Core антитела к структурным белкам вируса гепатита с нормальные значения

[07-010]
Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С

550 руб.

Определение в крови иммуноглобулинов IgG к белкам вируса гепатита С, которое используется для диагностики этого заболевания.

Синонимы русские

Антитела к белкам гепатита С;

Антитела к ВГС.

Синонимы английские

Antibodies to structural and non-structural proteins of HCV;

Antibodies to HCV.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования;
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Гепатит С – вирусное заболевание печени, отличительной чертой которого является бессимптомное течение и высокая частота прогрессии в хронический гепатит, цирроз печени и гепатоцеллюлярную карциному. Основной путь передачи гепатита С – через кровь и ее компоненты. Группы риска по заражению ВГС:

  • Медицинские работники;
  • Люди, использующие инъекционные наркотики;
  • Пациенты с ВИЧ;
  • Люди, которым были сделаны татуировки с помощью нестерильных инструментов;
  • Пациенты, получившие переливание крови или ее компонентов до 1992 г.;
  • Пациенты, получившие трансфузию факторов свертывания крови до 1987 г.;
  • Пациенты, получающие лечение гемодиализом в течение длительного времени;
  • Дети, рождённые от матерей с ВГС.

Следует отметить, что по крайней мере в 20 % случаев источник заражения установить не удается. В России наблюдается рост заболеваемости гепатитом С: в период с 1999 по 2011 гг. заболеваемость хроническим ВГС выросла в 3 раза. Как правило, пациенты с ВГС не догадываются о своем заболевании.

Вирус гепатита С (ВГС) – РНК-вирус, принадлежащий семейству Flaviviridae. При транскрипции его генома образуется единый белок длиной около 3000 аминокислот, который затем разрезается с помощью пептидаз клетки-хозяина и вирусных пептидаз с образованием структурных и неструктурных белков:

  • Структурные белки (коровый белок, Е1 и Е2, от англ. envelope glycoproteins – гликопротеины оболочки) необходимы для формирования вирусного капсида;
  • Неструктурные белки (p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B, от англ. non-structural – неструктурные) выполняют различные регуляторные функции.

В ответ на заражение вирусом гепатита С в организме человека начинают вырабатываться антитела – иммуноглобулины M и G, которые можно исследовать для диагностики гепатита. Следует отметить, что при гепатите С синтез иммуноглобулинов М может наблюдаться на разных стадиях заболевания, как при остром, так и при хроническом гепатите, и поэтому не имеет никакого диагностического значения. Это важное отличие диагностики гепатита С от гепатита В (выявление иммуноглобулинов М при гепатите В наблюдается только в острую стадию). Таким образом, все серологические тесты для диагностики гепатита С основаны на выявлении иммуноглобулинов G к белкам этого вируса.

Структурные и неструктурные белки иммуногенны в разной степени. Показано, что наиболее выраженными иммуногенными свойствами обладают следующие белки (в скобках указан процент пациентов с хроническим гепатитом С, у которых в крови обнаруживаются антитела к указанному белку):

  • Коровый белок (97 %);
  • NS4B (86 %);
  • NS3 (68 %);
  • NS5A (53 %).

Менее иммуногенны белки E2 (31 %), NS4A(28 %) и E1 (22 %). NS2 и NS5B имеют очень слабые иммуногенные свойства, и антитела к ним у пациентов с ВГС выявляются редко.

Антитела к ВПС могут быть определены в крови приблизительно через 8 недель после первичного заражения. Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться у людей с иммунодефицитом (например, ВИЧ-инфицированных), почечной недостаточностью и эссенциальной смешанной криоглобулинемией. Ложноположительные результаты также встречаются.  

Вирусы гепатита С неоднородны по генетическому составу. На этом основании выделяют 6 генотипов ВПГ, геномы которых различаются на 30-35 %, и множество подтипов, различающихся на 20-25 %. В восточной Европе и США чаще встречаются генотипы 1a и 1b, тогда как для других стран характерны другие генотипы (например, Египет – генотип 4, Южная Африка – генотип 5). Показано, что иммунный ответ пациентов, инфицированных разными генотипами ВГС, различается. Это особенно справедливо в отношении антител к белкам E1, E2, NS3, NS4A и NS5A.

Качественный и количественный состав антител к ВГС у пациента остается достаточно постоянным в течение заболевания, в том числе и после проведенного лечения.

