Чувствительность теста пцр гепатит с
ПЦР анализ
Анализ РНК HCV (определение РНК вируса гепатита С), часто называемый анализ ПЦР гепатита С — это исследование крови, позволяющее выявить непосредственно генетический материал вируса гепатита (каждый вирус — это одна частица РНК). Этот тест чаще всего выполняется методом ПЦР, — отсюда и название ПЦР гепатита С. Существуют качественный и количественный анализы на РНК ВГС.
Качественный анализ указывает на наличие вируса в крови. Данный тест необходимо проводить всем пациентам, у кого обнаружены антитела к гепатиту С. Его результат может быть «обнаружено» или «не обнаружено». Референсные значения (значение, которое должно быть в норме) — «не обнаружено». Результат «обнаружено» может свидетельствовать о том, что вирус размножается и инфицирует все новые клетки печени. Качественный тест ПЦР имеет определенную чувствительность (10-500 МЕ/мл.). Это означает то, если вирус присутствует в крови в очень малой концентрации (ниже порога чувствительности метода), может быть получен результат «не обнаружено». Поэтому, при проведении качественного ПЦР у пациентов с низкой виремией (концентрацией вируса), например, проходящих противовирусную терапию, важно знать чувствительность диагностической системы. Для контроля вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии желательно использовать диагностическую систему с чувствительностью не ниже 50 МЕ/мл. Таким критериям соответствуют, например, анализаторы COBAS AMPLICOR ВГС-TEST (аналитическая чувствительность 50 МЕ/мл или 100 копий/мл), РеалБест РНК ВГС (аналитическая чувствительность 15 МЕ/мл или 38 копий/мл) и другие.
Где безопасно купить новые препараты для лечения гепатита C? На наш взгляд, самый оптимальный и надёжный способ — это воспользоваться услугами проверенных годами поставщиков на нашем форуме, которые уже помогли избавиться от этого заболевания сотням пациентов.
Стоимость пцр
ПЦР анализ, стоимость которого зависит от применяемых реактивов, и может составлять от 300 руб. до 5000 руб., выполняется от одних суток до недели.
Кроме метода ПЦР для выявления РНК ВГС также используется метод транскрипционной амплификации (ТМА), обладающий лучшей чувствительностью (порядка 5-10 МЕ/мл.), однако этот метод в России пока не распространен.
Как часто нужно делать ПЦР гепатита C? Обычно его проводят сразу после обнаружения антител к гепатиту C и после 4-й, 12-й, 24-й недели противовирусной терапии, а также через 24 недели после завершения ПВТ, а затем — ежегодно, в случае УВО.
Рис. 1. Пример результатов качественного ПЦР гепатита С.
Количественный анализ ПЦР (вирусная нагрузка) — это тест на концентрацию вируса (виремию) в крови. Вирусная нагрузка — это количество единиц генетического материала (вирусной РНК), которая присутствует в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Количество вируса может быть отображено по-разному. Например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 106 МЕ/мл. В некоторых лабораториях используются другие единицы измерения — копии/мл. Коэффициент пересчета из копий в международные единицы различный для разных тест-систем. Примерно значения можно пересчитать по формуле 1 МЕ/мл = 4 копии/мл, например, 5.5* 105 МЕ/мл = 2.2* 106 копий/мл.
Важно знать, что не существует прямой связи между концентрацией вируса в крови и тяжестью гепатита С.
На что же влияет вирусная нагрузка?
Во-первых, на инфекционность. Чем выше концентрация вируса, тем выше риск передать вирус, например, при половых контактах или вертикальным путем. Во-вторых, концентрация вируса влияет на эффективность лечения (если лечение будет проводиться на основе интерферона). Так, низкая вирусная нагрузка является благоприятным фактором при проведении терапии, а очень высокая – неблагоприятным. Также, количественный ПЦР имеет большое значение при проведении интерфероновой терапии для оценки ее успешности и планировании длительности курса. Так, при быстром ответе на лечение и низкой виремии перед терапией, сроки лечения могут быть сокращены. И, наоборот, при медленном снижении концентрации вируса, ПВТ может быть продлена.
Какая нагрузка считается низкой, а какая — высокой?
Высокой принято считать нагрузку свыше 800 *103 или 800.000 ME/мл, что примерно составляет 300*104 или 3.000.000 копий /мл. Нагрузка свыше 1*107 ME/мл считается очень высокой. Однако до сих пор среди специалистов нет общего мнения о значениях, разграничивающих высокую и низкую виремию. Так, в некоторых работах этой границей считается цифра 400.000 ME/мл.
Как часто нужно делать количественный тест?
