Антиген нуклеокапсида вируса гепатита в
Среди всего населения планеты у 2 млрд человек в крови выявлен поверхностный антиген вируса гепатита В. Каждый год регистрируются десятки тысяч новых случаев заражения. Поэтому для профилактики распространения инфекции серологический скрининг назначают всем обратившимся за медицинской помощью и группе лиц, находящихся в зоне риска.
Среди вашего окружения есть больные Гепатитом В?
ДаНет
Что такое антигены вируса гепатита В?
Иммунитет здорового человека активизируется при появлении в организме чужеродных агентов. В ответ на антигенные свойства возбудителей болезней вырабатываются защитные антитела. Причиной инфицирования HBV-инфекцией становится проникновение в кровь инфицирующей дозы ДНК-вируса.
Вирусный штамм обладает чрезвычайно высокой вирулентностью, инфицирующая доза содержится в 0,0000001 мл сыворотки.
Расположение антигенов вируса гепатита В
От начала инфицирования в серологических тестах можно обнаружить разные типы антигенов и соответствующих им антител, по которым судят о стадии инфекционного процесса. В составе вирусной частицы ВГВ различают 4 типа антегенов:
- поверхностный HBSAg находится среди молекул суперкапсида (внешней фосфолипидной мембраны вириона);
- сердцевинный HBCoreAg содержится в ядре (core);
- HBeAg совместно с геномом включен во внутреннюю ядерную часть (нуклеокапсид). Положительное значение в анализе свидетельствует об активной репликации вирусного ДНК.
- HBxAg до конца не изучен. В начале инфекции обнаружить нельзя, появляется при хронизации процесса. По мнению ученых влияет на развитие первичного рака печени — гепатоцеллюлярной карциномы.
Поверхностный антиген
Поверхностный антиген вируса гепатита В отвечает за проникновение возбудителя в гепатоциты. Это первый серологический маркер, который появляется в крови. Достигает максимального титра к четвертой недели и циркулирует в сыворотке до 6 месяцев.
Из-за постоянной генетической изменчивости HBSAg возбудителю свойственна неоднородность в разных регионах планеты. Мутации S-гена приводят к формированию генотипов инфекции, на сегодня их зарегистрировано восемь. В России до 93% случаев инфицирования числятся с генотипом D.
Мутационные штаммы являются причиной неэффективности вакцинации против ВГВ.
Ядерный антиген
Тестирование сыворотки для выявления HBeAg проводится только в случае положительного поверхностного HBSAg для подтверждения диагноза. Наличие в крови антигена доказывает инфицированность человека. Подтверждается почти у 95% зараженных лиц в начале желтушного периода. При благоприятном течении болезни АГ исчезает при прогрессировании симптомов и к нему появляются АТ.
Обнаружить HBCAg при проведении ИФА нельзя, так как он локализуется внутри гепатоцитов. Подтвердить его можно только при биопсии печеночной ткани, что не оправдано из-за сложности инвазивной процедуры. Наиболее информативны антитела: anti-HBCAg IgM и IgG.
Среди четырех антигенов именно HBCAg обладает максимальной иммуногенностью, как чужеродный агент, он первым активизирует иммунитет на ответную реакцию.
Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В
В ответ на появление в крови поверхностного антигена, указывающего на положительный гепатит В, иммунная система начинает продуцировать anti-HBS двух видов:
IgM свидетельствуют о начале периода выздоровления, диагностируются 1—2 месяца и пропадают.
IgG наибольшие значения отмечаются через 1—2 года, в течение 10 лет титр постепенно падает. Постинфекционный иммунитет не устойчив, человек может заразиться снова.
Выявление АТ к поверхностному антигену помогает в составлении прогноза болезни:
- благоприятный прогностический признак отмечается при появлении anti-HBS на фоне клинических улучшений;
- неблагоприятный формируется при исчезновении anti-HBS в преджелтушном и желтушном периоде. В таких случаях быстро развивается паренхиматозная дистрофия.
Для формирования иммунитета к болезни вакцинацию проводят рекомбинантным HBSAg. В ответ на введение количество антител anti-HBS нарастает и колеблется на уровне 10 МЕ/мл в течение 10 лет.
Антигены вирусы гепатита В и взаимодействие с ними антител
Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В
В серологических анализах на гепатит В особая диагностическая ценность принадлежит антителам к вирусу, так как самого HBCORAg в крови нет. Иммуноглобулины класса М (anti-HBCOR IgM) присутствуют в плазме до 18 месяцев.
