Диагностика активности вирусного гепатита в и с

Комплексное исследование при подтвержденном вирусном гепатите В (HBV). Анализ маркеров инфекции позволяет установить клиническую стадию заболевания, иммунологический статус обследуемого, а также оценить эффективность лечения. Включает в себя определение белков вируса (антигенов), основных классов специфических антител, а также обнаружение ДНК вируса в крови.

Венозную кровь.

• Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования.
• Не курить за 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит B (HBV) – инфекционное заболевание, которое является причиной серьёзных поражений печени. Зачастую гепатит B переходит в хроническую форму, его течение становится затяжным и провоцирует возникновение цирроза и рака печени.

Вирус гепатита B (Hepadnaviridae) содержит двухцепочечную ДНК, окруженную нуклеокапсидом размером 27 нм, в состав которого входит антиген HBcAg, и внешней оболочкой, содержащей антиген HBsAg. Этот антиген обнаруживается в крови за 6 недель до появления симптомов заболевания и может выявляться длительное время как при их наличии, так и в при их отсутствии (при хроническом гепатите и носительстве). На ранних стадиях заболевания присутствует у 90-95 % больных.

Особенностью вируса гепатита B является то, что он поступает непосредственно в кровь и циркулирует в ней на протяжении всего периода заболевания. У некоторых пациентов вирус в крови сохраняется всю жизнь. По этой причине источником заражения могут стать не только те, кто болен гепатитом в его острой форме, но также те, кто уже перенес данное заболевание, а также люди, у которых заболевание не проявляется, однако они являются носителями вируса.

Полное выздоровление регистрируется у 92-95 % больных острым гепатитом В, и лишь у 5-8 % из них отмечается переход заболевания в хроническую форму.

Гепатит B лечится исключительно в условиях стационара. Это заболевание в случае длительного течения является фактором риска развития первичной гепатоцеллюлярной карциномы (рак печени).

В жизнедеятельности вируса гепатита В различают две фазы: фазу репликации и фазу интеграции. В фазе репликации происходит воспроизведение (размножение) вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы синтезируется нуклеокапсид, содержащий ДНК вируса, антигены HBcAg, HBeAg, которые являются основной мишенью иммунной системы. Затем нуклеокапсид мигрирует из ядра в цитоплазму, где реплицируются белки внешней оболочки (HBsAg), и, таким образом, происходит сборка полного вириона. При этом избыток HBsAg, не использованный для сборки вируса, через межклеточное пространство попадает в кровь. Полная сборка (репликация) вируса заканчивается презентацией его растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на мембране гепатоцита, где происходит его «узнавание» иммуноцитами. Антиген HBcAg серологическими методами не определяется, потому что отсутствует в крови в свободном виде. Определяется наличие в крови антител (anti-HBc) к этому антигену, вырабатывающихся вследствие его высокой иммуногенности.

Маркерами фазы репликации вируса гепатита В являются:

• выявление в крови антигенов HBeAg и anti-HBc (Ig M).

У 7-12 % больных хроническим вирусным гепатитом В возможен спонтанный переход фазы репликации в нерепликативную фазу (при этом из крови исчезает HBeAg и появляются anti-HBe). Именно фаза репликации обусловливает тяжесть поражения печени и контагиозность больного.

В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве.

Вирусная ДНК может быть интегрирована не только в гепатоциты, но и в клетки поджелудочной железы, слюнных желез, лейкоциты, сперматозоиды, клетки почек.

Фаза интеграции сопровождается становлением клинико-морфологической ремиссии. В этой фазе в большинстве случаев формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к купированию активности процесса и носительству HBsAg. Интеграция делает вирус недосягаемым для иммунного контроля.

Серологические маркеры фазы интеграции:

• наличие в крови только HBsAg или в сочетании с anti-HBc (IgG);
• отсутствие в крови ДНК-вируса;
• сероконверсия HBeAg в anti-HBe (т.е. исчезновение из крови HBeAg и появление anti-HBe).

