Бактериологические методы исследования кишечных инфекций

Диагностика проводится на основании:

• паспортных данных;
• жалоб;
• анамнеза заболевания (особенности начала заболевания и его развития);
• эпидемиологического анамнеза;
• анамнеза жизни (перенесенные инфекционные заболевания, прививки, аллергические реакции);
• клинического обследования пациента;
• лабораторных методов исследования;
• инструментальных методов исследования.

I.    Анамнез болезни:

• когда появились первые признаки;
• начало болезни, острое или постепенное;
• была ли продрома;
• динамика симптомов;
• получал ли лекарства, как изменилось самочувствие.

II.    Эпидемиологический анамнез:

• источник, пути передачи с учетом инкубационного периода;
• поездки;
• полевые условия;
• контакты с больными, животными;
• свои эпидемические особенности.

Объективное обследование

Симптомы и синдромы, характерные для инфекционных заболеваний: Состояние больного.

Положение тела (столбняк, менингококковая инфекция).

Тип лихорадки:

• постоянного типа;
• ремитирующая (послабляющая);
• интермитирующая (перемежающая) — в течение суток высота температуры чередуется от нормальной до суточных колебаний в 3 С, бывает при малярии;
• гектическая (истощающая) — суточные колебания более 3 °С, большие подъемы температуры чередуются с быстрым падением до нормальной или субфебрильной температуры, может быть 2-3 раза в сутки, при сепсисе;
• извращенная (инвертированная) — утром температура выше, чем вечером;
• возвратная — высокая температура держится несколько дней, потом становится нормальная и повторяется через несколько дней, при возвратных тифах;
• волнообразная (ундулирующая);
• неправильная (атипичная) — колебание температуры без закономерностей, при многих заболеваниях.

Измерять температуру не реже 2 раз в сутки, при необходимости и чаще.

Состояние кожи, слизистых

Экзантема. Энантема. Имеют строгую локализацию и сроки. Выяснить время появления и последовательность.

Выделяют следующие элементы сыпи:

• розеола — пятно диаметром 2-5 мм, при растягивании или надавливании стеклом исчезает и появляется вновь. Сохраняется от нескольких часов до нескольких суток, при брюшном тифе;
• пятно — сходно с розеолой, но больше в диаметре, 5-20 мм. Может быть мелко- и крупнопятнистая сыпь, при кори;
• папула — образуется из-за пролиферации эпидермиса, инфильтрата, ограниченного отека в дерме. Цвет, как у розеолы. При ветряной оспе трансформируется в везикулу;
• везикула (пузырек) — образование 1,5-5 мм с серозно-геморрагической жидкостью, при герпесе, ветряной оспе;
• пустула — образование 1,5-5 мм с гнойным содержимым, при ветряной оспе;
• пузырь-булла — однокамерное, полостное образование более 5 мм с серозным, серозно-геморрагическим содержимым, на фоне воспаленной кожи, при рожистом воспалении;
• геморрагии — возникают из-за увеличения проницаемости сосудов. В зависимости от размеров различают:
• петехии;
• пурпуры — 2-5 мм;
• экхимозы — неправильной формы, больше 5 мм (при менингококковой инфекции);
• может быть первичный аффект — язва (при туляремии), карбункул.

Состояние лимфоузлов

Лимфаденопатия — это увеличение периферических лимфоузлов. Они могут быть от 0,5 до 4 см и более. Определяют их величину, консистенцию, подвижность, цвет кожи. Если они увеличены до 3-5 см — это бубоны. Увеличение может быть локальным (регионарным) и генерализованным (чума, туляремия). Лимфоузлы — барьер для микроорганизмов; если барьер прорывается, может быть выход в другие лимфоузлы, проникновение воспаления или возбудителя в кровь. Лимфоузлы затем нагнаиваются, склерозируются. Могут образовываться свищи.

Об острой лимфаденопатии говорят в том случае, если имеется увеличение более 2-3 групп лимфоузлов, не связанных между собой (мононуклеоз, бруцеллез, ВИЧ-инфекция). Но это может быть и при неинфекционных заболеваниях, при лимфогранулематозе, лимфолейкозе.

