Кач анализ на гепатит с

Анализ на гепатит С (кач. ПЦР) – молекулярно-биологическое исследование, при котором в образце обнаруживается генетический материал возбудителя инфекции. Является золотым стандартом в диагностике инфекционных болезней. Спустя 10-12 суток после заражения в крови появляется вирусная рибонуклеиновая кислота – HCV RNA. В случае ее обнаружения подтверждают положительный результат иммуноферментного анализа (ИФА) и заражение гепатитом С.

Что означает качественный анализ на гепатит

Кач. анализ на вирус гепатита С – высокоточный метод диагностики, который основан на выявлении генетического материала инфекционного агента. Выполняется во время полимеразной цепной реакции (ПЦР), которая считается золотым стандартом диагностики вирусных гепатитов.

Суть методики заключается в обнаружении генетического материала вируса гепатита С – HCV RNA. Анализ обладает высокой специфичностью, его результаты учитываются при дифференциальной диагностике болезней гепатобилиарной системы – печени, желчевыводящих протоков, желчного.

Преимущества анализа на РНК ВГС:

Ранняя диагностика. Во время ПЦР-исследования удается выявить вирусные частицы еще до проявления внешних симптомов. РНК начинает циркулировать в кровотоке спустя 1.5 недели после заражения.
Точность. Для кач. исследования применяется высокоточная тест-система, при использовании которой риск ложных результатов практически исключен.
Быстрый результат. Пациент может забрать итоги исследования уже через 2-3 дня после сдачи крови.

Кач. ПЦР – лабораторный анализ, который входит в скрининг гепатита С. По его результатам удается выявить HCV-инфекцию еще до появления симптомов.

ПЦР как метод лабораторной диагностики впервые был запатентован биохимиком Кэри Мюллисом в 1983 году. В результате внедрения в клиническую практику нового анализа врачи научились не просто выявлять инфекцию, но и проводить дифференциальную диагностику, то есть отличать болезни со схожими проявлениями.

Как подготовиться к сдаче

На точность ПЦР-исследования влияют качество подготовки пациента, соблюдение медработником правил забора и хранения материала, неукоснительное выполнение лаборантом методики тестирования.

Требования по подготовке к кач. анализу на вирус гепатита С:

от приема пищи отказываются за полсуток до посещения лаборатории;
забор крови у женщин целесообразно проводить накануне или сразу после менструаций;
не рекомендуется волноваться и курить за полчаса до исследования;
кровь сдают натощак исключительно в утренние часы;
до исследования сообщают врачу о приеме рецептурных и безрецептурных лекарств, об имеющихся заболеваниях.

Для анализа берут венозную кровь из локтевой вены пациента. В его присутствии медработник маркирует пробирку с биоматериалом и отправляет ее в лабораторию.

Расшифровка

Генетический материал ВГС обнаруживается через несколько суток после заражения гепатитом. Поэтому кач. ПЦР назначается всем людям, подверженным HCV-инфекции:

детям, рожденным от больных матерей;
инъекционным наркоманам;
медработникам (хирургам, стоматологам);
совместно проживающим с носителями ВГС;
перенесшим инвазивные медицинские процедуры.

Расшифровка результатов качественной ПЦР:

Не обнаружено – вирус отсутствует. Если генетический материал не выявляется, а антитела к ВГС есть, это указывает на перенесенную инфекцию.
Обнаружено – заражение гепатитом. Если РНК обнаружена, это свидетельствует о репликации (самокопировании) вируса. Во время кач. анализа подтверждается факт заражения гепатитом С.

Ложноотрицательные результаты при молекулярно-биологическом исследовании крови почти исключены. Ложноположительные реакции в 90% случаев связаны с неправильным забором, хранением и исследованием биоматериала.

От чего зависит точность анализа

Вероятность погрешностей при выполнении качественной ПЦР не превышает 1.5-2%. На результаты анализа могут влиять:

минимальный уровень виремии – менее 50 МЕ/мл;
хронический гепатит вне рецидива;
прием медикаментов, влияющих на компоненты крови, например, гепарина;
повышенное содержание криоглобулинов.

Выявление вирусной РНК при отсутствии изменений в содержании печеночных трансаминаз (АЛТ, АСТ) еще не свидетельствует о 100% заражении гепатитом. Для подтверждения диагноза врач сопоставляет результаты кач. ПЦР с данными:

иммуноферментного анализа на антитела к вирусу;
биохимических печеночных проб;
клинического анализа крови;
УЗИ брюшных органов;
гистологического исследования образцов ткани из печени.

