Хемилюминесцентный анализ на гепатит с
Что такое гепатит С и чем он опасен
Модель вируса гепатита С
Гепатит С — вирусное заболевание, при котором поражаются клетки печени, также патологический процесс может затронуть иммунные механизмы и другие внутренние органы. Инфицирование происходит преимущественно через кровь во время трансфузий, инвазивных процедур. Редко возможен путь передачи при половом контакте либо от матери ребёнку во время родов.
Заболевание вызывается вирусом гепатита С (ВГС), который относится к роду Flavivirus и состоит из однонитевой РНК, включающей около 10 000 нуклеотидов. Особенностью ВГС является его способность к мутациям, что помогает вирусу избегать атак иммунной системы. Всего известно 6 генотипов ВГС, каждый из которых включает множество подтипов. Вариабельность ВГС не позволяет создать эффективную вакцину против гепатита С, что является одной из причин неуклонного роста инфицирования во всём мире.
Гепатит С — «ласковый убийца»
Болезнь начинается с острой стадии, которая в 85% случаев протекает бессимптомно, поэтому диагностируется гепатит С обычно уже на последующих этапах болезни. Примерно в четверти случаев острая стадия завершается самоисцелением, когда системе иммунитета удаётся полностью уничтожить вирус, при этом инфицированный человек зачастую даже не догадывается о том, что был болен. В остальных 75% заражений ВГС защитным клеткам организма удаётся лишь частично сдерживать размножение вируса. Гибель гепатоцитов сопровождается омертвением тканей печени и приводит к развитию патологий, опасных для жизни: циррозу и опухолевым образованиям в печени.
Гепатоцеллюлярный рак — одно из самых тяжёлых последствий гепатита С, является причиной летального исхода, в ряде стран Африки занимает первое место среди онкологических заболеваний мужского населения и третье место среди видов рака у женщин.
Согласно статистике ВОЗ во всём мире ежегодно осложнения гепатита С уносят жизни 700 000 людей.
Группа риска по гепатиту С
Наркозависимые лица — в группе риска
Заболевание быстро распространяется в среде наркоманов, на их долю приходится 2/3 случаев заражения гепатитом С. В некоторых странах наркозависимым людям предоставляется возможность бесплатного обследования и лечения во избежание распространения болезни. Так, в северных штатах Индии, где инфицирование гепатитом С среди наркоманов составляет 98%, ВОЗ организовала проект по скрининг-тестам и терапии.
К группе риска относятся люди, получающие донорскую кровь, хотя за последние десятилетия удалось значительно снизить количество заражений во время трансфузий путём тщательного обследования доноров. Однако существует невысокий процент случаев, когда гепатит С не выявляется при тестировании, что приводит к инфицированию реципиентов.
Любые процедуры, связанные с повреждением кожных покровов, при несоблюдении стерильных мер, могут спровоцировать передачу вируса от больного человека здоровому. Так, местом заражения может быть стоматологический кабинет, салон татуировок и пирсинга.
Незначительное число заражений происходит и при половом контакте, поэтому люди, чьи сексуальные партнёры являются носителями вируса, также входят в группу риска. Профилактическое обследование рекомендуется проводить и лицам, у которых среди ближайших родственников есть пациенты с гепатитом С. Инфицирование в данном случае может произойти при использовании одних и тех же бритвенных и маникюрных приборов, зубной щётки, то есть при несоблюдении мер личной гигиены. Воздушно-капельным путём, через одежду или посуду вирус не передаётся.
Показания к проведению исследования
Диагностика заболеваний печени — показание к исследованию
Анализ может быть назначен в качестве скрининг-теста, а также в профилактических целях при планировании и во время беременности, поступлении в стационар, в предоперационный период. Направление на выявление гепатита С выдаётся при наличии изменений в общих анализах мочи, кала, крови, а также следующих симптомах:
- повышенная утомляемость;
- нарушение сна;
- расстройство стула, изменение цвета кала на более светлый;
- цвет мочи становится темнее;
- желтушность слизистых и кожных покровов;
- головные, мышечные боли;
- боли в области правого подреберья;
- тошнота, рвота;
- непереносимость жирной пищи;
- рост температуры тела;
- увеличение размеров печени.