Для дифференциальной диагностики проводят биопсию лимфатических узлов.

Состояние костно-суставной системы

Обследование органов кровообращения, органов дыхания, органов пищеварения

Диарейный синдром — учащенная дефекация. В зависимости от локализации процесса стул может быть: жидкий, водянистый, обильный, скудный с патологическими примесями, такими как кровь, слизь, гной. Важны: количество, консистенция, патологические примеси, остатки непереваренной пищи, гельминты. Необходимо спросить, не ел ли свеклу, черешню, вишню, принимал ли лекарства (соли висмута), так как они изменяют цвет кала. Алая кровь, не смешанная с фекалиями, может быть при геморрое. Кровь прожилками — при шигеллезах. Цвет мелены (дегтеобразный стул) из пищеварительного тракта.

Гепатолиенальный синдром, бывает при бруцеллезе, лептоспирозе, брюшном тифе, малярии, мононуклеозе. Это органы ретикулоэндотелиальной системы (РЭС). Если возбудитель имеет гепатотропное действие (при вирусных гепатитах), то появляется желтуха.

Увеличение определяется перкуссией, пальпацией, УЗИ.

Обследование мочеполовой системы. Определяем диурез, выявляем синдром Пастернацкого.

Обследование нервно-психической системы

Выявляем менингеальные симптомы.

Менингеалъный синдром — комплекс клинических симптомов, говорящий о воспалении мозговых оболочек (при менингите). Это общемозговые и обол очечные симптомы. Обол очечные симптомы — показания для люмбальной пункции (LP). Первичный менингит может быть при менингококковой инфекции, энцефалите (при боррелиозе, клещевом энцефалите). Должно быть исследование спинномозговой жидкости. В ликворе увеличение лимфоцитов (при серозном менингите), увеличение нейтрофильных лейкоцитов (при гнойном менингите). Вторичные менингиты — это осложнения.

Обследование сердечно-сосудистой системы (пульс, артериальное давление, жалобы).

Симптомы, имеющие диагностическое значение.

Особо патогномоничные симптомы:

• пятна Вельского — характерны для кори;
• тризм;
• характерный карбункул;
• характер стула — скудный, со слизью, кровью (при шигеллезах);
• менингеальные симптомы;
• осмотр ротоглотки, миндалин, образование налетов — при мононуклеозе, скарлатине, дифтерии;
• распространение налетов за миндалины — при дифтерии;
• вовлечение опорно-двигательного аппарата — при бруцеллезе, иерсиниозе, полиомиелите;
• вид языка — при скарлатине, брюшном тифе;
• состояние живота: вздутие, урчание, боль, чувствительность сигмы;
• цвет мочи — при вирусных гепатитах, ГЛПС, лептоспирозах;
• изменение зрения — при ботулизме.

Лабораторные методы:

• методы прямого обнаружения микроорганизмов — бактериологический, бактериоскопический, молекулярно-генетический;
• методы косвенного обнаружения микроорганизмов — серологический, иммунологический, аллергический, гистологический, биологический. Результаты зависят от правильного забора материала, хранения, доставки.

Бактериоскопический метод — для исследования используют кровь, слизь, ликвор, пунктат бубонов, фекалии. Полученные мазки (отпечатки) окрашивают, получают результат через несколько часов.

• Можно флюорохромами пометить специфические сыворотки — это иммунофлюоресцентный метод. Исследование толстой капли.
• Риноцитологическое исследование — отпечатки, полученные на стекле, обрабатывают специальными красками и под микроскопом определяют клеточный состав и внутриклеточные включения. Отсморкать содержимое носа и ввести в носовой ход на 2-3 см стекло из плексигласа, прижать его к перегородке носа.
• Смывы из носоглотки (грипп, ОРВИ) — трехкратно прополоскать рот стерильным физиологическим раствором по 10 мл, стенку глотки протереть тампоном, который потом следует поместить в стерильную банку.

Бактериологический метод.