Пациенты, перенесшие инфекцию и имеющие антитела к вирусу, не могут повторно заразиться гепатитом B. В некоторых случаях полное выздоровление не наступает и человек становится хроническим вирусоносителем. Вирусоносительство может протекать бессимптомно, но в некоторых случаях развивается хронический активный гепатит B. Ключевым фактором риска активного вирусоносительства является возраст, когда человек был заражен: для грудных детей уровень риска превышает 50 %, в то время как для взрослых остается на уровне 5-10 %. Исследования показывают, что мужчины чаще становятся носителями, чем женщины.

HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg) является белком, который присутствует на поверхности вируса. Обнаруживается в крови при остром и хроническом гепатите В. Самый ранний маркер. Достигает максимума к 4-6-й неделе заболевания. Сохраняется до 6 месяцев при остром гепатите, свыше 6 месяцев – при переходе заболевания в хроническую форму.

HBeAg – ядерный ‘е’-антиген вируса гепатита В

Антиген, находящийся в ядре вируса. Появляется в крови одновременно с HBsAg и сохраняется в течение 3-6 недель. HBeAg появляется в крови больного острым гепатитом В одновременно с HBsAg или вслед за ним и сохраняется в крови 3-6 недель. Указывает на активное размножение и высокий риск передачи вируса при половом контакте, а также перинатально. Инфекционность HBeAg-положительной сыворотки в 3-5 раз выше, чем HBsAg-положительной. Выявление HBeAg в крови более 8-10 недель свидетельствует о переходе заболевания в хроническую форму. При отсутствии репликативной активности вируса во время хронической инфекции HBeAg не выявляется. Его появление же свидетельствует о реактивации вируса, что чаще происходит на фоне иммуносупрессии.

При лечении вирусного гепатита В исчезновение HBeAg и появление антител к HBe-антигену свидетельствует об эффективности терапии.

anti-HBc (Ig M) – специфические антитела класса IgМ к ядерному ‘core‘ антигену вируса

Начинают вырабатываться еще до клинических проявлений, указывают на активную репликацию вируса.

Появляются в крови через 3-5 недель, сохраняются в течение 2-5 месяцев и исчезают в период выздоровления.

anti-HBc – суммарные антитела (IgM+IgG) к ядерному ‘core’ антигену вируса гепатита В

Важный диагностический маркер, особенно при отрицательном значении HBsAg. Антитела класса IgM вырабатываются через 3-5 недель. Антитела класса IgG начинают вырабатываться с 4-6-го месяца и могут сохраняться пожизненно. Подтверждают контакт организма с вирусом.

anti-HBs – суммарные антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В

Появляются медленно, достигая максимума через 6-12 месяцев. Указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител. Выявление этих антител свидетельствует о выздоровлении и развитии иммунитета. Обнаружение антител в высоком титре в первые недели заболевания может быть связано с развитием гипериммунного варианта фульминантного гепатита В.

anti-HBe – антитела к ‘е’-антигену вируса гепатита В

Появляются на 8-16-й неделе после инфицирования у 90 % больных. Свидетельствуют о завершении острого периода болезни и начале периода реконвалесценции. Могут сохраняться до 5 лет после перенесенного заболевания.

HBV (ДНК) – ДНК вируса гепатита В

Маркер наличия и репликации вируса. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Это особенно важно в сложных диагностических случаях. При инфицировании мутантными штаммами вируса результаты теста на специфические антигены HBsAg и HBeAg могут быть отрицательными, но при этом риск распространения вируса и развития заболевания у зараженного человека сохраняется.

Качественное определение ДНК вируса играет важную роль в раннем выявлении гепатита В у людей с высоким риском инфицирования. Генетический материал вируса обнаруживается в крови на несколько недель раньше, чем HBsAg. Положительный результат ПЦР за период более 6 месяцев указывает на хроническую инфекцию. Определение вирусной нагрузки (количество ДНК вируса в крови) позволяет оценить вероятность перехода заболевания в хроническую форму.

