Иммунохроматографический метод для гепатита с

Расшифровка качественного ПЦР-анализа на гепатит C

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.

Острый гепатит C является широко распространенной вирусной инфекцией. Заболевание антропонозное, то есть в нормальных условиях развивается только в человеческом организме. Возбудителем болезни служит вирус HCV. Для начала развития инфекции вирус должен попасть непосредственно в печень. Основным путем заражения организма является контакт с инфицированной кровью и / или ее компонентами. Вирус обнаруживается с помощью анализа крови на гепатит C методом ПЦР.

Сложность диагностики инфекции до приобретения хронической формы состоит в том, что протекает она бессимптомно. Выявляется болезнь часто случайно, во время прохождения обычных медосмотров, диспансеризации.

Особенности генетической вариабельности HCV

Организм человека не способен выявить и обезвредить попавший в организм вирус гепатита C на ранних стадиях инфицирования, что связано с генетическим непостоянством HCV. Нить РНК вируса имеет протяженность около 10 000 нуклеотидов, которые быстро замещаются.

В настоящий момент известно 6 генотипов и свыше 90 субтипов HCV. Существуют так называемые квазивиды — множественные вариации вируса гепатита C.

Внутри одного генотипа вируса образуется большое количество мутированных, генетически родственных его вариаций. Разные квазивиды одного генотипа являются результатом генетической нестабильности HCV. Они образуются в ходе мутаций при размножении вируса гепатита C.

Наличие различных вариаций одного и того же генотипа объясняет отрицательный ответ вируса на иммунные атаки организма, а также сохранение его длительной активности.

Приобретение хронической формы болезни, безрезультатная терапия интерферонами и риск повторного инфицирования являются следствием генетической мутации вируса.

Инфицирование

Инфекция острого гепатита C передается путем попадания зараженной крови в кровоток здорового человека. Такой путь передачи называется парентеральным. В зоне высокого риска заражения находятся люди, которые могут контактировать с потенциально инфицированной кровью. Это сотрудники медицинских лабораторий, пациенты, требующие переливание крови, трансплантацию органов, а также находящиеся на диализе.

В салонах красоты (предоставляющих услуги пирсинга, тату, маникюра и т.д.), а также стоматологических кабинетах все манипуляции должны происходить в санитарных условиях с использованием стерильных инструментов, так как HCV может попасть в организм через загрязненные инструменты.

Отдельно следует выделить наркозависимых людей. Многократное использование одного шприца с иглой разными лицами в разы повышает риск инфицирования. Именно наркоманы составляют большую часть больных гепатитом C и являются переносчиками вируса HCV.

В бытовых условиях инфекция может распространяться через личные средства гигиены: зубные щетки, бритвенные принадлежности.

Все способы передачи инфекции, кроме контакта с кровью, называются общим словом непарентеральный путь заражения. Таким способом гепатит C передается крайне редко, что связано с малой концентрацией вируса. Половой путь передачи составляет не более 10% случаев заражения. Передача вируса с молоком кормящей матери относится к единичным случаям.

Всем, кто находится в группе повышенного риска заражения, а также тем, кто имел неосторожность контактировать с инфицированной кровью, рекомендуется сдать анализы крови на выявление HCV.

Особенности диагностики

Из-за отсутствия специфических симптомов острого вирусного гепатита C заболевание в большинстве случаев приобретает хроническую форму.

В первые несколько недель после инфицирования (в среднем 3 недели) можно обнаружить РНК вируса гепатита C в крови больного. Для выявления вируса гепатита, его вида, генотипа необходимо лабораторное исследование биологического материала: крови и ее сыворотки, лимфы, фрагментов тканей печени. Такое исследование проводится не только для диагностики, но и для определения качественной интерферонотерапии.

Как правило, антитела к HCV обнаруживаются посредством иммуноферментного анализа (ИФА). Данное исследование дает исчерпывающий ответ: «обнаружено» или «не обнаружено». Соответственно, проба положительна или отрицательна. Антитела, обнаруженные с помощью ИФА, не всегда свидетельствуют о присутствии HCV в организме. Часто такой анализ дает ложноположительные результаты. Это связано с тем, что человек когда-то заразился гепатитом C, но произошло самоизлечение, а антитела в организме остались. В случае обнаружения в исследуемой крови анти-HCV назначается дополнительное ПЦР-исследование на гепатит C.