Чувствительность определения РНК возбудителя гепатита С в рамках ПЦР-анализа составляет 98-100%. Но если результаты противоречат данным дополнительных исследований, кач. анализ повторяют спустя 1-2 недели.

Что делать при положительном результате

Обнаруженный в крови ВГС свидетельствует о необходимости проведения противовирусной терапии (ПВТ). Отказ от лечения чреват гепатоцеллюлярной недостаточностью, циррозом или раком печени.

На выбор медикаментов и продолжительность ПВТ влияют уровень виремии и генотип возбудителя гепатита С.

До лечения пациентам назначают два анализа:

ПЦР РНК количественный – подсчет количества копий ВГС в крови и определение вирусной нагрузки;
генотипирование – уточнение генотипа и подвида возбудителя.

Для уничтожения HCV-инфекции прибегают к безынтерфероновой терапии, которая проводится ингибиторами неструктурных белков ВГС:

Ледипасвир;

Дасабувир;

Омбитасвир;

Нарлапревир;

Даклатасвир;

Пибрентасвир;

Софосбувир.

Длительность стандартного курса – 12 недель. При осложнениях или медленном достижении вирусологического ответа его продлевают до 6 месяцев. Своевременная ПВТ при условии правильной постановки диагноза ведет к уничтожению ВГС в 96-100% случаев.

Источник

Информация об исследовании

Гепатит С — инфекционное заболевание печени, которое вызывает вирус HСV. Вирус гепатита С размножается в клетках крови и поражает клетки печени. Вирус передается при незащищенных половых контактах, при контакте с кровью (например, при медицинских манипуляциях, переливании крови, использовании одного шприца и т.д.), от матери к ребенку во время беременности или родов. Исследование выявляет наличие вируса в крови уже спустя 5-20 дней после возможного заражения.

Выявление возбудителя гепатита C (ВГС) происходит с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени. Определяется наличие генетического материала (РНК) вируса в крови.

Среди всех возбудителей вирусных гепатитов у ВГС наибольшее количество вариаций, а благодаря высокой мутационной активности он способен избегать защитных механизмов иммунной системы человека. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза заболевания и эффективности противовирусной терапии.
Гепатит С передается с кровью и биологическими жидкостями парентеральным, половым и трансплацентарным путями. Группу повышенного риска составляют лица, практикующие внутривенную наркоманию, беспорядочные половые связи, а также медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные. Проникая в организм, HCV попадает в макрофаги крови и гепатоциты печени, где происходит его репликация. Повреждение печени происходит в основном за счет иммунного лизиса, также вирус оказывает прямое цитопатическое действие. Сходство антигена вируса с антигенами системы гистосовместимости человека обусловливает возникновение аутоиммунных («системных») реакций. В программе системных проявлений HCV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, синдром Шегрена, идеопатическая тромбоцитопеническая пурпура, гломерулонефрит, ревматоидный артрит и др. По сравнению с другими вирусными гепатитами, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину, чаще переходит в хронические формы. В 20 — 50% случаев хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и в 1,25 — 2,50% — к развитию гепато-целлюлярной карциномы. С высокой частотой возникают аутоиммунные осложнения.

Инкубационный период — 5 — 20 дней. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезенки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В трети случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Холестаз возникает крайне редко.

Показания к назначению исследования

1. Клинические признаки гепатита;
2. Профилактические скрининговые исследования (РНК вируса гепатита С — самый ранний маркёр при острой инфекции);
3. Обследования контактных лиц;
4. Диагностика гепатитов смешанной этиологии — выявление ведущего вируса;
5. Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии;
6. Контроль эффективности проводимой терапии;
7. Цирроз печени.

Подготовка к исследованию

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Факторы, влияющие на результаты исследований

Причины ложноотрицательного результата:

минимальная вирусная нагрузка крови (менее 200 копий/мл);
наличие в образце ингибиторов – химических и белковых субстанций, влияющих на различные компоненты ПЦР;
присутствие в крови гепарина;
высокий уровень криоглобулинов в крови;
нарушение транспортировки и хранения материала.

Причины ложноположительного результата:

загрязнение пробы.

Интерпретация результата

«обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита С, инфицирование вирусом гепатита С.
«не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не обнаружен фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита С или концентрация РНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности теста.