• Посев крови проводят с соблюдением асептики.
• Взятие кала проводят сразу после дефекации не более 10 г шпателем, палочкой или специальной петлей. Брать гной, пленки, слизь, а не кровь, и быстро доставить в лабораторию.
• Взятие ликвора (спинномозговая жидкость) — проводится только врачом (люмбальная пункция — LP). Избегать минусовых температур.
• Взятие желчи: забор осуществляется при зондировании, порции А, В, С. Доставить необходимо не позже 1-2 часов.
• Взятие мочи: забирают средние порции 3-5 мл в посуду. (Катетером брать мочу не рекомендуется, но если его применяют, то опорожняют с помощью катетера мочевой пузырь, промывают антибиотиками и через 10 минут берут пробу.) Если инфекция в почках, то во всех порциях получат микроорганизмы, а если в мочевом пузыре, то получат стерильную мочу. Доставить за 1-2 часа в бактериологическую лабораторию. Иногда мочу хранят в холодильнике до суток.
• Взятие мокроты проводится в стерильную банку натощак во время кашля утром.
• Взятие материала из глаз проводится с пораженных мест с соблюдением правил асептики. Берет материал врач-окулист.

Ресницы не должны касаться тампона.

С края век гной забирают пинцетом из язвочки.

При заборе из ушей сначала кожу наружного уха обработать 70° спиртом и промыть физиологическим раствором, потом собрать материал на ватный тампон.

Серологический метод. Кровь забирают на 5-7-й день. Повторно забирают через 5-7 дней при бактериальной инфекции, а при вирусной — через 10-12 дней.

Метод иммунофлюоресценции — обнаруживают специфические антигены возбудителя в сыворотке, моче, слюне.

Метод ПЦР — обнаруживают генетический материал возбудителя в крови больного.

Внутрикожная аллергическая проба проводится при бруцеллезе, сибирской язве, туляремии, орнитозе, токсоплазмозе, сапе, лепре. Так как в организме больного развивается сенсибилизация к антигенам возбудителя, при введении этих антигенов больным на месте внутрикожного введения аллергена (бруцеллин, антраксин, тулярин, токсоплазмин, маллеин, лепромин и др.) будет покраснение и инфильтрат.

Внутрикожная проба положительна с 8-10-го дня болезни и сохраняется месяцы и годы. Учет через 24-48 часов. Если результат (покраснение, инфильтрат) больше 6 см, увеличение лимфоузлов, повышение температуры — проба положительная. Если появляется только гиперемия и инфильтрат, который исчезает через 24 часа, — проба отрицательная. Результат 3-6 см — резко положительная, 1-3 см — слабо положительная, если результат меньше 1 см — сомнительная. Это вспомогательный метод диагностики, он говорит не о заболевании, а только о сенсибилизации. Пробы могут быть положительные у переболевших, у вакцинированных и ревакцинированных.

Инструментальные методы: ректороманоскопия (RRS), колоноскопия, лапароскопия, УЗИ, рентгенологическое исследование, томографическое сканирование, радиоизотопное исследование.

Анализы на кишечную инфекцию – распространенный вид лабораторного исследования, позволяющий выявить наличие патогенных микроорганизмов в желудочно-кишечном тракте.

Диагностический метод применяют при проявлении характерных симптомов кишечной инфекции, а также во время периодических медицинских осмотров. Данные анализы позволяют не только выявить морфологическую принадлежность возбудителей заболевания, но и определить чувствительность к различным группам антибиотиков.

Показания к исследованию

Анализы на наличие кишечной инфекции назначают в случаях проявления симптоматики, которая указывает на присутствие возбудителя бактериальной природы:

• кишечной палочки;
• стафилококка;
• сальмонеллы, провоцирующей развитие брюшного тифа.

На наличие того или иного возбудителя в желудочно-кишечном тракте укажут следующие симптомы:

При совокупности перечисленных характерных симптомов необходима срочная консультация врача инфекциониста, который назначит необходимые лабораторные исследования.

Как определяют

Анализы на кишечные инфекции, в том числе стафилококк и брюшной тиф – лабораторные методы исследования у детей и взрослых, которые позволяют выявить конкретного возбудителя инфекции и определить тактику дальнейшего лечения.

