Гепатиты в и с референсные значения
«Выявление генов вируса гепатита С (HVC) в крови пациента является вторым этапом лабораторной диагностики этой инфекционной патологии. Чтобы обнаружить возбудителя, который не имеет клеточной мембраны и, соответственно, поверхностных антигенов, используют метод полимеразной цепной реакции. С помощью этого метода определяют непосредственно молекулу, в которой закодирована вся его генетическая информация — РНК.
Содержание
Что это значит?
Анализ на РНК вируса гепатита С
РНК вируса гепатита С: метод ПЦР
РНК гепатита С: качественный анализ
РНК гепатита С: количественный анализ
Гепатит С: анализы и расшифровка
РНК — Рибонуклеиновая кислота, наряду с ДНК входит в состав клеток всех живых организмов. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет способность к ее мутациям.
Исследование на наличие генома HVC назначают обычно после того, как проводят общий, биохимический анализ крови и получают положительный ответ на антитела (anti-HVC).
Что это значит?
Исследование на антитела к HVC является скрининговым, то есть с его помощью можно обследовать большие контингенты населения (медиков, беременных, пациентов стационаров, доноров, инъекционных наркоманов, ВИЧ-инфицированных). Отрицательный результат лабораторного анализа anti-HVC говорит о том, что в крови обследуемого не обнаружено иммунной реакции на вирус. Отрицательный результат может быть получен в таких случаях:
Если человек никогда не заражался гепатитом С.
Если чувствительность лабораторной тест-системы оказалась ниже, чем концентрация anti-HVC.
Если инфицирование произошло менее 2 месяцев назад и anti-HVC в крови еще недостаточно для определения. При ложноотрицательном ответе по причине человеческого фактора.
Если же получен результат, что антитела к HVC у больного обнаружены, это значит, что вирус гепатита С находился в организме обследуемого на момент проведения исследования или был в крови некоторое время назад. При положительном результате на anti-HVC возникает необходимость проведения дополнительных лабораторных исследований, которые обнаружат генетический материал самого возбудителя, определят концентрацию его генов (вирусную нагрузку, виремию) и установят генотип.
Анализ на РНК вируса гепатита С
Геном HVC в лабораторных условиях можно обнаружить с помощью нескольких исследований:
- разветвленной ДНК (р-ДНК);
- транскрипционной амплификации (ТМА);
- полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Метод р-ДНК — недорогой и простой способ обнаружения вирусного генома у большого количества обследуемых людей. Его главным недостатком является низкая чувствительность: выявляет HVC только при его концентрации свыше 500 МЕ/мл.
Метод транскрипционной амплификации обнаруживает в сыворотке крови нуклеиновые кислоты вируса. Анализ имеет высокую чувствительность (5-10 МЕ/мл), но он еще недостаточно внедрен в повсеместную лабораторную практику.
Метод ПЦР в России является самым распространенным и доступным лабораторным обследованием с высокой чувствительностью (от 50-60 МЕ/мл).
Исследование ПЦР выполняется в любой клинической лаборатории, имеющей соответствующую аккредитацию. Очень важным нюансом этого метода диагностики, который влияет на результат анализа, является чувствительность используемой в лаборатории тест-системы. Например, чувствительность диагностикума 60 МЕ/мл, как в лабораториях «Инвитро», позволяет обнаруживать вирусную РНК спустя 3 месяца после заражения. При низкой чувствительности тест-системы гены возбудителя могут не обнаруживаться даже спустя 4 месяца после инфицирования.
РНК вируса гепатита С: метод ПЦР
Метод ПЦР имеет множество преимуществ перед другими лабораторными исследованиями для обнаружения генов HVC:
- высокая чувствительность. Метод позволяет определять генетический материал возбудителя даже при его минимальной концентрации в образце;
- большая специфичность. Выявляет гены вируса определенного генотипа среди множества ДНК и РНК других возбудителей, что позволяет проводить генотипирование возбудителя;
- быстрота проведения. Отсутствие длительного процесса культивирования возбудителя сокращает время получения результата до нескольких часов; универсальность анализа.
Универсальная процедура проведения исследования позволяет одновременно использовать один образец крови человека для обнаружения генетического материала разных возбудителей. Эти преимущества позволяют считать ПЦР «золотым стандартом» лабораторной диагностики вирусного гепатита С вместе с иммуноферментным анализом на anti-HVC.