Среди современных методов диагностики стоит выделить ПЦР-анализ на гепатит C как наиболее качественный и точный.

С помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) представляется возможным выявить возбудителя гепатита C (вирус HCV). Данная диагностическая методика может обнаружить вирус даже при минимальной концентрации HCV в биологическом субстрате спустя всего 5 дней после инфицирования. Это позволяет начать противовирусную терапию еще до значительного поражения печени, так как за такой короткий промежуток времени организм не успевает выработать антитела.

Полимеразная цепная реакция разделяется на два типа: качественная и количественная.

Качественный анализ ПЦР на гепатит C помогает выявить присутствие HCV в крови как такового. Положительный результат исследования крови методом ПЦР говорит об инфицировании организма вирусом HCV.

Делается качественный ПЦР тест на выявление гепатита C после положительного результата ИФА, то есть, когда обнаружены антитела к данному вирусу.

Расшифровка анализа ПЦР констатирует присутствие или отсутствие вируса HCV в организме, то есть результат ПЦР положительный или отрицательный соответственно.

Исследование крови здорового человека с помощью ПЦР-анализа всегда покажет отрицательный результат.

Количественный тест ПЦР определяет вирусную нагрузку (виремию), то есть концентрацию HCV в биологическом субстрате. От величины вирусной нагрузки зависит течение всей болезни в целом. При низкой концентрации интерферонотерапия завершается положительным результатом. Иногда сроки терапии могут быть сокращены.

Высокая концентрация вирусов, напротив, делает противовирусную терапию малоуспешной, повышается риск развития тяжелых осложнений. Люди, у которых высокая виремия, могут передавать гепатит C непарентеральным путем: половым, контактно-бытовым, от матери к ребенку.

Концентрация вируса в биологическом субстрате измеряется в единицах (МЕ) на 1 мл крови (реже копии/мл). Если расшифровка количественного ПЦР-анализа на гепатит C показывает виремию выше 800 000 МЕ/мл (2 млн копий/мл), то это указывает на высокую концентрацию HCV. Если количество меньше 400 000 МЕ/мл (1 млн копий/мл), то вирусная нагрузка считается низкой.

Пример результатов количественного ПЦР теста на гепатит C:

Примечание: ПЦР-анализ на гепатит C имеет нижний порог чувствительности, равный 10 единицам. Это означает, что при концентрации HCV в биологическом материале ниже порога чувствительности тест может оказаться отрицательным, хотя вирус присутствует. Низкая концентрация вируса обычно связана с проводимой противовирусной терапией.

Вирусная нагрузка (точнее, ее уровень) не определяет степень поражения печени и тяжесть заболевания. Достоверную информацию о патологии можно получить с помощью биохимических показателей исследования крови, а также биопсии фрагментов ткани печени.

Для результативной противовирусной терапии очень важным остается определить генотип НСV.

• Главная
• Как лечить печень
• Диагностика печени
• Всё о сдаче анализов на гепатит

Всё о сдаче анализов на гепатит

При подозрении на гепатит  первым делом пациент беседует с врачом, чтобы понять возможные причины заболевания. Нередко начальная стадия гепатита напоминает простуду : повышенная температура тела, появление желтого оттенка кожи, хроническая усталость. После этого врач назначает сдачу анализов.

Прежде всего, если симптомы пациента приближены к вышеописанным, назначается обследование, которое включает в себя биохимический анализ крови и анализ на антитела. Врач также может попросить сделать анализ ПЦР. 

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Это анализ, позволяющий определить генетический материал вируса гепатита. ПЦР существует качественный и количественный. Качественный определяет лишь факт инфицирования пациента, но не может установить стадию и прогресс заболевания. Количественный метод дает полную картину о стадии развития гепатита, ее интенсивности, а также об эффективности лечения.

Анализ на антитела

Это специфическая диагностика, направленная на получение показателей, присущих каждому виду возбудителей болезни. Такие анализы можно разделить на 2 группы:

• Иммуноферментный анализ (ИФА)
• Иммунохроматографический анализ (ИХА)

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Он предназначен для точной диагностики заболевания, определения стадии болезни и ее возбудителей. Такой анализ на гепатит основан на качественных и количественных измерениях антител (антигенов), а также гормонов. Наличие в крови таких антител, их процентное соотношение, дает возможность определить тип возбудителя. Для этого анализа нужно высокоэффективное, дорогостоящее оборудование и качественные реактивы. Но при большой стоимости исследования и длительности, данный метод диагностики является самым эффективным и точным.