Обычно его делают перед проведением терапии и после 12-й недели лечения для оценки ее эффективности в случае, если качественным тестом РНК еще определяется.
Результатом количественного теста может быть количественная оценка виремии в формате, описанном выше, а также результаты «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено».
Порог чувствительности количественного ПЦР обычно выше, чем качественного. Так, для системы COBAS AMPLICOR он составляет 600 ME/мл. Результат «не обнаружено» может означать, что количественный тест и подтверждающий качественный тест не обнаружил вирусную РНК. Результат «ниже диапазона измерений» означает, что количественный тест не выявил РНК гепатита С, но вирус присутствует в очень малой концентрации (в случае, если при этом был проведен дополнительный подтверждающий качественный тест).
Рис.2 Пример результатов количественного теста.
Источник
Модераторы: Werwert, Vitek, bobcat2, VeraVEK, Модераторы
future23
Сообщения: 3 Зарегистрирован: 17 июн 2014, 08:31
Возраст: 35
Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1905254Сообщение
future23
17 июн 2014, 09:15
Доброго времени суток, Уважаемые!
Не знал в какой раздел затолкать тему, решил сюда, просьба не наказывайте.
Считаю на форуме не хватает раздела, посвященного «Анализам/Исследованию ВГС»
К делу…
История:
Я из Перми. 10 лет назад у меня впервые обнаружили антитела к ВГС.
7 лет я состоял на учете в Краевом Гепатоцентре. Меня оттуда как бы списали, потому что у меня ни разу за эти 10 лет не был выявлен ВГС в крови методом ПЦР. ПЦР контролировался 2 раза в год. Фиброскан в 2012 году показывал F0 с очень большой вероятностью. Сам для себя я решил что попал в число тех 15-20% счастливчиков, иммунитет организма которых сам победил вирус. Данное умозаключение я сделал на основании в том числе того что врач ГЦ мне сказала что антитела могут определяться еще очень и очень долго если однажды организм столкнулся с вирусом.
Недавно я сдал ПЦР в лаборатории KDL. Он оказался положительным с примечанием «Аналитическая чувствительность: 15 МЕ/мл» (что является достаточно точным).
Пересдал в Invitro. Результат отрицательный. Чувствительность метода мне пока не известна (задал вопрос на сайте).
Сдал еще раз в краевой инфекционной больнице на всякий что говорится. Там правда чувствительность со слов доктора составляет 250 МЕ/мл. Но Гепатоцентр всегда верит им если возникают споры.
Врач с которым я общался в краевой инфекционной больнице буквально в коридоре сказал что «у точных методом много ложных индикаций и не всегда возможно определить генотип, а количественный анализ скорее всего покажет 0».
Вопросы:
1. Что все таки считать есть у меня ВГС или нет?
2. Можно ли с чем то спутать ВГС при исследовании? (У меня в 2 раза превышает IgE)
Тема исключительно важная для меня.
Кто нибудь сталкивался с такими вопросами?
Alemadasja
Pigалица
Сообщения: 37282 Зарегистрирован: 17 июн 2012, 15:46
Генотип: 1
Откуда: Central Europe
Возраст: 39
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1905256Сообщение
Alemadasja
17 июн 2014, 09:19
future23 писал(а):. Что все таки считать есть у меня ВГС или нет?
Никто однозначно не ответит на этот вопрос. Попробуйте определить в KDL генотип и количество.
Биопсия 08.2012 — F1 А1.
Фиброскан 07.2016 — F2 (9кПа)
Дневничок. SOF+LDV c 08.08.2016
Все приходит к тому, кто умеет ждать…
Summersun
.
Сообщения: 1814 Зарегистрирован: 07 дек 2013, 10:10
Генотип: 3
Откуда: Киев
Возраст: 40
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1905264Сообщение
Summersun
17 июн 2014, 09:27
ну да, количество собственно все и покажет. Думаю что покажет «не выявлено» )
Гепс с 2001. /28.07.2014 —F0 (фиброскан 4,3 Кпа)
Пвт начата 04.12.13 пегинтрон 120, ребетол 1000
1,7н (-) 5н (-) 7н (-) Бросил терапию, очень плохо себя чувствовал. И 4 месяца спустя минус и 4 года спустя не найден!
Мемуары
ОСТРЯК
….
Сообщения: 4218 Зарегистрирован: 13 янв 2012, 01:10
Генотип: 3a
Откуда: с питера и геленджика
Возраст: 43
олеся
..