В качестве биоматериала для изучения применяют каловые массы. Однако, в случае диагностирования брюшного тифа используют сыворотку крови, т. к. исследование испражнений обладает малой чувствительностью и позволяет выявить возбудителя у 30-40% пациентов.

Наличие патогенной флоры в каловых массах определяют с помощью лабораторных методов, состоящих из 2 видов исследований:

• бактериологические;
• микроскопические.

Бактериологический анализ каловых масс считается наиболее точным методом для определения конкретного возбудителя инфекции. Для проведения исследования часть взятого материала помещают в специальные питательные среды, в условиях которых происходит активное размножение бактерий в течение 5 дней.

После окончания взращивания колоний определяют характер их роста и принадлежность к определенным видам инфекций. На выращенных колониях проводят тест на чувствительность к антибиотикам или бактериофагам. Стоимость анализа варьируется от 450 до 850 руб.

Микроскопические исследования проводят с помощью микроскопа. Для этого образец кала размешивают с водой, а затем образовавшуюся смесь по капле наносят на предметное стекло, где с помощью нативного материала определяют патологические элементы.

При диагностировании кишечной инфекции, вызванной стафилококками, применяют микроскопию кала, окрашенного по Граму.

Суть анализа заключается в окрашивании образцов биоматериала специальным набором красителей, с помощью которых определяют принадлежность бактерий к грамположительным или грамотрицательным. При наличии стафилококка в мазках будут выявлены грамположительные кокки. Стоимость исследования – от 580 руб.

В случаях, когда инфекция в кишечнике спровоцирован вирусом или простейшими микроорганизмами, анализ на кишечную группу может не обладать достаточной информативностью. Тогда проводят полимерную цепную реакцию (ПЦР-диагностику) кала – диагностический метод, позволяющий в течение 1 суток выявить или опровергнуть наличие желудочно-кишечной инфекции.

ПЦР относят к молекулярно-генетическому исследованию, при котором происходит выделение РНК/ДНК болезнетворных организмов и увеличение их численности с дальнейшим распознаванием. Стоимость комплексного анализа на определение главных возбудителей составляет 1200 руб. и выше.

К дополнительным методам исследования инфекции у детей и взрослых относят бак посев и серологическое исследование крови, позволяющее выявить антитела к возбудителям. Подобные анализы только косвенно указывают на наличие инфекционного процесса, поэтому не используются в качестве основного метода диагностирования.

Подготовка и проведение анализа

Анализы на кишечную инфекцию требуют тщательной подготовки, чтобы не допустить получения недостоверных результатов. Перед проведением исследования пациенты отказываются от приема препаратов, соблюдают специальную диету и правила сбора биологического материала.

Основные правила сбора кала распространены на все виды лабораторных исследований и считаются общепринятыми:

• Для сбора биоматериала используют только стерильную посуду – пластиковую тару, приобретенную в аптеке или стерилизованную стеклянную баночку.
• Сбор каловых масс для исследования осуществляют в утреннее время после проведения гигиены внешних половых органов. Если сдача анализа необходима ребенку, его предварительно подмывают и предлагают помочиться.
• После естественной дефекации кал собирают с чистой поверхности, чтобы избежать заселение материала посторонними микроорганизмами. Запрещено брать каловые массы из унитаза. Сбор материла у детей грудного возраста осуществляют с поверхности подгузника.
• Для исследования необходимо около 20 г каловых масс, взятых со средней части биоматериала.
• Присутствующие в кале гнойные выделения и слизь также собирают для проведения исследования.
• Для более точного результата, кал нужно доставить в течение 2 ч после сбора. При отсутствии такой возможности, собранный материал можно хранить в холодильнике не более 4 ч.

Если забор биоматериала производит медицинский сотрудник в условиях стационара, то процесс сопровождается следующими манипуляциями:

1. Пациента укладывают на кушетку в положении согнутых к животу ног.
2. Для сбора биологического образца используют стерильную пробирку с петлей, помещенной в специальный раствор.
3. С помощью петли проникают в прямую кишку пациента на глубину 4-5 см – у взрослых, и 2-3 см – у детей. Затем петлю извлекают и помещают в пробирку с раствором.

