Анализы на гепатит ифа положительный пцр отрицательный
Печень человека ежедневно испытывает огромные нагрузки. Орган непрерывно фильтрует кровь, очищая ее от токсичных соединений. Поэтому состояние печени требуется постоянно держать под контролем. Сделать это помогут диагностические процедуры.
Сдавали ли Вы когда-нибудь кровь на гепатит С?
ДаНет
Выявить развитие такого опасного заболевания, как гепатит С, позволяет полимеразная цепная реакция. Однако многие пациенты сталкиваются с ситуацией, когда антитела гепатита С есть, а ПЦР при этом отрицательный. Рассмотрим, что это значит.
Пути передачи вируса гепатита С
Гепатит С − опасная болезнь печени, имеющая вирусную природу. Вирусы передаются от больного человека к здоровому через биологические жидкости: кровь, слюну, сперму, влагалищные выделения.
Способы заражения гепатитом С
Медицинские работники выделяют условия, которые способствуют передаче вирусного заболевания:
- Переливание крови.
В девяностые годы донорская кровь не подвергалась лабораторным исследованиям, поэтому случаи заражения реципиентов встречались достаточно часто. Сейчас доноры сдают анализ на гепатит. - Многократное использование иглы для инъекций.
Группу риска составляют наркозависимые и малообеспеченные люди. - Незащищенный половой акт.
Причины, приводящие к заражению вирусом: беспорядочные связи, частая смена партеров, неразборчивость. Надежно защитит от гепатита С использование презерватива. - Прохождение родовых путей ребенком.
Во время беременности плод защищен плацентой. В процессе родов защита отсутствует. - Грудное вскармливание.
Молоко зараженной женщины не содержит вирусных частиц. Опасность заключается в том, что младенцы прокусывают соски при кормлении. В подобных условиях инфицированная кровь попадет внутрь неокрепшего организма. - Плохая стерилизация инструментов.
Для выполнения косметических процедур, как маникюр, педикюр, татуаж, пирсинг.
Рискуют заразиться вирусом также медработники, постоянно контактирующие с хирургическими инструментами, использованными шприцами. Поэтому медицинский персонал, попадающий в группу риска, периодически проходит диагностику гепатита С.
Вопреки распространенному мнению, вероятность заражения вирусом гепатита С бытовым способом практически исключена.
Когда появляются антитела к гепатиту С?
Проникновение вируса внутрь организма человека вызывает синтез специальных антител, противостоящих распространению инфекции. Выработка антител отмечается в двух случаях:
- вакцинация против гепатита;
- распространение вируса в результате заболевания.
Присутствие антител в сыворотке крови можно обнаружить с помощью диагностических процедур только спустя две-три недели. Часто выявление болезни происходит поздно. Подобная проблема объясняется бессимптомным протеканием патологии. Больной ощущает повышенную утомляемость, ухудшение настроения, головные боли. Однако подобным болезненным признакам редко уделяют внимание.
Определяют присутствие антител с помощью иммуноферментного анализа. Если антитела к гепатиту С обнаружены, дополнительно проводят ПЦР диагностику.
Антитела к гепатиту C есть, а ПЦР отрицательный: причины
Иммуноферментное исследование способно выявить не сам вирус, а лишь наличие антител к нему. Иммунная система человека устроена таким образом, что после выздоровления она оставляет внутри организма защитные резервы, которые не позволят возникновения рецидива. Именно поэтому после контакта иммунитета с вирусом гепатита С остается некоторое количество антител.
Если ПЦР на гепатит С отрицательный, а антитела есть, это означает, что пациент перенес заболевание в прошлом. В редких случаях подобный результат свидетельствует о переходе патологии в неопасную скрытую форму или в хроническую стадию. В подобных случаях при соблюдении пациентом рекомендаций иммунолога, опасность активизации вирусных частиц сводится к нулю.
При постановке диагноза медицинские работники ориентируются преимущественно на результаты ПЦР. ИФА используется исключительно как первичная диагностика.
При диагностике гепатита С сначала делают ИФА, для подтверждения – ПЦР
Что такое ПЦР?
Анализ ПЦР заслуженно считается самым действенным методом выявления гепатита С. Полимеразная цепная реакция способна определить присутствие генотипа вируса в плазме крови на ранних стадиях развития заболевания, спустя семь-десять дней. Для диагностики используются два вида ПЦР:
- Качественный.