Сообщения: 2342 Зарегистрирован: 07 янв 2006, 17:29
Генотип: 1b
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906105Сообщение
олеся
18 июн 2014, 19:57
надо пересдать в KDL еще раз. 250МЕ/мл — слишком нечувствительный анализ.
В Инвитро, если вы не Рошевском тесте делали анализ , чувствительность 60МЕ/мл.
Рошевский или нет можно определить по цене. Первый очень дорогой, от 10 тыс.
1b, 2012г. F1-2 (биопсия), 2013 F0 фиброскан
IL 28B TC и GT
24.08.12 пегасис+рибавирин-07.12.12 неответ
Мой дневничок
30.05.14 Совальди+Совриад
14 д. «-«, 27 д. «-«, 40д.»-«
4 недели после «-«
X-SAGA 2014
,
Сообщения: 320 Зарегистрирован: 09 мар 2014, 11:58
Генотип: 1b
Возраст: 40
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906182Сообщение
X-SAGA 2014
18 июн 2014, 23:29
Я недавно сдавала пцр качест-й в КДЛ,чувствительность теста 15ме.Бывают ли тесты с большей чувствительностью,интересно?Например-10ме или 5ме.
Геп. С, 1. вирус. нагруз- 2* 10^ 6ме. фиброскан- 2ф, биопсия- 0-1ф. ИЛ- 28- СТ/ТТ. ПВТ с 11. 03. 14г. Альгерон-90,рибавирин-1000. Минус с 12нед-48нед.Возврат ч/з 3мес.
Майна
Сообщения: 8 Зарегистрирован: 14 июн 2014, 07:04
Генотип: 1
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906475Сообщение
Майна
19 июн 2014, 16:35
Alemadasja
Первым признаком гепатита является утомляемость, которая постепенно нарастает, сопровождается слабостью и сонливостью.
Наблюдается изменение цикла сна: сонливость в дневное время сменяется ночной бессонницей, что может быть первым признаком начинающейся печеночной энцефалопатии.
Присоединяется отсутствие аппетита, тошнота, вздутие живота, рвота.
Alemadasja
Pigалица
Сообщения: 37282 Зарегистрирован: 17 июн 2012, 15:46
Генотип: 1
Откуда: Central Europe
Возраст: 39
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906487Сообщение
Alemadasja
19 июн 2014, 16:48
Майна, а что делать, если этих признаков нет? гепатита тоже нет?
Про энцефалопатию — это совсем круто. От заражения до последней стадии может несколько десятков лет пройти, а о гепатите можно и не знать.
Биопсия 08.2012 — F1 А1.
Фиброскан 07.2016 — F2 (9кПа)
Дневничок. SOF+LDV c 08.08.2016
Все приходит к тому, кто умеет ждать…
Майна
Сообщения: 8 Зарегистрирован: 14 июн 2014, 07:04
Генотип: 1
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906506Сообщение
Майна
19 июн 2014, 17:39
Эх,Alemadasja, у меня почти такая же ситуация, как у future23. Сначала выявили гепС, 1 ген, ПЦР +, а потом и ИФА, и ПЦР отрицательные — многократно. Возможно, это латентное течение гепС и вирус сидит в печёнке и здорово замаскировался. У меня, похоже, уже признаки цирроза имеются.
Alemadasja
Pigалица
Сообщения: 37282 Зарегистрирован: 17 июн 2012, 15:46
Генотип: 1
Откуда: Central Europe
Возраст: 39
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906507Сообщение
Alemadasja
19 июн 2014, 17:40
Майна писал(а):У меня, похоже, уже признаки цирроза имеются.
Так кроме гепСа ведь еще множество заболеваний печени сушествует, способных провести к циррозу.
Биопсия 08.2012 — F1 А1.
Фиброскан 07.2016 — F2 (9кПа)
Дневничок. SOF+LDV c 08.08.2016
Все приходит к тому, кто умеет ждать…
олеся
..
Сообщения: 2342 Зарегистрирован: 07 янв 2006, 17:29
Генотип: 1b
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906527Сообщение
олеся
19 июн 2014, 18:44
Майна
может и исчезнуть. Спонтанное выздоровление называется.
Гепатит В ведь тоже таким же образом может исчезнуть. У меня исчез, остались анти-HBs.
1b, 2012г. F1-2 (биопсия), 2013 F0 фиброскан
IL 28B TC и GT
24.08.12 пегасис+рибавирин-07.12.12 неответ
Мой дневничок
30.05.14 Совальди+Совриад
14 д. «-«, 27 д. «-«, 40д.»-«
4 недели после «-«
Alemadasja
Pigалица
Сообщения: 37282 Зарегистрирован: 17 июн 2012, 15:46
Генотип: 1
Откуда: Central Europe
Возраст: 39
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906558Сообщение
Alemadasja
19 июн 2014, 19:54
Майна писал(а):как мог вирус без лечения исчезнуть и не оставить «следа»?
