Лабораторная диагностика гепатита в дипломная работа

Ðàçìåùåíî íà https://www.allbest.ru/

11

äèàãíîñòèêà âèðóñíûé ãåïàòèò çàáîëåâàíèå

Ïðèíöèïìåòîäà.

Òåðìèí «ãåïàòèò» âêëþ÷àåòãðóïïóçàáîëåâàíèé,êîòîðûåõàðàêòåðèçóþòñÿâîñïàëèòåëüíûìïîðàæåíèåìïå÷åíè. Âîñïàëåíèåïàðåíõèìû (òêàíè) ïå÷åíèìîæåòáûòüâûçâàíîðàçëè÷íûìèïðè÷èíàìè. Ñîãëàñíîñîâðåìåííîéêëàññèôèêàöèèãåïàòèòîâðàçëè÷àåìñëåäóþùèåâèäûýòîãîçàáîëåâàíèÿ.

Èíôåêöèîííûé ãåïàòèò — âèðóñíûå ãåïàòèòû (Ãåïàòèò À, Â, Ñ, D, E, G), áàêòåðèàëüíûå ãåïàòèòû. Òîêñè÷åñêèé ãåïàòèò — àëêîãîëüíûé ãåïàòèò, ëåêàðñòâåííûé ãåïàòèò, ãåïàòèò ïðè îòðàâëåíèè ðàçëè÷íûìè õèìè÷åñêèìè âåùåñòâàìè (ïðèðîäíûå è ïðîìûøëåííûå ÿäû). Àóòîèììóííûé ãåïàòèò — ðàçðóøåíèå òêàíåé ïå÷åíè ñîáñòâåííîé èììóííîé ñèñòåìîé îðãàíèçìà. Ëó÷åâîé ãåïàòèò — ðåäêàÿ ôîðìà ãåïàòèòà ðàçâèâàþùàÿñÿ ïðè âîçäåéñòâèè íà îðãàíèçì áîëüøèõ äîõ èîíèçèðóþùåãî èçëó÷åíèÿ.

Èç ïðèâåäåííûõ âûøå ãðóïï ãåïàòèòîâ, íàèáîëåå ÷àñòî âñòðå÷àþòñÿ èíôåêöèîííûå, à èìåííî âèðóñíûå ãåïàòèòû.  íàñòîÿùåå âðåìÿ íàáëþäàåòñÿ ïàíäåìè÷åñêîå ðàñïðîñòðàíåíèå âèðóñíîãî ãåïàòèòà Â.

Ðàçëè÷íûå âèäû âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ õàðàêòåðèçóþòñÿ ñïåöèôè÷åñêèì êëèíè÷åñêèì ðàçâèòèåì è â ðàçíîé ñòåïåíè íàðóøàþò ôóíêöèþ ïå÷åíè. Âèðóñíûé ãåïàòèò À ïðîòåêàåò îñòðî è ïîëíîñòüþ èñ÷åçàåò ïðè êëèíè÷åñêîì âûçäîðîâëåíèè áîëüíîãî. Äëÿ âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ Â, Ñ, D õàðàêòåðíî îñòðîå è õðîíè÷åñêîå òå÷åíèå. Ýòî íàèáîëåå îïàñíûå ôîðìû âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ. Ïåðåõîä çàáîëåâàíèÿ â õðîíè÷åñêóþ ôîðìó ïðåäïîëàãàåò óõóäøåíèÿ ïðîãíîçà çàáîëåâàíèÿ èç-çà íåýôôåêòèâíîñòè ëå÷åíèÿ è äëèòåëüíîãî ðàçâèòèÿ âîñïàëèòåëüíîãî ïðîöåññà â ïå÷åíè. Õðîíè÷åñêèå ôîðìû âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ ñ÷èòàþò îäíèìè èç ñàìûõ ðàñïðîñòðàíåííûõ ïðè÷èí öèððîçà ïå÷åíè è ïåðâè÷íîãî ðàêà ïå÷åíè.

Ìåòîäûäèàãíîñòèêèâèðóñíûõãåïàòèòîâ.

Äèàãíîñòèêà âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ ïîäðàçóìåâàåò óñòàíîâëåíèå âîçáóäèòåëÿ ãåïàòèòà, îïðåäåëåíèå ôîðìû çàáîëåâàíèÿ è óñòàíîâëåíèå ñòåïåíè íàðóøåíèÿ ôóíêöèè ïå÷åíè è ñîïóòñòâóþùèõ îñëîæíåíèé.

Íà÷àëüíûì ýòàïîì äèàãíîñòèêè ÿâëÿåòñÿ ñáîð àíàìíåñòè÷åñêèõ äàííûõ è êëèíè÷åñêèé îñìîòð áîëüíîãî.

Ñèìïòîìû è êëèíè÷åñêèå ïðèçíàêè çàáîëåâàíèÿ çàâèñÿò îò òèïà âèðóñíîãî ãåïàòèòà è îò ýòàïà ðàçâèòèÿ çàáîëåâàíèÿ.

