Конфирматорный тест на гепатит в

Подтверждающий тест на HBsAg — маркёр инфицирования вирусом гепатита В, который проводится после получения положительного результата выявления HBsAg.

HBsAg — наиболее ранний маркёр гепатита В, появляющийся ещё в инкубационном периоде заболевания, до повышения уровня ферментов крови. Вирус гепатита В состоит из оболочки и нуклеокапсида. Оболочка содержит поверхностный белок — HBsAg, в нуклеокапсиде находятся «core» антиген (HBcAg) и антиген «e» (HBeAg), а также ферменты и ДНК вируса.

Гепатит В (HBV или ВГВ) — потенциально опасная для жизни инфекция, одно из самых распространённых в мире инфекционных заболеваний печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV).

Пути передачи HBV:

кровь и/или другие жидкости организма инфицированного человека;
через слизистые оболочки, повреждения кожного покрова;
при незащищённом половом контакте;
бытовой путь;
использование нестерильных шприцев;
переливание крови и пересадка донорских органов;
парентеральный путь (от матери к ребёнку). Мать, также, может заразить новорождённого через трещины на сосках.

Гепатит В может протекать как в лёгкой форме, которая длится несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции.

Клиническая картина при гепатите В
Основные клинические проявления гепатита В: появление слабости, тошнота, снижение аппетита, быстрая утомляемость, лихорадка, желтушность кожных покровов, в лабораторных анализах — нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Во многих случаях заболевание протекает бессимптомно во время острой стадии инфекции. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. После перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

HВsAg в сыворотке в норме отсутствует.

Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В (HBV).

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1–2 нед. инкубационного периода и в первые 2–3 нед клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Частота выявления HBsAg зависит от чувствительности используемого метода исследования. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBcAg IgM. Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при лёгких и средне-тяжёлых формах болезни. При тяжёлых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причём у 20% больных с тяжёлой формой и 30% со злокачественной, антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный прогностический признак; он определяется при злокачественных (фульминантных) формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 мес. от начала острой инфекции. Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев. У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4–5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 мес от начала заболевания.

HBsAg может быть выявлен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркёры вирусного гепатита В — анти-HBcAg IgM, анти-НВс IgG, анти-HBeAg и изучают функцию печени. При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg. Если повторные исследования крови в течение более 3 мес. выявляют HBsAg, такого человека относят к хроническим носителям поверхностного антигена. Носительство HBsAg — довольно распространённое явление.

Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В в крови дольше 6 месяцев после начала болезни свидетельствует о вероятности того, что гепатит В перешёл в хроническую форму. Возможно пожизненное носительство HBsAg.

Подтверждающий тест
Подтверждающий тест, как правило, проводят для подтверждения предварительно полученных сомнительных результатов при скрининговых обследованиях на HBsAg. Обычно для выявления HBsAg используются тест-сиcтемы, предназначенные для клинических и эпидемиологических исследований, а также массового скрининга на станциях переливания крови. В основе метода лежит принцип взаимодействия HBsAg с антителами, иммобилизованными на поверхности лунок планшета. Положительный результат должен быть подтвержден. В таких тест-системах для подтверждения положительных (сомнительных) результатов на HBsAg в сыворотке крови используется метод конкурентного ИФА, основанного на принципе нейтрализации HBsAg специфическими антителами. Минимальная концентрация HBsAg, выявляемая такой тест-системой — 0,05 МЕ/мл.

Показания
Основные показания к применению: подтверждение предварительных скрининговых данных при обследовании на HBsAg.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Ответ выдаётся в качественном формате: «положительно», «отрицательно», «сомнительно».

При подтверждении первичного положительного результата выдаётся ответ: HBsAg — «положительный», HBsAg (подтверждающий) — «положительный».

При не подтверждении положительного результата скринингового исследования выдаётся ответ — HbsAg — «отрицательный». Это означает вероятность каких-либо неспецифических влияний компонентов сыворотки крови обследуемого (например, присутствие лекарственных препаратов). В таком случае рекомендуется через некоторое время повторить исследование для исключения неспецифических влияний на результат теста.