Синонимы русские

Вирус гепатита С, антиген гепатита С, ВГС

Синонимы английские

hepatit С

Источник

Содержание

Виды ПЦР
Показания для анализа
Подготовка к ПЦР-диагностике гепатита
Расшифровка результатов ПЦР-исследования
Преимущества ПЦР-анализа
Недостатки ПЦР
Цена ПЦР-анализа на гепатит С

ПЦР (или полимеразная цепная реакция) — это введенный Кэри Муллисом (США) лабораторный способ диагностики ДНК и РНК возбудителя. Достаточно всего одной молекулы, обнаруженной в коже или биологической жидкости, чтобы высокочувствительный ПЦР-анализ выявил вирус-возбудитель.

Анализ на ПЦР на гепатит

Виды ПЦР

ПЦР-анализ крови при ХВГС бывает трех видов — качественный, количественный и анализ, определяющий генотип вируса.

Качественный ПЦР-анализ на гепатит С проходят те пациенты, у которых ИФА-анализ выявил антитела к ХВГС. Результат качественного ПЦР-анализа обозначается словами «РНК обнаружена» или «РНК не обнаружена». Выявить в крови минимальное количество возбудителя способны тест-системы, чья чувствительность составляет не менее 50 МЕ/мл. При меньшей концентрации вируса анализ может дать ложноотрицательный результат. Во избежание ошибки лаборатории, специализирующиеся на ПЦР-диагностике, необходимо оснащать тест-системами высокой чувствительности. Например, лаборатория «Инвитро» использует тестовые системы с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Пациенты и врачи имеют право требовать от сотрудников лаборатории данные о чувствительности тестов.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит С нужен, чтобы определить концентрацию вируса в крови (или степень виремии). О результате исследования говорят цифры. Если в 1 мл крови найдено 2 млн. МЕ, то результат выглядит следующим образом — 2×10*6 МЕ/мл. Некоторые лаборатории используют другой показатель — число копий на 1 мл крови (1 МЕ — это 4 копии РНК). Получается, что 2×10*6 МЕ/мл равняется 8×10*6 копий РНК вируса (8 млн. копий) в 1 мл крови.

При генотипировании определяется, к какому из шести генотипов принадлежит вирус. Именно генотип возбудителя влияет на клиническую картину, скорость появления осложнений и дальнейший прогноз для пациента. Правильное определение генотипа вируса дает возможность выбрать комбинацию препаратов и определить длительность курса лечения.

Виды анализа ПЦР

Рекомендуемые товары

Показания для анализа

Чтобы подтвердить наличие ВГС, назначается ПЦР-анализ, помогающий обнаружить возбудителя и начать лечение. Показания для назначения:

У пациента обнаружены признаки воспаления печени.
Проводятся скрининговые профилактические исследования.
Необходимо обследовать людей, контактирующих с больными гепатитом.
Диагностируются гепатиты смешанного происхождения, и надо определить главный возбудитель.
Определяется уровень активности размножения возбудителя у хронических больных.
У пациента диагностирован цирроз.
Необходимо оценить эффективность проводимой терапии.

Подготовка к ПЦР-диагностике гепатита

Процедура проводится утром натощак, кровь берется из вены.

Пациент должен следовать следующим правилам:

Не употреблять пищу за 10 часов до процедуры. Разрешается пить только чистую воду.
Не курить за 4 часа до манипуляции и не употреблять спиртное за сутки до анализа.
Избегать физических и психологических нагрузок перед процедурой.
Не принимать лекарственные препараты в течение 2 дней перед забором крови. Если пациент по каким-либо причинам принимал лекарства, то об этом надо уведомить лаборанта (употребление отдельных препаратов вызывает ошибочно положительный результат).

Расшифровка результатов ПЦР-исследования

Расшифровка ИФА- и ПЦР-анализа — это задача для гепатолога или инфекциониста. Требуются также результаты биопсии, биохимического анализа крови и УЗИ. Расшифровать результаты ПЦР-анализа может только квалифицированный врач, который должен на их основании назначить терапию. Таблицы расшифровки вирусной нагрузки при гепатите С приводятся ниже.

Расшифровка ПЦР

Качественный анализ. Расшифровка

*Обнаружено*	Пациент инфицирован, т.к. в его биологическом материале найдена РНК вируса.
*Не обнаружено*	Пациент не инфицирован, либо количество РНК вируса находится ниже границы чувствительности.