Повышенные уровни печеночных трансаминаз при положительном результате ПЦР являются показателями необходимости проведения терапии. Во время лечения вирусного гепатита В исчезновение ДНК вируса свидетельствует об эффективности лечения.

Для чего используется исследование?

• Для оценки серологического профиля;
• для выяснения стадии заболевания и степени контагиозности;
• для подтверждения заболевания и уточнения его формы (острая, хроническая, носительство);
• для наблюдения за течением хронического гепатита В;
• для оценки эффективности противовирусной терапии.

Когда назначается исследование?

• При выявлении у пациента поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg);
• при подозрении на инфицирование вирусом гепатита В и сомнительных результатах серологических тестов;
• при микст-гепатитах (сочетанные вирусные гепатиты В и С);
• при динамическом наблюдении за больным гепатитом В (определение стадии процесса при совместном исследовании на другие специфические маркеры инфекции).

Что означают результаты?

Референсные значения

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

• [07-004] anti-HBc, IgM
• [07-005] anti-HBc, антитела
• [07-007] anti-HBs, антитела
• [07-024] HBeAg
• [07-025] HBsAg
• [07-111] anti-HBe, антитела
• [09-008] HBV, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Острый гепатит В. Выделяют «дикий» штамм (естественный) и «мутантный» штамм (вид) вируса. Определение штамма вируса имеет определенное значение при выборе противовирусного лечения. Мутантные штаммы вируса несколько хуже поддаются лечению в сравнении с «диким».

Хронический гепатит В (ХВГВ). Выделяют три серологических варианта:

1. ХВГВ с минимальной активностью (ранее использовали термин «носительство HBsAg»);
2. НВе-негативный ХВГВ;
3. НВе-позитивный ХВГВ.

Интерпретация сочетаний серологических маркеров гепатита В



Кто назначает исследование?

Инфекционист, гастроэнтеролог, гепатолог, эпидемиолог.

[09-009] HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

[06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)

[06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ)

[06-013] Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)

[40-120] Билирубин и его фракции (общий, прямой и непрямой)

[06-045] Фосфатаза щелочная общая

[06-004] Альбумин в сыворотке

[03-011] Фибриноген

[40-483] Лабораторное обследование функции печени

Литература

• А. М. Сокурова, ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Минздрава России, Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов, УДК: 616.36-002:578.891.
• Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.

Вирусный гепатит типа В – это серьёзный воспалительный процесс в печёночной ткани, который при его игнорировании и отсутствии правильного лечения, может привести к серьезным последствиям – раку и циррозу. При отсутствии лечения перерастает в хроническую стадию, которая развивается у подавляющего числа пациентов (70–80%). Гепатит В считается одним из самых распространённых заболеваний печени на территории всех стран мира, которое передаётся половым путём, при использовании нестерильных шприцов, а также от матери к плоду.

Только при своевременном обнаружении заболевания и назначении необходимой терапии можно сохранить здоровую печень. Примечательно, что выявить заболевание можно даже в инкубационный период, что значительно повышает шансы на выздоровление. Диагностика вирусного гепатита B включает в себя ряд мероприятий.

К какому врачу обратиться

При подозрении наличия в организме данного заболевания взрослым пациентам необходимо обратиться к участковому терапевту, а детей записать на приём к педиатру. Если же человек был в контакте с больным гепатитом (незащищённый половой акт) или находился в другой ситуации, которая могла спровоцировать заражение (тату, пирсинг, стоматологическое лечение, внутривенное введение наркотиков, переливание крови, а также другие манипуляции), и существует большая вероятность присутствия вируса в организме, нужно немедленно обратиться к инфекционисту.