Доноров тестируют на наличие anti-HBCOR (total). Для выбраковки донорского биоматериала достаточно присутствия суммарного количества иммуноглобулинов без учета их класса.
Маркер anti-HBCOR IgG у лиц переболевших HBV, носителей HBSAg и больных с хронизацией процесса присутствует в крови пожизненно. Поэтому для диагноста это более информативный показатель, чем anti-HBS.
Поверхностный антиген вируса гепатита В положительный: что это значит?
Тестирование на выявление HBSAg назначают отдельно или в комплексе с анализами на другие маркеры инфекции. Поверхностный антиген сохраняется в крови на протяжении начального периода заболевания. Наибольшее значение отмечается за 1—2 недели до окончания инкубационного периода.
Появление положительного результата свидетельствует о:
- начале острой стадии вирусного гепатита В;
- заключительной стадии острого периода;
- «здоровом» носительстве;
- хроническом течении без признаков повреждения гепатоцитов;
- сероконверсии (выработке иммуноглобулинов к ВГВ).
Всегда существует вероятность ложноположительных результатов к вирусу гепатита, при выявлении поверхностного АГ исказить ответ может:
- некачественная или нечувствительная тест-система;
- онкология;
- аутоиммунные заболевания и другие инфекции.
Что делать при обнаружении антител к антигенам вируса гепатита Б?
Точный диагноз HBV-инфекции по одному положительному ИФА не устанавливают. Врач-инфекционист дополнительно назначает:
- повторную серодиагностику;
- ПЦР для выявления генетического материала;
- биохимический анализ;
- УЗИ печени.
Носителям HBV-инфекции сдавать биоматериалы для донорства запрещено.
Своевременная диагностика факта инфицирования улучшает прогноз для больного, так как клинические формы многообразны: от бессимптомного течения до быстропрогрессирующего цирроза.
Инфицированных больных в острой стадии и при обострении хронической формы госпитализируют для лечения в инфекционный стационар согласно санитарным правилам 3.1.1.2341-08 «Профилактика вирусного гепатита В». У лиц с установленным периодом ремиссии противовирусная терапия проходит в амбулаторно-поликлинических условиях.
Массовые обследования людей на выявление поверхностного антигена HBV необходимы, так как только 15% случаев инфицирования заканчиваются выздоровлением.
При хронизации процесса современные препараты поддерживают качество жизни больного человека, но не исключается риск возникновения фиброзных изменений в печени, печеночной недостаточности и гепатокарциномы.
( 4 оценки, среднее 5 из 5 )
Источник
Поверхностный антиген вируса гепатита В, HBsAg количественный — маркёр наличия защитного иммунитета против вируса гепатита В.
HBsAg — наиболее ранний маркёр гепатита В, появляющийся ещё в инкубационном периоде заболевания, до повышения уровня ферментов крови.
Вирус гепатита В состоит из оболочки и нуклеокапсида. Оболочка содержит поверхностный белок — HBsAg, в нуклеокапсиде находятся «core» антиген (HBcAg) и антиген «e» (HBeAg), а также ферменты и ДНК вируса. Гепатит В (HBV или ВГВ) — потенциально опасная для жизни инфекция, одно из самых распространенных в мире инфекционных заболеваний печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV).
Пути передачи HBV:
- кровь и/или другие жидкости организма инфицированного человека;
- через слизистые оболочки, повреждения кожного покрова;
- при незащищённом половом контакте;
- бытовой путь;
- использование нестерильных шприцев;
- переливание крови и пересадка донорских органов;
- парентеральный путь (от матери к ребёнку). Мать, также, может заразить новорождённого через трещины на сосках.
Длительность инкубационного периода от 4 недель до полугода. Гепатит В может протекать как в лёгкой форме, которая длится несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции.
Клиническая картина при гепатите В
Основные клинические проявления гепатита В: появление слабости, тошнота, снижение аппетита, быстрая утомляемость, лихорадка, желтушность кожных покровов, в лабораторных анализах — нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Во многих случаях заболевание протекает бессимптомно во время острой стадии инфекции.
Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. После перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет.
Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени. HВsAg в сыворотке в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В (HBV).
При остром заболевании, HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1–2 нед инкубационного периода и в первые 2–3 нед клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Частота выявления HBsAg зависит от чувствительности используемого метода исследования.
Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBcAg IgM.
Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни. Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и средне-тяжелых формах болезни.
При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причём у 20% больных тяжёлой формой, злокачественный антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный прогностический признак; он определяется при злокачественных (фульминантных) формах гепатита В.
При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 мес от начала острой инфекции. Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев. У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4–5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 мес от начала заболевания.