Îáû÷íî áîëüíûå îáðàùàþòñÿ ê âðà÷ó â ïåðèîä ïðîäðîìàëüíîé (íà÷àëüíîé) ôàçû çàáîëåâàíèÿ. Äëÿ ýòîãî ïåðèîäà õàðàêòåðíî óõóäøåíèå îáùåãî ñîñòîÿíèÿ áîëüíîãî. ×àñòî ãåïàòèò íà÷èíàåòñÿ ñ óñòàíîâëåíèÿ «ãðèïïîçíîãî» ñîñòîÿíèÿ, ñ ïîâûøåíèåì òåìïåðàòóðû òåëà, áîëÿìè â ìûøöàõ è ñóñòàâàõ, ãîëîâíîé áîëüþ, ïîòåðåé àïïåòèòà. Òàêæå ìîãóò ïðèñóòñòâîâàòü íàðóøåíèÿ ñî ñòîðîíû æåëóäî÷íî-êèøå÷íîãî òðàêòà: òîøíîòà, ðâîòà, äèàðåÿ. Îïèñàííûå âûøå ñèìïòîìû íîñÿò íåñïåöèôè÷åñêèé õàðàêòåð è ìîãóò ñëóæèòü ëèøü äëÿ ïðåäïîëîæåíèÿ èíôåêöèîííîãî çàáîëåâàíèÿ. Áîëåå ñïåöèôè÷íûìè ñèìïòîìàìè ÿâëÿþòñÿ áîëè â ïðàâîì ïîäðåáåðüå, ïîòåìíåíèå ìî÷è (ìî÷à ÷àéíîãî öâåòà) è îáåñöâå÷èâàíèå êàëîâûõ ìàññ, óâåëè÷åíèå ñåëåçåíêè. Îïðåäåëåíèå ïîäîáíûõ ñèìïòîìîâ ìîæåò ïîñëóæèòü äëÿ ðàííåé äèàãíîñòèêè ãåïàòèòîâ, îñîáåííîãî âèðóñíîãî ãåïàòèòà À, ÷àñòî âñòðå÷àþùåãîñÿ ó äåòåé äîøêîëüíîãî âîçðàñòà. Óñòàíîâëåíèå ñî ñëîâ áîëüíîãî âîçìîæíûõ ïðè÷èí çàáîëåâàíèÿ èìååò âàæíóþ ðîëü äëÿ äèôôåðåíöèðîâêè ðàçëè÷íûõ ôîðì âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ è äëÿ ïðèíÿòèÿ ýïèäåìèîëîãè÷åñêèõ ìåð ïî ïðåäóïðåæäåíèþ ðàñïðîñòðàíåíèÿ çàáîëåâàíèÿ. Êàê èçâåñòíî, âèðóñ ãåïàòèòà À ïåðåäàåòñÿ ñ çàãðÿçíåííîé ïèùåé è âîäîé, ïîýòîìó íàðóøåíèå ýëåìåíòàðíûõ ñàíèòàðíî-ãèãèåíè÷åñêèõ íîðì â ó÷ðåæäåíèÿõ äëÿ äåòåé äîøêîëüíîãî âîçðàñòà, ñïîñîáñòâóåò ïîÿâëåíèþ âñïûøåê ýòîãî çàáîëåâàíèÿ â ó÷ðåæäåíèÿõ äëÿ äåòåé äîøêîëüíîãî âîçðàñòà. Âèðóñû ãåïàòèòà Â, Ñ è D ïåðåäàþòñÿ èñêëþ÷èòåëüíî ïàðåíòåðàëüíûì ïóòåì (òî åñòü ÷åðåç êðîâü), ïîýòîìó íàëè÷èå â èñòîðèè áîëåçíè ïàöèåíòà ýïèçîäà ïîñåùåíèÿ ñòîìàòîëîãà, îñóùåñòâëåíèÿ ðàçëè÷íûõ õèðóðãè÷åñêèõ îïåðàöèé èëè èíúåêöèé, à òàêæå íàíåñåíèå òàòóèðîâîê èëè ïèðñèíã, ïîìîãàþò ïðåäïîëîæèòü èìåííî ýòè ôîðìû âèðóñíîãî ãåïàòèòà.