Антитела к гепатиту С – чувствительный, но недостаточно специфичный метод диагностики этого заболевания. Поэтому серологические тесты – это скрининговые тесты диагностики гепатита. При получении положительного результата исследования антител на гепатит С обязательно проводят подтверждающее исследование – анализ на РНК вируса с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР). Кроме того, при подтверждении диагноза «гепатит С» может понадобиться генотипирование ВГС и гистологическое исследование печени или неинвазивные методы определения состояния печени (такие как ФиброМакс).

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики гепатита С.

Когда назначается исследование?

  • При профилактическом обследовании, особенно если пациент принадлежит к группе риска по гепатиту С;
  • в некоторых случаях при устройстве на работу.
Читайте также:  Анализы вич гепатит в туле

Что означают результаты?

Референсные значения

Выдается по компонентам:

IgG к антигену core                                     

IgG к антигену NS3                                      

IgG к антигену NS4                       

IgG к антигену NS5

Результат: орицательный.

Положительный результат:

  • гепатит С;
  • ложноположительный результат (чаще у пациентов, не относящихся к группам риска, например доноров крови).

Отрицательный результат:

  • норма;
  • ложноотрицательный результат (сопутствующая ВИЧ-инфекция, почечная недостаточность, эссенциальная смешанная криоглобулинемия).

Что может влиять на результат?

  • Время, прошедшее с момента заражения;
  • Состояние иммунной системы;
  • Сопутствующие заболевания почек;
  • Генотип вируса гепатита С.



Важные замечания

  • Это скрининговый тест. При получении положительного результата необходим дополнительный, подтверждающий тест (определение РНК вируса с помощью ПЦР);
  • результаты анализа следует интерпретировать с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

[09-012] HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

[09-011] HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]

[09-010] HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР]

[12-016] Гистологическое исследование гепатобиоптата (биоптата печени) с использованием стандартных методик

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, врач общей практики.

Литература

  • Kamili S, Drobeniuc J, Araujo AC, Hayden TM. Laboratory diagnostics for hepatitis C virus infection. Clin Infect Dis. 2012 Jul;55 Suppl 1:S43-8.
  • Virol J. 2009 Jun 23;6:84. doi: 10.1186/1743-422X-6-84. Sillanpää M, Melén K, Porkka P, Fagerlund R, Nevalainen K, Lappalainen M, Julkunen. Hepatitis C virus core, NS3, NS4B and NS5A are the major immunogenic proteins in humoral immunity in chronic HCV infection.Virol J. 2009 Jun 23;6:84.
  • Стела Бивол, Аня Саранг. Гепатит С в России: эпидемия бездействия. Фонд содействия защите здоровья и социальной справедливости им. Андрея Рылькова, 2013.

Источник

Гепатит С продолжает распространяться в мире, несмотря на предлагаемые меры профилактики. Особая опасность, связанная с переходом в цирроз и рак печени, заставляет разрабатывать новые способы диагностики на ранних стадиях заболевания.

Антитела к гепатиту С представляют возможность изучения вируса-антигена и его свойств. Они позволяют выявить носителя инфекции, отличить его от больного заразного человека. Диагностика на основе антител к гепатиту С считается наиболее достоверным методом.

Неутешительная статистика

Статистика ВОЗ показывает, что сегодня в мире насчитывается около 75 млн людей, зараженных вирусным гепатитом С, свыше 80% из них — трудоспособного возраста. Ежегодно заболевают 1,7 млн.

Численность инфицированных людей составляет население таких стран, как Германия или Франция. Другими словами, каждый год в мире появляется город-миллионник, сплошь населенный зараженными людьми.

Предположительно, в России число инфицированных 4–5 млн человек, к ним ежегодно добавляется около 58 тыс. Практически это означает, что почти 4% населения заражены вирусом. Многие инфицированные и уже больные не знают о своей болезни. Ведь гепатит С длительно протекает бессимптомно.

Диагноз чаще ставится случайно, в качестве находки во время профилактического обследования или иного заболевания. Например, болезнь обнаруживается в период подготовки к плановой операции, когда кровь в соответствии со стандартами проверяют на различные инфекции. 

В итоге: из 4–5 млн вирусоносителей лишь 780 тысяч знают о своем диагнозе, а на учете у врача стоят 240 тысяч пациентов. Представьте себе ситуацию, когда заболевшая в период беременности мать, не зная о своем диагнозе, передает заболевание новорожденному малышу.