HBsAg может быть выявлен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В — анти-HBcAg IgM, анти-НВс IgG, анти-HBeAg и изучают функцию печени. При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg. Если повторные исследования крови в течение более 3 мес выявляют HBsAg, такого человека относят к хроническим носителям поверхностного антигена.
Носительство HBsAg
Носительство HBsAg — довольно распространённое явление. Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В в крови дольше 6 месяцев после начала болезни свидетельствует о вероятности того, что гепатит В перешёл в хроническую форму. Возможно пожизненное носительство HBsAg. Количественное определение HBsAg может быть использовано в диагностике, мониторинге и контроле терапии гепатита В. Результат исследования, выполненного в диагностических целях, следует использовать в комплексе с клиническими свидетельствами и использованием других маркёров гепатита для диагноза острой или хронической инфекции.
Целесообразно выполнять исследование не ранее 6 недель от момента предполагаемого инфицирования.
Показания:
- диагностика острого и хронического вирусного гепатита В;
- мониторинг состояния, контроль терапии пациентов с гепатитом В.
Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: МЕ/мл.
Референсные интервалы:
- < 0,05 МЕ/мл — отрицательно;
- > и = 0,05 МЕ/мл — положительно.
Все положительные результаты HBsAg (выше 0,05 Ед/мл) перепроверяют дважды с проведением подтверждающего теста HBsAg с иммуноингибированием. При подтверждении положительного результата в подтверждающем тесте выдаётся дополнительный ответ: HBsAg (подтверждающий) — «положительно».
В редких случаях проба с иммуноингибированием не подтверждает специфичности положительного результата HBsAg. В таких случаях выдаётся ответ HBsAg (подтверждающий): «результат повторно положительный, неподтверждённый». Это указывает на вероятность неспецифических интерференций компонентов сыворотки крови, влияющих на результат. В таком случае, рекомендуется через некоторое время повторить исследование.
Положительный результат:
- острый гепатит В — инкубационный или острый периоды;
- хронический гепатит В;
- носительство вируса гепатита В.
Отрицательный результат:
- гепатита В нет (при отсутствии положительных anti-HBc-маркёров гепатита В);
- при наличии положительных anti-HBc-маркёров: нельзя исключить острый гепатит В (период выздоровления);
- нельзя исключить хронический гепатит В с низкой интенсивностью репликации;
- редко: при молниеносном, злокачественном течении гепатита В; гепатите В с дефектным (серонегативным) HBs-антигеном.
Пробы пациентов, получающих препараты мышиных моноклональных антител в целях диагностики или терапии, могут содержать человеческие анти-мышиные антитела (HAMA), которые при тестировании способны вызвать искажение (как повышение, так и понижение) результата. Пробы гепаринизированных пациентов могут частично коагулировать, что вызывает возникновение ошибок вследствие присутствия фибрина (взятие крови следует проводить до гепаринотерапии).
Источник
Острый вирусный гепатит В
Возбудитель. HBV (частица Дейна) — ДНК-содержащий вирус из семейства Hepadnaviridae, диаметром 42 нм. Липопротеидная оболочка содержит поверхностный антиген HBsAg (австралийский антиген), открытый Бламбергом в 1965г. В частицах HBsAg определяются три белковых домена (Pre-S1, Pre-S2, S), липидный и углеводный компонент, а также рецептор полимеризованного альбумина рАR (рис. 3.5).
*Примечание.
Структура HBs-Ag кодируется геном S.
Структура HBcor-Ag кодируется геном C.
Pre-S-ген кодирует рецептор полиальбумина
Pre-S1-регион
поверхностного антигена
Pre-S2-регион
поверхностного
антигена
S-компонент
поверхностного
антигена
Рис. 3.5. Структура вируса гепатита B
Гепатоциты имеют рецептор для полиальбумина, предполагается, что с помощью рАR HBV проникает в клетку. Существует один главный серотип и генетически устойчивые подтипы HBsAg, определяемые набором антигенных детерминант его поверхности: adw, adr, ayw, ayr. В структуру нуклеокапсида (ядерного антигена — HBcAg) входят: субъединица HBeAg, ДНК-полимераза (обратная транскриптаза), протеинкиназа и ДНК. Молекула ДНК (HBV DNA) частично однонитчатая, кольцевой конфигурации.
HBeAg образуется в процессе превращения белка Pre-core в структурный белок core и выделяется за пределы клетки (служит маркером репликации вируса).
Важные функции выполняют полипептидные Pre-S домены (регионы) HBsAg. Pre-S1 регион HBsAg “распознается” рецепторами гепатоцита. Его содержание в крови служит отражением репликации вируса. К Pre-S1 вырабатываются вируснейтрализующие антитела, нарушение их синтеза способствует хронизации инфекции. Предполагается, что антитела к Pre-S2 также имеют значение для элиминации вируса.
Эпидемиология и факторы риска. Инфицированность населения некоторых стран достигает 15-30% (наибольший уровень отмечается в странах Юго-Восточной Азии и в Южной Африке). Для заражения достаточно минимальных количеств крови или биологических жидкостей организма, содержащих HBV. Вирус высокоустойчив во внешней среде, в том числе к высушиванию и замораживанию.
Пути передачи HBV: парентеральный — переливание крови, инвазивные исследования, гемодиализ; нарушение целостности кожи и слизистых (татуировки, акупунктура, пользование общими зубными щетками); половой, вертикальный, перинатальный. В последние годы возросло значение полового пути. У 25% пациентов не удается установить источник заражения.
В группы риска входят: наркоманы, проститутки, гомосексуалисты, пациенты отделений гемодиализа, пациенты, нуждающиеся в повторных трансфузиях крови или ее компонентов, медицинские работники, члены семьи носителя HBV, пациенты с хроническими заболеваниями кожи. При развитии ОВГ В в первом и втором триместрах беременности вероятность заражения плода небольшая, в третьем триместре инфицирование почти закономерно, особенно при наличии HBeAg у матери.
Инкубационный период длится в среднем 60-90 дней (15-180 дней).
Патогенез. HBV оказывает прямое токсическое действие на клетки печени, которое сочетается с иммунно-опосредованным повреждением их мембран. Сердцевина вируса формируется в ядре гепатоцита, компоненты оболочки – в цитоплазме. HBV, кроме того, реплицируется в клетках системы мононуклеарных фагоцитов. В острую фазу инфекции в кровоток выделяются “полные” вирусные частицы и множество “пустых” оболочек. Внепеченочные проявления инфекции (кожная сыпь, артралгии, хронический мембранозный гломерулонефрит, узелковый артериит, миокардит, синдром Гийена-Барре, эссенциальная смешанная криоглобулинемия) представляют собой иммуннокомплексные синдромы. Предполагается, что их развитие обусловлено также изменением функций мононуклеарных фагоцитов.
Клиническая картина. В продромальной фазе нередко наблюдается синдром, “подобный сывороточной болезни”, может сохраняться длительно. Течение ОВГ В вариабельно. В целом, он протекает тяжелее и более длительно, чем ОВГ А. Продолжительность самоограничивающейся формы обычно не превышает 4 мес. (желтуха сохраняется около 4 недель). Рецидивы и холестатические варианты встречаются редко.
Риск развития фульминантного гепатита при острой инфекции HBV -около 1%. При выраженной желтухе, инфицировании мутантным вирусом, а также суперинфекции HAV, HDV, HCV он повышается.
Серологическая диагностика (рис. 3.6). HBsAg — свидетельство присутствия HBV в организме — определяется в крови в сроки от двух недель до двух месяцев до появления симптоматики и сохраняется от нескольких дней до 2-3 мес (если не происходит элиминация вируса — дольше).
Показатели острой
инфекции:
наличие HBs-Ag и
Ig M анти-HBcor
Признаки выздоровления:
исчезновение HBs-Ag,
исчезновение Ig M анти-HBcor,
появление Ig G анти-HBcor,
появление анти-HBs.
выраженность изменений
«общие» симптомы
желтуха
повышение уровня трансаминаз
HBe-Ag
Ig M анти-HBcor
Ig G анти-HBcor
недели
продром
инкубация
желтушный
период
инфицирование
Рис. 3.6. Динамика серологических показателей при ОВГ B
Вируснейтрализующие анти-HBs сменяют HBsAg и свидетельствуют о формировании относительного или абсолютного иммунитета. У 10-20% больных сероконверсия не наступает.
HBeAg – маркер активной репликации – выявляется при ОВГ еще до развития синдрома цитолиза. Его определение не обязательно при рутинном обследовании.
Анти-HBe — свидетельство низкой контагиозности больного, их появление с одновременным исчезновением HBeAg (сероконверсия) предшествует выздоровлению.
HBcAg выявляется только в ткани печени методом оптической флюоресценции.
Продукция анти-HBc индуцируется случайным освобождением HBcAg в кровь. Анти-НВс класса IgM служат показателем острой инфекции, появляются одновременно с манифестацией болезни и сохраняются до года. После элиминации вируса еще в течение нескольких лет определяются анти-HBc класса IgG (не несут защитной функции). У носителей они фиксируются постоянно.