Источник

Общая информация

Вирус гепатита В опасен тем, что провоцирует патологические изменения тканях печени. Острая форма вирусного гепатита может отличается быстрым течением и становится причиной смерти больного. В большинстве случаев хроническая форма гепатита становится основной причиной развития цирроза печени с высокой вероятностью возникновения печеночно-клеточного рака. Выявление поверхностного антигена вируса (HBs Ag) в сыворотке либо плазме крови может указывать на наличие в организме пациента инфекции, вызванной вирусом гепатита В. HВsAg confirmatory – это первый маркер, возникающий после заражения в крови и выявляющийся в крови в течение первых 2 или 3 недель, до развития клинических и биологических признаков заражения. Одной из особенностей HBs Ag является то, что он может обнаруживаться в крови в течении непродолжительного времени (нескольких дней) либо на протяжении достаточно продолжительного временного промежутка, достигающего нескольких лет. В том случае, если HBs Ag сохраняется в крови более 6 месяцев, то считается, что произошла хронизация патологического процесса. В связи с тем, что у многих больных заболевание может протекать при хроническом течении бессимптомно, тест на определение HBs Ag является обязательным для каждого донора крови, что позволяет предупредить передачу гепатита посредством гемотрансфузии. Помимо этого, рекомендован пренатальный скрининг беременных женщин, благодаря чему малыши, рожденные от матерей-носителей HBV могут своевременно получить профилактическое лечение.

Подтверждающий анализ Access HBs Ag Confirmatory представляет собой хемилюминесцентный анализ парамагнитных частиц для подтверждения присутствия поверхностного антигена гепатита В (HBs Ag) в образцах сыворотки и плазмы крови пациента, которые были неоднократно признаны реактивными при проведении анализа Access HBs Ag.

Подтверждающий анализ Access HBs Ag Confirmatory основан на использовании принципа нейтрализации избытка специфических антител HBsAg (нейтрализующий реагент) для подтверждения наличия в сыворотке или плазме крови HBs Ag, которые многократно признаны реактивными при проведении анализа Access HBs Ag. Подтверждающий анализ сообщает процент ингибирования (супрессии) контрольного анализа (HBs Ct) с нейтрализующим реагентом (HBs Bk). Беспримесный образец добавляется в два отдельных реакционных сосуда, один из которых содержит нейтрализующий реагент (человеческий HBs Ag – специфический иммуноглобулин IgG), а другой – разбавляющий раствор. Парамагнитные частицы, которые покрытые с HBs Ag-специфическими моноклональными антителами добавляются к смеси, затем в смесь последовательно вводится рекомбинантная щелочная фосфатаза, спаренная с HBs Ag- специфическим моноклональным антителом. HBs Ag – специфические моноклональные антитела были отобраны в следствии их возможности распознавать различные субтипы и мутанты HBs Ag.

В том случае, если HBs Ag обнаруживаются в образце, HBs Ag – специфические антитела нейтрализирующего реагента соединяются с антигенными детерминантами, которые утрачивают способность соединятся с антителами твердой фазы и спариваться.

После инкубации в реакционном сосуде, образцы, прикрепленные к твердой фазе, удерживаются в магнитном поле, пока несвязанные материалы смываются. После этого, вводится хемилюминесцентный субстрат (Lumi-Phos 530) и свет, полученный в результате ферментативной реакции, измеряется в люминометре. Генерация фотонов – это функциональный показатель количества ферментного коньюгата, который присутствует в конце реакции. Даже незначительное уменьшение генерированного света регистрируется посредством сопоставления такого же образца, в котором нейтрализующий реагент заменен на разбавляющий раствор.

Оба контрольных образца – с нейтрализующим реагентом и разбавляющим раствором, автоматически обрабатываются системой иммунологического анализа Access.

Показания

Тест на определение HВsAg confirmatory применяется для:

диагностирования вирусного гепатита В;

дифференциальной диагностики гепатитов;

обнаружения ранее перенесенного вирусного гепатита В;

определения стадии болезни.

Полученные результаты

Референсные значения (норма HВsAg confirmatory): отрицательно.

HВsAg confirmatory – положительный результат.

Предполагаемые болезни

Обнаружение в крови пациента HВsAg confirmatory может указывать на раннюю острую инфекцию, позднюю стадию острой инфекции, сопровождающуюся сероконверсией, активную хроническую инфекцию, хроническую инфекцию с низким риском повреждения печени.

Отсутствие в крови пациента HВsAg confirmatory указывает на отсутствие активной инфекции, стадию выздоровления, наличие у пациента иммунитета благодаря спонтанной инфекции либо вакцинации.

Врач-консультант

Данное исследования может быть назначено инфекционистом, гепатологом, гастроэнтерологом, терапевтом, врачом общей практики, хирургом, иммунологом, гематологом, акушер-гинекологом.