Чаще всего пациент получает направление на приём к гепатологу. Это врач, специализирующийся на выявлении и последующей терапии заболеваний печени. Есть также детская гепатология, которая стала отдельным разделом данной области относительно недавно и находится сейчас в стадии усиленного развития. Маленьких пациентов направляют к докторам именно узкого профиля, потому что юный организм имеет ряд своих особенностей, которые необходимо учитывать при диагностике, а впоследствии и лечении.

Однако далеко не во всех больницах можно записаться на консультацию к гепатологу ввиду их отсутствия. В этом случае нужно обратиться к гастроэнтерологу, который сможет дать компетентную консультацию и оказать квалифицированную помощь. По возможности следует посещать специалистов в других населённых пунктах.

Методы диагностирования

Гепатит группы B передаётся половым путём или через контакт с кровью инфицированного. Протекать болезнь может в острой, либо хронической форме. Носителями инфекции на данный момент являются приблизительно 300 миллионов людей по всей планете.

Первой ступенью диагностики заболевания становится поход к терапевту. Врач назначит необходимое первичное обследование. Врач должен знать информацию об операциях, проведенных в течение последних 6 месяцев, а также о ситуациях, которые могли спровоцировать заражение. Специалист оценит общее состояние, наличие тех или иных признаков заболевания. В случае, если при первичном обследовании в клинике подозрения на наличие в организме вирусного гепатита B показались врачу небезосновательными, пациенту предстоит пройти ряд обследований, которые осуществляются по инструкциям Европейской ассоциации по изучению печени. Они способны подтвердить или опровергнуть этот диагноз.

Ключевое место занимают лабораторные методы для выявления вируса гепатита B в человеческом организме. В их число входят анализы на различные маркеры, а также биопсия печени. С их помощью в первую очередь выявляется наличие данной инфекции у пациента.

Для оценки степени тяжести вируса и определения признаков развития осложнений применяются аппаратные методы диагностики: ультразвуковое исследование органов брюшной полости с допплерографией, гастроскопия (ФГДС), фибросканирование печени (эластография, фибротест).

Сравнительно недавно в практику вошли методы генодиагностики, которые обеспечивают обнаружение и возможность осуществления характеристики генов или не смысловых последовательностей ДНК и РНК. В их число входит анализ полимеразной цепной реакции. Он является прямым методом выявления возбудителя в исследуемом материале.

Пациентам старше сорока лет доктора назначают обследование органов сердечно-сосудистой и дыхательной систем.

Чтобы иметь целостную картину состояния больного нужно прибегать к комплексу различных способов диагностирования наличия в организме гепатита и степени его тяжести, а также появления первых признаков осложнения для оказания оперативной и квалифицированной помощи на ранних стадиях.

Быстрое реагирование и принятые меры помогут определить индивидуальный план лечения и сохранить здоровый орган на долгие годы. Иногда даже небольшое промедление может стоить пациенту жизни.

Необходимые анализы

Каждый человек должен регулярно сдавать кровь на гепатит. Возбудителем заболевания является вирус Hepadnaviridae. Особенно рекомендуется проводить исследования лицам с желтушностью кожных покровов и белков глаз, изменённым цветом кала, отсутствием аппетита, а также слабостью и тошнотой. Пристальное внимание этому вопросу следует уделять беременным женщинам, донорам крови и людям, которым в ближайшем времени предстоит операция.

При отсутствии описанных симптомов тревожным сигналом можно считать повышенные показатели концентрации внутриклеточных ферментов (АсАт, АлАт) в крови пациента и холестаз (сокращение желчных выделений в двенадцатиперстную кишку).

Чтобы диагностировать вирусный гепатит B, необходимо сдать качественный или количественный анализ крови на маркеры поверхностного антигена HBsAg (он выявляется и при остром, и при хроническом течениях болезни уже после 3–5 недель, прошедших с момента инфицирования), внутреннего HBcAg (он определяется исключительно в клетках печени) и связанного с ним HBeAg. Проверяют также наличие антител anti-HBs, anti-HBc, anti-HBe. Они есть как у больных, так и у здоровых носителей. В отдельных случаях сохраняются в организме у излечившихся людей на протяжении всей оставшейся жизни.

Чаще всего отсутствие антигена HBsAg указывает на то, что у пациента нет вирусного гепатита B. Средняя продолжительность его циркуляции составляет 70–80 дней. Несмотря на то, что инкубационный период при гепатите длится 2–6 месяцев, анализ становится положительным уже спустя 1–9 недель с момента заражения.

Для исключения наличия суперинфекции назначают анализы на HCV и HDV. Кроме того, потребуются следующие исследования:

• на онкомаркеры. Это позволяет узнать о присутствии в организме человека серьёзных раковых патологий, что может значительно усложнить процесс будущего лечения, а потому нужно определить факт их наличия на ранних стадиях;
• на гормоны щитовидной железы. Исследование необходимо для составления плана противовирусного лечения, не наносящего дополнительного вреда здоровью пациента;
• общие биохимические анализы крови и мочи. Это позволит определить противопоказания к терапии, уровень аланинаминотрансфераза, изменения в работе и состоянии поражённого органа;
• фибротест, состоящий из двух расчётных алгоритмов. Он направлен на диагностику: степени тяжести фиброза печени (по стадиям F0, F1, F2, F3, F4), активности некровоспалительного процесса в печени (по степеням А0, А1, А2, А3) согласно международной общепринятой системе METAVIR, которая позволяет проводить точную и быструю интерпретацию результатов врачами по всему миру;
• коагулограмма – исследование белкового состава крови. Указывает на функциональность печени и помогает предотвратить дальнейшее развитие осложнений;
• определение ДНК вируса HBV посредством качественной полимеразной цепной реакции (ПЦР). Количественный анализ позволяет определить вирусную нагрузку, т.е. число копий ДНК в 1 миллиметре крови пациента. Этот способ помогает найти возбудитель, установить нахождение HBV в ткани и клетках, создать описательную характеристику мутантных форм вируса, выявить степень виремии, в том числе и на фоне противовирусного лечения;
• тест на ВИЧ. В отдельных ситуациях врачи дают направление на прохождение этого анализа.

Все биоматериалы сдаются только натощак. В течение 24 часов перед посещением лаборатории нужно воздержаться от употребления алкогольной продукции и жирной пищи. Это является обязательными условиями проведения безошибочного исследования.

Чаще всего качественный анализ занимает не более четырёх часов, а количественный – максимум один день.

Таким образом, диагностика вирусного гепатита B – это целый комплекс мероприятий, который состоит не только из сдачи ряда анализов крови и мочи, но и прохождения обследований многих органов: брюшной полости, сердца, сосудов и дыхательной системы. Первым шагом при подозрении наличия этого заболевания должен стать визит к семейному врачу (терапевту), который сделает первичные заключения и определит план дальнейших действий. Более подробную консультацию даст инфекционист или гепатолог. Маленьких пациентов стоит вести к детским врачам, которые при определении присутствия болезни будут опираться на особенности юного организма. Важно помнить, что своевременное выявление гепатита и грамотно составленное лечение могут не только продлить годы жизни пациента, но и предотвратить заражение других людей.

Обезопасить себя от появления столь серьёзной проблемы можно путём соблюдения несложных правил:

1. Не вести беспорядочную половую жизнь.
2. Делать пирсинг, татуировки только в проверенных салонах.
3. Ограничить использование чужих средств личной гигиены (бритвы, зубные щётки, маникюрные ножницы и так далее).
4. Выбирать клиники по оказанию качественных стоматологических услуг.
5. Воздержаться от употребления наркотиков.
6. Регулярно выполнять профилактику заболевания.
7. Систематически сдавать анализы на антигены гепатита.
8. Следить за состоянием печени.

Гепатит – заболевание, требующее систематической профилактики и пристального внимания к собственному организму. Только в этом случае удастся снизить уровень опасного воздействия его вирусов на печень и сохранить крепкое здоровье на долгие годы.