Ñëåäóþùèì âàæíûì è ñïåöèôè÷íûì ñèìïòîìîì ïîðàæåíèÿ ïå÷åíè ÿâëÿåòñÿ ïîÿâëåíèå æåëòóõè. Ðàçâèòèå æåëòóõè îçíà÷àåò ïåðåõîä çàáîëåâàíèÿ â æåëòóøíóþ ôàçó. Æåëòóõà îáóñëîâëåíà ïîðàæåíèåì òêàíåé ïå÷åíè, êîòîðûå ñòàíîâÿòñÿ íåñïîñîáíûìè ïåðåðàáàòûâàòü è âûâîäèòü èç îðãàíèçìà ïðîäóêòû ðàñïàäà ãåìîãëîáèíà — áèëèðóáèí, â ðåçóëüòàòå ÷åãî áèëèðóáèí íàêàïëèâàåòñÿ â îðãàíèçìå è îêðàøèâàåò êîæó â æåëòûé öâåò. Ðàíåå âñåãî æåëòóøíîñòü ïîÿâëÿåòñÿ íà ñëèçèñòîé îáîëî÷êå ïîä ÿçûêîì, çàòåì æåëòåþò ñêëåðû ãëàç è ëèøü ïîòîì êîæíûå ïîêðîâû. Ñ ïîÿâëåíèåì æåëòóõè (5-10 äíåé ñ íà÷àëà çàáîëåâàíèÿ) ñîñòîÿíèå áîëüíîãî ÷àñòè÷íî óëó÷øàåòñÿ. Ïîòåìíåíèå ìî÷è è îáåñöâå÷èâàíèå êàëîâûõ ìàññ íà ýòîì ýòàïå çàáîëåâàíèÿ äîñòèãàåò ìàêñèìàëüíîé âåëè÷èíû è ñëóæàò âàæíûì äèàãíîñòè÷åñêèì ïðèçíàêîì.

Ôàçà âûçäîðîâëåíèÿ õàðàêòåðèçóåòñÿ ïðîãðåññèâíûì óëó÷øåíèåì ñîñòîÿíèÿ áîëüíîãî, ïîñòåïåííûì èñ÷åçíîâåíèåì æåëòóõè è íîðìàëèçàöèåé öâåòà ìî÷è è êàëà. Òàêèì îáðàçîì. îáùàÿ ïðîäîëæèòåëüíîñòü áîëåçíè ìîæåò äîñòèãíóòü 2-3 íåäåëü. Îäíàêî ïîëíîå êëèíè÷åñêîå (íîðìàëèçàöèÿ âñåõ ôóíêöèé îðãàíèçìà) è ñåðîëîãè÷åñêîå (èñ÷åçíîâåíèå âèðóñíûõ àíòèãåíîâ èç êðîâè áîëüíîãî) âûçäîðîâëåíèå ìîæåò ïðîäëèòüñÿ äî 9 íåäåëü â ñëó÷àå âèðóñíîãî ãåïàòèòà À, è äî 16 íåäåëü â ñëó÷àå ãåïàòèòà Â. Ñ òî÷êè çðåíèÿ äèàãíîñòèêè è ëå÷åíèÿ, îïòèìàëüíûì ñ÷èòàåòñÿ ïåðâûé (ïðîäðîìàëüíûé) ïåðèîä çàáîëåâàíèÿ. Âàæíî îáðàòèòü âíèìàíèå ðîäèòåëåé íà îïèñàííûå âûøå ñèìïòîìû, ïðè ðàçâèòèè êîòîðûõ ó äåòåé, íóæíî íåìåäëåííî îáðàòèòüñÿ ê âðà÷ó èíôåêöèîíèñòó.

Êàê óæå óïîìèíàëîñü âûøå, ãåïàòèò À çàêàí÷èâàåòñÿ ïîëíûì âûçäîðîâëåíèåì áîëüíîãî (êðàéíå ðåäêî âñòðå÷àþòñÿ àãðåññèâíûå ôîðìû áîëåçíè ïðèâîäÿùèå ê ñìåðòè áîëüíîãî). Âèðóñíûé ãåïàòèò Â, â ñâîþ î÷åðåäü, ìîæåò ïåðåõîäèòü â õðîíè÷åñêóþ ôîðìó. Âåðîÿòíîñòü ïåðåõîäà çàáîëåâàíèÿ â õðîíè÷åñêóþ ôîðìó òåì âûøå, ÷åì ìåíüøå âîçðàñò áîëüíîãî. Õðîíè÷åñêîå òå÷åíèå òàêæå õàðàêòåðíî è äëÿ ãåïàòèòà Ñ è D. Ïðè õðîíè÷åñêîì òå÷åíèè, ñèìïòîìû è êëèíè÷åñêèå ïðèçíàêè çàáîëåâàíèÿ âûðàæåíû ñëàáî. Áîëüíîé æàëóåòñÿ íà ïåðèîäè÷åñêîå íåäîìîãàíèå, ïîòåðþ àïïåòèòà, ïîõóäàíèå. Ïåðèîäè÷åñêè ïîÿâëÿåòñÿ ñëàáàÿ æåëòóøíîñòü êîæè. Çàïîäîçðèòü âèðóñíûé ãåïàòèò ïðè òàêîé ôîðìå ðàçâèòèÿ èñõîäÿ òîëüêî èç ñèìïòîìîâ çàáîëåâàíèÿ è êëèíè÷åñêèõ çíàêîâ î÷åíü òÿæåëî èëè ñîâñåì íåâîçìîæíî. Äëÿ áîëåå äåòàëüíîé äèàãíîñòèêè îñòðûõ ñîñòîÿíèé è äèàãíîñòèêè ñêðûòûõ õðîíè÷åñêèõ ôîðì âèðóñíîãî ãåïàòèòà ïðèìåíÿþò äîïîëíèòåëüíûå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ.