Иммунохроматографический анализ (ИХА)

Данный анализ называют «экспресс-тестом». Он сравнительно молодой в применении и  используется для быстрой диагностики гепатита, не требующего использования дорогостоящего оборудования. Данный тест проводится с помощью индикаторных полосок,  панелей или тест-кассет. Его преимущества – это быстрое визуальное определение содержания антител, гормонов и других важных веществ в организме, а также отсутствие нужды в непосредственном присутствии пациента во время анализа. Но чувствительность и надежность теста уступает иммуноферментному анализу (ИФА).

Итак, сдача биохимического анализа крови, анализа ИФА или ИХА, а также ПЦР  позволяет своевременно и правильно диагностировать гепатит и назначить эффективное лечение. Методы ИФА и ИХА идентичны и взаимозаменяемы. Если ваши симптомы болезни слабо выражены и вы не нуждаетесь в точном определении возбудителей вируса и стадии болезни, то анализ ИХА будет подходящим для исследования. ИФА же предназначен для более точной картины заболевания. Какой именно анализ выбрать: ИФА или ИХА, лучше выбрать совместно с лечащим врачом.

Анализ крови на гепатит

Анализы крови на гепатит необходимы для определения инфекции, активности ее течения и запущенности патологии. Биохимия позволяет выявить уровень агрессивности вируса к клеткам печени, изменение его активности во время и после терапии.

Что определяет анализ

Исследование крови позволяет оценить количество антигенов с антителами и их соотношение. Во время диагностики определяется стадия патологии, ремиссия или обострение. После полученных данных врач назначает определённую терапию. Также на их основе он может изменить тактику лечения, провести её коррекцию и спрогнозировать осложнения гепатита.

Показания к сдаче анализа

Когда следует провериться? Если вы найдете себя в одной из ниже перечисленных ситуаций, вам следует провести этот анализ:

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.

• частая смена половых партнёров;
• планирование беременности;
• порезы, уколы и травмы сомнительными предметами;
• зуд, желтушность кожи и склер;
• дискомфорт в правом подреберье, тошнота;
• отвращение к жирной пище, непереносимость;
• тёмная моча, серый или белый стул;
• потеря веса при диспепсических расстройствах.

Сколько ждать результат анализа

Анализы крови на гепатит доступны любому человеку, который хочет провериться на наличие патологии. Полученные результаты позволят оставаться спокойным или своевременно начать лечение. Исследование проводят в поликлинике по месту жительства или в частном медицинском учреждении.

Для выявления антител или других показателей кровь берётся из вены. В некоторых случаях её сдают повторно, если врач не уверен в диагнозе при первичном обследовании. Обычно после сдачи анализов ответы из лаборатории приходят через два дня. Если на направлении присутствует пометка cito, такой анализ является срочным. Его сделают в ближайшие несколько часов.

Что ищут в крови

В биохимическом анализе важен уровень печёночных ферментов. Сокращённо они пишутся как АЛТ и АСТ. Эти вещества попадают в кровь, если происходит разрушение клеток органа. Высокий уровень АЛТ — единственный показатель, по которому можно определить бессимптомный гепатит.

Повышение билирубина (общего и прямого) говорит о наличии желтухи. При лёгкой форме концентрация его не превышает 34 мкмоль/л, в тяжёлых состояниях показатель бывает от 170 мкмоль/л и выше.

Гепатит определяется по белковым фракциям в крови. При вирусе альбумины снижаются, а гамма-глобулины увеличиваются. Они являются главными элементами, обеспечивающими иммунную защиту от внедрения чужеродных агентов.

• Полимеразная цепная реакция

Высокоточный метод определения всех форм вируса:

1. Гепатит А (определяется РНК).
2. Гепатит В (определение поверхностного и капсульного антигена, ДНК вируса).
3. Гепатит С (через 21 день после заражения определяется РНК вируса).
4. Гепатит D и G (определение РНК возбудителя).

• Иммунологический анализ

В ходе исследования выявляются антитела ко всем типам гепатита и к собственным клеткам печени при аутоиммунном нарушении. Система Т-лимфоцитов подвергается сбою, а их количество значительно снижается. В некоторых случаях в процесс вовлекаются эритроциты.