Правила подготовки
Пациенты должны быть подготовленными к тесту
- Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до исследования.
- В предыдущие сутки рекомендуется ограничить жирную, острую пищу, полностью исключить алкоголь.
- Физические и эмоциональные нагрузки должны быть сведены к минимуму.
- Исключается употребление лекарственных средств, если их приём отменить невозможно, необходимо предоставить список препаратов врачу.
- Курение следует прекратить минимум за 1 час до тестирования.
- В день сдачи анализа можно пить только чистую воду.
- Все иные исследования и медицинские манипуляции проводятся после изъятия крови.
Методы диагностики гепатита С
Лабораторная диагностика проводится несколькими методами
Качественный метод
Через несколько недель, в некоторых случаях через несколько месяцев после проникновения в организм вируса иммунная система начинает вырабатывать защитные антитела к оболочке, элементам генома и ядру ВГС. Для определения специфических иммуноглобулинов используются анализы на антитела к ВГС. Это может быть иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) или иммуноферментный анализ (ИФА), которые основываются на выявлении комплексов антитело-антиген. На начальном этапе образуются иммуноглобулины класса М, затем подключаются иммуноглобулины класса G.
ПЦР-диагностика
Гепатит С является заболеванием, при котором наблюдается замедленный иммунный ответ, а в 5% случаев антитела против ВГС не определяются у пациента и через год после инфицирования. При помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) можно выявить ВГС на самых ранних сроках, что выгодно отличает данный метод диагностики от ИХЛА и ИФА. В основе анализа лежит обнаружение РНК вируса всех 6 генотипов ВГС.
Исследование на интерлейкин-28-бета
При инфицировании ВГС существует несколько путей развития болезни, включая самостоятельное уничтожение вируса системой иммунитета, медикаментозное лечение с устойчивым вирусологическим ответом (УВО), а также развитие болезни с переходом в последующие стадии, несмотря на терапию рибавирином и интерфероном. Реакцию организма на зарождение гепатита С долго не могли предугадать, пока не была обнаружена прямая связь между полиморфизмами гена интерлейкина-28-бета и УВО при гепатите С. Интерлейкин-28-бета относится к интерферонам 3 типа, обладающих способностью подавлять репликацию ВГС. Генетический анализ назначается перед началом лечения гепатита С для прогноза эффективности лечения и выбора тактики терапии.
Биохимический анализ крови
Биохимический анализ отражает целый ряд изменений в крови и печени при гепатите С. Печень продуцирует комплекс ферментов, участвующих в различных биохимических процессах организма. Снижение либо рост уровня ферментов позволяют выявить нарушения в работе печени. Изменение концентрации электролитов, жиров и белков в крови отражают последствия инфицирования ВГС.
Расшифровка результатов
Расшифровка теста — важный и ответственный этап диагностики
Качественный анализ
Положительный:
- острая либо хроническая фаза гепатита С;
- наличие заболевания в прошлом периоде.
Отрицательный:
- отсутствие инфицирования;
- инкубационный период (первые 4-6 и более недель после заражения);
- серонегативный вариант гепатита С (когда иммуноглобулины против ВГС не вырабатываются).
ПЦР
Отражает вирусную нагрузку и исчисляется в количестве вирусных частиц. Результаты могут быть представлены следующим образом:
- Отрицательный. РНК ВГС отсутствует либо количество ниже предела чувствительности.
- От 10^2 до 1х10^8 МЕ/мл — положительный результат со средней вирусной нагрузкой.
- > 10^8 МЕ/мл — высокий уровень концентрации РНК ВГС.
Комплекс лабораторных методов позволяет поставить верный диагноз
Интерлейкин-28-бета
- Генотип С/С. Высокая вероятность УВО при терапии рибавирином и интерфероном.
- Генотипы С/Т и Т/Т. Низкая вероятность УВО при противовирусной терапии.
Биохимический анализ
При гепатите С могут быть выявлены следующие отклонения:
- снижение альбумина;
- повышение билирубина;
- рост концентрации триглицеридов;
- повышенное присутствие аммиака;
- снижение либо повышение уровня железа;
- пониженный уровень мочевины;
- повышение концентрации аспартатаминотрансферазы (АсАт);
- значительный рост фермента аланинаминотрансферазы (АлАт);
- превышение нормы щелочной фосфатазы (ЩФ);
- повышенный уровень лактатдегидрогеназы (ЛДГ);
- появление в крови фермента сорбитолдегидрогеназы (СДГ);
- рост концентрации фруктозо-моносфат-альдолазы (ФМФА).