Ïîèñê âèðóñíûõ àíòèãåíîâ — ÿâëÿåòñÿ íàèáîëåå ñïåöèôè÷íûì èç âñåõ ñóùåñòâóþùèõ íûíå òåñòîâ. Îïðåäåëåíèå â êðîâè áîëüíîãî âèðóñíûõ àíòèãåíîâ (÷àñòèö âèðóñîâ) è àíòèòåë ê ýòèì àíòèãåíàì ïîìîãàåò íå òîëüêî òî÷íî óñòàíîâèòü âîçáóäèòåëÿ çàáîëåâàíèÿ, íî è îöåíèòü àêòèâíîñòü âèðóñíîãî ïðîöåññà.  äèàãíîñòèêå õðîíè÷åñêîãî âèðóñíîãî ãåïàòèòà  ïðèìåíÿþò ñëåäóþùèå âèäû ìàðêåðîâ:

Ag. HBs (ïîâåðõíîñòíûé àíòèãåí, àâñòðàëèéñêèé àíòèãåí) — ÿâëÿåòñÿ íåîñïîðèìûì ïðèçíàêîì èíôåêöèè ãåïàòèòà Â. Îïðåäåëåíèå Ag. HBs âîçìîæíî â ñàìîì íà÷àëå çàáîëåâàíèÿ åùå äî ïîÿâëåíèÿ áèîõèìè÷åñêèõ íàðóøåíèé êðîâè. Äëèòåëüíîå ïðèñóòñòâèå â êðîâè Ag. HBs ãîâîðèò î õðîíè÷åñêîé èíôåêöèè.

Anti-HBs (àíòèòåëà ïðîòèâ Ag. HBs) — ïîÿâëåíèå àíòèòåë àíòè Ag. HBs (Anti-HBs) ïîñëå âàêöèíàöèè èëè ïåðåíåñåííîé áîëåçíè, ÿâëÿåòñÿ ïðèçíàêîì ïîëíîãî âûçäîðîâëåíèÿ áîëüíîãî è ïðèîáðåòåíèÿ ïðîòèâîâèðóñíîãî èììóíèòåòà. Àíòèòåëà Anti-HBs çàùèùàþò îðãàíèçì îò ïîâòîðíîãî çàðàæåíèÿ âèðóñîì ãåïàòèòà Â.

Anti-HBñ — ïîÿâëÿåòñÿ â êðîâè áîëüíîãî íåìíîãî ïîçæå ÷åì Ag. HBs. Îïðåäåëåíèå Anti-HBñ ïîäòâåðæäàåò äèàãíîç âèðóñíîãî ãåïàòèòà Â.

4. Ag. HBå — ïîÿâëåíèå ýòîãî âèðóñíîãî áåëêà â êðîâè íàáëþäàåòñÿ â èíêóáàöèîííûé ïåðèîä ñðàçó ïîñëå ïîÿâëåíèÿ Ag. HBs. Îïðåäåëåíèå Ag. HBå ÿâëÿåòñÿ ïðèçíàêîì àêòèâíîãî ðàçìíîæåíèÿ âèðóñà. Ïðèñóòñòâèå Ag. HBå â êðîâè áîëåå 3-õ ìåñÿöåâ ãîâîðèò î âîçìîæíîñòè ïåðåõîäà çàáîëåâàíèÿ â õðîíè÷åñêóþ ôîðìó. Èñ÷åçíîâåíèå Ag. HBå è ïîÿâëåíèå Anti-HBå ãîâîðèò î ñíèæåíèè èíòåíñèâíîñòè ðàçìíîæåíèÿ âèðóñà è îá óìåíüøåíèè ñòåïåíè çàðàçíîñòè áîëüíîãî.

Âñå àíàëèçû ïî îïðåäåëåíèþ îïèñàííûõ âûøå ìàðêåðîâ âèðóñíîãî ãåïàòèòà ïðîâîäÿò â ñïåöèàëüíûõ ëàáîðàòîðèÿõ. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà ïðîèçâîäÿò çàáîð íåñêîëüêèõ ìèëëèëèòðîâ êðîâè èç âåíû.

Äðóãèì âàæíûì ýòàïîì äèàãíîñòèêè ÿâëÿåòñÿ îïðåäåëåíèå áèîõèìè÷åñêîãî ñîñòàâà êðîâè, êîòîðûé ïðåòåðïåâàåò çíà÷èòåëüíûå èçìåíåíèÿ ïðè âèðóñíîì ãåïàòèòå.