Назначается после положительного анализа на присутствие антител. Суть метода заключается в том, чтобы определить, присутствует вирус гепатита С в крови пациента либо отсутствует. Некоторые условия могут дать ложноотрицательный результат.Например, проведение лабораторного исследования в первые дни после попадания вирусных частиц в организм, ошибки медработников при заборе крови, лечение уколами Гепарина. - Количественная ПЦР диагностика.
Лабораторное исследование определяет концентрацию вирусных частиц в организме. Тяжесть и стадия заболевания прямо пропорциональна количеству вируса. Особенности и успешность терапевтического курса также зависят от результата количественного ПЦР. При небольшой концентрации вирусных частиц вероятность полного выздоровления достигает девяноста девяти процентов.Зашкаливающие показатели, наоборот, сводят успешность лечения к минимуму, а также способны вызывать ухудшение самочувствия пациента. При выявлении заболевания количественная ПЦР диагностика проводится неоднократно − спустя один, три и шесть месяцев. Подобные меры требуются, чтобы проследить динамику болезни и объективно оценить результаты лечения.
Многих пациентов интересует, если в результате анализа на гепатит С ПЦР отрицательный, что значит подобная формулировка. В данном случае человек признается полностью здоровым.
Нужно ли повторно сдавать анализы?
Положительный результат ИФА показывает присутствие антител в плазме крови и указывает на факт столкновения иммунной системы человека с вирусом гепатита С. Поэтому требуется дополнительная диагностика с использованием ПЦР. Положительный результат однозначно подтвердит развитие заболевания.
Если результат отрицательный, в девяноста процентах случаев пациент здоров. Однако сохраняется вероятность, что заболевание только зарождается, и вирусных частиц настолько мало, что ПЦР исследование пока не способно их выявить.
Поэтому, для полного исключения гепатита С, медицинские работники назначают повторное прохождение анализа спустя полгода. При отрицательном результате пациент может быть уверен в отсутствии болезни.
Что делать если обнаружены антитела, а ПЦР отрицательный?
Присутствие антител во внутренней среде человека может свидетельствовать о нахождении вируса гепатита С в скрытой форме, даже при отрицательном ПЦР. Поэтому в подобных случаях, чтобы обезопасить человека от активизации болезненного процесса, иммунологи назначают ежегодное прохождение лабораторных исследований.
Дополнительно пациент получает следующие рекомендации:
- сократить употребление жирных, жареных блюд;
- увеличить суточную норму потребления чистой воды до двух литров;
- исключить спиртные напитки;
- внимательно относиться к обработке инструментов во время косметических и медицинских процедур.
Стоит отметить, что присутствие антител, даже при отрицательном ПЦР − противопоказание для сдачи донорской крови.
Выявление антител в плазме крови − не повод для отчаяния. Их присутствие еще не говорит о протекании гепатита С. Чтобы получить правильный диагноз, потребуется пройти комплексное медицинское обследование.
( 1 оценка, среднее 5 из 5 )
Источник
Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.
Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.
Что такое ИФА?
Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.
Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.
Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.
ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.
В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.
Показания к ИФА на гепатит С
Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:
- острых и хронических заболеваниях печени;
- желтухе неясного генеза;
- обследовании перед хирургическими вмешательствами;
- стандартном обследовании доноров крови;
- постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;
- прохождении гемодиализа;
- профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;
- незащищенном сомнительном половом контакте;
- рождении детей от инфицированных матерей.
В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.
Как проводится анализ?
За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.
Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).
Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:
- На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
- На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
- Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.
Виды ИФА
Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:
- По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
a) конкурентный;
b) неконкурентный;
- По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
a) гомогенные;
b) гетерогенные;
- 3) По принципу определения исследуемого вещества:
a) прямой;
b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.
Прямой метод ИФА
При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.
- В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
- Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
- Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.
Непрямой метод
При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.
- В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
- В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
- В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
- Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.
Расшифровка результатов
Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.
При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).
Положительный
При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.
Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.
Отрицательный
Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.
Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.
Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.
Ложноположительный
ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:
- выполненной накануне вакцинации;
- при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;
- опухолевом процессе;
- инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).
Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.
ИФА положительный, а ПЦР отрицательный: что это значит?
Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».
Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.
Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.
Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.
Источник