Отклонения от нормы ещё не являются поводом для постановки диагноза. Расшифровка показателей осуществляется в комплексе лечащим врачом.
Источник
[40-001]
4 обязательных анализа, экспресс
1990 руб.
Комплексное скрининговое экспресс-исследование на гепатиты B и C, ВИЧ-инфекцию 1-го и 2-го типов и сифилис, обязательное для госпитализации, оформления санитарной книжки, постановки на учет по беременности, постановки на воинский учет, получения разрешения на работу и пр.
Синонимы русские
Гепатит С, антитела + гепатит B, антиген, австралийский антиген + ВИЧ 1 и 2, антитела и антиген p24 + сифилис (бледная трепонема), антитела.
Синонимы английские
Anti-HCV + HBsAg, Hepatitis B Surface Antigen + HIV 1,2 Ag/Ab Combo,HIV 1,2 Abs, p24 antigen + Treponema pallidum Abs.
Метод исследования
Иммунохемилюминесцентный анализ.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Исследование предназначено для скрининга гепатитов B и C, ВИЧ-инфекции 1 и 2 типов и сифилиса. Так как это экспресс-тест, результаты будут получены в кратчайшие сроки.
Для скрининга гепатита B в анализе крови определяют один из антигенов этого вируса – HBsAg. Он входит в состав оболочки вируса и является самым ранним маркером активной инфекции. HBsAg обычно появляется в крови через 2-8 недель после заражения. Этот антиген может быть обнаружен как при остром, так и при хроническом гепатите В. Он не определяется при разрешении острой инфекции гепатита В и после вакцинации. Следует подчеркнуть, что HBsAg также не обнаруживается в период «серологического окна». Более того, в некоторых случаях инфекция гепатита носит латентный характер, при этом вирус сохраняется в ткани печени (о чем свидетельствует положительный результат анализа на ДНК вируса), однако HBsAg в крови не выявляется. Таким образом, HBsAg – это чувствительный, но не абсолютный маркер для исключения гепатита В. Присутствие HBsAg в крови более 6 месяцев служит одним из критериев диагностики хронического гепатита В. При выявлении HBsAg в крови проводят дополнительные, подтверждающие тесты для уточнения диагноза вирусного гепатита В.
Для скрининга гепатита C в анализе крови определяют IgG-антитела к этому вирусу. Anti-HCV могут быть обнаружены как при текущей инфекции (острой или хронической), так и при разрешении острого гепатита C. Таким образом, анализ на Anti-HCV не позволяет дифференцировать острый и хронический гепатит и гепатит C в анамнезе. При выявлении Anti-HCV в крови проводят дополнительные, подтверждающие тесты для уточнения диагноза вирусного гепатита С.
Анализ на ВИЧ (вирус, вызывающий СПИД), или, точнее, скрининг ВИЧ-инфекции 1-го и 2-го типа осуществляется с помощью определения антител к этому вирусу и антигена p24. Анализ на антитела к вирусу характеризуется очень высокой чувствительностью (> 99,5 %). Специфичность такого анализа ниже: ложноположительный результат может наблюдаться при наличии в крови пациента аутоантител, заболеваниях печени, недавней вакцинации против вируса гриппа и при наличии другой острой вирусной инфекции. По этой причине при получении положительного результата проводят дополнительный, подтверждающий анализ. Также для получения более точной информации о ВИЧ-статусе пациента анализ на антитела к ВИЧ дополняют анализом на антиген p24 – один из структурных белков вирусного капсида, являющийся ранним маркером острой ВИЧ-инфекции. Анализ на p24 может быть особенно полезным на ранних стадиях инфекции, когда титр антител к вирусу еще не достиг определяемого уровня. Следует отметить, что при выработке достаточного количества антител к ВИЧ (в том числе и к p24) этот антиген может больше не определяться. Специфичность анализа на p24 достигает 100 %, а его чувствительность – 30-50 %. Комбинация двух тестов для определения ВИЧ (антитела и антиген p24) позволяет достичь 100 % чувствительности и специфичности.