Аналогичная российская ситуация сохраняется в большинстве стран мира. Высоким уровнем диагностики (80–90%) отличаются Финляндия, Люксембург и Нидерланды.

Как образуются антитела к вирусу гепатита С?

Антитела формируются из белково-полисахаридных комплексов в ответ на внедрение в организм человека чужеродного микроорганизма. При гепатите С — это вирус с определенными свойствами. Он содержит собственную РНК (рибонуклеиновую кислоту), способен мутировать, размножаться в гепатоцитах печени и постепенно разрушать их.

Интересный момент: нельзя считать человека, у которого нашли антитела обязательно больным. Известны случаи, когда вирус внедряется в организм, но сильными иммунными клетками вытесняется без запуска цепи патологических реакций.

Свидетелями присутствия вируса в крови являются особые антитела, по наличию которых можно установить стадию заболевания, судить о последствиях активного гепатита.

Гепатит
Для заражения всегда необходим контакт с кровью больного человека

Инфицирование возможно:

  • во время переливания недостаточно стерильной крови и препаратов из нее;
  • при процедуре гемодиализа;
  • инъекциях многоразовыми шприцами (в том числе наркотиков);
  • оперативном вмешательстве;
  • стоматологических процедурах;
  • при производстве маникюра, педикюра, татуажа, пирсинга.

Незащищенный секс рассматривается как повышенный риск заражения. Особое значение придается пути передачи вируса от беременной матери к плоду. Шанс составляет до 7% случаев. Обнаружено, что при выявлении антител к вирусу гепатита С и ВИЧ-инфицирования у женщины вероятность заражения ребенка составляет 20%.

Что нужно знать о течении и последствиях?

При гепатите С острая форма наблюдается крайне редко, в основном (до 70% случаев) течение заболевания сразу приобретает хронический характер. Среди симптомов следует отметить:

  • повышенную слабость и усталость;
  • чувство тяжести в подреберье справа;
  • рост температуры тела;
  • желтушность кожи и слизистых;
  • тошноту;
  • снижение аппетита.
Читайте также:  Исход после лечения гепатита с

Для этого типа вирусного гепатита характерно преобладание легких и безжелтушных форм. В некоторых случаях проявления заболевания очень скудные (бессимптомное течение в 50–75% случаев).

Диагноз ставится на основании единственного признака — заключения анализа на антитела.

жизненный цикл вируса гепатита С
Парадокс заключается в том, что печеночная клетка сама «кормит» и помогает размножаться вирусу

Последствиями гепатита С являются:

  • печеночная недостаточность;
  • развитие цирроза печени с необратимыми изменениями (у каждого пятого больного);
  • выраженная портальная гипертензия;
  • раковое перерождение в гепатоцеллюлярную карциному.

Существующие варианты терапии не всегда предоставляют способы как избавиться от вируса. Присоединение осложнений оставляет надежду только на пересадку печени донора.

Что значит для диагностики наличие у человека антител к гепатиту С?

Чтобы исключить ложноположительный результат анализа на фоне отсутствия жалоб и признаков болезни, необходимо повторить исследование крови. Такая ситуация возникает нечасто, в основном при проведении профилактических осмотров.

Серьезное внимание вызывает выявление положительного теста на антитела к гепатиту С при повторных анализах. Это указывает, что такие изменения могут быть вызваны только присутствием вируса в гепатоцитах печени, подтверждает инфицированность человека.

Для дополнительной диагностики назначают биохимический анализ крови с определением уровня трансаминаз (аланиновой и аспарагиновой), билирубина, белка и фракций, протромбина, холестерина, липопротеидов и триглицеридов, то есть всех видов обмена веществ, в которых участвует печень.

Определение в крови наличия РНК вируса гепатита С (HCV), другого генетического материала с помощью полимеразной цепной реакции. Полученная информация о нарушенной функции печеночных клеток и подтверждение присутствия РНК НСV в сочетании с симптоматикой придает уверенность в диагнозе вирусного гепатита С.

Врач ставит диагноз
Окончательный диагноз ставит врач после ряда обследований

Генотипы вируса HCV

Изучение распространения вируса в разных странах позволило выделить 6 видов генотипа, они отличаются по структурной цепочке РНК:

  • №1 — распространен наиболее широко (40–80% случаев заражения), причем различают дополнительно 1а — доминирующий в США и 1b — на западе Европы и в Южной Азии;
  • №2 — встречается всюду, но реже (10–40%);
  • №3 — типичен для полуострова Индостан, Австралии, Шотландии;
  • №4 — поражает население Египта и Средней Азии;
  • №5 — характерен для стран Южной Африки;
  • №6 — локализован в Гонконге и Макао.