так, как это происходит у 20% заразившихся, что тут удивительного? симптомы цирроза и гепатита вы себе сами придумали?
гепатит Б вообще в 80% случаев сам уходит, и слава Богу! 🙂
Биопсия 08.2012 — F1 А1.
Фиброскан 07.2016 — F2 (9кПа)
Дневничок. SOF+LDV c 08.08.2016
Все приходит к тому, кто умеет ждать…
future23
Сообщения: 3 Зарегистрирован: 17 июн 2014, 08:31
Возраст: 35
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906653Сообщение
future23
20 июн 2014, 06:00
в лаборатории МедЛабЭкспресс, в которой я делал анализы ПЦР на протяжении около 7 лет, аналитическая чувствительность составляет от 150МЕ/мл (или 300 копий вируса в мл со слов врача МедЛабЭкспресса)…
В KDL точнее в 10 раз получается (от 15 МЕ/мл)
В Инвитро на сайте так и не ответили… жду.. но со слов Олеси это от 60МЕ/мл…
Это все касается в Перми (хотя Инвитро возит в Москву)
PS Появились реальные опасения что вирус все таки есть и он попадает в кровь ((
PPS Кто помнит как пересчитать в из МЕ/мл в копий/мл ?
== 20 июн 2014, 11:10 ==
Георгий , что скажешь?
До врача еще не дошел… сам ничего не понимаю…
Anti-HCV — 3.58
core — 20.01
NS 3 — 19.12
NS 4 — 20.75
NS 5 — 4.80
Alemadasja
Pigалица
Сообщения: 37282 Зарегистрирован: 17 июн 2012, 15:46
Генотип: 1
Откуда: Central Europe
Возраст: 39
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906772Сообщение
Alemadasja
20 июн 2014, 10:27
future23 писал(а):S Кто помнит как пересчитать в из МЕ/мл в копий/мл ?
зачем тебе копии? информативнее именно МЕ
а вообще коэффициенты для пересчета разные, от 1,5 до 5,7 — в зависимости от тест-системы, это надо в лабе уточнять
Биопсия 08.2012 — F1 А1.
Фиброскан 07.2016 — F2 (9кПа)
Дневничок. SOF+LDV c 08.08.2016
Все приходит к тому, кто умеет ждать…
олеся
..
Сообщения: 2342 Зарегистрирован: 07 янв 2006, 17:29
Генотип: 1b
Re: Чувствительность метода ПЦР
Сообщение: # 1906803Сообщение
олеся
20 июн 2014, 11:08
future23
везде коэффициент разный пересчета.
В Инвитро умножай на 2,5 и получишь копии. Кстати, в описании анализа на их сайте Инвитро указана и чувствительность и как пересчитывать.
1b, 2012г. F1-2 (биопсия), 2013 F0 фиброскан
IL 28B TC и GT
24.08.12 пегасис+рибавирин-07.12.12 неответ
Мой дневничок
30.05.14 Совальди+Совриад
14 д. «-«, 27 д. «-«, 40д.»-«
4 недели после «-«
Кто сейчас на конференции
Сейчас этот форум просматривают: Sneginka156
Источник
РНК-вирус проникает в клетки печени и вызывает болезнь – гепатит С. Заболевание проходит в острой и хронической форме. Для него характерно протекание без видимых признаков. Такое течение объясняется высокой способностью вируса к мутации и появлению различных видов. Это помогает патогену приспосабливаться к организму хозяина и ускользать от иммунной защиты.
Исследования на ранних стадиях развития не дает результата. Качественный анализ ПЦР на гепатит С проводят, чтобы выявить патоген, и начать вовремя лечение.
Что такое качественный анализ на гепатит С?
Гепатит С – серьезное заболевание, при хроническом развитии которого возникает цирроз и рак печени. Ученые длительное время не могут разработать вакцину от болезни, несмотря на изучение особенностей строения HCV. Многообразие видов патогена слабо поддается изучению.
Только с помощью лабораторных исследований можно обнаружить поражение органа, и предупредить инфицирование окружающих. С этой целью проводят качественный анализ ПЦР на гепатит С.
Носитель в течение многих лет может быть инфицирован и не подозревать о болезни. Качественный анализ предполагает проведение в лаборатории полимеразной цепной реакции крови пациента на наличие РНК вируса. Диагностика проводится на сверхчувствительном медицинском оборудовании, которое помогает его обнаружить.