При анализе крови на сифилис (скрининге сифилиса) определяют IgM- и IgG-антитела к бледной трепонеме (Treponema pallidum). Анализ характеризуется очень высокой чувствительностью. При следующих факторах могут наблюдаться ложноположительные результаты: наличие в крови аутоантител (например, антиядерных антител), наличии ОРВИ, мононуклеоза, кори и других вирусных инфекций, узелкового периартериита, ревматоидного артрита, склеродермии и других заболеваний соединительной ткани, других спирохетозов (болезнь Лайма, лептоспироз) и других трепонематозов. По этой причине при получении положительного результата анализа на сифилис проводят дополнительные, подтверждающие тесты для уточнения диагноза. Серологические тесты имеют наибольшую информативность во вторичном периоде и при латентном сифилисе.
Так как в исследовании определяются антитела к возбудителям заболеваний, при интерпретации результата следует учитывать состояние иммунной системы пациента. Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться у пациентов с иммуносупрессией (прием глюкокортикоидов и других иммуносупрессантов) и у пожилых людей. Также большое значение имеют анамнестические данные: принадлежность пациента к группе риска по этим заболеваниям (использование инъекционных наркотических средств, многократные переливания крови), наличие аутоиммунных и инфекционных заболеваний, физиологическое состояние организма (беременность, пожилой возраст).
Для чего используется это исследование?
- Для скрининга гепатитов B и C, ВИЧ-инфекции 1-го и 2-го типов и сифилиса.
Когда назначается исследование?
- При госпитализации в стационар;
- при оформлении санитарной книжки;
- при постановке на учет по беременности;
- при постановке на воинский учет;
- при получении разрешения на работу.
Что означают результаты?
Референсные значения (норма анализов на гепатиты В и С, анализа на ВИЧ, анализа на сифилис): отрицательно – для всех 4 показателей.
Положительный результат | Отрицательный результат | |
Anti-HCV | Острый гепатит C Хронический гепатит C Гепатит C в анамнезе | Норма |
HBsAg | Острый гепатит B Хронический гепатит B | Норма Латентный гепатит B Период «серологического окна» гепатита В Вакцинация против гепатита В |
HIV 1,2 Ag/Ab Combo:
| ВИЧ-инфекция Ложноположительный результат:
| Норма |
HIV 1,2 Ag/Ab Combo:
| Острая ВИЧ-инфекция | Норма |
Treponema pallidum Abs | Сифилис Ложноположительный результат:
| Норма Ложноотрицательный результат:
|
Что может влиять на результат?
- Время, прошедшее с момента инфицирования;
- состояние иммунной системы организма;
- наличие в крови аутоантител, вирусных и бактериальных патогенов, препятствующих осуществлению реакции.
Важные замечания
- Исследование является скрининговым: при получении положительного результата анализа проводят дополнительные, подтверждающие тесты для уточнения диагноза;
- при интерпретации результата следует учитывать состояние иммунной системы пациента.
Также рекомендуется
- Вирусный гепатит В. Обследование для исключения вируса гепатита В, в том числе у контактных лиц
- Вирусный гепатит В. Определение формы и стадии заболевания
- Вирусный гепатит C. Анализы для первичного выявления заболевания. Обследование контактных лиц
- Вирусные гепатиты. Первичная диагностика
- Treponema pallidum, антитела
- Treponema pallidum, IgM, титр
- Treponema pallidum, IgG, титр
- Treponema pallidum, ДНК [ПЦР]
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, терапевт, хирург, гинеколог.
Литература
- Chernecky C. C. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures / С.С. Chernecky, В.J. Berger; 5th ed. – Saunder Elsevier, 2008.
- Fauci et al. Harrison’s Principles of Internal Medicine/A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J. L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. – The McGraw-Hill Companies, 2008.
- Schmeltzer P, Sherman KE. Occult hepatitis B: clinical implications and treatment decisions. Dig Dis Sci. 2010 Dec;55(12):3328-35.
Источник
[07-009]
Anti-HCV, антитела
825 руб.
Anti-HCV – специфические иммуноглобулины классов IgM и IgG к белкам вируса гепатита С, свидетельствующие о возможной инфицированности или ранее перенесенной инфекции.