Кроме того, зарегистрировано более 80 субтипов генома. К каждому из них образуются антитела.

Разновидности антител к гепатиту С

Антитела к гепатиту С делятся на два основных вида иммуноглобулинов. IgM (иммуноглобулины «М», core IgM) — образуются на белок ядер вируса, начинают вырабатываться через месяц–полтора после заражения, обычно свидетельствуют об острой фазе или недавно начавшемся воспалении в печени. Снижение активности вируса и трансформация болезни в хроническую форму может сопровождаться исчезновением из крови этого вида антител.

IgG — образуются позже, указывают на то, что процесс перешел в хроническое и затяжное течение, представляют основной маркер, который используется для скрининга (массового исследования) с целью обнаружения зараженных лиц, появляются через 60–70 дней от момента инфицирования.

Максимума достигает через 5–6 месяцев. Показатель не говорит об активности процесса, может быть признаком как текущего заболевания, так сохраняться многие годы после лечения.

На практике легче и дешевле определить суммарные антитела к вирусу гепатита С (total Anti-HCV). Сумма антител представлена обоими классами маркеров (М+G). Через 3–6 недель накапливаются М-антитела, затем вырабатываются G. Они появляются в крови пациента через 30 дней после заражения и остаются пожизненно или до момента полного удаления инфекционного агента.

Приведенные виды относятся к структурируемым белковым комплексам. Более тонкий анализ — определение антител не к вирусу, а к его отдельным неструктурируемым белковым компонентам. Они кодируются иммунологами, как NS.

Каждый результат указывает на особенности заражения и «поведения» возбудителя. Проведение исследований значительно увеличивает стоимость диагностики, поэтому в государственных медицинских учреждениях не применяется.

Метод ИФА
Диагностика предусматривает использование ИФА

Анализ крови

Наиболее важными считаются:

  • Anti-HCV core IgG — возникают спустя 3 месяца после заражения;
  • Anti-NS3 — повышены при остром характере воспаления;
  • Anti-NS4 — подчеркивают длительное течение болезни и степень разрушения печеночных клеток;
  • Anti-NS5 — появляются при высокой вероятности хронического течения, указывают на присутствие вирусной РНК.

Наличие антител к неструктурируемым белкам NS3, NS4 и NS5 определяют по специальным показаниям, анализ не входит в стандарт обследования. Считается достаточным определение структурируемых иммуноглобулинов и суммарных антител.

Периоды обнаружения антител в крови

Различные сроки образования антител к вирусу гепатита С и его компонентам позволяют достаточно точно судить о времени инфицирования, стадии заболевания и риске возникновения осложнений. Эта сторона диагностики используется при назначении оптимального лечения и для установления круга контактных лиц.

Таблица указывает на возможные сроки формирования антител

Когда образуются после зараженияВид антител
через месяц–полтораАнти-HCV total (суммарные)
через 11–12 недель (3 месяца)Anti-HCV core IgG
одновременно с IgM спустя 4–6 недельAnti-NS3
позже всехAnti-NS4 и Anti-NS5
Читайте также:  Что показывает пцр рнк гепатита с

Этапы и сравнительная характеристика методов выявления антител

Работа по выявлению антител HCV проходит в 2 этапа. На первом — выполняются скрининговые исследования в больших объемах. Используются методы, не отличающиеся высокой специфичностью. Положительный результат анализа означает, что необходимо провести дополнительные специфичные тесты.

На втором — в исследования включаются только пробы с ранее предполагаемым положительным или сомнительным значением. Истинным положительным результатом считаются те анализы, которые подтверждены высокочувствительными и специфичными способами.

Сомнительные итоговые пробы предложено дополнительно тестировать несколькими сериями наборов реагентов (обязательно 2 и более) различных фирм-производителей. Например, для выявления anti-HСV IgG используются иммунологические наборы реагентов, которые могут определить антитела к четырем белковым компонентам (антигенам) вирусного гепатита С (NS3, NS4, NS5 и сore). Исследование считается наиболее высоко специфичным.

ИФА
Методом ИФА можно выявлять как антитела, так и антигены, это зависит от выбора тестирующего вещества

Для первичного выявления антител в лабораториях могут использоваться скрининговые тестовые системы или иммуноферментный метод (ИФА). Его суть: возможность зафиксировать и количественно определить специфическую реакцию антиген+антитело при участии особых меченых ферментных систем.