ПЦР — это исследование, используемое для определения генов HVC в крови обследуемого человека. Исследование состоит из нескольких этапов:
- Отбора образца биоматериала.
- Многократного увеличения концентрации копий РНК в отобранном образце.
- Обнаружения генетического материала с помощью специальных тест-систем.
После забора венозной крови у пациента проводят искусственное инициирование процесса множественного реплицирования (амплификации, копирования) генов HVC.
Для этого определенным способом несколько раз изменяют температуру внутри пробирки с биоматериалом. Когда количество копий РНК в пробирке достигает необходимого значения, проводят обнаружение возбудителя с помощью специальных тест-диагностикумов.
ПЦР-диагностика бывает
- качественной (обнаруживает присутствие вируса),
- количественной (определяет концентрацию вирусных генов в единице объема)
- генотипической (устанавливает генотип возбудителя).
РНК гепатита С: качественный анализ
Задача качественного ПЦР — определение наличия HVC в представленном биоматериале. Это исследование проводится обычно для скрининговой диагностики заболевания или выявления носительства. Назначают его после того, как выявят anti-HVC методом ИФА.
Чтобы поставить диагноз гепатита С, достаточно обнаружить генетический материал HCV качественно, то есть без подсчета его концентрации в объеме крови. Результатом качественного ПЦР может быть: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено».
syringe needle with droplet of blood in front of a finger and on blue bacjground
Точность метода соответствует 95%. При этом точность самих тест-диагностикумов достигает 100%, а 5% — это человеческий фактор, который всегда присутствует в лабораторных исследованиях. Чтобы избежать ложноотрицательного анализа, особенно у людей с низкой виремией, необходима высокая чувствительность применяемой в исследовании диагностической системы. Чувствительность тест-системы должна быть не меньшей, чем 60 МЕ/мл.
РНК гепатита С: количественный анализ
Количественный анализ назначают тогда, когда нужно знать уровень виремии в организме человека. Показаниями для проведения этого исследования являются:
- положительный результат качественного ПЦР при условии обнаружения антител к вирусу;
- установление стадии патологии;
- определение вирусной нагрузки при гепатитах;
- выбор комбинации противовирусных препаратов;
- мониторинг вирулогического ответа на проводимую противовирусную терапию;
- оценка вероятности перехода острого гепатита С в хронический.
Результат анализа выражается в МЕ/мл (международных единицах в 1 мл сыворотки) или в копиях/мл (количестве копий генов вируса в 1 мл сыворотки). Количественный ПЦР не имеет нормы: в норме ген HVC в крови человека обнаруживаться не должен. Полученные результаты обследования сравнивают с референсными значениями, установленными для той или иной степени вирусной нагрузки.
Так, показатели (в МЕ/мл):
- ниже 4×10*5 считаются низкой виремией;
- от 4×10*5 до 8×10*5 — средней;
- свыше 8×10*5 — высокой.
Чем больше копий вирусной РНК в крови, тем агрессивнее протекает заболевание и больше риск передачи вируса окружающим. Но уровень вирусной нагрузки — не единственный показатель, влияющий на тяжесть течения патологии и дальнейший прогноз для пациента: важен также генотип возбудителя.
Установление генотипа необходимо для назначения правильной схемы лечения. От него также зависит прогноз для здоровья и жизни пациента. Например, вирус 3 генотипа чаще приводит к фиброзу или циррозу печени, в сравнении с пациентами носителями 1 генотипа.
Гепатит С: анализы и расшифровка
РНК Диагноз гепатита С невозможно поставить только по результатам только качественного и/или количественного анализа ПЦР: определения HVC и уровня вирусной нагрузки недостаточно для назначения адекватной противовирусной терапии. Потенциального больного нужно обследовать комплексно (клинически, лабораторно, инструментально), чтобы иметь объективную картину патологии. Правильно назначить комплекс обследований для установления диагноза гепатита С, а затем грамотно расшифровать полученные результаты может только врач.
Источник: Sofosbuvir-Daclatasvir.ru
Читайте также
Вид:
Источник
Гепатит С – это опасное вирусное заболевание, оказывающее разрушительное воздействие на печень. В основе разработки схемы комплексного лечения лежит диагностика. Только отталкиваясь от данных анализов, врач-гепатолог может оценить состояние больного.
Важность лабораторных исследований заключается еще и в том, что вирусный гепатит С имеет одиннадцать генотипов, каждый из которых имеет разную степень негативного воздействия на организм, а следовательно, требует индивидуального подхода в лечении.