Что показывает качественный анализ?
Качественное обследование с помощью ПЦР обладает достоинствами перед другими методами:
- даннй метод помогает выявить генетический материал патогена на ранних стадиях;
- показывает вид возбудителя;
- используется система тестов, нет необходимости высеивать материал в питательной среде;
- обладает высокой скоростью диагностики возбудителя: результат анализа будет готов через 5 часов;
- выявляет скрытую инфекцию.
Качественный анализ назначают при профилактическом осмотре, когда имеются показания на его проведение. Он проводится во время лечения, после выздоровления. С его помощью подтверждают наличие или отсутствие антител вируса гепатита С в крови.
ПЦР исследует:
- количественное содержание генотипа HCV;
- качественные характеристики вирусной РНК;
- генотипирование.
Диагностику проводят повторно для подтверждения результата с более чувствительным реагентом.
Показания к исследованию
Для проведения качественной ПЦР нужны предпосылки для ее назначения:
- сексуальная связь с лицом, который инфицирован вирусом гепатита;
- цирроз печени;
- обязательное обследование перед оперативным вмешательством;
- проведение вакцинации против вируса гепатита В;
- плановое обследование работников медицинских учреждений, садов, школ.
Если у пациента видны явные признаки гепатита:
- желтизна кожных покровов, белков глаз;
- боль в правом подреберье;
- усталость;
- увеличение в размерах печени;
- тошнота.
Вирус гепатита С проникает в клетки печени через кровеносные сосуды. Патоген может попасть при гемодиализе, при пользовании инфицированной иглой, при нанесении татуировки, в стоматологических и косметических кабинетах.
Возможна передача вируса новорожденному от инфицированной матери, если происходит травмирование кожи ребенка при родах. Качественный анализ выявляет вирус и указывает на второстепенные признаки: наличие в крови больного антител.
Расшифровка результатов
Врач-гепатолог или инфекционист проводит расшифровку результатов ПЦР и ИФА на гепатит С. Полученные данные подтверждаются комплексным обследованием:
- биохимическим анализом;
- УЗИ органа;
- биопсией печеночных тканей.
Опираясь на полученные данные, врач подтверждает или отрицает гепатит С.
Стандартная чувствительность теста на ПЦР колеблется в пределах 10-500 МЕ/мл. Анализ не дает результата, если она ниже указанного параметра.
Количественный анализ ПЦР показывает вирусную нагрузку: концентрацию патогена в человеческом организме (сколько фрагментов флававируса в 1 мл крови). Такой метод обследования назначают перед началом комплексной терапии и на 12 неделе заболевания. Он помогает:
- Выявить степень болезни. Если концентрация вируса в крови пациента высокая, возможна передача инфекции другим лицам.
- Назначить противовирусную терапию, выбрать нужный метод лечения.
- Сделать прогноз выздоравления.
Важно определить генотип, так как патоген постоянно мутирует и приспосабливается к организму. Известно 11 типов, на территории РФ выявлены три: 1, 2, 3. Обследование покажет тип вирусной инфекции.
При расшифровке пишут:
- РНК обнаружено;
- РНК не обнаружено (болезнь не выявлена);
- тип флававируса;
- количественный состав (концентрацию в крови);
- название теста.
РНК обнаружено
Если гепатит С обнаружен в биологическом материале пациента, врач назначает повторное исследование, чтобы исключить ошибку. Обследование биоматериала делают от 1 до 5 дней. Срок исполнения зависит от загруженности персонала.
Присутствие флававируса и антител к нему свидетельствует о продолжительном течении болезни, которая перешла в хроническую стадию. Ложные показания бывают у беременных женщин и у людей, имеющих другие инфекционные заболевания.
РНК не обнаружено
Качественный анализ не обнаружил гепатит С. Отрицательное значение означает, что в крови отсутствуют РНК вируса. Утомляемость и другие признаки возможно связаны с протеканием другой инфекции в организме и требуют дальнейшего изучения.
Что делать, если РНК вируса гепатита С обнаружено?
Если вирус обнаружен в крови, нельзя отчаиваться и впадать в панику. В 20 процентах болезнь излечивается самостоятельно. Антитела не всегда свидетельствует о том, что вы болеете гепатитом С. Случаются ошибки при лабораторных исследованиях. Доброкачественные и злокачественные опухоли, инфекционные очаги в организме, проведенная ранее вакцинация смазывают картину ПЦР.
Раннее обнаружение помогает вовремя остановить болезнь. Назначают противовирусную терапию. Препараты помогают вылечить хроническое заболевание в течение 3-6 месяцев.
Источник