В роли подтверждающего метода хорошо помогает иммуноблоттинг. Он сочетает ИФА с электрофорезом. Одновременно позволяет дифференцировать антитела и иммуноглобулины. Положительными считаются пробы при обнаружении антител к двум и более антигенам.

Кроме выявления антител, в диагностике эффективно используют метод полимеразной цепной реакции, который позволяет зарегистрировать мельчайшее количество генного материала РНК, а также определение массивности вирусной нагрузки.

Как расшифровать результаты анализов?

По результатам исследований необходимо выявить одну из фаз гепатита.

  • При латентном течении — нельзя обнаружить никаких маркеров антител.
  • В острую фазу — возбудитель появляется в крови, наличие инфицирования можно подтвердить маркерами по антителам (IgM, IgG, суммарному показателю) и РНК.
  • При переходе в фазу восстановления — в крови остаются антитела к иммуноглобулинам IgG.

Динамика маркеров при остром гепатите
График показывает, что первый достоверный факт присутствия вируса подтверждается по наличию РНК (с десятого дня заражения)

Полную расшифровку развернутого исследования на антитела может сделать только врач специалист. В норме у здорового человека никаких антител к вирусу гепатита нет. Бывают случаи, когда при отрицательной пробе на антитела у пациента выявляется вирусная нагрузка. Такой результат нельзя сразу перевести в разряд ошибок лаборатории.

Ситуация может объясняться ранним этапом развития инфекции, кровь взята в тот момент, когда антитела еще не сформировались.

Оценка развернутых исследований

Приводим первичную (грубую) оценку анализов на антитела в сочетании с наличием РНК (генного материала). Окончательный диагноз ставится с учетом полного биохимического обследования функций печени. При остром вирусном гепатите С — в крови имеются антитела к IgM и core IgG, положительный генный тест, нет антител к неструктурированным белкам (NS).

Хронический гепатит С с высокой активностью сопровождается — наличием всех видов антител (IgM, core IgG, NS) и положительным тестом на РНК вируса. Хронический гепатит С в латентной фазе показывает — антитела к типу core и NS, отсутствие к IgM, негативное значение теста на РНК.

В период выздоровления — длительно удерживаются положительные тесты на иммуноглобулины типа G, возможно некоторое повышение фракций NS, другие тесты будут отрицательными. Специалисты придают значение выяснению соотношения между антителами к IgM и IgG.

Так, в острую фазу коэффициент IgM/IgG составляет 3–4 (количественно антитела IgM преобладают, что указывает на высокую активность воспаления). В процессе лечения и приближения выздоровления коэффициент становится в 1,5–2 раза меньше. Так подтверждается падение активности вируса.

Забор крови из вены
Сдать анализ можно по собственному желанию инкогнито в частных клиниках

Кого необходимо обследовать на антитела в первую очередь?

В первую очередь опасности заражения подвергаются определенные контингенты людей, кроме пациентов с клиническими признаками гепатита неясной этиологии. Чтобы раньше выявить заболевание и начать лечение вирусного гепатита С, необходимо проводить обследование на антитела:

  • беременных;
  • доноров крови и органов;
  • людей, которым переливалась кровь и ее компоненты;
  • детей, рожденных от инфицированных матерей;
  • персонал станций переливания крови, отделений по заготовке, переработке, хранению донорской крови и препаратов из ее компонентов;
  • медицинских работников отделений гемодиализа, трансплантации, хирургии любого профиля, гематологии, лабораторий, стационарных отделений хирургического профиля, процедурных и прививочных кабинетов, стоматологических клиник, станций скорой помощи;
  • всех больных с заболеваниями печени;
  • пациентов центров гемодиализа, перенесших пересадку органов, хирургическое вмешательство;
  • пациенты наркологических клиник, противотуберкулезных и кожно-венерологических диспансеров;
  • сотрудников домов ребенка, спец. интернатов, детских домов, школ-интернатов;
  • контактных лиц в очагах вирусного гепатита.

Своевременно пройти обследование на антитела и маркеры — меньшее, что можно сделать для профилактики. Ведь недаром гепатит С именуется «ласковым убийцей». Ежегодно из-за вируса гепатита С на планете умирает около 400 тыс. человек. В основном причина — осложнения заболевания (цирроз, рак печени).

Источник