Источник

Общая информация

Вирус гепатита С (ВГС) представляет собой РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который вызывает поражение клеток печени и развитие гепатита. Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С представляет собой метод обнаружения инфицирования гепатитом С, посредством выявления в крови одновременно антител класса IgG и IgM, формирующихся к белкам вируса гепатита С методом иммуноферментного анализа для подтверждения скрининговых исследований. У здоровых лиц антитела к вирусу гепатита С не определяются в крови.

Данный тест назначается при подозрении на вирусный гепатит, а также при получении положительных или сомнительных данных при проведении предварительных исследований на вирусный гепатит С.

Возбудителем гепатита С является РНК-содержащий вирус. В недавнем прошлом заболевание называлось «гепатит ни А ни В». Передача вируса происходит через кровь и половым путем. Инкубационный период заболевания варьируется от 2 недель до 6 месяцев. Хронический тип течения гепатита С или хронический активный гепатит, обнаруживается у значительной части пациентов и очень часто осложняется развитием цирроз печени.

В составе вируса гепатита С содержатся белки, к которым формируются антитела. Это нуклеокапсидный белок С – core (сердцевинный), оболочечный Е1-Е2, белки – NS1, NS2, NS3, NS4, NS5. Именно к этим белкам и формируются антитела, которые затем выявляются в сыворотке крови.

Возникновение суммарных антител к вирусу гепатита С характеризуется высокой вариабельностью, однако в большинстве случаев выработка антител начинается с 3 по 6 неделю после заражения. Первыми, с 3 по 6 неделю заболевания, начинают вырабатываться антитела класса IgM. Но уже через 1,5 либо 2 месяца начинается выработка антител класса IgG, концентрация которых достигает максимума с 3 по 6 месяц заболевания. Данный вид антител может обнаруживаться в сыворотке крови годами. Из этого следует, что выявление антител позволяет провести определение инфицирования гепатитом С, начиная с 3 по 6 неделю и более после заражения. При назначении теста необходимо помнить о том, что выявление антител класса IgM и IgG при использовании метода ИФА считается скрининговым, в связи с чем он не может использоваться для точной постановки диагноза. Для точной постановки диагноза потребуется подтверждение инфицирования методом иммуноблота либо тест-системами, обладающими более высокой чувствительностью. В связи с тем, что современные тест-системы обладают определенной чувствительностью, данный метод рекомендуется использовать не раньше 4 или 6 недели после возможного заражения.

К тест-системам, обладающим повышенной чувствительности относят метод выявления иммуноглобулинов класса IgM и IgG к неструктурным белкам вируса гепатита С – NS3, NS4, NS5 и к структурному белку С (core). Главным преимуществом такого теста является способность обнаруживать в плазме крови человека антитела IgM и IgG к разным антигенам вируса за счет их взаимодействия с рекомбинантными антигенами, иммобилизованными на поверхности лунок планшета.

Показания

Подтверждение инфицированности вирусом гепатита С назначается в случае получения ранее выполненных положительных либо сомнительных результатов.

Забор крови осуществляется из вены в пустую пробирку либо с гелем. Для получения точных данных транспортировка пробирки с кровью в лабораторию должна происходить при температуре не ниже 4, но и не выше 8°С.

Полученные результаты

В норме у не зараженных лиц антитела к белкам вируса гепатита С в сыворотке крови не выявляются.

Предполагаемые болезни

Положительный результат теста может указывать на раннюю острую инфекцию, позднюю стадию острой инфекции, сопровождающуюся сероконверсией, активную хроническую инфекцию, хроническую инфекцию с низким риском повреждения печени.

Отсутствие в крови пациента anti-HCV confirmatory указывает на отсутствие активной инфекции, стадию выздоровления, наличие у пациента иммунитета благодаря спонтанной инфекции либо вакцинации.

Врач-консультант

Данное исследование может быть назначено инфекционистом, гепатологом, гастроэнтерологом, терапевтом, врачом общей практики, хирургом, иммунологом, гематологом, акушер-гинекологом.

Источник

Общая информация

Показания

Тест на определение HВsAg confirmatory применяется для:

диагностирования вирусного гепатита В;

дифференциальной диагностики гепатитов;

обнаружения ранее перенесенного вирусного гепатита В;

определения стадии болезни.

Полученные результаты

Референсные значения (норма HВsAg confirmatory): отрицательно.

HВsAg confirmatory – положительный результат.

Предполагаемые болезни

Врач-консультант

Источник