Îïðåäåëåíèåïå÷åíî÷íûõôåðìåíòîâ.

Ïîâðåæäåíèå òêàíåé ïå÷åíè ñîïðîâîæäàåòñÿ âûáðîñîì â êðîâü ôåðìåíòîâ èç êëåòîê ïå÷åíè è ïîâûøåíèåì èõ êîíöåíòðàöèè â ïëàçìå.  íîðìå êîíöåíòðàöèÿ ÀÑÀÒ (AST, àñïàðòàòàìèíîòðàíñôåðàçà) êîëåáëåòñÿ â ïðåäåëàõ 5-35 Åä. /ë (U/l), à êîíöåíòðàöèÿ ÀËÀÒ (ALT, àëàíèíàìèíîòðàíñôåðàçà) — 5-40 Åä. /ë (U/l). Ïðè ãåïàòèòå òàêæå íàáëþäàåòñÿ ïîâûøåíèå ïëàçìàòè÷åñêîé àêòèâíîñòè ùåëî÷íîé ôîñôàòàçû (íîðìà 30-115 Åä. /ë (U/l).

Îïðåäåëåíèåôðàêöèéáèëèðóáèíà — ïðè âèðóñíîì ãåïàòèòå ïîâûøàþòñÿ êàê ôðàêöèÿ ñâîáîäíîãî, òàê è ñâÿçàííîãî áèëèðóáèíà. Ñâÿçàíî ýòî ñ íåñïîñîáíîñòüþ êëåòîê ïå÷åíè ïîðàæåííûõ âèðóñîì âûâîäèòü èç îðãàíèçìà ïèãìåíò áèëèðóáèí. Ôèçèîëîãè÷åñêàÿ êîíöåíòðàöèÿ ôðàêöèé áèëèðóáèíà â êðîâè ðàâíÿåòñÿ 0,1-0,3 ìã/äë äëÿ ïðÿìîãî (ñâÿçàííîãî) áèëèðóáèíà è 0,2-0,7 ìã/äë äëÿ íåïðÿìîãî (ñâîáîäíîãî) áèëèðóáèíà.

Ïîòåìíåíèå ìî÷è ïðè ãåïàòèòå âûçâàíî ïîïàäàíèåì â ìî÷ó ïèãìåíòà áèëèðóáèíà, êîòîðûé â çäîðîâîì îðãàíèçìå, ïåðåðàáàòûâàåòñÿ êëåòêàìè ïå÷åíè è âûâîäèòñÿ ñ æåë÷üþ.  íîðìå áèëèðóáèí â ìî÷å îòñóòñòâóåò.

Äëÿ äèàãíîñòèêè ìîðôîëîãè÷åñêèõ èçìåíåíèé ïå÷åíè ïðè ãåïàòèòå èñïîëüçóþò óëüòðàçâóêîâîå èññëåäîâàíèå. Ýòîò ìåòîä ïîçâîëÿåò îïðåäåëèòü èçìåíåíèÿ ñòðóêòóðû ïàðåíõèìû ïå÷åíè ïðè õðîíè÷åñêîì ãåïàòèòå èëè öèððîçå ïå÷åíè. Äëÿ áîëåå ïîëíîãî ãèñòîëîãè÷åñêîãî àíàëèçà òêàíåé ïå÷åíè ïðîâîäÿò ãèñòîëîãè÷åñêîå èññëåäîâàíèå îáðàçöà òêàíåé çàáðàííûõ íà áèîïñèþ. Ãèñòîëîãè÷åñêîå èññëåäîâàíèå ïîìîãàåò óñòàíîâèòü ìîðôîëîãè÷åñêèå îñîáåííîñòè âîñïàëèòåëüíîãî ïðîöåññà, âëèÿþùèå íà ýâîëþöèþ çàáîëåâàíèÿ.

ÑõåìàñòðîåíèÿâèðèîíàâèðóñàãåïàòèòàÑ.

Êñòðóêòóðíûìáåëêàìîòíîñÿòáåëîêñåðäöåâèíû (êîð) èãëèêîïðîòåèíûîáîëî÷êè (Å1èÅ2). Íåñòðóêòóðíóþîáëàñòüïðåäñòàâëÿåòêîìïëåêñáåëêîâñôåðìåíòàòèâíîéàêòèâíîñòüþ,âïåðâóþî÷åðåäüÐÍÊ-çàâèñèìàÿ — ÐÍÊïîëèìåðàçà. Ïîìèìîâèðóñíûõáåëêîâ,ñíàðóæèâèðèîíïîêðûòëèïèäíîéîáîëî÷êîéñîñòîÿùåéèçëèïîïðîòåèíîâîðãàíèçìàõîçÿèíàíèçêîéïëîòíîñòè.

Âûÿâëåíèåñåðîëîãè÷åñêèõìàðêåðîââèðóñíûõãåïàòèòîâ.