Когда анализ крови дает положительный или отрицательный результат на присутствие вируса, все более или менее ясно. Но в медицине часто употребляется обозначение «референсный показатель». Что под этим подразумевается, и как расшифровать собственный анализ крови – разберемся далее.
Что такое референсные значения в анализе крови на гепатит С
Подобная терминология употребляется не только в отношении больных гепатитом С. Данную формулировку используют при расшифровке любого анализа, будь то кровь или моча. И обозначает она интервал, определяющий нормативное значение. То есть если один из показателей вписывается в установленный «коридор», это означает, что нет отклонений от нормы.
Как пример, можем рассмотреть референсный показатель лейкоцитов в общем анализе крови. Согласно установленной норме, цифровое значение должно находиться в промежутке между 4 и 9. Все данные выше или ниже считаются отклонением, и указывает на развитие какой-либо патологии. Естественно, врач не рассматривает изменение только одного показателя, а оценивает общее изменение в формуле крови для постановки точного диагноза.
Но может ли показатель присутствия вируса в анализе крови на гепатит С считаться нормой? Существует ли для этого заболевания усредненный показатель?
Могут ли быть референсные значения в расшифровке анализа на гепатит С
Ответ на этот вопрос зависит от типа исследования, которое проводится. Так, все анализы на присутствие вируса можно разделить на две большие группы:
- качественные;
- количественные.
Интерпретация качественного анализа
Если производится качественная диагностика (например, ПРЦ), то норматив обозначается не в цифровом эквиваленте, а буквенном. То есть в качестве результат должна быть фраза «не обнаружено».
То есть фраза «обнаружено», указывает на то, что иммунная система человека обнаружила вирус и начала вырабатывать антитела против него. Это значит, что пациент скорее всего болен вирусным гепатитом С, но нуждается в дополнительном обследовании для уточнения диагноза.
Указателем абсолютного здоровья пациента является полное отсутствие вируса в анализе крови. Это указывает на то, что больной не инфицирован гепатитом С и у него не диагностируется ни острая, ни хроническая его форма.
Интерпретация количественного анализа
К количественной диагностике относится та же ПРЦ (полимеразная цепная реакция) или методика РНК. Здесь уже определяется вирусная нагрузка на организм. Показателем референсного значения является «не обнаружено». Либо нахождение показателя в «коридоре» от 0 до 15МЕ/мл.
Любое цифровое значение более 15 МЕ/мл указывает на присутствие заболевания и подтверждает диагноз гепатита С.
Здесь уже врач рассматривает количественные данные: чем выше показатель, тем опаснее состояние пациента. Например, цифра 100 000 000 МЕ/мл указывает на высокую степень поражения вирусом. Такое значение угрожает жизни больного и требует срочного медикаментозного лечения.
Какие анализы сдаются
При первоначальном обращении за медицинской помощью затруднительно определить проблему, тем более что симптомы вирусного гепатита С очень схожи с огромным количеством других заболеваний. Поэтому врач, в первую очередь, исключает другие болезни. Для этого в самом начале обследования назначается общий анализ крови и ее биохимия.
Трактуя показатели первоначальных лабораторных исследований, врач может предположить наличие вирусного гепатита в организме пациента. Для уточнения диагноза выдается направление на обнаружение HVC инфекции в крови пациента.
Как обозначается гепатит С в анализах
Зависит от типа исследования. Обычно используется следующее буквенное обозначение:
- анти-HCVcor IgM;
- анти-HCVcor IgG;
- анти-HCVNS3,4,5 IgG;
- РНК
В первых трех вариантах в значении маркера часто указывается «+» или «–». Один или несколько плюсов обозначают наличие инфекции, то есть в крови пациента присутствуют антитела. В медицине термин звучит как «положительный маркер». То есть человек, имеющий подобный результат на выявление HCV-инфекции, скорее всего болен и может быть источником инфекции для окружающих.
РНК HCV обозначает на присутствие или отсутствие вируса. То есть в анализе будет сделана четкая запись – «обнаружено» или «не обнаружено».
Анализы ПРЦ на гепатит С
Методика позволяет выявить возбудителя заболевания. Как известно, человек может заразиться одним из одиннадцати существующих генотипов. Методика считается действенной, особенно при определении хронической стадии заболевания. Ее вероятность достигает 97%.
Метод делится на три типа:
- Качественный. Данная методика позволяет поставить первоначальный диагноз на основании выявленного в крови вируса.