Собранный материал доставляют в лабораторию сразу после проведения всех манипуляций. Допускается хранение образца в пробирке в течение 24 ч при температуре 2-4°С.

Анализ на кишечные инфекции

Анализ на кишечные инфекции требует от пациента тщательной подготовки, чтобы избежать получение недостоверных результатов:

• За 7 дней до забора кала отказаться от приема антибактериальных препаратов и слабительных средств;
• 3а 3 дня до проведения исследования внести корректировки в питании, отказавшись от продуктов, провоцирующих брожение в кишечнике. К таким продуктам относят: бобовые, мясо и рыба, капуста, мучные и хлебобулочные изделия. Запрещено также употреблять алкоголь.
• В течение последних 3 суток перед сдачей кала не пользоваться ректальными суппозиториями.
• В день сбора кала не использовать промывные клизмы.

Собранный сразу после акта дефекации кал без примесей мочи в стерильной таре отправляют в лабораторию. Каловые массы засевают на твердые цветные среды. Если образец кала был собран на тампон в условиях стационара, его наносят на твердую среду, а затем рассеивают с помощью шпателя. Затем посевы отправляют в термостат и содержат при температуре 37°С в течение 24 ч.

Спустя сутки выращенные колонии осматривают с помощью микроскопа, изучая культурные признаки бактерий. Затем выявленные бактериологические колонии окрашивают по Граму для того, чтобы пересеять их на другие специфические среды для дальнейшего взращивания чистых культур возбудителя.

На 5-7 сутки исследования происходит идентификация выделенной чистой культуры с дальнейшим изучением биохимических свойств бактерий. Окончательные результаты анализов получают спустя неделю после сдачи материала.

Анализ на стафилококк

Развитие кишечной инфекции стафилококковой природы провоцирует золотистый стафилококк. Для выявления его наличия используют бактериологические и бактериоскопические методы исследования. Материалом для изучения являются каловые массы, сбор которых осуществляется после выполнения всех условий подготовки.

За 3 суток до проведения исследования пациентам необходимо отказаться от приема следующих групп препаратов:

• железосодержащие;
• энтеросорбенты;
• слабительные;
• антибиотики широкого спектра действий.

Биоматериал собирают в утреннее время после естественной дефекации и в течение 2-3 ч. доставляют в лабораторию в стерильной таре.

После того как образцы каловых масс попадают в лабораторию, их подвергают бактериоскопии с применением окрашивания по Грамму. О наличие стафилококковой инфекции будет свидетельствовать выявление кокков, расположенных группами по 2-3 бактерии в виде гроздьев винограда.

Далее проводят бактериологической исследование. Собранный биоматериал засеивают на 2 питательные среды – желточно-солевой и кровяной агар. Затем засеянные среды инкубируют в течение суток при температуре 37°С.

На вторые сутки оценивают характер роста колоний. На желточно-солевом агаре размещены стафилококковые колонии золотистого или белого цвета, с гладкой поверхностью и ровными краями. На кровяном агаре по периметру расположения колоний образуются зоны разрушения эритроцитов.

Высеянные колонии на обоих средах окрашивают по Граму и изучают с помощью микроскопии. На 3 день исследования определяют вид стафилококковой инфекции и ее чувствительность к антибиотикам.

Анализ на брюшной тиф

Возбудителем брюшного тифа являются бактерии рода Сальмонелла.

Для диагностики наличия инфекции в организме выбирают бактериологическое исследование, биоматериалом для которого выступает:

• сыворотка крови;
• каловые массы;
• урина;
• желчь;
• костный мозг.

Наибольшей информативностью в первую неделю заболевания обладает бактериологический анализ крови, забор которой осуществляется из вены.

Перед проведением диагностики пациенту необходимо пройти подготовку:

1. За 3 суток до сдачи анализа прекращают прием всех медикаментов.
2. В день сбора крови запрещено курить и употреблять спиртные напитки.
3. За 1 сутки до проведения исследования отказаться от приема острой, жирной пищи.
4. Анализ проводят натощак либо не раньше, чем через 4 ч. после последнего приема пищи.