HBV DNA — самый чувствительный показатель репликации, выявляется методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в сыворотке крови и ткани печени.
Диагноз базируется на выявлении в крови HBsAg и IgM анти-НВс. На схеме 3.1 представлен алгоритм диагностики при нестандартных серологических показателях (диагностика “по сероконверсии).
HBs-Ag
не выявлен
IgM-анти-HB core
выявлены
У пациента ОВГ B
с подпороговым уровнем HBs-Ag
Пациент перенес ОВГ B в течение года с элиминацией HBV
определить анти-HBs
анти-HBs не выявлены
анти-HBs выявлены
ОВГ B
состояние после перенесенного ОВГ B
Схема 3.1. Алгоритм диагностики «по сероконверсии»
При фульминантном гепатите отмечается очень быстрая сероконверсия (исчезновение маркеров репликации и нарастание титров антител). Диагноз ОВГ В основывается на обнаружении IgM анти-HBc.
При заражении мутантным типом HBV с изменением генетического кода в Pre-core локусе, и нарушением секреции HBeAg, наблюдается большая частота тяжелых форм ОВГ В и фульминантного гепатита. HBeAg, как критерий репликации, не выявляется. При инфекции HBV, мутантному по гену S, может отсутствовать HBsAg в крови.
Отдаленные последствия. Присутствие HBsAg в крови в течение 6 мес. после начала ОВГ В указывает на формирование персистенции вируса, которая развивается у мужчин в 6 раз чаще, чем у женщин. Неполная элиминация вируса происходит у 90-98% новорожденных, 50% детей младшего возраста и 5-10% здоровых взрослых. Отмечена более частая хронизация инфекции при безжелтушных формах ОВГ.
Персистенция HBV может протекать в виде бессимптомного носительства с нормальной гистологической картиной печени или неспецифическими изменениями, хронического гепатита, цирроза, гепатоцеллюлярной карциномы, и сопровождаться проявлениями иммунокомплексной патологии.
Иммунопрофилактика. Профилактические меры до контакта с больным (“отсроченный эффект”). Самым эффективным методом является вакцинация.
Рекомбинантная дрожжевая вакцина содержит HBsAg в качестве иммуногена. Эффективность: в 85-95% случаев предотвращает инфекцию HBV или клинически манифестный гепатит В.
Рекомендуется вакцинировать: детей младшего возраста; подростков 11-12 лет, ранее не вакцинированных; пациентов, входящих в группы риска. У последних обязательно исследование маркеров HBV. Для вакцинации отбираются лица с отсутствием HBsAg и анти-HBc.
Режим дозирования: инъекция в дельтовидную мышцу 10-20 мкг белка HBsAg для взрослых и 2,5-5-10 мкг для детей. Введение проводится в три этапа с интервалом в 1 и 6 месяцев. Переносимость хорошая.
Длительность защитного действия вакцинации и продолжительность “иммунной памяти” не установлена. Титр анти-HBs определяют спустя 1-3 мес. после окончания основного курса вакцинации (рис. 3.7). При сохранении высокого риска заражения проводят ревакцинацию каждые 5-7 лет.
.Рис. 3.7. Антителопродукция через 1-3 месяца после окончания основного курса вакцинации против гепатита В (по ш. Шерлок, Дж. Дули, 1997 г.)
Исследуется лечебная эффективность применения вакцины у пациентов с хронической инфекцией HBV.
Профилактические меры после контакта с больным (“немедленный эффект”). Включают сочетанное применение вакцины и иммуноглобулина против гепатита В (препарата сывороточного иммуноглобулина с повышенным титром анти-HBs). Защитный эффект комбинации превышает 95%. Показания: половой контакт с больным ОВГ В; контакт с HBsAg положительной кровью; дети, рожденные от матерей с HBsAg.
Режим дозирования: для новорожденных — иммуноглобулин в дозе 0,5 мл в переднебоковую часть бедра и вакцина в дозе 5-10 мкг контралатерально, в течение 12 часов после рождения. Второй и третий этапы вакцинации проводятся с интервалом в 1 и 6 мес; для взрослых — иммуноглобулин в дозе 0,04- 0,07 мл/кг в дельтовидную мышцу. Одномоментно или в течение ближайших дней — первый этап вакцинации (контралатеральная инъекция) – 100-20мкг вакцины. Второе и третье введение вакцины – с интервалом в 1 и 6 мес.
Источник