Óñòàíîâèòü âèðóñíóþ ïðèðîäó ãåïàòèòà è ïîëó÷èòü èíôîðìàöèþ îá åãî ýòèîëîãèè âîçìîæíî òîëüêî ïóòåì âûÿâëåíèÿ ñåðîëîãè÷åñêèõ ìàðêåðîâ âèðóñîâ ãåïàòèòà. Ê òàêèì ìàðêåðàì îòíîñÿò âèðóñíûå áåëêè (àíòèãåíû), ñïåöèôè÷íûå àíòèòåëà, âûðàáàòûâàåìûå îðãàíèçìîì â îòâåò íà èíôåêöèþ, è íóêëåèíîâûå êèñëîòû âèðóñà (ÄÍÊ èëè ÐÍÊ), ïðåäñòàâëÿþùèå åãî ãåíîì.

Ñîâîêóïíîñòü ìåòîäîâ, ïîçâîëÿþùèõ âûÿâëÿòü â áèîëîãè÷åñêèõ òêàíÿõ è æèäêîñòÿõ ñïåöèôè÷åñêèå âèðóñíûå èëè áàêòåðèàëüíûå áåëêè (àíòèãåíû) èëè àíòèòåëà, âûðàáàòûâàåìûå â îðãàíèçìå õîçÿèíà â ïðèñóòñòâèè òîãî èëè èíîãî âîçáóäèòåëÿ, îòíîñÿò ê èììóíîëîãè÷åñêèì ìåòîäàì ëàáîðàòîðíîãî àíàëèçà. Çà ïîñëåäíèå íåñêîëüêî äåñÿòèëåòèé èììóíîëîãè÷åñêèå ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ ïîëó÷èëè ïîâñåìåñòíîå ðàñïðîñòðàíåíèå. Ïðè÷èíîé ýòîãî ÿâèëîñü òåñíîå ñëèÿíèå èììóíîëîãèè è áèîòåõíîëîãèè, êîòîðîå ïîçâîëèëî ðàçðàáîòàòü è âíåäðèòü â ïðàêòèêó øèðîêèé ñïåêòð òåñò-ñèñòåì, îñíîâàííûõ íà âçàèìîäåéñòâèè àíòèãåí — àíòèòåëî. Ïðèìåíèòåëüíî ê âèðóñíûì ãåïàòèòàì, èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç îòíîñèòñÿ ê íåïðÿìûì ìåòîäàì îáíàðóæåíèÿ âîçáóäèòåëÿ, ïîçâîëÿþùèì óñòàíîâèòü ýòèîëîãèþ áîëåçíè.

Ñðàâíèòåëüíî íåäàâíî â ïðàêòèêó êëèíèêî-äèàãíîñòè÷åñêèõ ëàáîðàòîðèé âîøëè ìåòîäû ãåíîäèàãíîñòèêè, ïîçâîëÿþùèå îáíàðóæèâàòü è õàðàêòåðèçîâàòü ãåíû èëè íåñìûñëîâûå ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ÄÍÊ è/èëè ÐÍÊ. Ñâîèì ðàçâèòèåì ýòè ìåòîäû îáÿçàíû ðàçðàáîòêîé â 1983 ã ïðèíöèïà ïîëèìåðàçíîé öåïíîé ðåàêöèè (ÏÖÐ).

Ëàáîðàòîðíàÿäèàãíîñòèêà.

Ëàáîðàòîðíàÿ äèàãíîñòèêà âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé êîìïëåêñíîå èññëåäîâàíèå, êîòîðîå âêëþ÷àåò â ñåáÿ ðàçëè÷íûå ìåòîäû.

Ñïåöèôè÷åñêàÿ — ýòî èññëåäîâàíèå êðîâè ïàöèåíòà íà íàëè÷èå â íåé õàðàêòåðíûõ äëÿ îïðåäåëåííîãî âèðóñà ïîêàçàòåëåé, êîòîðûå â êëèíè÷åñêîé ïðàêòèêå ÷àñòî íàçûâàþòñÿ ìàðêåðàìè. Ïî ñâîåé ïðèðîäå ýòè ìàðêåðû ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ëèáî ÷àñòèöû ñàìîãî âèðóñà, ëèáî àíòèòåëà ê íèì, ÿâëÿþùèåñÿ ðåçóëüòàòîì áîðüáû èììóííîé ñèñòåìû ÷åëîâåêà ñ âèðóñîì. Íàëè÷èå è ñîîòíîøåíèå òåõ èëè èíûõ ìàðêåðîâ â êðîâè ïàöèåíòà ìåíÿåòñÿ â ïðîöåññå çàáîëåâàíèÿ è çàâèñèò îò åãî äàâíîñòè, ñòàäèè, àêòèâíîñòè è èñõîäà. Ïðàâèëüíàÿ òðàêòîâêà ýòèõ äàííûõ ïîçâîëÿåò îïûòíîìó âðà÷ó ñîðèåíòèðîâàòüñÿ â îòíîøåíèè äèàãíîçà è íàìåòèòü òàêòèêó ïî äàëüíåéøåìó îáñëåäîâàíèþ è ëå÷åíèþ êîíêðåòíîãî ïàöèåíòà. Íåðåäêî îäíîêðàòíîãî èññëåäîâàíèÿ áûâàåò íåäîñòàòî÷íî è òîëüêî õàðàêòåð èçìåíåíèÿ ìàðêåðîâ ïðè ïîâòîðíûõ èññëåäîâàíèÿõ äàåò îñíîâàíèÿ äëÿ ïðèíÿòèÿ òîãî èëè èíîãî âðà÷åáíîãî ðåøåíèÿ.