Проведение исследование осуществляется поэтапно:

1. Взятую венозную кровь в объеме 15-20 мл засеивают на специальную среду Рапопорта в соотношении 1:10 (на 10 мл среды 1 мл крови).
2. Полученные посевы помещают в термостат при температуре 37°С на 18-24 ч.
3. Спустя сутки бактерии пересеивают на среду Левина. Бактерии подозрительного характера, имеющие черный или прозрачный цвет, повторно сеют на агар.
4. На образованной среде происходит распознавание сальмонелл по характерным признакам: способности расщеплять глюкозу с образованием кислоты.

В качестве дополнительного метода диагностики проводят общий анализ крови. На наличие в организме сальмонеллы, провоцирующей брюшной тиф, укажет лейкопения и высокая СОЭ, обнаруженные собранном биоматериале.

Бактериологическое исследование испражнений возможно только со 2-й недели заболевания, так как именно в этот период в посевах материала можно обнаружить брюшнотифозные палочки.

Расшифровка результатов

Анализы на кишечную инфекцию позволяют получить результаты спустя 3-7 дней после проведения исследования. Они представлены в форме специальных бланков, на которых в виде таблицы подана информация о наличии полезных, условно-патогенных и патогенных бактерий. Количественное содержание микроорганизмов указано в степенях.

Для того, чтобы расшифровать полученный результат, необходимо сравнить его с показателями общепринятых нормативов.

В норме в кишечнике здорового человека обитают:

• бифидобактерии;
• бактероиды;
• лактобактерии;
• кишечная палочка;
• энтерококки;
• бациллы;
• клостридии;
• пептококки;
• сапрофитный и эпидермальный стафилококки.

Нормы показателей при этом будут отличатся в зависимости от возраста пациента.

О наличии инфекционного процесса будет свидетельствовать заполненная графа рядом с разделом «патогенная микрофлора».

Анализы на кишечную инфекцию в норме

В таком случае будет указан один из видов патогенных бактерий:

• шигелла;
• сальмонелла;
• холерный вибрион;
• золотистый стафилококк.

При выявлении кишечной палочки стоить обратить внимание на указанный штамм. Так, некоторые кишечные палочки являются патогенными и провоцируют развитие инфекционных процессов.

Когда необходимо обратиться к врачу

О необходимости обращения к врачу станет известно после получения результатов анализа. В случае, если в ходе исследования в микрофлоре кишечника были выявлены патогенные организмы, нужно обратиться к участковому терапевту.

Анализы на кишечную инфекцию, содержащие положительные результаты на наличие сальмонеллы, золотистого стафилококка, патогенной кишечной палочки или холерного вибриона, требуют дальнейшей расшифровки врачом инфекционистом.

Если помимо результатов анализа, у пациента наблюдаются признаки интоксикации организма, повышение температуры или усиливающаяся диарея, необходима срочная госпитализация в инфекционное отделение.

Возможные осложнения

Основные осложнения, вызванные длительным течением кишечной инфекции, связаны с обезвоживанием организма на фоне быстрой потери жидкости из-за усиливающихся диареи и рвоты. Особенно это касается пациентов детского возраста, для которых выраженное обезвоживание в короткие сроки приводит к гиповолемическому шоку и почечной недостаточности.

К другим последствиям кишечной инфекции относят генерализацию патологического процесса в других органах, которая может спровоцировать:

• сепсис;
• ДВС-синдром;
• развитие острой сердечной недостаточности;
• отек легких.

Достаточно распространенным осложнением кишечной инфекции является инфекционно-токсический шок, развивающийся вследствие повышения температуры.

Анализы на кишечную инфекцию – диагностический метод, состоящий из бактериологических, микроскопических и серологических исследований. Метод используют для выявления опасных возбудителей, провоцирующих развитие острых кишечных инфекций бактериальной природы. На основании результатов собранных анализов пациентам назначается лечение с применением антибактериальной терапии.

Оформление статьи: Владимир Великий

Видео о кишечных инфекция

Кишечная палочка в анализах: