Гепатит с серонегативный вариант что значит
Anti-HCV-total определяет суммарное количество специфических антител (иммуноглобулинов) в сыворотке крови к антигенам вируса гепатита С. Что это за анализ? Исследование является скрининговым методом диагностики и подтверждения инфицирования или установления факта перенесенного патологического процесса.
Антитела в крови образуются в ответ на попадание чужеродных антигенов как защитный механизм гуморального звена иммунной системы. Их появление возможно определить уже спустя месяц после заражения, поэтому результат теста способствует выявлению заболевания на ранних стадиях, что обеспечит наиболее благоприятный исход лечения.
Что это за анализ?
Анализ крови Anti-HCV-total назначается пациентам с подозрением на инфицирование гепатитом С. Что это за метод исследования? Данный способ лабораторной диагностики подтверждает наличие в крови антител к вирусу гепатита С. Исследование проводится с помощью серологической иммунноферментной реакции (ИФА), основанной на иммунокомплексном взаимодействии определенного антигена с антителом. В качестве анализатора используется Sinnowa ER-500 и тест-система Вектор-бест.
Результат достоверен вследствие высокой специфичности и чувствительности тестовых систем. Анализ является качественным и определяет только присутствие чужеродного агента в организме. Материалом для постановки реакции является сыворотка крови испытуемого, предварительно обработанная исходным реактивом пероксидазы хрена. Анализируются антитела к некоторым типам белков возбудителя – NS3 и NS4. Результат оценивается на основании степени свечения реакционной системы: чем выше интенсивность – тем больше иммунных комплексов образовалось после реакции, тем больше исходных антигенов находилось в биологическом материале.
Что такое Abbott ARCHITECT Anti-HCV test? Улучшенная полностью автоматизированная версия иммунологического анализа обнаруживает структурные и неструктурные белки HCV, обладает еще более высокой чувствительностью и специфичностью сероконверсии. Благодаря высокой производительности иммуннохемилюминесцентная реакция экономит время и не определяет сомнительных, ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
В результате попадания в кровь генетического материала вируса гепатита С в крови вырабатываются специфические anti-Hepatitis C Virus двух изотипов:
- Иммуноглобулины класса М (IgM) свидетельствуют об острой стадии заболевания, так как образуются в качестве первичного звена ответа на наличие антигена. В крови можно выявить только минимум через месяц от начала патологии.
- Иммуноглобулины класса G (IgG) показывают хроническое течение гепатита С или уже перенесенное заболевание, вырабатываются как вторичное звено приобретенного иммунитета. В крови определяются не ранее, чем через полгода после инфицирования.
Показания к назначению
Лабораторный тест на определение антител к HCV в первую очередь назначается в качестве уточнения диагноза лицам с признаками поражения печени:
- при повышенной биохимической активности печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), гипербилирубинемии, повышении уровня щелочной фосфатазы;
- при морфологических изменениях паренхимы печени при инструментальных исследованиях (УЗИ, эластрография (пункционная биопсия), КТ, МРТ);
- на основании клинической картины и физикального объективного осмотра (характерные жалобы, желтушный, интоксикационный, диспепсический синдром, увеличение размеров печени и селезенки);
- больным с подтвержденным диагнозом гепатита C в процессе противовирусной терапии для оценки качества лечения и лицам, состоящим на диспансерном наблюдении в течение двух лет после выздоровления.
На наличие антител к вирусному гепатиту С обязательно обследуются:
- беременные либо планирующие беременность женщины;
- новорожденные дети, родившиеся от больных матерей;
- ВИЧ-инфицированные;
- больные другими вирусными гепатитами (В (выявлен HbsAg), Д);
- потенциальные доноры крови и органов;
- лица, имеющие гемотрансфузии в анамнезе;
- больные на гемодиализе;
- пациенты, готовящиеся к оперативному вмешательству.
Регулярно сдавать кровь на Анти-HCV положено лицам из группы риска:
- медицинским работникам, контактирующим с биологическими жидкостями организма и в случае экстренной диагностики при несчастном случае;
- асоциальному контингенту населения: лицам с беспорядочными половыми связями, употребляющим наркотические вещества инъекционным способом, злоупотребляющим алкоголем.
Достоверность и причины возможных ошибок
Результат метода высокочувствителен и специфичен, так как выявляет минимальное количество вирусной нагрузки в крови, а образование иммуннокомплексов происходит посредством реакции только определенных белков исключительно с другими структурами генетического материала вируса.
Однако результат может быть ошибочным по некоторым причинам:
- низкое качество биологического материала (ошибки на этапе забора крови, при её упаковке и хранении не в положенном месте либо длительное время);
- неправильная транспортировка в лабораторию (несоблюдение сроков, механические повреждения);
- неисправность аналитических тестовых систем (некачественные/неверно добавленные реагенты, техническая поломка);
- человеческий фактор (ошибка лаборанта, контаминация крови испытуемого другой кровью из лаборатории);
- низкая вирусная нагрузка (титр антител в сыворотке крови ниже обозначенной пороговой величины, недостаточный для постановки реакции).
Погрешность в результате исследования может быть обусловлена несоблюдением правил подготовки к анализу:
- употребление пищи за 8–10 часов до Anti-HCV-total;
- приём лекарственных препаратов, психоактивных веществ и алкоголя;
- чрезмерная физическая активность;
- инсоляции, колебания температурного режима, физиотерапевтические процедуры.
Особенности подготовки к сдаче крови на Anti-HCV-total
Интерпретация результатов зависит от правильности сдачи крови, поэтому подготовка к анализу начинается за 24 часа до манипуляции и содержит некоторые меры ограничения:
- исключение из пищевого рациона продуктов с высоким содержанием углеводов, жиров, натриевой соли, специй, а именно сладкого, копченного, острого, соленостей, жаренной и жирной пищи;
- ограничить занятия спортом и другие тяжелые физические нагрузки;
- предотвратить воздействие физических и химических факторов (не загорать на пляже и солярии, отменить физиотерапевтические процедуры, не перегреваться и не переохлаждаться);
- снизить воздействие биологических факторов (24 часа не употреблять алкоголь, психостимулирующие средства, биологические добавки, лекарства, если это возможно по жизненным показателям).
Во избежание сомнительного результата анализа необходимо предотвратить всасывание в системное кровеносное русло других соединений (белков, жиров, углеводов, никотина, химических веществ), поэтому:
- кровь сдается строго натощак;
- прием пищи за 8 часов до сдачи теста;
- можно выпить стакан чистой воды без газа;
- за час до анализа полагается не курить;
- фармацевтические средства по возможности принимать после сдачи крови.
Что значит отрицательный результат
Если результат исследования Anti-HCV-total отрицательный, что это значит? Расшифровка результата «отрицательно» при выявлении антител к гепатиту С:
- Вируса в крови не обнаружено, больной здоров.
- Недостаточный срок с момента заражения (инкубационный период).
- Серонегативный вариант течения вирусного гепатита С.
- Низкий титр антител (вирусная нагрузка ниже пороговой нормы тестового анализатора), в таком случае результат называется ложноотрицательным.
О чем говорит положительный анализ крови
Если результат анализа Anti-HCV-total положительный, то, поскольку система обладает высокой степенью чувствительности, такой показатель достоверно означает, что антитела к заболеванию присутствуют в крови.
Так как в норме иммуноглобулины к HCV отсутствуют, это значит, что:
- пациент инфицирован (носитель), диагноз HCV;
- человек болеет острой или хронической формой гепатита С (диагноз подтвержден);
- в прошлом перенес заболевание (стадия реконвалесценции).
При положительном анализе пациенту назначают полное комплексное обследование для выбора тактики лечения и выявления стадии заболевания и возможно присоединившихся осложнений.
Источник
Вирус гепатита С относится к флавивирусам и достаточно устойчив во внешней среде.
Пути передачи вируса гепатита С:
• Парентеральный (с кровью и биологическими жидкостями)
• Половой
• Трансплацентарный
Группы повышенного риска:
• лица, практикующие внутривенную наркоманию
• лица, практикующие беспорядочные половые связи
• медицинские работники
• больные находящиеся на гемодиализе или перенесшие переливания крови
• заключенные
Клиническое течение.
Проникая в организм, HCV попадает в макрофаги крови и гепатоциты печени, где происходит его репликация. Повреждение печени происходит в основном за счет иммунного лизиса, также вирус оказывает прямое цитопатическое действие. По сравнению с другими вирусными гепатитами, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину, чаще переходит в хронические формы. В 20 — 50% случаев хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и в 1,25 — 2,50% — к развитию гепато-целлюлярной карциномы. Инкубационный период — 5 — 20 дней. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезенки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В трети случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Холестаз возникает крайне редко (5% случаев). Лабораторные показатели отражают цитолиз. При высоком уровне трансаминаз (более 5 норм) и признаках печеночно-клеточной недостаточности следует заподозрить микст-инфекцию – вирусный гепатит С и В.
Генотипы вируса гепатита С.
Вирус гепатита С отличается высокой изменчивостью и наличием нескольких вариантов генотипа. В настоящее время выделено 6 генотипов вируса. Для клинической практики достаточно разграничивать 5 субтипов ВГС: 1a, 1b, 2a, 2b, 3a. На территории России преобладающим генотипом является 1b, далее с убывающей частотой — 3a, 1a, 2a.
У пациентов с субтипом 1b хронизация вируса гепатита С происходит в 90% случаев, а с генотипами 2а и 3а в 33 — 50%. Инфицирование генотипом 1b сопровождается более тяжелым течением заболевания, развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Пациенты с субтипом 3a имеют более выраженный стеатоз и поражения желчевыводящих путей, а также более высокий уровень АлАТ, чем пациенты с генотипом 1b. При этом уровень фиброза более выражен у пациентов с вирусом субтипа 1b.
При монотерапии интерфероном устойчивый ответ наблюдается у 18% пациентов, инфицированных субтипа 1b, и у 55% — инфицированных другими генотипами. При комбинированной схеме лечения интерферон+рибаверин стойкий ответ наблюдается у 28% пациентов, инфицированных субтипом 1b и у 66% пациентов, инфицированных другими генотипами.
Диагностика.
Первый шаг в лабораторной диагностике гепатита С – скрининговое исследование на наличие специфических антител к вирусу методом иммуноферментного анализа (ИФА) Положительный результат теста на антитела, полученный при первичном тестировании, подлежит обязательной перепроверке в дополнительных более специфичных исследованиях, чтобы исключить ненужные медицинские исследования и лишние психологические травмы. Этот тест, как и другие ИФА-тесты, может иногда давать ложноположительный результат вследствие перекрестных реакций и неспецифического связывания, определяющихся индивидуальными особенностями сыворотки пациента. Технологии скрининговых и подтверждающих тестов в разных лабораториях часто различаются, в некоторых случаях результаты, полученные в разных лабораториях, расходятся. При выявлении у обследуемого человека антител к вирусу, которые могут присутствовать в крови, как при текущей инфекции, так и после выздоровления, далее наиболее важно, в клиническом плане, подтвердить или исключить текущую инфекцию.).
Положительный результат ПЦР-тестирования означает присутствие вируса гепатита С в крови, дополнительное определение генотипа вируса (см. тест № 324) помогает определить тактику лечения пациента. Отрицательный результат ПЦР-теста говорит об отсутствии вируса в крови в момент взятия пробы — что может быть как в случае, если инфицирования данным вирусом не было, так и в случае избавления от вируса после инфекции в прошлом (спонтанно или в результате лечения) или временного подавления репликации вируса.
Поэтому в случаях, когда результат теста на антитела положителен, а результат ПЦР-теста на РНК вируса отрицателен, человек рассматривается как потенциально инфицированный, и в этих ситуациях особенно важно, в том числе и психологически, убедиться в достоверности результатов определения антител.
Верифицировать результаты определения антител скрининговых ИФА-тестов помогает высокоспецифичное развернутое исследование антител методом иммуноблота, которое позволяет не только выявить, но также и идентифицировать антитела, направленные против определенных структурных и неструктурных компонентов вируса гепатита С, имеющих разную значимость.
Антитела к антигенам вируса гепатита C.
Антитела класса М начинают вырабатываться через 4 — 6 недель после инфицирования, их концентрация быстро достигает максимума. По прошествии 5 — 6 месяцев уровень IgM падает и повышается вновь во время следующей реактивации инфекции. Антитела класса G появляются с 11 — 12 недели после инфицирования, достигают пика концентрации к 5 — 6 месяцу и сохраняются в крови на более-менее постоянном уровне в течение всего периода болезни и реконвалесценции. Таким образом, суммарный уровень антител (total) определяется с 4 — 5 недели после инфицирования и далее.
Показания к назначению
• Повышение уровня АлАТ и АсАТ
• Подготовка к оперативному вмешательству
• Парентеральные манипуляции
• Подготовка к беременности
• Клинические признаки вирусного гепатита
• Незащищенные половые контакты, частая смена половых партнеров
• Внутривенная наркомания
• Холестаз
Интерпретация результатов – тест качественный.
«Положительно» — в случае обнаружения антиHCV-антител, при этом тестирование проводится повторно другим методом. При повторно положительном результате выдается ответ HCV — «Положительно», HCV (подтверждающий) — «Положительно».
«Отрицательно» — при отсутствии антиHCV-антител.
Положительный результат:
• Гепатит С или реконвалесценция после гепатита С. Нельзя различить острый и хронический гепатит, а также гепатит и реконвалесценцию.
Отрицательный результат:
• Гепатит С не выявлен;
• Первые 4 — 6 недель инкубационного периода гепатита С;
• Гепатит С, серонегативный вариант
Качественное определение РНК вируса гепатита С методом ПЦР
Маркер активной репликации вируса. Определяемый фрагмент — консервативный участок генома вируса гепатита С. Специфичность определения — 98%. Чувствительность определения до 50 МЕ/мл в прошедшей обработку (выделение РНК вируса и процесс обратной транскрипции в к ДНК) пробе.
Согласно рекомендации ВОЗ установление диагноза гепатита С возможно на основании троекратного обнаружения РНК вируса гепатита С в сыворотке крови больного при отсутствии других маркеров гепатита. РНК вируса гепатита С выявляется в крови уже через 5 дней после инфицирования, т.е. задолго до появления антител к гепатиту С. Время появления anti-HCV различно: в одних случаях — через 2 — 4 недели после начала гепатита, в других — через месяцы после повышения уровня аминотрансфераз. У ряда больных с самоограничивающимся течением инфекции anti-HCV никогда не появляются.
Серологические тесты являются свидетельством HCV инфекции, тогда как только определение РНК вируса гепатита С позволяет различать активную инфекцию от прошедшей. Проведение ПЦР позволяет выявить РНК вируса гепатита С не только в сыворотке крови, но и в биоптате печени, что важно при подтверждении роли вируса гепатита С в формировании гепатоцеллюлярной карциномы. У подобных больных РНК вируса гепатита С регистрируется в гепатоцитах и при отсутствии anti-HCV и РНК вируса гепатита С в сыворотке крови.
Показания к назначению
• Профилактические скрининговые исследования (РНК вируса гепатита С — самый ранний маркер при острой инфекции)
• Обследования контактных лиц
• Диагностика гепатитов смешанной этиологии — выявление ведущего вируса
• Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии
• Контроль эффективности проводимой терапии
• Цирроз печени
• Слабость, недомогание, быстрая утомляемость, снижение аппетита, тошнота, тяжесть в правом подреберье, увеличение печени, а также боли в мышцах, суставах
• Желтуха, кожный зуд, увеличение селезенки, сосудистые «паучки», в некоторых случаях покраснение ладоней и стоп
Интерпретация результатов
В норме — не обнаружено.
Количественное определение РНК вируса гепатита С методом ПЦР (вирусная нагрузка).
Определяемый фрагмент — консервативный участок генома вируса гепатита С. Специфичность определения — 98%. Чувствительность определения — от 850000МЕ/мл до 600 МЕ/мл вирусных частиц в сыворотке крови.
Количественная характеристика содержания РНК вируса гепатита С в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии. Если концентрация вируса меньше 8х105 МЕ/мл (2х106 копий/мл), то прогноз курса лечения благоприятный, если выше, то необходимо апробировать другие схемы лечения. Вирусная нагрузка ниже 8х105 МЕ/мл (2х106 копий/мл) наряду с определением генотипа вируса является независимым и наиболее информативным параметром прогнозирования эффективности лечения.
Эффективность выбранной схемы лечения на 85% определяется снижением концентрации РНК вируса гепатита С к третьему дню от начала лечения. Ранний вирусологический контроль осуществляется на 3 — 4 неделе с момента начала противовирусной терапии.
Показания к назначению
• Положительный качественный тест на наличие РНК вируса гепатита С в сыворотке крови;
• Определение тактики лечения пациентов;
• Точная оценка эффективности лечения.
Определение генотипа вируса гепатита С методом ПЦР.
Определяемый фрагмент — консервативный участок генома вируса, свойственный конкретному генотипу. Специфичность определения — 98%.
Определение генотипа вируса гепатита С является достоверным прогностическим фактором развития инфекции и ответа на противовирусную терапию, а также определяется продолжительность курса лечения.
Показания к назначению
• Положительный качественный тест на наличие РНК вируса гепатита С в сыворотке крови
• Определение тактики лечения пациентов
• Точная оценка эффективности лечения
• Прогноз хронизации инфекционного процесса
• Определение прогрессирования заболевания
Иммуноблот рекомбинантный, IgG к вирусу гепатита С.
Высокоспецифичное исследование, использующееся для верификации положительных результатов скрининговых тестов на наличие антител к вирусу гепатита С, которое позволяет не только выявить, но также и идентифицировать антитела, направленные против определенных структурных и неструктурных компонентов вируса гепатита С, имеющих разную значимость.
Как и ИФА-тесты, этот метод информативен, в среднем, начиная с 3-4 недели инфекции – период появления в крови специфических антител, но есть исключения:
• «диагностическое окно» в течение инкубационного периода и очень ранней острой фазы, когда иммунный ответ задерживается, поскольку вирусная нагрузка очень мала;
• иммуносупрессированные пациенты;
• новорожденные с перинатальной инфекцией (нетипичная картина связанная с антителами матери).
Подтверждение инфекции вирусом гепатита С в этих ситуациях возможно лишь положительным результатом при повторных исследованиях вирусной РНК методом ПЦР.
Показания к назначению
• Подтверждение положительных или сомнительных результатов, полученных при скрининговом исследовании антител к вирусу гепатита С.
Интерпретация результатов
«Отрицательный результат» — человек не был инфицирован вирусом гепатита С (результат скрининговых ИФА тестов – ложноположительный).
«Положительный результат»- была инфекция вирусом гепатита С.
«Пограничный результат» — возможно, была инфекция вирусом гепатита С.
Источник