Синонимы русские
Суммарные антитела к вирусу гепатита С, анти-HCV.
Синонимы английские
Antibodies to Hepatitis C Virus, IgM, IgG; HCVAb, Total.
Метод исследования
Иммунохемилюминесцентный анализ.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Вирус гепатита С (ВГС) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает клетки печени и вызывает гепатит. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и ассоциирован с развитием криоглобулинемии, болезни Шегрена и В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний. Среди всех возбудителей вирусных гепатитов у ВГС наибольшее количество вариаций, а благодаря высокой мутационной активности он способен избегать защитных механизмов иммунной системы человека. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза заболевания и эффективности противовирусной терапии.
Основной путь передачи инфекции – через кровь (при переливании элементов крови и плазмы, пересадке донорских органов, через нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятна передача вируса при половом контакте и от матери ребенку во время родов, но это происходит реже.
Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро, с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса, редко оно сопровождается желтухой. У 60-85 % зараженных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Для хронического вирусного гепатита С характерна «волнообразность» с повышением печеночных ферментов и слабовыраженными симптомами. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.
Специфические иммуноглобулины вырабатываются к ядру вируса (нуклеокапсидному белку core), оболочке вируса (нуклеопротеинам Е1-Е2) и фрагментам генома вируса гепатита С (неструктурным белкам NS). У большинства больных ВГС первые антитела появляются через 1-3 месяца после инфицирования, но иногда могут отсутствовать в крови больше года. В 5 % случаев антитела к вирусу так никогда и не обнаруживаются. При этом о ВГC будет свидетельствовать выявление суммарных антител к антигенам вируса гепатита С.
В острый период болезни образуются антитела классов IgM и IgG к нуклеокапсидному белку core. В период латентного течения инфекции и при ее реактивации в крови присутствуют антитела класса IgG к неструктурным белкам NS и нуклеокапсидному белку core.
После перенесенной инфекции специфические иммуноглобулины циркулируют в крови 8-10 лет с постепенным снижением концентрации или сохраняются пожизненно в очень низких титрах. Они не защищают от вирусной инфекции и не снижают риска повторного заражения и развития заболевания.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики вирусного гепатита С.
- Для дифференциальной диагностики гепатитов.
- Для выявления ранее перенесенного вирусного гепатита С.
Когда назначается исследование?
- При симптомах вирусного гепатита и повышении уровня печеночных трансаминаз.
- Если известно о перенесенном гепатите неуточненной этиологии.
- При обследовании людей из группы риска по заражению вирусным гепатитом С.
- При скрининговых обследованиях.
Что означают результаты?
Референсные значения
Результат: отрицательный.
Отношение S/CO (signal/cutoff): 0 — 1.
Причины anti-HCV положительного результата:
- острый или хронический вирусный гепатит С;
- ранее перенесенный вирусный гепатит С.
Причины anti-HCV отрицательного результата:
- отсутствие вируса гепатита С в организме;
- ранний период после инфицирования;
- отсутствие антител при вирусном гепатите С (серонегативный вариант, около 5 % случаев).
Что может влиять на результат?
- Ревматоидный фактор в крови способствует ложноположительному результату.
Важные замечания
- При положительном результате anti-HCV для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С» выполняется тест с определением структурных и неструктурных белков вируса (NS, Core).
- При имеющихся факторах риска заражения и подозрении на вирусный гепатит С рекомендовано определение РНК вируса в крови методом ПЦР даже при отсутствии специфических антител.
Также рекомендуется
- Anti-HCV, антитела, ИФА
- Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С
- HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]
- HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]
- HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР]
- anti-HAV, IgM
- HBsAg
- anti-HBc, IgM
- Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
- Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
- Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
- Фосфатаза щелочная общая
- Альбумин в сыворотке
- Билирубин общий
- Холестерол общий
- Тромбиновое время
- Фибриноген
- Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
- Лейкоцитарная формула
- Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
Кто назначает исследование?
Инфекционист, гепатолог, гастроэнтеролог, терапевт.
Литература
- Возианова Ж. И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3 т. — К.: Здоровье, 2000. – Т.1.: 600-690.
- Кишкун А. А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. – М.: ООО «МИА», 2006. – 471-476 с.
- Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
- Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
- Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.
Источник