Äèàãíîñòè÷åñêèåìåòîäû.

 ëàáîðàòîðíîé äèàãíîñòèêå âèðóñíûõ èíôåêöèé èìåþòñÿ òðè îñíîâíûõ ïîäõîäà 1) íåïîñðåäñòâåííîå èññëåäîâàíèå ìàòåðèàëà íà íàëè÷èå âèðóñíîãî àíòèãåíà èëè íóêëåèíîâûõ êèñëîò;

2) èçîëÿöèÿ è èäåíòèôèêàöèÿ âèðóñà èç êëèíè÷åñêîãî ìàòåðèàëà;

3) ñåðîëîãè÷åñêàÿ äèàãíîñòèêà, îñíîâàííàÿ íà óñòàíîâëåíèè çíà÷èòåëüíîãî ïðèðîñòà âèðóñíûõ àíòèòåë â òå÷åíèå áîëåçíè.

Ïðè ëþáîì âûáðàííîì ïîäõîäå ê âèðóñíîé äèàãíîñòèêå îäíèì èç âàæíåéøèõ ôàêòîðîâ ÿâëÿåòñÿ êà÷åñòâî èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà.

ÏÖÐîñíîâàíà íà ïðèíöèïå åñòåñòâåííîé ðåïëèêàöèè ÄÍÊ. Ñóòü ìåòîäà çàêëþ÷àåòñÿ â ìíîãîêðàòíîì ïîâòîðåíèè öèêëîâ ñèíòåçà (àìïëèôèêàöèè) âèðóñ ñïåöèôè÷åñêîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ÄÍÊ ñ ïîìîùüþ òåðìîñòàáèëüíîé Taq ÄÍÊ-ïîëèìåðàçû è äâóõ ñïåöèôè÷åñêèõ çàòðàâîê — òàê íàçûâàåìûõ ïðàéìåðîâ.

Êàæäûé öèêë ñîñòîèò èç òðåõ ñòàäèé ñ ðàçëè÷íûì òåìïåðàòóðíûì ðåæèìîì.  êàæäîì öèêëå óäâàèâàåòñÿ ÷èñëî êîïèé ñèíòåçèðóåìîãî ó÷àñòêà. Âíîâü ñèíòåçèðîâàííûå ôðàãìåíòû ÄÍÊ ñëóæàò â êà÷åñòâå ìàòðèöû äëÿ ñèíòåçà íîâûõ íèòåé â ñëåäóþùåì öèêëå àìïëèôèêàöèè, ÷òî ïîçâîëÿåò çà 25-35 öèêëîâ íàðàáîòàòü äîñòàòî÷íîå ÷èñëî êîïèé âûáðàííîãî ó÷àñòêà ÄÍÊ äëÿ åå îïðåäåëåíèÿ, êàê ïðàâèëî, ñ ïîìîùüþ ýëåêòðîôîðåçà â àãàðîçíîì ãåëå.

Ìåòîä âûñîêîñïåöèôè÷åí è î÷åíü ÷óâñòâèòåëåí. Îí ïîçâîëÿåò îáíàðóæèòü íåñêîëüêî êîïèé âèðóñíîé ÄÍÊ â èññëåäóåìîì ìàòåðèàëå.  ïîñëåäíèå ãîäû ÏÖÐ íàõîäèò âñå áîëåå øèðîêîå ïðèìåíåíèå äëÿ äèàãíîñòèêè è ìîíèòîðèíãà âèðóñíûõ èíôåêöèé (âèðóñû ãåïàòèòîâ, ãåðïåñà, öèòîìåãàëèè, ïàïèëëîìû è äð.) [8, 9].

Ðàçðàáîòàíâàðèàíòêîëè÷åñòâåííîéÏÖÐ, ïîçâîëÿþùèé îïðåäåëÿòü ÷èñëî êîïèé àìïëèôèöèðîâàííîãî ñàéòà ÄÍÊ. Ìåòîäèêà ïðîâåäåíèÿ ñëîæíà, äîðîãîñòîÿùà è ïîêà íåäîñòàòî÷íî óíèôèöèðîâàíà äëÿ ðóòèííîãî ïðèìåíåíèÿ.

 íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ, íàïðèìåð ïðè äèôôåðåíöèàëüíîé äèàãíîñòèêå õðîíè÷åñêèõ ãåïàòèòîâ, èìååò çíà÷åíèå îöåíêà ñîñòîÿíèÿ òêàíè ïå÷åíè.

Âñåáîëüøååçíà÷åíèåèðàñïðîñòðàíåíèåïîëó÷àåòÈÔÀäëÿäèàãíîñòè÷åñêèõöåëåé. Íàòâåðäóþôàçó (äíîëóíîêïîëèñòèðîëîâûõïëàíøåòèëèïîëèñòèðîëîâûåøàðèêè) ñîðáèðóåòñÿâèðóñíûéàíòèãåí. Ïðèäîáàâëåíèèñîîòâåòñòâóþùèõàíòèòåë,íàõîäÿùèõñÿâñûâîðîòêå,ïðîèñõîäèòèõñâÿçûâàíèåññîðáèðîâàííûìèàíòèãåíàìè. Íàëè÷èåèñêîìûõàíòèòåëîáíàðóæèâàåòñÿñïîìîùüþàíòè-àíòèòåë (íàïðèìåð,÷åëîâå÷åñêèõ), êîíúþãèðîâàííûõñôåðìåíòîì (ïåðîêñèäàçîé). Äîáàâëåíèåñóáñòðàòàèðåàêöèÿñóáñòðàò — ôåðìåíòäàþòîêðàñêó. ÈÔÀìîæåòáûòüèñïîëüçîâàíàèäëÿîïðåäåëåíèÿàíòèãåíîâ. Âýòîìñëó÷àåíàòâåðäóþôàçóñîðáèðóþòñÿàíòèòåëà.

Ìîíîêëîíàëüíûåàíòèòåëà. Áîëüøîé ïðîãðåññ â äèàãíîñòèêå âèðóñíûõ èíôåêöèé äîñòèãíóò â ïîñëåäíåå äåñÿòèëåòèå, êîãäà ñ ðàçâèòèåì ãåííî-èíæåíåðíûõ èññëåäîâàíèé áûëà ðàçðàáîòàíà ñèñòåìà ïîëó÷åíèÿ ìîíîêëîíàëüíûõ àíòèòåë. Òåì ñàìûì áûëè ðåçêî ïîâûøåíû ñïåöèôè÷íîñòü è ÷óâñòâèòåëüíîñòü äèàãíîñòè÷åñêèõ ìåòîäîâ îïðåäåëåíèÿ âèðóñíûõ àíòèãåíîâ. Óçêàÿ ñïåöèôè÷íîñòü ìîíîêëîíîâ, ïðåäñòàâëÿþùèõ íåáîëüøóþ äîëþ âèðóñíûõ áåëêîâ, êîòîðûå ìîãóò íå ïðèñóòñòâîâàòü â êëèíè÷åñêîì ìàòåðèàëå, óñïåøíî ïðåîäîëåâàåòñÿ èñïîëüçîâàíèåì íåñêîëüêèõ ìîíîêëîíàëüíûõ àíòèòåë ê ðàçëè÷íûì âèðóñíûõ äåòåðìèíàíòàì.

Âûâîäû:

Êîëè÷åñòâî ìåòîäîâ, èñïîëüçóåìûõ äëÿ äèàãíîñòèêè âèðóñíûõ èíôåêöèé, íåïðåðûâíî ðàñòåò. Îäíè óõîäÿò â ïðîøëîå è èìåþò â îñíîâíîì èñòîðè÷åñêîå çíà÷åíèå, äðóãèå ñîâåðøåíñòâóþòñÿ. Íåñîìíåííî, ÷òî òåõíè÷åñêèé ïðîãðåññ â îïðåäåëåíèè àíòèòåë, áåëêîâîãî àíàëèçà è ãåíîäèàãíîñòèêè íàðÿäó ñ ðàñøèðåíèåì íàøèõ çíàíèé âèðóñîâ è ïàòîãåíåçà âèðóñíûõ èíôåêöèé ïðèâåäóò ê ïîÿâëåíèþ íîâûõ âûñîêîñïåöèôè÷íûõ è âûñîêî÷óâñòâèòåëüíûõ ìåòîäîâ, óäîáíûõ äëÿ êëèíè÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ.

 íàñòîÿùåå âðåìÿ âûïóñêàåòñÿ áîëüøîå êîëè÷åñòâî êîììåð÷åñêèõ ñåðòèôèöèðîâàííûõ òåñò-ñèñòåì, â òîì ÷èñëå è îòå÷åñòâåííûõ, äëÿ äèàãíîñòèêè íàèáîëåå ðàñïðîñòðàíåííûõ è ñîöèàëüíî çíà÷èìûõ âèðóñíûõ èíôåêöèé.

Ðàçìåùåíî íà Allbest.ru