происходит со сдачи общих анализов крови и мочи.

Во время инфицирования гепатитом цвет мочи меняется на более тёмный, при этом:

гемоглобин, эритроциты, лейкоциты, тромбоциты уменьшаются;
лимфоциты увеличиваются;
нарушается гемостаза крови;
повышается СОЭ;
высокий уровень уробилина в составе урины.

Биохимический анализ крови

Биохимический анализ крови обнаруживает:

ферменты печени АЛТ и АСТ;
билирубин;
ГГТ (гамма-глобулин);
ЩФ (щелочные фосфаты);
глюкозу;
ферритин;
трансферритин;
триглицериды;
креатинин;
ТП (тимоловая проба).

Полный биохимический анализ крови — видео от автора Здоровье ТВ.

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ, который сокращено называется ИФА предназначен для выявления анти-HCV. Он основан на комплексе структурных и неструктурных вирусных пептидов. Суть метода заключается в добавлении в исследуемую кровь специфических антител, которые впоследствии дают реакцию «антиген-антитело».

Читайте также: На самом деле гепатит с

Высокочувствительный анализ ИФА даёт самый точный диагноз и оценивает характер заболевания, на основе чего можно составить грамотное лечение.

ПЦР-диагностика

Методика ПЦР – это качественный анализ на гепатит, который позволяет выделить даже наличие отдельного гена. Ультрачувствительный анализ ПЦР обнаруживает флавирус ещё до образования антител. Точный анализ можно получить уже через пять дней после предполагаемого заражения.

На фото представлены биохимический анализ и ПЦР-диагностика.

Биохимия крови на гепатит
Качественный ПЦР на гепатит

Когда нужно сдавать тесты на гепатит С?

Провести анализ на гепатит С должны:

пары, желающие завести ребёнка;
беременные женщины;
пациенты с подозрением на заболевание;
доноры крови или органов;
люди, имеющие пристрастие к наркотикам;
пациенты с ВИЧ болезнями;
люди, ведущие беспорядочную половую жизнь;
заключенные в местах лишения свободы;
после хирургического вмешательства в стоматологическом кабинете;
медицинские сотрудники и сотрудники МВД.

Контроль заболевания у хронических пациентов проводится каждые шесть месяцев.

Как правильно подготовиться и сдать биологическую жидкость?

Сдача биологической жидкости не требует специальной подготовки. Процедура проводится в утренние часы натощак. Для успешного анализа надо сделать забор не менее 6 мл крови и 15 мл урины.

Материал доставляется на исследование в тот же день. В противном случае анализы покажут ложноположительный результат.

Расшифровка результатов

Таблица, в которой сведены вероятные сочетания трактовки результатов:

anti-HCV IgM	anti-HCV core IgG	anti-HCV NS IgG	RNA HCV	Особенности	Толкование результата
+	+	—	+	У пациента обнаружены симптомы острого заболевания. Возрастают титры anti-HCV core IgG	Острый гепатит С
+	+	+	+	У пациента обнаружены клинические признаки острого гепатита	Хронический гепатит С, ранняя стадия
—	+	+	—	Признаки гепатита отсутствуют. При наличии патологии присутствует небольшое увеличение активности аминотрасфераз	Хронический гепатит С, скрытая стадия
—	+	-/+	—	Маркеры показывают отсутствие симптоматики заболевания. Наличие в крови anti-HCV core IgG (название иммуноглобулина) 1:80 и ниже. Нормальные уровни аминотрансфераз (АЛТ, АСТ) в низких титрах с последующим пропаданием антител в течение нескольких лет	Реконвалесцент (выздоровевший) острого гепатита С или латентная фаза хронического гепатита С

Расшифровать показатели можно самостоятельно, но лучше проконсультироваться с врачом.

Нормы веществ

Отрицательный анализ на гепатит С можно получить при качественной диагностике методом ПЦР или ИФА. В иммунологическом результате концентрация антигенов ниже нормы относится к отрицательному результату.

Следующие показатели указывают на норму:

ферменты АЛТ и АСТ у мужчин до 41 МЕ/л, у женщин — до 31 МЕ/л;
ЩФ не выше 150 МЕ/л;
билирубин не выше 27-34 мкмоль/л.

Положительный результат

Определить положительный результат можно, если человек ранее болел острой формой гепатита. Он имеется также у людей, которые в данный момент здоровы, однако, являются носителями вируса.

При подтверждении гепатита проводится повторная биохимия крови. Специалист может назначить пациенту регулярное тестирование, чтобы фиксировать характер болезни и эффективность лечения.

Если анализы на антитела дали положительный результат, а тест ПЦР дал отрицательный результат, человек считается положительно инфицированным. Чтобы подтвердить или опровергнуть теорию, проводится диагностика РИБА. Эта методика эффективна уже через 3 недели после возможного инфицирования.

Варианты ложных анализов

В медицине существует три вида ложных диагностических результатов:

сомнительный;
ложноположительный;
ложноотрицательный.

Анализ на гепатит считается сомнительным, если в крови нет нужных маркеров, но у пациента присутствуют симптомы заболевания. В большинстве случаев этот результат появляется при несвоевременной диагностике, когда антитела не успевают оформиться. При сомнительном анализе пациенту назначают повторную лабораторную диагностику через месяц и ещё одну через шесть месяцев.

Ложноположительным анализ считается в том случае, если методика ИФА обнаруживает в крови иммуноглобулины класса М. Однако методом ПЦР РНК вирус не подтверждён.

Причины ошибочной диагностики

Ложноположительными являются около 15% результатов.

Причинами ошибок являются:

скрытый характер заболевания;
употребление иммуносупрессивных лекарств;
особенности иммунной системы организма;
в крови повышенный уровень криоглобулинов;
содержание гепарина в составе крови;
острая инфекционная болезнь;
аутоиммунные болезни;
раковые опухоли;
новообразования;
беременность.

Кроме этого, тесты могут быть ошибочными по внешним причинам:

у медицинского работника низкая квалификация;
химические реактивы низкого качества;
некачественное или устаревшее медицинское оборудование;
попадание в сыворотку крови инородных веществ;
нарушение техники хранения и транспортировки биологических образцов.

Нередко ложноположительные результаты получаются у беременных по причинам:

сбой в обмене веществ;
ОРЗ или ОРВИ;
аутоиммунные болезни;
эндокринные болезни;
внезапное снижение уровня микроэлементов в организме.

К какому врачу обратиться и где делать?

При первом же подозрении на заражение нужно обращаться:

к врачу-инфекционисту;
гепатологу.

Далее врачом пишется направление для сдачи необходимых тестов.

Пациент может пройти обследование:

в обычной клинике по направлению врача;
в платном диагностическом центре по собственному усмотрению.

Сколько делаются анализы на гепатит С?

Диагностирование проводится до семи дней с момента поступления биологического образца в лабораторию. Результат анализа может быть готов уже через 1-2 дня. Однако все зависит от сложности исследования и вида вируса.

Загрузка …

Видео

Какие сдают анализы на гепатит С расскажет автор видео от канала Клиника «Московский Доктор».

Источник: hromosoma.com