- Количественный. Устанавливается вирусная нагрузка на организм. В зависимости от ее величины устанавливается дозировка лекарственных препаратов и схема лечения. Также этот метод используют для определения эффективности назначенного лечения. То есть если вирусная нагрузка уменьшается, комплекс мероприятий действует.
- Генотипный. Позволяет точно определить возбудителя заболевания. Это очень важно для дальнейшего лечения.
Для анализа используется венозная кровь, которая помещается в пробирку. Туда добавляются специальные ферменты, под воздействием которых количество вирусного генома многократно увеличивается. Это дает возможность его обнаружения даже при минимальном заражении. Главное, что больному не придется длительное время томиться в ожидании результат. Точный ответ с подтверждением или опровержением диагноз будет через 48 часов.
Расшифровка результата анализа ПРЦ на гепатит С
При каждой лаборатории присутствует специально обученный сотрудник, занимающийся расшифровкой анализов. Именно в его компетенции находится выявление референсного значения. При этом каждая лаборатория использует различные реактивы и тест-системы. Именно поэтому количественный анализ может быть либо в МЕ/мл или копиях/мл. Но это не меняет сути.
Лаборант не занимается трактовкой данных – это функция врача-гепатолога. Он рассматривает не только данные представленного обследования. Если результат вызывает сомнение, специалист может назначить дополнительное обследования при помощи других методик.
Некоторые выводы больной может сделать самостоятельно, получив результаты на руки. Качественный тест с обозначением «обнаружено» или «не обнаружено» косвенно укажет на наличие заболевания.
Трактовка количественного показателя – привилегия врача. Тем более что среди врачей не существует единого мнения, какая вирусная нагрузка является средней, а какая – низкой. Существуют такие значения:
- от 0 до 15МЕ/мл – референсное значение (то есть пациент скорее здоров, чем болен);
- до 4 х 10*5 МЕ/мл – низкая вирусная нагрузка;
- от 4 х 10*5 МЕ/мл до 8 х 10*5 МЕ/мл – средняя вирусная нагрузка;
- свыше 8 х 10*5 МЕ/мл до 10 х 10*5 МЕ/мл – высокая вирусная нагрузка;
- более 10 х 10*5 МЕ/мл – очень высокая нагрузка, сопряженная с опасностью для жизни пациента.
Количественный показатель указывает на агрессивность вируса. То есть чем его больше, тем сильнее негативное воздействие, оказываемое им на печень, тем длительнее и сложение будет терапия.
Если пациент сомневается в результатах анализов, их следует пересдать по собственной инициативе.
Анализы ИФА на гепатит С
Эта методика основывается на обнаружении в венозной крови пациента, антител к вирусному гепатиту С. Их существует два типа:
- IgG – указывает на хроническое течение заболевания;
- IgM – указывает, что болезнь находится в острой стадии.
Отсутствие антител обозначает, что болезни нет. Но это не всегда верно. Вирус HVC умеет «скрываться» и «обманывать» иммунную систему человека. Поэтому при его попадании в организм не всегда тут же происходит адекватный иммунный ответ. Поэтому в случае сомнения анализ следует повторить через время.
Анализы riba на гепатит С
Не относится к первоначальному обследованию. Его чаще используют после ПРЦ или ИФА для подтверждения диагноза. RIBA обозначает рекомбинантный иммуноблотинг. Методика не позволяет точно определить генотип вируса, она указывает на его однозначное присутствие в организме.
Биохимический анализ крови для выявления гепатита С
Анализ крови на биохимические показатели – это важный этап предварительного обследования. Человеческая кровь выдает более 100 показателей. Их отклонение от референсного значения может указывать на следующие патологии:
- Нарушение работы печени, почек, поджелудочной железы или желчного пузыря.
- Сбой в обменных процессах.
- Воспалительные процессы внутренних органов, тканях или суставах.
Биохимический анализ крови позволяет быстро выявить любые проблемы со здоровьем. Отклонение показателей от нормы точно указывает на возникшие заболевания и дает основание для дополнительных обследований.