• Экспресс-анализ

Быстрая проверка пациента с помощью тест-полосок на наличие гепатита. Для исследования используется кровь или слюна. При гепатите обнаруживается поверхностный антиген и антитела. Экспресс исследование можно проводить в амбулаторных условиях.

Срок действия анализов на гепатит составляет 3 месяца.

В этом видео вы узнаете об исследовании крови на наличие вируса гепатита.

Подготовка к анализам

Несоблюдение рекомендаций перед сдачей биологического материала приведёт к ошибочным данным. Если у врача возникнут сомнения, он назначает повторное исследование. Чтобы этого не возникало, необходимо соблюдать правила.

1. Анализы сдают на голодный желудок. От последнего приёма пищи должно пройти не менее 10 часов. Если в кровь попадёт сахар, он может исказить данные.
2. За 24 час исключается острое, солёное и спиртное. Лучше отказаться от сигарет.
3. За несколько дней заканчивают приём различных лекарственных средств. Врач должен быть оповещён о системном приёме препаратов.
4. Любые физические действия, приводящие к нагрузке на печень, прекращаются.
5. Не используются средства народной медицины для поддержки органа, останавливается курс физиотерапии.
6. Женщинам лучше не проводить анализ во время менструаций.

Алгоритм диагностики

При выявлении гепатитов все исследования имеют свою очерёдность. Ни один врач не будет делать биопсию в первую очередь, пока не будет других исследований, указывающих на заражение вирусом.

Очерёдность:

• общий анализ крови;
• биохимия крови из вены;
• ультразвуковое исследование печени;
• иммуноферментное исследование; на наличие антигена;
• ПЦР;
• забор ткани печени для морфологической диагностики.

Расшифровка анализов (маркеры)

Фибриноген (в норме белок составляет 1,8 — 3,5 г/л. При более пониженном показателе судят о гепатите и поражении тканей органа.

АЛТ (0 — 75 Ед/л) и АСТ (0 – 50 Ед/л). При повышении показателей обнаруживается гепатит.

Билирубин (в норме показатель не превышает 21 мкмоль/л).

Общий сывороточный белок (нормальный показатель у взрослых от 66 до 83 г/л, понижение говорит об уменьшении выработки альбумина и развитии болезни).

HBsAg (положительный маркер с показателем выше 0,05 МЕ/мл говорит о заражении гепатитом).

HBeAg (выявляется у все инфицированных, высокие показатели говорят о хронической форме гепатита, острой стадии или обострении).

Anti-НВс (антитела формы IgG являются благоприятным признаком, говорят об иммунитете, а IgM появляется показателем острой формы и высокой степени заразности).

Anti-НВе (маркер свидетельствует о нормальном протекании болезни о формировании иммунитета у больного к вирусу).

Anti-HBs (выздоровление, установление иммунитета).

Когда анализ ошибочный

Ложные показатели наиболее часто встречаются при выявлении гепатита С. Сразу поставить диагноз по одному анализу крови невозможно, понадобятся дополнительные исследования.

Ложноположительные результаты не относятся к ошибке медперсонала. Обычно сбой получается при влиянии факторов внутри человека.

1. Заболевания аутоиммунного характера.
2. Различные опухоли.
3. Инфекция в организме.
4. Ранее проведённая вакцинация.
5. Курс интерфероном.
6. Особенность организма (повышенный билирубин).

Ложноположительный анализ случается и по вине сотрудника лаборатории. Часто происходит подмена пробирок, опечатка в листочке с результатами или неправильно подготавливаются образцы. Если на кровь было воздействие повышенной температуры, анализы также получаются ложными.

Никто не даёт гарантии, что результаты достоверны у всех людей. Ошибки случаются даже в частных клиниках, но эти случаи единичны. Чтобы исключить ложные результаты, рекомендуется сдать анализ, выявляющий ДНК и РНК вируса гепатита.

Стоимость анализов на гепатиты

Для установки точного диагноза многие обращаются в специальные медицинские учреждения с собственной лабораторией. Достаточно пойти на обследование крови, чтобы быть уверенным в своём здоровье. Цена исследований в различных клиниках колеблется от 300-400 рублей за один анализ. Полный комплекс вместе с консультацией врача может составлять до 2 000 рублей.

Если ощущается недомогание, а большинство симптомов имеет схожесть с одним из видов гепатита, рекомендуется сдать анализы. Это можно сделать, минуя врача на первом этапе. Затем с листком обследования и результатами подойти к специалисту.

Source: lechenie-pechen.ru