Количественный анализ. Расшифровка

*Не обнаружено*	Человек здоров. РНК вируса в биоматериале не найдена, либо ее концентрация ниже границы чувствительности.
**До 1,810^2 МЕ/мл***	Концентрация РНК вируса находится ниже диапазона количественного определения. В таком случае требуется осторожность при интерпретации результата. Часто необходимо провести повторное исследование.
**До 810^5 МЕ/мл***	Низкий уровень вирусной нагрузки при гепатите С. Как правило, снижение концентрации вируса говорит об успешном лечении.
**Больше 810^5 МЕ/мл***	Высокий уровень вирусной нагрузки при гепатите С.
**Больше 2,410^7 МЕ/мл***	Поскольку количество РНК вируса выходит за верхнюю границу диапазона количественного определения, определить уровень вирусной нагрузки нельзя. Нужен повторный тест с разведением образца крови.

Генотипирование. Расшифровка

*Обнаружена РНК определенного генотипа*	В биоматериале пациента найден вирус гепатита С, относящийся к определенному генотипу и субтипу. Результат обозначается цифрами и латинскими буквами: 1а, 2b и т.д. Существует 7 генотипов и 67 субтипов. В России из 7 генотипов встречаются первые 3.
*Обнаружена РНК вируса гепатита С*	В биоматериале пациента найдена РНК нетипичного для России генотипа вируса, поэтому требуются дополнительные исследования.
*Не обнаружено*	Человек здоров, либо в его крови очень низкая концентрация РНК вируса.

Иногда ПЦР-анализ отрицательный, но при этом ИФА-анализ говорит о наличии антител к вирусу. Это значит, что переболевший острым гепатитом С человек смог излечиться самостоятельно. Около 20-ти случаев инфицирования при сильном сопротивлении организма инфекции заканчиваются самопроизвольным излечением.

Отрицательный анализ ПЦР и антитела

В некоторых ситуациях результаты высокоточного ПЦР-анализа могут быть искажены:

Нарушения температурного режима и других условий транспортировки крови в лабораторию.
Загрязнение образца крови.
Присутствие следов гепарина и других антикоагулянтов в крови.
Присутствие ингибиторов в биоматериале (полимеразная цепная реакция замедляется или останавливается).

Преимущества ПЦР-анализа

Во-первых, это метод ранней диагностики, который позволяет выявить генетический материал вируса. ИФА-анализ способен определить только вырабатываемые организмом в ответ на инфекцию вещества (иммуноглобулины). С момента заражения гепатитом С до начала иммунного ответа может пройти несколько недель и даже месяцев, и в этот период ИФА-анализ неэффективен. ПЦР-анализ уже на первой неделе инфицирования дает ответ.

Второе преимущество ПЦР-анализа — низкая вероятность ошибки. При исследовании определяют характерный только для одного вида возбудителей участок генетического материала, что дает возможность исключить ложный результат. ИФА-анализ показывает наличие антител, которые выделяются против разных вирусов (перекрестные антитела).

Преимущества анализа ПЦР

Недостатки ПЦР

Каким бы эффективным ни было исследование, у него есть свои минусы:

В ходе ПРЦ-исследования генетический материал возбудителей (в том числе неживых) реплицируется, а это приводит к искажению результатов. Чтобы оценить эффективность лечения с помощью ПЦР-анализа, повторное исследование проводится как минимум через 2 месяца после предыдущего. Организм пациента должен быть «очищен» от погибших вирусов.
Тест-системы определяют часть вирусного генома, которая теоретически может принадлежать другим вирусам или микроорганизмам, следовательно, существует вероятность ложноположительного результата.
Быстрая мутация вирусов иногда опережает способность тестовых систем определять геном возбудителя, следовательно, есть вероятность ложноотрицательного ответа.

Производители лабораторных тест-систем регулярно проводят их испытания, выясняя, как системы реагируют на перекрестные реакции или какой-либо генотип вируса.

Цена ПЦР-анализа на гепатит С

В государственных учреждениях пройти анализ можно бесплатно, требуется только направление от гепатолога или инфекциониста.

Платное исследование доступно во всех крупных городах РФ. На цену влияет тип исследования, используемое оборудование, необходимое для анализа время.

В Москве и Санкт-Петербурге качественный ПЦР-анализ на гепатит С стоит от 600 до 900 рублей, в области — от 300 до 800 рублей.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит С стоит от 17000 до 22000 рублей, на гепатит В — от 1200 до 10000 рублей.

Чтобы получить достоверные результаты ПЦР-анализа на гепатит С, надо обращаться только в зарекомендовавшие себя лаборатории. В этом случае вопрос стоимости исследования отходит на второй план.

Источник