Для определения возможных проблем с печенью исследуется следующие показатели:
Показатель | Возможная патология | Ед. измерения | Референсное значение | |
мужчины | женщины | |||
Билирубин | Превышение верхней допустимой границы указывает на серьезные нарушения в работе печени и ее структурное изменение | Мкмоль/л | 3,4-17,1 | 3,4-17,1 |
Альбумин белок, вырабатываемый печенью | Резкое снижение показателя свидетельствует о серьезном заболевании печени | г/л | 35-50 | 35-50 |
Гамма-глобулин | г/л | 130-160 | 120-150 | |
Ферменты АлАт и АсАт | Любое отклонение выше верхнего референсного значения указывает на присутствие вирусного гепатита | Ед/л | 41-45 | 31 |
Глюкоза | Понижение показателя обозначает серьезное нарушение метаболизма и отклонения в работе печени | Ммоль/л | 3,30-5,50 | 3,30-5,50 |
Показатели нормы различаются не только по половой принадлежности, но и в зависимости от возраста пациента. В таблице указаны данные для взрослых пациентов до 60 лет.
Только врач способен расшифровать показатели. Некоторое отклонение от нормы не обязательно указывает на наличие гепатита С. Это может быть временный сбой в работе печени под воздействием других факторов.
Условия назначения анализов
Любой из анализов на вирусный гепатит С может назначаться по показаниям, то есть, когда больной обратился за помощью в лечебное заведение и врач заподозрил наличие одного из вирусных гепатитов.
Кроме этого, существует определенная группа людей, для которых необходимость сдачи анализа на наличие вирусного гепатита С является обязательной:
- Беременные в момент постановки на учет в женскую консультацию.
- Больные с симптомами «желтухи».
- Люди, относящиеся к группе риска:
- Медицинские сотрудники, особенно лица, которые постоянно имеют контакт с кровью.
- Сотрудники правоохранительных органов.
- Люди, у которых обнаружен СПИД.
- Наркозависимые граждане (инъекционные наркоманы).
Кроме перечисленных лиц рекомендована сдача анализов людям, ведущим беспорядочную половую жизнь, а также гомосексуалистам, постоянно меняющим партнеров. Хотя риск заразиться гепатитом С половым путем при незащищенном контакте состоит всего 10%, сдать анализы не помещает. Тем более, что в части государственных учреждений определенная диагностика производится совершенно бесплатно.
Подготовка к сдаче анализов
Для того, чтобы результат анализов был максимально достоверным, пациенту необходимо подготовиться к их сдаче. Мероприятия заключаются в следующем:
- Последнее употребление пищи должно быть не менее, чем за 8 часов до обследования. То есть забор крови из вены происходит на голодный желудок.
- Непосредственно перед сдачей анализа не стоит курить.
- За 2-3 дня до сдачи анализов следует оказаться от употребления алкоголя, очень острой, жирной и соленой пищи.
- Перед походом в лабораторию не стоит подвергать организм сильным физическим и эмоциональным нагрузкам.
Несоблюдение этих простых правил может привести к ложным выводам. Врачи рекомендуют провести 10-15 минут перед забором крови в полном покое. Если перед сдачей анализов пациентом употреблялись любые медикаментозные средства, он обязательно должен об этом уведомить врача.
Ложноположительный результат анализа на гепатит С
Существует вероятность в пределах 10-15% получения ложноположительного анализа при обследовании. Чаще всего на некорректный результат влияют сопутствующие заболевания:
- аутоиммунные проблемы;
- злокачественные и доброкачественные образования;
- инфицирование другими сложно определяемыми вирусами.
В любом случае врач обычно не руководствуется одним результатом, назначая дообследованние или пересдачу анализов.
Кроме причин, связанных со здоровьем обследуемого, на результат анализов существенно влияет человеческий фактор:
- Квалификация лаборанта.
- Точность оборудования.
- Случайная подмена пробы.
- Нарушение правил хранения и подготовки исследуемого материала.
Поэтому прежде, чем делать любые выводы, необходимо подтвердить положительный результат при помощи других методик.
Чтобы не получить ложноположительный ответ, нужно отказаться от сдачи крови в случае:
- ОРВИ или гриппа;
- 30-дневного периода после вакцинирования от гриппа, гепатита В или столбняка.
Чаще других случаев, ложноположительный результат обнаруживается у беременных женщин.
Современная методика обследования позволяет обнаружить гепатит С как в острой, так и хронической стадиях заболевания. Для того, чтобы быть уверенным в результатах лабораторного обследования, не стоит обращаться в сомнительные учреждения. В данной ситуации главным фактором является не цена вопроса, а репутация заведения и достоверность проводимых исследований.
Полезное видео про референсные значения и нормы анализов
Источник